方案牛海绵状脑病痒病监测实施方案.doc

附件2：
外来动物疫病监测实行方案
牛海绵状脑病、痒病监测实行方案
一、监测范围
（一）牛海绵状脑病。重点在奶牛养殖场、肉牛养殖场、动物医院和屠宰场进行采样监测，采集对象涉及具有神经症状、紧急屠宰、非正常死亡的2岁以上牛，以及正常屠宰的4-7岁奶牛和种牛。
（二）痒病。重点对放牧羊群、种羊养殖场以及屠宰场进行采样监测，采集对象为瘙痒、神经症状、共济失调、倒地不起、失明、死亡或其他症状的1岁以上绵羊和山羊。
二、送样时间及地点
各市州将采集好的样品先冷冻保存，然后于4月25日、6月25日、8月20日前分三次送省动物卫生监督所。省动物卫生监督所于5月10日、7月10日、9月5日分三次将采集的样品送至中国动物卫生与流行病学中心国家牛海绵状脑病参考实验室。
三、采样数量和规定
（一）采样数量：各市州按照《甘肃省2023年疯牛病、痒病检测任务分派表》（附录）中任务数量，采集相应类别脑样，保证完毕年度采样数量。
（二）采样规定
1、各市（州）采集的牛脑样品具有神经症状的样品应80%以上为奶牛样品；紧急屠宰、死亡或4-7岁正常屠宰牛的样品应50%以上为奶牛样品。
2、各市州在采样过程中要认真填写采样单，对临床疑似病牛要拍照或摄像，建立具体的采样档案，所有档案、图片和录像等材料连同采集到的样品一起送省动物卫生监督所。
四、监测结果解决与报告
（一）各市州在10月30日前将疯牛病、痒病采样和流行病学调查总结报省动物卫生监督所，内容涉及：1、检查的各种易感动物总数及其年龄结构；2、每种易感动物总的死亡率和由神经性疾病导致的死亡率；3、主管部门限制流通的动物类型与数量记录；4、临床检查与流行病学调查的动物数量与结果；5、除牛科动物以外感染传染性海绵状脑病（TSEs）的动物；6、BSE相关知识的教育培训情况；7、进口和饲喂肉骨粉的情况。省动物动物卫生监督所汇总后在11月30日前，向农业部兽医局提交BSE年度工作总结，并抄送国家牛海绵状脑病参考实验室。
（二）牛海绵状脑病普查采样单、非正常屠宰牛登记表、羊痒病普查采样单及采样送样方案详见附录。
附录：1、甘肃省2023年疯牛病、痒病检测任务分派表
2、牛海绵状脑病普查采样单
3、羊痒病普查采样单
4、非正常屠宰牛登记表
5、采样与送样方案
附录1：
甘肃省2023年疯牛病、痒病检测任务分派表

市（州）
牛脑样品（份）
羊脑样品(份）
临床疑似奶牛脑样（份）
奶牛脑样（份）
其它牛脑样（份）
合计
酒泉市
2
9
7
18
15
张掖市
2
10
8
20
15
武威市
2
11
12
25
15
白银市
1
3
6
10
15
临夏州
4
13
13
30
10
甘南州
1
3
6
10
12
陇南市
1
5
4
10
12
定西市
2
10
13
25
15
平凉市
2
8
10
20
16
庆阳市
1
5
6
12
10
天水市
2
8
10
20
15
合计
20
85
95
200
150

附录2：
牛海绵状脑病普查采样单
采样单编号：第___ 张编制：国家牛海绵状脑病参考实验室
样品保存条件：甲醛固定□-18℃以下冷冻□
样品类别：脑□淋巴结□脾脏□扁桃体□其它_________
采样地点：省（市）县乡
样品
编号
种类
月龄
健康状况

备注
奶牛
肉牛
兼用牛
正常屠宰
非正常屠宰*
死牛
急宰
疑似

*若为非正常屠宰牛请继续填写《非正常屠宰牛登记单》，样品编号要相应。

注释：
1.采样地点相同的样品可以登记在同一张采样单上。样品编号用地名的首字母+数字来表达，例如青岛1号写为QD-1，此号必须与样品包装编号相应起来。
2.请具体填写采样单位名称、电话、地址等信息。
3.有些选项可以打“√”表达。
采样单位（委托采样单位）名称：（盖章）电话：
采样单位（委托采样单位）地址：邮编：
采样人（委托采样人）署名： 年 月 日
封样单位（运送单位）名称：（盖章）电话：
封样单位（运送单位）地址：邮编：
送样人（委托送样人）署名： 年 月 日
此单一式3联，一联随样品封存，另两联分别由采样单位和养殖单位保存。
附录3：
羊痒病普查采样单
采样单编号：第张编制：国家牛海绵状脑病参考实验室
样品保存：甲醛固定□-18℃以下冷冻□样品类别：脑□淋巴结□脾脏□其他

采样地点：省（市）县乡
样品
编号
动物种类

月龄
性别
健康状况
备注
（若为临床可疑，请描述病羊的品种、畜主、是否为
进口等情况，可单独附页说明）
临床可疑
山羊
绵羊
正常屠宰
临床
可疑
其他疾病

1、发病初期易惊、不安、打颤、凝视，有时癫痫状发作。
2、走路时头高举，后肢明显抬高，前肢摇摆不稳类似驴跑。
3、发病后期明显瘙痒，啃咬腹部和股部，或在固定物上摩擦患部，患部有皮肤破损，日渐消瘦而亡。

注释：采样地点相同的样品可以登记在同一张采样单上。样品编号用地名的首字母+数字来表达，例如青岛1号写为QD-1，此号必须与样品包装编号相应起来。有些选项可以打“√”。
采样单位（委托采样单位）名称：（盖章）电话：
采样单位（委托采样单位）地址：邮编：
采样人（委托采样人）署名： 年 月 日
封样单位（运送单位）名称：（盖章）电话：
封样单位（运送单位）地址：（盖章）邮编：
送样人（委托送样人）署名： 年 月
附录2:
附录4：
非正常屠宰牛登记表
样品编号：编制：国家牛海绵状脑病参考实验室
保存条件：甲醛固定□-18℃以下保存□样品类别：脑□其它­­_______­­­­__月龄：___________
牛的种类：奶牛□肉牛□兼用牛□健康状况：临床疑似牛□紧急屠宰牛□死牛□
采样地点：省（市）县乡村
具体描述：
年龄判断依据：牙齿□养殖档案□曾饲喂肉骨粉：是□否□性别：母□公□
品种：___________________原产国___________________耳标____________________
畜主/养殖场___________________________________________________________________
临床疑似牛（由不明因素引起的渐进性行为变化或神经症状，表现如下）：
1． 行为表现：甩头□磨牙□过度舔舌□耳朵竖立□行为改变，如落伍□
挤奶时连续踢踏□经常伸展脖子□像拉马车样低头站立□
面对舍门或障碍物踌躇不前□不愿进挤奶室□走路时后肢过度摇摆或伸展□
2.神经症状：颤抖□兴奋□胆怯□恐惊□狂怒□
意识异常□转圈运动□共济失调□瘫痪/局部麻痹□
感觉过敏如听觉、触觉、视觉□没有外伤或感染而濒临死亡□
其他
紧急屠宰牛：
倒地不起□斜靠着物体才干站立□不愿行动□严重伤病□宰前检疫认为要销毁的牛□其他
死牛：
在养殖场死的□在运送过程中死的□在其他地方死的

其他描述：

照片：
每省至少要对20%的临床疑似牛进行拍照或摄像，并收集临床疑似牛的其他材料如档案等。若为数码照片，则可以给照片的名称命名为相应的样品编号，然后以电子方式或相片（背面要标明样品编号）发送给省站或疯牛病检测实验室。若不是数码照片，则洗出来，在其背面用圆珠笔或记号笔注明样品编号，与采样单一并交给疯牛病检测实验室。

附录5：
采样与送样方案
牛羊脑样品既可以按甲醛固定解决，也可以按冷冻保存解决，然后运送至国家认定的检测实验室进行检测。具体方法见“方案一：新鲜牛羊脑样品的采集与运送方案”和“方案二：甲醛固定的牛羊脑样品的采集与运送方案”。参考实验室建议采用方案一的规定进行采样和运送，该方案也是当前国际上广泛采纳的方案。
方案一：新鲜牛羊脑样品的采集与运送方案
1. 专用采样工具采集牛羊脑样品的特点：
国家牛海绵状脑病参考实验室根据国际上通用的牛羊脑采样工具设计出我国的牛羊脑样品采样工具。该工具为塑料制品，呈勺子形状，前端带有锋利的齿，便于切断脑组织。这种采样方式有着非常明显的优点，如使用简朴、节约成本、工作效率高、机动性强、采样安全。
2. 采样物品准备：
数码照相机（或数码摄像机）、专用的采样勺（一把勺子最多可以采集三份样品，牛脑采样勺为蓝色，羊脑采样勺为黄色）、医用剪刀（一把，长10cm左右）、一次性手套、橡胶检查手套（即乳胶手套）、口罩、工作服、样品杯（可向参考实验室索取）、记号笔、冰袋（至少3块大号的冰袋）、大号的透明胶带、带盖泡沫箱（有厚度，无破损，大小适中）、签字笔或圆珠笔、采样单、吸水纸等。
3.采样环节：
A.假如有比较典型的疯牛病（BSE）疑似牛，则要拍照或摄像留下证据。每省至少要对20%的临床疑似牛进行拍照或摄像，并且收集临床疑似牛的其他材料如档案等。采集临床疑似牛时，采样人员还需要通过问询等方式弄清该病牛的其他情况，问询内容可以涉及饲养历史、来源、流动等情况。这些证据材料必须存档和备份，运送样品时一并寄送至检测实验室。
B.每次采样至少有两人在场，其中一人戴好一次性手套和橡胶检查手套，此外一人专门登记和启动样品杯而不需要戴手套。通过观测牙齿检查牛羊的年龄，大于3岁的牛（第二对永久门齿长出）和大于18月龄的羊（第一对永久门齿长出）才可以采样，但假如该动物为疯牛病或痒病风险动物则没有年龄限制。
C.在平整地面倒置牛/羊头，即牛/羊头的两角和鼻子靠地放置。同时，此外一人开始填写采样单，并且在样品杯上标记上相应的样品编号（以县/市名+序号，如青岛1号）。一个样品杯只能装一个脑样品。
D.在枕骨大孔处用剪刀剪开脑硬膜，目的是便于插入采样勺。然后用一个手指伸入枕骨大孔中，沿着延脑（延髓）转一周，目的是切断延脑与头骨之间相连的神经和血管，以便于脑组织顺利挖出。
E.从延脑腹侧（也即勺子从枕骨大孔的上面进入）将采样勺插入枕骨大孔中，插入时采样勺要紧贴枕骨大孔的腔壁，以免损坏延脑组织。采样勺插入的深度约为5-7cm（采羊脑时插入深度约为4cm），然后向上一扳勺子手柄，同时往外抠出脑组织和勺子，延脑便可完整取出。
注意：尽量保护好延脑“三叉口”处（脑闩部）的组织的完整性。
F.将脑组织放入编好号的样品杯中，拧紧杯盖，然后放置在盛有冰袋的泡沫箱中，用透明胶带将泡沫箱的盖子绑紧。
注意：采好的样品必须在5小时之内放入冰柜中冷冻上，以防腐败；样品至少要冷冻24小时才干往疯牛病检测实验室运送。
G.各地送来的样品要先在省动物疫病防止控制机构统一清理，假如没有冷冻好的样品，则必须及时放入冰柜中冷冻，然后由省动物疫病防止控制机构统一将样品发送至检测实验室。
4.样品运送：
准备好带盖的结实的泡沫箱，该泡沫箱必须无任何破损，并且大小适中（根据样品的量来决定）。先在泡沫箱的底部铺上一层吸水纸，之后放入冷冻好的样品，然后在侧面放入几块冷冻好的冰袋，最后在样品的上面放入几块冷冻好的冰袋，盖紧箱盖。用大号的透明胶带封好箱口，再横向打好包，箱子外面用记号笔写上“易碎勿压”以及向上的“箭头”等字样，然后由省动物疫病防止控制机构统一运送。打好包的样品必须及时发送，并保证4天之内运送至检测实验室。
提醒：一、这种包裹最佳通过航空途径运送或由专人运送，并牢记要注明“易碎勿压”。二、牢记在采样单上写明送样人及其联系方式，样品检测完后实验室要出具检查报告并寄给送样人。
方案二：甲醛固定的牛羊脑样品采集与运送方案
1. 材料
A.数码照相机（或数码摄像机）、采样单、复写纸和圆珠笔或铅笔
B.医用胶布（用于捆装有样品的纱布，并在其上写上样品编号）
C.电动骨锯或采样勺、骨钳、斧头
D.解剖刀、剪刀、乳胶手套
E.纱布、棉线、密封塑料桶（容积不少于5000ml）
F.固定液：即10%福尔马林（甲醛）生理盐水
氯化钠8.5g；水900ml；40%福尔马林（甲醛）100ml
2.采样环节
A.假如有比较典型的BSE疑似牛，则要拍照或摄像留下证据。每省至少要对20%的临床疑似牛进行拍照或摄像，并且收集临床疑似牛的其他材料如档案等。采集临床疑似牛时，采样人员还需要通过问询等方式弄清该病牛的其他情况，问询内容可以涉及饲养历史、来源、流动等情况。这些证据材料必须存档和备份，运送样品时一并寄送至检测实验室。
B.填写采样单
根据实际情况，按采样单规定认真填写。采样地点相同的样品可以登记在同一张采样单上。
C.取样
（I）电锯采样法
a.用电锯沿两牛角根部到枕骨大孔上边沿的方向将牛颅腔打开。
b.用手术刀将脑膜切开，骨钳打开颅腔，然后把脑神经和脑血管切断。
c.取出整个脑组织涉及大脑、小脑和脑干（间脑、中脑、脑桥和延脑）；注意千万不要把脑干损坏。
d.将每头牛的脑组织用纱布松松地裹住(纱布容易透水)，千万不能紧，一定要松，然后将写有编号名称的医用胶布（用圆珠笔或铅笔将编号写在上面，编号：地名+序号+样品类别名，如“青岛市10号牛”）用棉线栓在纱布口处，注意不让胶布脱落。解决好后放入10-20倍体积10%福尔马林生理盐水中固定一周。注意标签编号与采样单的编号相相应。
e.用新的福尔马林生理盐水更换旧的固定液，密封在塑料桶中，桶外贴上桶中所有牛脑的编号，以便我们解决牛脑时不开桶盖便可知桶中的牛脑情况。每个塑料桶可根据大小放置相应数量的牛脑。
（II）采样勺采集法
a.准备专用的采样勺（一把或二把便可）、医用剪刀（一把）、一次性手套、橡胶检查手套（即乳胶手套）以及其他采样用品如采样单等。
b.戴好一次性手套和橡胶检查手套，专门登记的人员不需要戴手套。通过观测牙齿检查牛的年龄。
c.在平整地面倒置牛头，即牛头的两角和鼻子靠地放置。
d.在枕骨大孔处用剪刀剪开脑硬膜，目的是便于插入采样勺。然后用一个食指伸入枕骨大孔中，沿着延脑转一周，目的是切断延脑与头骨之间相连的神经和血管，以便于延脑的取出。
e.从延脑腹侧（也即勺子从枕骨大孔的上面进入）将采样勺插入枕骨大孔中，插入时采样勺要紧贴枕骨大孔的腔壁，以避免损坏延脑组织。采样勺插入的深度约为5-7cm（采羊脑时插入深度约为4cm），然后向上一扳勺子手柄，同时往外抠出脑组织和勺子，延脑便可完整取出。
f.其余环节见(I)中的d和e。
注：对于临床疑似牛羊，采下脑后，从脑中线一分为二，一份用于甲醛固定，另一份用于—20℃冷冻并在低温下运送至参考实验室。
3.样品的包装与运送
A.独将采样单邮寄给检测实验室，切不可与样品一起邮寄，目的是防止采样单被污染。
B.将固定好的牛脑放在几个大的带内盖的塑料桶中密封，注意每个牛脑都随身带有一个唯一的编号，桶外壁上也标明桶内的所有牛脑编号。运送时桶里的固定液可以不按10-20倍体积的量，而保存适当的量便可，适当的量是以浸没牛脑为准，但是运送时必须更换成新的固定液。
C.运送时，将装有样品的塑料桶用木架子固定好，以防运送途中颠倒。
D.在木架子外面加两张不干胶标签，一张注明样品名称、采样单位与地址及联系电话，另一张注明放置方向、小心、易碎和切勿倒置等字样。
E.样品由专人或经航空运至检测实验室。
牛传染性胸膜肺炎监测计划
一、监测范围
重点对规模屠宰场进行肉品监测。
二、监测时间
各市州于6月15日将采集的血清样品送至省动物疫病防止控制中心，省动物疫病防止控制中心于6月20日前将各市州送检的血清样品送至指定实验室；各市州于8月15日将采集的肉品监测样品送至省动物疫病防止控制中心，省动物疫病防止控制中心于8月20日前将各市州送检的肉品监测样品送至指定实验室。发现可疑病例，随时采样，及时送至指定实验室。
三、监测数量
各市州采集牛血清样品见表1。平凉、张掖、甘南各选择1-2个规模屠宰场进行肉品监测，采集有眼观肺炎变化的牛肺脏不少于20个。
四、监测结果解决
（一）血清学阳性样品应进行溯源追踪，采集鼻、咽部拭子进行病原学检查，同时限制同群牛移动，必要时应做剖杀检查；
（二）屠宰场肺脏样品病原学检查为阳性应追踪来源，对同群牛进行流行病学调查；
（三）疑似肺脏样品病原检查为阳性应追踪样品来源，对同群牛开展流行病学调查；
（四）对病原检查为阳性牛进行扑杀，必要时对同群牛进行扑杀，并作无害化解决。
（五）将扑杀和解决情况按快报规定进行报告。