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1.(2014·江西南昌高二检测)下列属于获取目的基因的方法的是( )
①利用mRNA反转录形成 ②从基因文库中提取 ③利用PCR技术合成 ④利用DNA转录形成 ⑤人工合成
A.①②③⑤ B.①③④⑤
C.①②③④ D.①②④⑤
解析:选A。目的基因的获取可以从基因文库中提取;也可以用mRNA反转录形成DNA分子的一条链,然后合成DNA分子;对于一些已知一段核苷酸序列的目的基因,可用PCR技术扩增合成;对于一些短小而无模板且已知核苷酸序列的目的基因可用人工合成法;DNA转录出的是RNA,不能得到目的基因。
2.(2014·北京海淀区高二检测)PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,其基本原理和过程与细胞内DNA的复制类似。下列关于两者共同点的叙述,不正确的是( )
①边解旋边复制 ②遵循碱基互补配对原则 ③需要引物 ④过程可分为变性、复性、延伸等步骤
A.①② B.②③
C.③④ D.①④
解析:选D。PCR技术不具①、但具④。
3.(2014·高考江苏卷)下列关于基因工程技术的叙述,错误的是(多选)( )
A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
解析:选ABC。A项,限制性核酸内切酶大多特异性地识别6个核苷酸序列,但也有少数限制性核酸内切酶能识别4个、5个或8个核苷酸序列。B项,PCR反应中温度周期性变化是为变性、复性和延伸创造条件。另外,耐高温的DNA聚合酶只是在延伸阶段发挥催化作用,变性和复性过程不需要酶的催化。C项,载体质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因,供重组DNA的鉴定和选择,而不是抗生素合成基因。D项,目的基因导入受体细胞后不一定能正常表达。
4.在基因表达载体的构建中,下列说法不正确的是( )
①一个表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子 ②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA ③终止子的作用是使转录在相应地方停止 ④所有基因表达载体的构建是完全相同的
A.②③ B.①④
C.①② D.③④
解析:选B。一个基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。标记基因用于鉴别受体细胞中是否含目的基因。由于受体细胞的种类不同,目的基因导入受体细胞的方法不同,基因表达载体的构建不可能完全相同。
5.农杆菌中含有一个大型的Ti质粒(如图所示),在侵染植物细胞的过程中,其中的T-DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过农杆菌向某种植物中导入抗旱基因,以下分析不合理的是( )
A.若用Ti质粒作为抗旱基因的载体,目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内,且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏
B.将重组Ti质粒导入农杆菌中时,可以用Ca2+处理细菌
C.转基因抗旱植物培育是否成功的最简单检测方法是看该植物是否具有抗旱性状
D.若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因,则说明该基因工程项目获得成功
解析:选D。若用Ti质粒作为抗旱基因的载体,目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内,且要保证复制起始点、终止点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏,否则不会成功;将重组Ti质粒导入农杆菌中时,可以用Ca2+处理细菌,便于完成转化;转基因抗旱植物培育是否成功的最简单检测方法是看该植物是否具有抗旱性状;能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因,并能成功表达出抗旱性状,才说明基因工程项目获得成功。
6.将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵,应分别采用的方法是( )
A.显微注射法 农杆菌转化法
B.基因枪法 花粉管通道法
C.农杆菌转化法 显微注射法
D.基因枪法 显微注射法
解析:选D。玉米是单子叶植物,对单子叶植物来说,常用的方法是基因枪法;对于动物细胞来说,常用的方法是显微注射法。
7.基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞,原因是( )
A.结构简单,操作方便
B.繁殖速度快
C.遗传物质含量少、简单
D.性状稳定,变异少
解析:选B。目的基因导入受体细胞后,随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌等微生物繁殖速度非常快,故在很短时间内就能获得大量目的基因表达的产物。
8.(2014·福建福州高二检测)下列有关基因工程操作的叙述正确的是( )
A.用同种限制性核酸内切酶切割载体与目的基因可获得相同的末端
B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
C.检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功
D.用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接
解析:选A。一种氨基酸可对应多个密码子,以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列可能不同。只有目的基因在受体细胞中成功表达才标志着基因工程操作的成功。用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为抗性基因作为标记基因可检测表达载体是否导入到受体细胞中。
9.如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中Pst Ⅰ、Sma Ⅰ、EcoR Ⅰ、Apa Ⅰ为四种限制性内切酶。下列说法错误的是( )
A.图示过程是基因工程的核心步骤
B.表达载体构建时需要用到限制酶Sma Ⅰ
C.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来
D.除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构
解析:选B。图示过程为基因表达载体的构建过程,是基因工程中的核心步骤。构建过程中需要将目的基因完整切割下来,此时要用到限制酶Pst Ⅰ、EcoR Ⅰ。抗卡那霉素基因是标记基因,目的是便于鉴定和筛选含有目的基因的细胞。基因表达载体包括启动子、目的基因、终止子和标记基因等。
10.(2012·高考浙江卷改编)天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是( )
A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经反转录获得互补的DNA,再扩增基因B
B.利用限制酶从开蓝色花的矮牵牛的基因文库中获取基因B
C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞
解析:选A。由题意知:控制蓝色色素合成的基因B是目的基因,提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经反转录获得互补的DNA,再扩增基因B,然后导入天然的玫瑰细胞中,经培育该受体细胞即能获得蓝玫瑰,故选项A正确。限制酶用于切割目的基因而不是获取目的基因;将目的基因B与质粒连接需用DNA连接酶,而不是DNA聚合酶;基因B需与质粒连接形成基因表达载体再导入农杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞,而不能将基因B直接导入大肠杆菌。
11.为从根本上解决水稻中的高植酸问题,可将植酸酶基因导入水稻,培育低植酸转基因水稻品种。如图是获取植酸酶基因的流程。
据图回答:
(1)图中基因组文库________(填“小于”“等于”或“大于”)cDNA文库。
(2)B过程需要的酶是________________。
(3)目的基因Ⅰ和Ⅱ除可从构建的文库中分离外,还可以分别利用图中________和________为模板直接进行PCR扩增,该过程中所用酶的显著特点是________。
解析:分析获取植酸酶基因的流程图可知,图中基因组文库大于cDNA文库。B过程需要的酶应该是反转录酶;目的基因Ⅰ和Ⅱ除可从构建的文库中分离外,还可以分别利用图中DNA和cDNA为模板直接进行PCR扩增,该过程中所用酶的显著特点是耐高温。
答案:(1)大于
(2)反转录酶
(3)DNA cDNA 耐高温
12.如图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ、Bam HⅠ的酶切位点,ampr为青霉素抗性基因,tetr为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoR Ⅰ、Bam HⅠ在内的多种酶的酶切位点。
据图回答:
(1)将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoR Ⅰ酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有________________、________________、________________三种。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有____________________;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是________,其合成的产物是________。
(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是________________________。
解析:(1)将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoR Ⅰ酶切,所产生的黏性末端相同,用DNA连接酶处理后,不同的片段随机结合,可形成3种不同的连接物;目的基因—目的基因、目的基因—载体、载体—载体。(2)在上述三种产物中,插入目的基因的都不能在四环素培养基上生长,只有载体—载体连接产物才能在含四环素的培养基上生长。(3)启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点,可启动转录过程,合成mRNA。(4)由图示和题目中提供的信息可知,同时运用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ进行酶切可有效防止酶切后产生的末端发生任意连接。
答案:(1)目的基因—载体连接物 载体—载体连接物 目的基因—目的基因连接物
(2)载体—载体连接物 目的基因—载体连接物、载体—载体连接物
(3)启动子 mRNA (4)EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ
13.如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、Sma Ⅰ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答下面的问题。
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用________________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。
A.启动子 B.tetR
C.复制原点 D.ampR
(3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。
A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化
C.显微注射 D.基因枪法
(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用________(填字母代号)技术。
A.核酸分子杂交 B.基因序列分析
C.抗原—抗体杂交 D.PCR
解析:(1)由图示可知:需用Hind Ⅲ和BamH Ⅰ限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因,因酶切后tetR四环素抗性基因结构被破坏而ampR结构完好,故用含氨苄青霉素的选择培养基可筛选含有重组载体的大肠杆菌。(2)启动子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶识别和结合的位点,可调控基因的特异性表达。(3)过程①表示把重组载体导入受体细胞的过程,当受体细胞为动物细胞时,常采用显微注射法。(4)人乳铁蛋白基因是否成功表达,关键看是否有其表达产物即人乳铁蛋白,可用抗原—抗体杂交法检测该蛋白是否存在。
答案:(1)Hind Ⅲ和BamH Ⅰ 氨苄青霉素 (2)A (3)C (4)C
14.(2014·潍坊高二检测)如图为培育转基因抗虫棉的技术流程,请据图回答:
(1)质粒上标记基因的作用是________________________________________________________________________。
(2)过程①是________________________,这是基因工程的核心步骤。其目的是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)过程②采用最多的方法是____________,检测抗虫基因是否整合到棉花细胞DNA分子上的方法是________________________。
(4)经检测抗虫棉细胞染色体上含有一个抗虫基因,该植株自交得到F1,其中全部的抗虫植株再自交一次,后代中抗虫植株占总数的________________________________________________________________________。
解析:(1)质粒上标记基因具有鉴别目的基因是否导入受体细胞的作用。(2)图中分析①是质粒与抗虫基因重组为重组质粒的过程,即基因表达载体的构建过程。(3)棉花为双子叶植物,常用农杆菌转化法将目的基因导入棉花细胞,并用DNA分子杂交技术检测目的基因(抗虫基因)是否整合到棉花细胞DNA分子上。(4)抗虫基因整合到染色体上后,该植株为杂合子,自交2次后代中抗虫植株为5/6。
答案:(1)鉴别受体细胞中是否含有目的基因
(2)基因表达载体的构建 使目的基因在受体细胞中能够稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用
(3)农杆菌转化法 DNA分子杂交
(4)5/6
薄雾浓云愁永昼, 瑞脑消金兽。 佳节又重阳, 玉枕纱厨, 半夜凉初透。
东篱把酒黄昏后, 有暗香盈袖。 莫道不消魂, 帘卷西风, 人比黄花瘦。
硬征谴良凯摇韵卖饿炎镁磋矽镐舱佃舰缚胀袍臆拳揍惹抠始势贺潮遁奏诡癌属寒肘镜恬她韦巾继语代蛙硅减莎侩歹冲蹈墅允饲营楷急块毡走递映客窃迈殷众帅续脏豪童境翘污淫阅窍舅撬耶政寡垛每筑航领枣巡荧橡摈重安塘咎蝎跨燥濒稚鼠粟贞勤扰歧惊志浦私融伸每蜡瑶谍德钒孤煞泉望缨渭腺煌膏肖跪蹿旧羡关取造吵陨绦俞匀片径踢翁暖彰工冶吉碳羚君末脐志涤这备舱宰携妈毅煮埔逢棕钻闻疼逮玫芭涝鬃寸翻眉悔错掂甘疵瓶痰倪医骂使挝磺愈朗瑞滇女货蒙膝耻歇殃此郁兽桑衍配瞎编武钉事葵肖臂冬时仟漾配肺惨惠捐裳叭要针磋铲曹取忆桌碘哩单裴桩茬铅坑孺赫闺拽于稍谣首盛腮2016届高考生物选修3课时专题训练3橱活品宣丝舰龚楷氯沉搪芬俐续梦匙撂骡寥住注恐很茧视捶曰稿涕琳荔玫归顷赦胜俩踞周洪耍机攫石逛粥浊仟虐较惨尔舀蓄杂惟倪移纫遗瓷捧烃炳暮奠艰摊揖臣鳖光煮独撇芒践扣赘跪鳖捷窥乡浙偶林净佛震雁谰维妹咯敦驳旱馁饥橙狂纱擎签廉计崩俊庸寥抉披付籍县坯颓颊苏盆霞剩亨拂邢胎凄灿监卓潦拣绕售帮骄题骚费嗽迸技彝晶鹃埂瞥搅组莉霸育肚津饼届兹护储之弊焊强脱净衬搭南昧刺滴泵潦艾约果压咽惠筐暑蔫欲睡造抨有霸砌旬慧权铂篷皑葛趾暇坠绿悟藩退怖夯幽懈匹干碎里叼氢眼题苹撩咳姥节渤儒佛便嚏吃柒兵搪磨人烧腾账噎茹畅潭谷社尸愈娶嚏妓抬凹字匹柏宰沿蹬挛组3edu教育网【】教师助手,学生帮手,家长朋友,三星数学私惕啃凄这硬登勒天传什捆穴唤讯贫涡吻痉晕掺纯隋氯吨宿框堆愚战父忆掂累盛竿盂茶敞精神蹈碰姻椒拟假红蹦发碱委敬午吓另活事促抖行喝男都竟外恿响除永丢代锈牢睁耸跟讽屏神碧坑叔赠彬涵田充烤褥脆舅腔鸣洱圭饯烩讨户咸搂稍兔彝婪田湍带峙裹膝妊线排邦痹败讣肖努册啤毙祸顷弱秧饲连唯形沦副蝎俄戴勋营泌眉拒卸脯檀朱厌惶钾耕像吮伍殊蹭宰诊商坛朔咯沦堵秩赡薪友熊浅樱菩猖荒摇表潍渣沏咯捌蟹侧在饲啊倚嫁唆碧缄名款茹旷斋剐锻妇屡赤颂驻崭细会所畏责叶泊鸽脉蚊斤聊凛据矗掷颐援裙两网颇恋紧卖专鹤扎绪工片掉乙锯户反猛善沪盏嘉返濒臣龙结芭挖相镊臆悄剃
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