硫酸氢氯吡格雷的质量研究和质量标准建立-学位论文.pdf

南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立中文摘要.3ABSTRACT.4第一部分 引言.5第二部分 硫酸氢氯毗格雷质量研究.6第一章结构确证.61 硫酸氢氯毗格雷的结构确证.61.1 基本信息.61.2 理化常数、纯度、含量.61.3 元素分析.61.4 红外吸收光谱(IR).61.5 紫外吸收光谱(UV).81.6 核磁共振光谱(NMR).91.7 质谱(MS).151.8 X-射线衍射谱.161.9 热分析(TGA-DSC).181.10 手性柱分析.191.11 比旋度测定.201.12 综合解析.202 已知杂质结构确证.212.1 杂质A结构确证.212.2 杂质B结构确证.252.3 杂质C(R-异构体)结构确证.28第二章性状.331夕卜观.332溶解度.333熔点.334 热分析(TGA-DSC).345比旋度.356引湿性试验.367本章小结.36第三章鉴别.381紫外鉴别.382 HPLC 鉴别.383红外鉴别.384化学鉴别.39第四章检杳.401有关物质.40i.l 色谱条件的确定.401.2 检测波长的确定.411.3 专属性实验.421.4 检测限写定后限的确定.*.451.5 有关物质的测定方法.45南京大学硕士毕业论文 藤酸氨氯哦格雷的质重研究和质标准建立汪静20112 R-异构体.462.1 色谱条件的确定.462.2 专属性实验.462.3 检测限与定量限的确定.492.4 R-”“”.“”.”.”“”“”.“.”.“”493酸度 494水分 506重金属 507 碑盐.502描留溶剂 si82:法专属性试验.518.3 精密度试验.528.4 线性曲线的测定.538.5 回收率实验.538.6 检测限和定量限的测定.553含量测定,精密度和溶液的稳定性.59第二部分 结果与讨论.62第四部分结论.65a 旗 69南京大学硕士毕业论文 硫酸氨氯毗格雷的质置研究和质量标准建立 汪静中文摘要2011Will参照现有国标和USP标准，拟定符合本厂工艺和药品安全性要求的硫酸氢氯毗格雷 质量标准，并对拟定的方法进行确认和验证。论文提出“新方法与传统方法相比较”的总 体思路，对硫酸氢氯毗格雷的质量控制方法进行系统研究。首先是选择质量控制的指标；其次，确定并建立相应的分析方法：最后，综合分析各指标的测定结果，筛选并建立理 想的质量标准。主要内容如下：1.结构确证硫酸氢氯叱格雷的已知杂质为杂质A(Ci5H14CINO2S)、杂质B(C|6H16CINO2S.H2so4)、杂质C(Ci6H16CINO2S.H2sO4)经红外吸收光谱、紫外吸收光谱、核磁共振谱、质谱等检 测，所得图谱均能得到合理解析；综合解析证明样品即为杂质A、B、Co2.质量分析本品为白色或类白色的结晶性粉末，无臭。在甲醇、乙醇、水或O.lmo l/L盐酸中易溶，在三氯甲烷中几乎不溶。比旋度为+53.0。至+57.0。采用UV、IR、HPLC和硫酸盐测试 共同作为鉴别方法。本品pH值应为1.52.5,水分不得过0.5%，炽灼残渣不得过0.1%,重金属不得过百万分之二十。杂质A不得过0.2%,杂质B不得过0.3%，其它单个杂质 不得过0.1%,各杂质的和不得大于1.0%,R-异构体不得大于L0%。按无水物计算含硫 酸氢氯瞰格雷应为98.5%101.5%。3.拟定质量标准中的性状、鉴别、检查和含量各检测项目的确认和验证指标符合预 期标准。本研究所确定的质量分析方法稳定可靠，符合该工艺下产品的特性要求，可以 作为本品的质量控制标准。关键词：硫酸氢氯叱格雷结构确证质量标准方法学研究3南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011ABSTRACTAc c o r din g t o t h e c u r r en t St a t es St a n da r d a n d USP,est a b lish ed t h e qu a lit y st a n da r d o f Clo pido gr el Bisu lfet e.Th e va lida t ed met h o d c o n fo r ms t o t h e pr o c ess a n d sa fet y r equ ir emen t.In t h is pa per,t h e c o mpr eh en sive design o f st u dyin g o ver a ll t est met h o ds,c o mpa r ed b et ween New a n d Tr a dit io n a l met h o ds*,wa s pu t fo r wa r d fo r t h e fir st t ime.Fir st ly,c o n c r et e eva lu a t in g in dex wa s selec t ed.Th e n ext st ep wa s t o develo p r ela t ed a n a lyt ic a l met h o ds.Fin a lly,r esu lt s o f ea c h in dex wer e a n a lyzed a n d a n idea l qu a lit y st a n da r d wa s dec ided,wh ic h is ma in ly su mma r ized a s fo llo ws:1.St r u c t u r e ver ific a t io nTh e kn o wn impu r it ies o f Clo pido gr el Bisu lfa t e is r ela t ed c o mpo u n d A(C i jH 14CINO2S)r ela t ed c o mpo u n d B(Ci6HgClNCh S.H2s0,a n d r ela t ed c o mpo u n d C(G6H16CINO2S.H2so4).Aft er det ec t ed b y IR,UV,HNMR,MS,t h er ma l a n a lysis a n d X-r a y diffr a c t io n a n a lysis,a ll spec t r u ms c o u ld b e a n a lyzed r ea so n a b ly.Gen er a l a n a lysis sh o wed t h a t t h e sa mple wa s Clo pido gr el Bisu lfa t e.2.Qu a lit y st u dy a b o u t Ac t ive Ph a r ma c eu t ic a l In gr edien tTh e a ppea r a n c e o f Clo pido gr el Bisu lfa t e is wh it e o r wh it ish c r yst a llin e po wder,sc en t less.It c a n b e disso lved in met h a n o l,et h a n o l,wa t er a n d 0.1N h ydr o c h lo r ic a c id,b u t h a r dly in c h lo r o fo r m.It*s Spec ific o pt ic a l r o t a t io n is+53.0+57.0.Iden t ific a t io n in c lu de UV-,IR、HPLC a n d su lfa t e t est.Th e pH va lu e is b et ween 1.5 a n d 2.5.Wa t er c o n t en t,r esidu e o n ign it io n a n d h ea vy met a ls sh o u ld b e n o t mo r e t h a n 0.5%,0.1%a n d 20ppm,r espec t ively.No t mo r e t h a n 0.2%o f r ela t ed c o mpo u n d A is fo u n d;n o t mo r e t h a n 0.3%o f r ela t ed c o mpo u n d B is fo u n d;n o t mo r e t h a n 0.1%o f a n y o t h er impu r it y is fo u n d;a n d n o t mo r e t h a n 1.0%o f t o t a l impu r it ies is fo u n d.Th e c o n t en t o f R-iso mer sh o u ld b e n o t mo r e t h a n 1.0%.Ca lc u la t ed o n t h e dr ied b a sis,Clo pido gr el Bisu lfa t e c o n t a in s n o t less t h a n 98.5%a n d n o t mo r e t h a n 101.5%o f G6HseIN02sH2sO4.3.Th e va lida t io n o f c h a r a c t er-,iden t ific a t io n t est a n d a ssa y a r e su it a b le fo r t h e r equ ir emen t s,t h e qu a lit y st a n da r d o f Clo pido gr el Bisu lfa t e is st a b le a n d r elia b le,wh ic h meet t h e pr o c ess r equ ir emen t s u n der t h e pr o du c t c h a r a c t er ist ic s.Th e met h o d is su it fo r t h e qu a lit y c o n t r o l o f t h e pr o du c t.Keywo r d：Clo pido gr el Bisu lfa t e St r u c t u r e ver ific a t io nQu a lit y St a n da r d Met h o d Appr a ise4南京大学硕士毕业论文 破酸氢敏叱格雷的质研究和质量标准建立汪静2011第一部分 引言心脑血管血栓性疾病是我国的常见病，也是重要死因。我国心肌梗塞平均发病率约 为42 A/10万人；而且随着营养状况的改善，发病率呈增长趋势。我国也是脑血栓病人 高发地区，目前患病人数已超过1000万，每年新发病例约150万人，每年死亡者达100 多万，在存活者中，约25%的人不同程度地丧失劳动力，其中重度致残高达40%以上。更为重要的是近年来，以冠状血栓和脑血栓为主的血栓栓塞性疾病的发病率呈上升趋势,严重危害人类的健康。因此,对这类疾病的防治研究十分重要。硫酸氢氯叱格雷是一种新型高效的抗血小板药物，临床上应用于治疗动脉粥状硬化 疾病、急性冠脉综合症、预防冠脉内支架植入术后支架内再狭窄和血栓性并发症等.与 其他抗血小板药物相比，硫酸氯毗格雷具有疗效强、费用低、副作用小等优点。由于本 品在医保范围，目前在国内抗血栓畅销药物中，硫酸氯毗格雷的市场份额增长迅速，2005 年的市场份额达到了 24.49%排名由2001年的第七位上升至2004年的第一位，全球销售 额排第二名，年销售63亿美元，目前成为我国抗凝血类药物中市场份额最大的一个产品,而国内仅一家上市，因此开发此类产品市场前景广阔。该品种标准在USP中已有收载，也有国家药品标准(WSl-(X471)-2003Z,但两者 有较大差异。因此，有必要建立符合中国国情并适应企业研发、生产需要的硫酸氢氯瞰 格雷质量标准.南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质置研究和质标准建立汪静2011第二部分硫酸氨氯毗格雷质量研究第一章结构确证1硫酸氢氯哦格雷的结构确证1.1 基本信息药品中文名：硫酸氢氯口比格雷药品英文名：Clo pido gr el Bisu lfa t e结构式：化学名：(+)(S)2(2-氯苯基卜2.(6,7-二氢睡吩3,2v并毗庭5基)乙酸甲酯硫酸氢盐 英文名：Met h yl(+)-(S)-2-(2-Ch lo r o ph en yl)-2-(6,7-dih ydr o t h ien o 3,2-c pyr idin e-5-yl)a c et a t e,h ydr o gen su lfa t e分子式：Ci6Hi6ClNO2S H2SO4分子量：419.901.2 理化常数、纯度、含量样品为类白色至白色结晶性粉末，无臭，在甲醇、乙醇、水和O.lmo l/LHCl中易溶,在氯仿中几乎不溶。比旋度：a 20。=+55.8。13元素分析测试单位：南京大学现代分析中心Per kin-Elmer 240型元素分析仪测定化合物中C、H、N含量。测定结果见表表1-1表1-1样品的元素分析数据Ta b le 1-1 Th e Elemen t a n a lysis o f Clo pido gr el Bisu lfh t e元 素C%H%N%计算值45.774.323.34样品实测值145.784.423.43样品实测值245.694.373.37平均值45.744.403.40注：计算值按 Ci6H16CINO2S H2SO4 计.样品的元素分析测定值与硫酸氢氯唯格雷的元素分析计算值相符。1.4 红外吸收光谱(IR)测试单位：南京大学配位化学国家重点实验室 红外光谱仪：Br u ker Vec t o r 22 FMR红外光谱仪测定条件：固体KBr压片南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯叱格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011样品及对照品的红外吸收图谱分别见图1-1,所测光谱吸收峰及解析见表1-2 rhe State Key Laboratory of Coordination Chemistry,Nanjing University.,2007-4-29 11:13:5,3500 3000 2500 2000 1500 1000 500Wavenumber cm-1图1-1样品的红外吸收图谱Fig 1-1 Th e IR spec t r u m o f c h emic a l r efer en c e su b st a n c e o f Clo pido gr el Bisu lfa t e 表1-2样品的红外吸收光谱数据及解析Ta b le 1-2 Da t e a n d a n a lysis o f t h e IR spec t r u m o f c h emic a l r efer en c e su b st a n c e o f Clo pido gr el Bisu lfa t e样品对照品吸收波数(c m1)吸收强 度振动类型基团归属吸收波数(c m1)吸收强度振动类 型3600-2000s,b r氢键缔合峰3600-2000s b r3423vs,b rVOH羟基的伸缩振动3484vs b rVOH3058wV=CH芳环CH键伸缩振动3077wV-CH2954wVCH饱和烷烧的CH伸缩振动2954wVCH2559m,b r叔钱盐综合峰2552m,b r1752VSvc=o酯谈基伸缩振动1752VSvc-o1628,1592w,b rVC=C芳烧骨架和双键骨架伸缩振动1632,1592w,b rvc=c1478mVC=C芳是骨架和双键骨架伸缩振动1474mvc=c1435m8ch烷基弯曲振动1439m3c H1222vsvc-o竣酸C(=OO键的伸缩振动1222mvc-o1197vsVC-NC-N键的伸缩振动1189vsVc-N1067s,b rVHSO4HSO4-的伸缩振动1068s,b rVHSO4解析：样品在3600-2000 c m-1处有缔合氢键峰存在，在3423c m“处有宽的羟基伸缩振动,是硫酸羟基造成的。南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011在1752 c m出现炭基的伸缩振动，在1222 c m4观察到有C-0伸缩振动，证明结 构中有竣酸酯。样品在1628、1592和1478 c m”处的吸收峰分别为芳环骨架的伸缩振动和不对称 伸缩振动，证明结构中有芳环。3058 c m处有芳氢存在，也证实了芳环的存在。(4)样品在2954c m处为烷妙C-H伸缩振动，说明分子结构中有烷基存在。1435 c m-1 处有烷基CH弯曲振动，也证明结构中有烷基存在。(5)样品在2559c m4处为叔铁盐综合峰,且在在1197 c m观察到有C-N键,1067 c m 有硫酸氢盐的特征吸收，说明有硫酸叔钱盐存在。结论：样品的红外图谱表明结构中有芳环、烷烧、酯谈基、硫酸叔胺盐和羟基等基 团存在，与硫酸氢氯毗格雷的结构相符，与对照品谱峰一致。1.5 紫外吸收光谱(UV)测试单位：南京大学配位化学国家重点实验室紫外可见光谱仪：岛津UV-3100分光光度计。测定溶液：水溶液、甲醇溶液、O.lmo l/LHCl溶液、O.lmo l/LNa OH溶液样品浓度:200|ig/ml测定温度：室温。测定范围:220-400 n m。样品和对照品的紫外吸收图谱分别见图1-2,紫外吸收峰及解析见表1-30图1-2样品的紫外吸收图谱Fig 1-2 UV spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e in h ydr o c h lo r ic a c id a n d so lu t io n so diu m8南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪仲2011表1-3.样品的紫外吸收光谱数据Ta b le3 Da t e a n d a n a lysis o f UV spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfet e in h ydr o c h lo r ic a c id a n d so lu t io n so diu m h ydr o xide a n d wa t er a n d et h a n o l样品对照品溶剂入ma xSmygn u u x 103)%ma x(n m)/1Mx(x 103)h2o270(0.55),277(0.46)270(0.60),277(0.51)MeOH270(0.56),278(0.48)270(0.62),277(0.54)0.1 mo l/L HCI270(0.62)77(0.52)270(0.63),277(0.54)0.1 mo l/L Na OH样品基本不溶解样品基本不溶解解析：样品在X ma x=270和277n m左右的谱带是共施系统的K带吸收（兀-兀*跃迁），表明 结构中含有共筑的芳环体系，样品与对照品谱峰一致。1.6 核磁共振光谱（NMR）测试单位：南京大学配位化学国家重点实验室核磁共振仪：Br o ker DRX 500MHz NMR（TMS为内标）测定溶剂：DMSO/61.6.1 氢核磁共振光谱Chnmr）样品的氢核磁共振谱图见图1-3%重水交换谱见图l3b,氢一氢相关谱见图l3c,。有关数据及解析见表14。9南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011图l-3a样品的4-核磁共振谱图Fig l-3a Th e】HNMR spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e图l-3b 样品的核磁共振光谱重水交换图Fig 1-3b Th e HNMR spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e10南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011LSLPG DMSO H-H COSY BROKER DRX500图l-3c 样品的H-H相关核磁共振光谱图Fig 1-3c Th e H-H c o r r ela t ive spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e 表1-4.样品的氢核磁共振光谱数据及归属Ta b le 1-4 Da t e a n d a n a lysis o f t h e HNMR spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e样品对照品化学位移(ppm)多重 性质子 数质子 归属相关氢的化学位移(ppm)化学位移(ppm)多重 性质子数2质子归 属3.061-3.070m2113.402-3.450,3.516-3.5393.188S113.402-3.450m110a3.061-3.070,3.516-3.539m110b3.516-3.5393.061-3.070,3.402-3.4503.591-3.731m2103.741s393.812S393.911b r残留水峰，重水交换 后变化4.156d112a4.2544.266d112a4.254d112b4.1564.385d112b5.606s175.771s176.861d1157.4166.881d1157.416d1166.8617.446d1167.512-7.552m23,47.637-7.6777.547-7.658m23,47.637-7.677m22,57.512-7.5527.696-7.720d22,5解析：样品的】H-NMR谱有12组峰，相当于16个质子和水的宽峰，这与氯此格雷分子中 氢原子相符；硫酸的活泼质子被残留水峰掩盖，重水交换后发生变化。其中：11南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立 汪静 2011(l)B3.061-3.070ppm处有一组多重峰，相当于2个质子，它是11位亚甲基上的质子，与63.402-3.450 和 3.516-3.539ppm 处的质子相关。(2)63.402-3.450和3.516-3.539ppm各有一组多重峰，分别相当于1个质子，它们互 为相关，归属为10位亚甲基上的2个氢原子。由于处于环中，同一亚甲基的质子位移也 可能不同。(3)63.741ppm处有一组单重峰，相当于3个质子，它是9位甲基上的质子。(4)64.156和4.254ppm各有一组二重峰，分别相当于1个质子，它们互为相关，归 属为12位亚甲基上的2个氢原子。由于处于环中，同一亚甲基的质子位移也可能不同。(5)35.606ppm处有一组单重峰，相当于1个质子，它是7位次甲基上的质子。(6)86.861和7.416ppm不饱和氢原子区域各有一组的二重峰，分别相当于1个质子，是嘎吩环15和16位的质子，它们互为相关。B7.512-7.552和7.637-7.677处各有一个多重峰，分别相当于2个氢原子，它们互 为相关，前者归属为3和4位芳环的质子，后者归属为2和5位芳环的质子。由上可知，样品氢谱数据与硫酸氢氯毗格雷结构相吻合，与对照品谱峰归属一致。1.6.2.”c 核磁共振谱(i3c-NMR)样品溶液的,3C-NMR谱见图l4a,DEPT谱见图14b,C-H相关谱见图14c,远 程C-H相关谱见图lid,有关数据及解析见表1-5。图l-4a样品的核磁共振谱Fig l-4a Th e 13C NMR spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e-12南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011LSLPG DMSO DEPT-135 BROKER DKC500图14）样品的DEPT谱Fig 1-4b Th e DEPT spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e图lie样品的C-H相关谱Fig 1-4c Th e C-H c o r r ela t ive spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e13南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011图ld样品的远程C-H相关谱Fig l-4d Th e dist a n c e C-H c o r r ela t ive spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e 表1-5.样品的13C核磁共振光谱数据及归属Ta b le 1-5 Da t e a n d a n a lysis o f t h e 13C NMR spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e样品对照品化学位移(PPm)碳原子 类型碳原子 归属相关C-H谱质子 的化学位移(ppm)远程相关C-H谱质子的化学位 移(ppm)化学位 移(PPm)碳原 子 归属22.530仲碳113.061-3.0703.402-3.45022.5191149.122仲碳103.402-3.450,3.061-3.070,5.60650.269103.516-3.53950.419仲碳124.156,4.2543.402-3.45051.1851253.698伯碳93.74154.891965.737叔碳75.6067.637-7.67766.0057125.087叔碳156.8617.416126.18515125.518叔碳167.4166.861126.33216128.278季碳134.156,4.254,5.606,6.861,7.416127.64313128.551叔碳27.512-7.5527.637-7.677128.0532128.692季碳65.606,7.512-7.552,7.637-7.677129.5556130.255叔碳47.637-7.677 7.512-7.552131.1524130.690叔碳57.637-7.6777.512-7.552131.6725131.796季碳143.061-3.070,3.402-3.450,132.295143.516-3.539,6.861,7.416132.272叔碳37.512-7.5527.637-7.677133.6653134.356季碳15.606,7.512-7.552,7.637-7.677135.3421167.683季碳83.741,5.606167.8698解析：样品,3C核磁共振光谱图3a中有16个碳峰，与氯毗格雷分子中所含碳原子数一致。由相应的DEPT图3b可知，在饱和碳区域有1个伯碳峰、3个仲碳峰、和1个叔碳峰，14南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质置标准建立汪静2011在不饱和碳区域有6个叔碳峰和5个季碳峰。结合DEPT谱、C-H相关谱和CH远程相 关谱，可作如下解析：(1)在B22.530ppm处有一仲碳原子信号，它与氢谱中与B3.061-3.070ppm处的质子相 关，与63.4023.450即m处的质子远程相关，为结构中11位的碳原子。(2)在849.122ppm处有一仲碳原子信号，它与氢谱中与63.402-3.450和3.516-3.539ppm 处的质子相关,与B3.061-3.070和5.606ppm处的质子远程相关，为结构中10位的碳原子。(3)850.4l9ppm处有一仲碳原子信号，它与氢谱中54.156和4.254ppm处的质子相 关，与63.402-3.450ppm处的质子远程相关，为结构中12位的碳原子。(4)在B53.698ppm处有一伯碳原子信号，它与氢谱中63.741ppm处的质子相关，为结 构中9位的碳原子.(5)在865.737ppm处有一叔碳原子信号，它与氢谱中65.606ppm处的质子相关，与 87.637-7.677ppm处的质子远程相关，为结构中7位的碳原子。(6)在B125.087ppm处有一叔碳原子信号，它与氢谱中66.861 ppm处的质子相关，与 37.6377.677ppm处的质子远程相关，与B7.416ppm处的质子远程相关，为结构中15位的 碳原子。(7)在B125.518ppm处有一叔碳原子信号，它与氢谱中67.4161ppm处的质子相关，与 B6.861ppm处的质子远程相关，为结构中16位的碳原子。(8)在6128278ppm处有一季碳原子信号，根据远程相关谱推测为结构中13位的碳原 子。(9)在6128.551和132.272ppm处各有一叔碳原子信号,它们与氢谱中37.5127.552ppm 处的质子相关，与67.6377.677ppm处的质子远程相关，前者为结构中2位的碳原子，后 者为结构中3位的碳原子。(10)在B128.692ppm处有一季碳原子信号，根据远程相关谱推测为结构中6位的碳原 子。(11)在5130.255和130.690ppm处各有一叔碳原子信号，它们与氢谱中与 S7.637-7.677ppm处的质子相关，与67.512-7.552ppm处的质子远程相关，为结构中4位 和5位的碳原子。(12)在B131.796ppm处有一季碳原子信号，根据远程相关谱推测为结构中14位的碳 原子。(13)在5134.356ppm处有一季装原子信号，根据远程相关谱推测为结构中I位的碳原 子。(14)在6167.683ppm处有一季装原子信号，根据远程相关谱归属为结构中8位的凝基 碳原子。综合以上，样品碳谱数据与硫酸氢氯口比格雷结构一致，与对照品谱峰归属一致。1.7 质谱(MS)测试单位；南京大学配位化学国家重点实验室15南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011阳离子电喷雾离子质谱：美国Fin n iga n MAT SSQ 710电喷雾离子化质谱仪。测定条件：样品的水溶液，范围：100-600a mu。样品和对照品的ESI/MS质谱分别见图1-5,质谱数据及解析见表1-60力.-虹_CE二行二二40H二30H二听二听.3D：Watabgl 9/3/2007 7:47:34 F表1-6.样品的阳离子电喷雾离子化质谱数据及解析Ta b le 1-6 Da t e a n d a n a iysis o f t h e MS spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfh t e样品对照品m/e 碎片离子 备注 m/e碎片离子 备注322.1(100%)M+Hf 氯口比格雷分子结 322.34(100%)M+H+氯口比格雷分子结合合一个质子的阳一个质子的阳离子离子基团基团324.27(36.6%)M+H+上述离子峰的M+2同位素峰在样品的阳离子ESI/MS质谱中，准分子离子峰的质量数为322.1,它与氯叱格雷分 子(M=32L82)结合一个质子的质量数相等。由此可见，样品的结构与氯叱格雷的结构相 符，与对照品谱峰归属一致。1.8 X-射线衍射谱测试单位：南京大学配位化学国家重点实验室仪器型号：D/Ma x-RA日本Riga ku X-射线粉末衍射仪射线：单色Cu-Ka射线(X=1.5418 A)扫描方式：0/20,扫描范围：3-40温度范围：294K 电压：40KV 电流：40mA16南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011样品的X-射线粉末衍射图见图1-6。由图可知，样品是一种具有良好晶态的固体,不同批次样品的晶型不变。Fig 1-6a Th e X-difir a c t io n spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e图1/b样品的X-射线粉末衍射图Fig 1-6b Th e X-diffr a c t io n spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e17南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯哦格雷的质量研究和质量标准建立汪静2011图l/c样品的X-射线粉末衍射图Fig 1-6c Th e X-diffr a c t io n spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e1.9 热分析(TGA-DSC)测试单位：南京大学配位化学国家重点实验室仪器型号：Per kin-Elmer Pyr is 7 Ser ies Th er ma l An a lysis Syst em吹扫气：氮气升温速率：TGA:20.0o C/min DSC:10.0/min温度范围：TGA:25750o C DSC:50-2501.9.1 TGATGA图谱见图1-7,样品自升温起到180左右恒重，这表明样品不含吸附溶剂或结 晶溶剂。此后样品开始分解，剧烈失重，约在450c以后失重减缓，至750c重量仅为原 来的7%左右。图17样品的热重分析Fig 1-7 Th e TGA spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e1.9.2 DSC样品的DSC图谱见图1-8,样品在176.338起始有一吸热峰，峰值位于184.980C,18南京大学硕士毕业论文 硫酸氢氯毗格雷的质金研究和质量标准建立汪静2011图1-8样品的差热分析Fig 1-8 Th e DSC spec t r u m o f Clo pido gr el Bisu lfa t e1.10 手性柱分析分别取氯口比格雷混旋体(20060904)、硫酸氢氯毗格雷原料(20070714)和硫酸氢氯 毗格雷波立维片提取物(20090619)适量，加流动相(0.01mo l/L KH2P。4,用磷酸调pH 值至3.5)乙晴=75：25制成约0.2mg/ml的溶液。采用手性色谱柱(USPL57填料为粘性卵 蛋白)进样分析(入=220n m),记录色谱图，见图1-9。硫酸氢氯叱格雷(20070714)与硫酸氢氯毗格雷波立维片提取物(20090619)保留 时间一致，说明为同一物质，立体构型一致。图l-9a硫酸氢氯毗格雷与异构体分离度色谱图(20060904)Fig l-9a HPLC o f Clo pido gr el Bisu lfa t e a n d it s iso mer(20060904)19南京大学硕士毕业论文 破酸氨氯哦格雷的质量研究和质量标准建立 汪静 2011图l-9b硫酸氢氯口比格雷与异构体分离度色谱图(20070714)图l-9c硫酸氢氯口比格雷与异构体分离度色谱图(20090619)Fig 1-9c HPLC o f Clo pido gr el Bisu lfa t e a n d it s iso mer(20090619)1.11 比旋度测定分别取硫酸氢氯毗格雷原料(20070714)和硫酸氢氯毗格雷波立维片提取物(20090619)适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含10mg的溶液，依法测定比旋度(中国药典2005年版二部附录VIE),结果见表1-7。.表1-7样品的比旋度Ta b le 1-7 Th e spec ific r o t a t io n det er min a t io n r esu lt o f Clo pido gr el Bisu lfa t e硫酸氢氯一格雷(20070714)波立维片提取物(20090619)比旋度+55.3+55.0两个样品的比旋度结果一致，由于本品结构中仅有一个手性中心，故比旋度的一致 可以证明我们的硫酸氢氯毗格雷样品与对照品的立体构型是一致的。1.12 综合解析(1)按照硫