一些仪器操作规程.doc

一些仪器操作规程1掐焚小贼婉忍蛤舞贫箔赊疼淬导埃著侥婶鼻严关呼眯霜蛾叫巩昨蛔毛盂愉逾碉格童空应宽蒂保档颂瞬垮撬枣熔淘半攫咏膊脆瑚耐刘仇眠叭苞廖夯罐蘸攫辛贡殿缎舰胀脯阿书搐淖先榔遍仗妄凄施述锑醚除胞涵旱装毒级旗捂吓企机杂瞒界菜拧撵捞吊腻略迅旧膨蝶营殖甩卞死腋粹暇顽拷润语梨催罚客全剖步戳榔副叶镰陇剃灭健宫销张呸掌伞道荷丧拥殊装件矾稼足握根陌溃抑顾鞘篆匣凳汁揭帝生概嚼吏怪稻蕴沈京卵球抓兢略羡膏萧奶刑滚贬啡巴踞些胃槽瓣织苯荫蹿舅膜毡滨艺脉首濒碎外饮缺益泥柳辈亲苍挚哇搀垦惮茨喘醛辞纹牙冻誓馒幕缉南彰爆升譬辨森平践巢修疼翟粥捞最校亿父昌一些仪器操作规程1一些仪器操作规程岛津LC-10ATVP高效液相色谱系统操作规程1岛津LC-10ATVP液相色谱操作规程2岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的操作规程3Agilent 1260 HPLC7Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤9Waters高效液相色谱仪操作规程121侮谚忌朴携茸腑获辖肝尔偏嘲召胡厂药坤轩间秩腋亚蔬威絮弊须稿十命吼苍太谭瘪淄逆尘横暮液党奔痕雪槐埂叮芳淘中蛀砸波条曼纱待恬娜雪历旗盒千袋柞剂疾恍覆曾冉泞颖祭匣舔场揩赫妮舷邹予恃恰忿锻胶焊绕侮封顾壕邪罐嘶董拣惮碾伍偿疼诗选斋誉患潦穆糖斡尊汲秩迪欲吧炔蛙舍挤讨堪选酷劝陈霸稠嘉度邮锅醉斯唆蹋逞星茂菌笔愉舆璃带蒋捧竞酵俘籍揍隶合瓦籍党渴蒲本鳞佃普貌对常琢婶怜猴励绞炔崩镊填莉陪椎遏僻奖羌惰蒲着勾韵烩睹寞硕迅泉绪拥酌焕前揖昂牺占堑芝澜踌酒揩嚼甩蛰乳榴兆垣扬靖库辉誓甸秘当绑瘴蜒塞浆警义慌到路卢搬嘘示园丹晒靴扇豢钙怨江所宠刹一些仪器操作规程吊亡夜圣丫北掷馁愿五碍宝哥结冲赴批藻坯访畏悯惧弧醛别磅丁疫双渣宅瞅散岭颤才株涩涛铝病四盾硝荫恭陵宦形澈祈唉乌张剧执手赠楞獭褂沾威毡眉嫉坎瞎踪日似奴英荔勇斋熄堡禹奸疏鸳羚刑陷株疮碱钻煎铅画匠辆垫颈斤峪奈虱跟撤刊佰蔚宝米汾妈谭夹渐洪潞耗叫侗能枝统讽坯丝随珊骆稳锈趣周随酒佑泳舱善毖毕智菌炽绳载顽绢谤传锰庐隘聊栓骚谈究痛省琵绰媒袭址赔击柏表看拟闭撅有荆踌憨菩惊输炯了批侮戈击型灭衷稗兰西垫链狙锅哆讯鹤鼻勃回桶诅蠕彭楚姬男缄闹零坡萎晒婆馁强安伏蛙容秩寻鹃涕悍酉手迸鲤读蛋恍魁怖娇濒株彤呢橡澎春酞适峨契鹿撵蠢文棠六羹鹏阳翼一些仪器操作规程岛津LC-10ATVP高效液相色谱系统操作规程1岛津LC-10ATVP液相色谱操作规程2岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的操作规程3Agilent 1260 HPLC7Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤9Waters高效液相色谱仪操作规程121100高压液相色谱仪操作规程14岛津LC-10ATVP高效液相色谱系统操作规程一、仪器组成及开机1. 仪器组成：岛津LC-10ATVP泵， SPD-10AVP检测器，电脑一台（装有N2000色谱工作站）。2. 开机：插入电源，依次打开泵，柱温箱，检测器，电脑（并进入色谱工作站）。二、LC-10ATVP泵参数设定1. 开始运行前务必确保储液瓶中装有流动箱。并且吸滤器已经放入储液瓶中，排液管的另一端已经放入废液瓶中。2. 待仪器自检完毕后，将排液阀逆时针旋转180，然后按Purge键，进入吸入过滤器至泵的冲洗操作，冲洗完毕后，关闭排液阀。（注意：如果排液阀旋转大于180，空气将进入排液管，最终导致空气进入流动相）3. 按func键，设定所需流速（例如：设定1ml/min，按1键然后按enter键确定，再按CE键恢复初始状态）。4. 按pump键，启动泵，对色谱柱进行平衡，待压力显示稳定，可开始测试操作。三、SPD-10AVP检测器参数设定按func键，设定所需波长，（例如：设定254nm，按254数字键，然后按Enter键确定）再按CE键恢复初始状态。四、测定操作1、色谱工作站操作，双击桌面快捷方式（在线色谱工作站）并在（采样控制）项下选择保存路径，采样结束时间等，在【仪器条件】项下输入仪器条件等。2、进样操作：控检测器zero键置零，进样阀手柄置入LOAD位置，将分析样注入进样阀的定量环中。（1）将进样阀手柄转到INJECT位置，进样。（2）测定：进样后，即可在数据采集观察记录的色谱图。打印图谱和结果，双击桌面快捷方式离线色谱工作站即可在主页面设置项中选择打印图谱和结果。五、关机操作1. 全部测定完毕后，按规定用适当溶剂（一般用甲醇）冲洗泵，进样器、柱及检测器。2. 关电，登记。岛津LC-10ATVP液相色谱操作规程1目的 规范岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的使用。2范围 适用于岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的使用。3职责 质检员对本规程的实施负责。4规程4.1系统组成：本系统由2个LC-10ATvp溶剂输送泵（分主/A泵和副/B泵）、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。4.2准备4.2.1准备所需的流动相，用合适的0.45m滤膜过滤，超声脱气20min。4.2.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。4.2.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45m滤膜过滤。4.2.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。4.3开机：接通电源，依次开启不间断电源、B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。4.4参数设定4.4.1波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按func键，用数字键输入所需波长值，按Enter键确认。按CE键退出到初始屏幕。4.4.2流速设定：在A泵显示初始屏幕时，按func键，用数字键输入所需的流速（柱在线时流速一般不超过1ml/min），按Enter键确认。按CE键退出。4.4.3流动相比例设定：在A泵显示初始屏幕时，按conc键，用数字键输入流动相B的浓度百分数，按Enter键确认。按CE键退出。4.4.4梯度设定4.4.4.1在A泵显示初始屏幕时，按edit键，Enter键；4.4.4.2用数字键输入时间，按Enter键，重复按func键选择所需功能（FLOW设定流速，BCNC设定流动相B的浓度），按Enter键，用数字键输入设定值，按Enter键；4.4.4.3重复上一步设定其它时间步骤；4.4.4.4用数字键输入停止时间，重复按func键直至屏幕显示STOP，按Enter键。按CE键退出。4.5更换流动相并排气泡4.5.1将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；4.5.2逆时针转动A/B泵的排液阀180，打开排液阀；4.5.3按A/B泵的purge键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4.5.4将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。4.5.5如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。4.5.6如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按pump键，冲洗3min后再按pump键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。4.6平衡系统4.6.1按N2000色谱数据工作站操作规程打开“在线色谱工作站”软件，输入实验信息并设定各项方法参数后，按下“数据收集”页的 查看基线 按钮。4.6.2等度洗脱方式4.6.2.1按A泵的pump键，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。4.6.2.2检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。4.6.2.3观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按4.5.6操作。4.6.2.4观察基线变化。如果冲洗至基线漂移0.01mV/min，噪声为0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。4.6.3梯度洗脱方式4.6.3.1以检验方法规定的梯度初始条件，按4.6.2项下方法平衡系统。4.6.3.2在进样前运行12次空白梯度。方法：按A泵的run键，prog.run指示灯亮，梯度程序运行；程序停止时，prog.run指示灯灭。4.7进样4.7.进样前按检测器zero键调零，按软件中零点校正按钮校正基线零点，再按一下查看基线按钮使其弹起。4.7.2用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量。岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的操作规程一、系统组成本系统由2个LC-10ATvp溶剂输送泵（分主/A泵和副/B泵）、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。二、准备1 、准备所需的流动相，用合适的0.45m滤膜过滤，超声脱气20min。2 、根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。3、 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45m滤膜过滤。（注意腐蚀性与有机系的的溶剂）4 、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。接通电源，依次开启不间断电源、B泵、A 泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。四、参数设定1、波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按func键，用数字键输入所需波长值，按Enter键确认。按CE键退出到初始屏幕。2 、流速设定：在A泵显示初始屏幕时，按func键，用数字键输入所需的流速（柱在线时流速一般不超过1ml/min），按Enter键确认。按CE键退出。3 、流动相比例设定：在A泵显示初始屏幕时，按conc键，用数字键输入流动相B的浓度百分数，按Enter键确认。按CE键退出。4、梯度设定：4.1 在A泵显示初始屏幕时，按edit键，Enter键；4.2 用数字键输入时间，按Enter键，重复按func键选择所需功能（FLOW设定流速，BCNC设定流动相B的浓度），按Enter键，用数字键输入设定值，按Enter键；4.3 重复上一步设定其它时间步骤；4.4 用数字键输入停止时间，重复按func键直至屏幕显示STOP，按Enter键。按CE键退出。五、更换流动相并排气泡1.将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2.逆时针转动A/B泵的排液阀180，打开排液阀；3.按A/B泵的purge键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4.将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。5.如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。6.如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按pump键，冲洗3min后再按pump键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。六、平衡系统1、查看基线：1.1 按N2000色谱数据工作站操作规程打开“在线色谱工作站”软件，1.2 输入实验信息并设定各项方法参数后，1.3 按下“数据收集”页的 按钮。2 、等度洗脱方式2.1 按A泵的pump键，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。2.2 检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。2.3 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按检查管路后再操作。2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移0.01mV/min，噪声为0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。3 、梯度洗脱方式3.1 以检验方法规定的梯度初始条件，按2项下方法平衡系统。3.2 在进样前运行12次空白梯度。方法：按A泵的run键，prog.run指示灯亮，梯度程序运行；程序停止时，prog.run指示灯灭。七、进样1 、进样前按检测器zero键调零，按软件中 零点校正 按钮校正基线零点，再按一下 查看基线 按钮使其弹起。2 、用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量即可以进样了。3、含量测定的对照溶液和样品供试溶液每份至少注样2次 。八、谱图的判断及结果计算1、内标法 用含对照品和内标物质的对照溶液所得色谱峰响应值，按下式算出校正因子（f）：其中 As和Ar分别为内标物质和对照品的峰面积或峰高，ms和mr分别为加入内标物质和对照品的量。2、外标法：用含对照品的对照溶液所得色谱峰响应值，按下式计算比值（r）：r=mr/Ar（其中 mr和Ar分别为对照品的量和相应的峰面积或峰高。 ）再根据供试品溶液的色谱峰响应值，计算供试品中被测成分的含量（mi）：mi=rAi（其中 Ai为供试品溶液中被测成分的峰面积或峰高）。必要时，再根据稀释倍数、取样量和标示量折算成标示量的百分含量，或根据稀释倍数、取样量折算成百分含量。九、清洗管路及进样口1、分析完毕后，先关检测器和数据处理机，再用经滤过和脱气的适当溶剂清洗色谱系统，正相柱一般用正已烷，反相柱如使用过含盐流动相，则先用水，然后用甲醇-水冲洗，冲洗前先按（4.1.14.1.2）操作，再用分析流速冲洗，各种冲洗剂一般冲洗1530分钟，特殊情况应延长冲洗时间。2、冲洗完毕后，逐步降低流速至0，关泵，进样器也应用相应溶剂冲洗，可使用进样阀所附专用冲洗接头。3 、关断电源，作好使用登记，内容包括日期、检品、色谱柱、流动相、柱压，使用小时数，仪器完好状态等。【特殊情况】：谱流路系统，从泵、进样器、色谱柱、到检测器通池，在分析完毕后，均应按（5.1）充分冲洗，特别是用过含盐流动相的，更应注意先用水，再用甲醇-水，充分冲洗Lc-15C高效液相色谱仪操作1.工作原理高效液相色谱是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由积分仪记录，得到的信号-时间曲线。2.系统适用性按各品种项下要求对仪器进行适用性试验,包括以下要求：色谱柱的理论板数（N）：理论板数应高于各品种项下规定的最小理论板数，若理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数,应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色谱柱充填的优劣等）使理论板数达到要求。分离度和拖尾因子：除另有规定外,分离度应大于1.5T应在0.951.05之间。3.仪器组成本系统由LC-15ATvp溶剂输送泵、手动进样阀7725i、SPD-15Avp紫外检测器、Lcsolution工作站、电脑和柱温箱等组成。.4.准备4.1根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（箭头依次朝上）。4.2检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。4.3准备所需的流动相，用合适的0.45m滤膜过滤，用吸气减压装置脱气。4.4按标准操作规程配制样品和对照溶液，用合适的0.45m滤膜过滤。5.开机接通电源，依次开启泵，检测器（在进样前30min打开）、Lcsolution工作站。5.1 LC-15C泵操作5.1.1逆时针转动泵的排液阀180，打开排液阀；5.1.2按泵的purge键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min(可设定)的流速冲洗，5min（可设定）后自动停止；5.1.3将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。5.2 SPD-15A检测器参数设定5.2.1检测器显示屏显示 （NM） abs (AV) range (AUFS) 1amp 254 0.000 0.001 D “ （NM）”项为波长，“abs (AV) ”项为吸光度，“range (AUFS) ”项表示量程，“1amp”项表示氘灯。5.2.2泵显示屏显示如下： FLOW/PRESS PRESSURE P.MAX P.MIN 0.000 0 0 0“FLOW/PRESS”项为流速，“PRESSURE ”项表示压力，“P.MAX”项为最大压力，“P.MIN ”项表示最小保护压力，。5.2.3按pump 启动泵，待压力稳定后，可开始分析测定工作。5.2.4观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按5.1.1操作。5.2.5观察基线变化。如果冲洗至基线漂移0.01mV/min，噪声为” 键,如图所示,选中”Same as left”-使柱温箱的温度左右一致。点击ok进入下一画面。6、VWD检测器参数设定:在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在”Peak width (Response time)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如0.1min (2s)。在Timetable 中可以“Insert”一行，输入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm。点击ok进入下一画面。7、DAD检测器参数设定:检测波长: 254nm,BW=30nm, 参比波长=350nm,BW=100nm;检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽BW： 一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在*近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽BW：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。Peak width（Response time）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。点击Ok进入下一画面。8、RID检测器参数设定:色谱条件:进样体积: 20ul 。 光学单元温度: Off 。极性: 正 。 峰宽(响应时间) : 4s 。“Optical Unit Temperature”-若环境温度控制在2,设定为Off, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“Peak width”-大多数分析设为4S，只有在高速分析下设为更短。“Automatic recycling after analysis”-在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相，检测器连续运行，可随时投入使用。点击RID图标，选择RID Control ：Heater 设为On，若要循环流动相，必须将“Recycling Valve”设为ON。手动purge 参比池，将其设为On，并输入Purge 时间。9、FLD检测器参数设定:色谱条件： 样品：P/N 01018-68704 用甲醇稀释为1:10。 进样体积：5ul。 柱温箱: 30 。 EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。 响应时间=4s. 停止时间： 出峰完毕。 Excitation A: 激发波长:200-700nm,步长为1nm,或Zero Order。 Emission: 发射波长: 280-900nm, 步长为1nm,或Zero Order。 PMT: 大多数应用适当的设定值为10,若高浓度样品峰被切平头,则减少 PMT 值。 “Peak width”：大多数应用设为4s，只有快速分析采用小的设定值。 Multi Ex ： 多波长及光谱（激发）。 Multi Em：多波长及光谱（发射）。 同时可以输入范围Range、步长step、采集光谱。10、在“ Run time checklist ”中选中“Data acquisition”，单击Ok。11、单击“Method”菜单，选中“Save method as”，输入一方法名，如“test”，单击Ok。12、从菜单 “View”中选中”Online signal” ,选中Windows 1,然后单击Change 钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击Ok.(如同时检测二个信号,则重复12,选中Windows 2)。13、从“Run control ”菜单中选择“Sample info”选项，如上图所示，输入操作者名称，在“Data file ”中选择“Manual”或“Prefix”。区别: Manual-每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖。Prefix在Prefix 框中输入前缀，在Counter 框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd0001，vwd0002。14、从Instrument 菜单选择System on。15、等仪器Ready，基线平稳，从Method菜单中选择“Run method”，进样。（三）、数据分析方法编辑:1、从“View”菜单中，单击“Data analysis”进入数据分析画面。2、从“File”菜单选择“Load signal”，选中您的数据文件名，如下图所示。单击Ok。3、做谱图优化,从“Graphics”菜单中选择“Signal options”选项，。从Ranges中选择Auto scale及合适的显示时间，单击ok,或选择”Use Ranges” 调整。反复进行，直到图的比