纳米材料和生物技术省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

量子点纳米晶制备及其在生物分析中应用第1页量子点量子点(Quantum dots)(Quantum dots)有时也叫纳米晶，它是纳米尺度原子有时也叫纳米晶，它是纳米尺度原子和分子集合体，普通粒径范围在和分子集合体，普通粒径范围在2 220nm20nm。量子点即是将材。量子点即是将材料尺寸在三维空间进行约束，并到达一定临界尺寸（抽象成料尺寸在三维空间进行约束，并到达一定临界尺寸（抽象成一个点）后，材料行为将含有量子特征（类似在箱中运动粒一个点）后，材料行为将含有量子特征（类似在箱中运动粒子），结构和性质也随之发生从宏观到微观转变。子），结构和性质也随之发生从宏观到微观转变。量子点纳米晶生物医学第2页Quantum Dots (QDs)量子点量子点 （Luminescence Semiconductor nanocrystals 半导体纳米晶体半导体纳米晶体）70 年代，量子点因为其独特光学特征年代，量子点因为其独特光学特征,认为其应用主要集中在电子与认为其应用主要集中在电子与光学方面光学方面 80 年代，生物学家已经对量子点产生了浓厚兴趣，但因为它荧光量年代，生物学家已经对量子点产生了浓厚兴趣，但因为它荧光量子产率低，工作集中在研究量子点基本特征方面子产率低，工作集中在研究量子点基本特征方面 1997 年以来，量子点制备技术不停提升年以来，量子点制备技术不停提升,量子点已越来越可能应用于量子点已越来越可能应用于生物学研究。生物学研究。量子点可作为生物探针是从量子点可作为生物探针是从1998年美国加州伯克利大学年美国加州伯克利大学Alivisatos 印第安纳大学印第安纳大学Nie两个研究小组开始，今后量子点功效深入被发觉、两个研究小组开始，今后量子点功效深入被发觉、推广，使之成为生物学领域研究热点。推广，使之成为生物学领域研究热点。第3页纳米粒子和生物分子尺寸范围第4页生物标识技术（Biomarker）生物标识技术原理是将含有标志性信号材料，如不一样颜色染料分子，能发是将含有标志性信号材料，如不一样颜色染料分子，能发射强荧光分子，含有磁性或放射性分子等，经过化学键或射强荧光分子，含有磁性或放射性分子等，经过化学键或非共价键和待识别生物组织连接起来，从而直观地观察和非共价键和待识别生物组织连接起来，从而直观地观察和分析被标识物存在和改变。分析被标识物存在和改变。第5页当前有3种类型纳米粒子可做为荧光标识1）含有光学活性金属纳米粒子2）荧光纳米球乳液（已商品化）3）发光量子点第6页长径比不一样Au 纳米棒TEM 照片（上方），光谱（左下角）和照片（右下角）(a)1.35 0.32；(b)1.95 0.34；(c)3.06 0.28；(d)3.50 0.29；(e)4.42 0.23第7页光镜金银免疫金银染色标识细胞表面标志物观察结果（a）Siha 细胞中HPV16病毒位置，HPV16病毒是子宫颈癌标志物（b）尖锐湿疣细胞中HPV6/11病毒，因为病毒被大量感染，细胞被染成深色免疫金纳米粒子细胞染色免疫金纳米粒子细胞染色第8页普通胶体金标识普通胶体金标识 免疫胶体金标识免疫胶体金标识免疫金纳米粒子细胞染色免疫金纳米粒子细胞染色电镜下观察到细胞纺锤形微管电镜下观察到细胞纺锤形微管第9页量子点在生物分析中应用 荧光分析法惯用于临床测定生物样品中一些成份含量，但荧光分析法惯用于临床测定生物样品中一些成份含量，但若直接用荧光光谱法对它们进行研究时，碱基和核酸荧光量若直接用荧光光谱法对它们进行研究时，碱基和核酸荧光量子效率很低，只有色氨酸、酪氨酸、和苯丙氨酸有天然荧光，子效率很低，只有色氨酸、酪氨酸、和苯丙氨酸有天然荧光，所以检测它们最好方法还是利用各种荧光探针。所以检测它们最好方法还是利用各种荧光探针。当前，应用最为普遍荧光探针是有机染料，但它们激光光当前，应用最为普遍荧光探针是有机染料，但它们激光光谱都较窄，所以难同时激发各种组分，而其荧光特征谱又较谱都较窄，所以难同时激发各种组分，而其荧光特征谱又较宽，而且分布不对称，最严重缺点是其光化学稳定性差。宽，而且分布不对称，最严重缺点是其光化学稳定性差。第10页研究较多量子点主要由II-VI族或III-V 族元素组成第11页(a)CdSe 量子点发光和粒径关系；(b)CdSexTe1-x 发光和组成关系（粒径保持不变，5 nm)第12页单个波长可激发全部量子点单个波长可激发全部量子点,而不一样染料分子而不一样染料分子荧光探针需多个激发波长荧光探针需多个激发波长应用范围广：可用于应用范围广：可用于多领域多领域和多仪器和多仪器各种颜色：各种颜色：颜色取决于量子点大小，在同一激发颜色取决于量子点大小，在同一激发波长下，可发出各种激发光，到达同时检测各种指波长下，可发出各种激发光，到达同时检测各种指标要求。标要求。抗光致漂白性抗光致漂白性安全：细胞毒性低，可用于安全：细胞毒性低，可用于活细胞及体内研究活细胞及体内研究荧光时间长：荧光时间较普通荧光分子长数千倍，荧光时间长：荧光时间较普通荧光分子长数千倍，便于长久跟踪和保留结果便于长久跟踪和保留结果第13页(a)荧光素激发谱和发射谱(b)CdSe量子点激发谱和发射谱第14页三种不一样尺寸量子点荧光光谱第15页荧光素和量子点标识物光稳性比较荧光素和量子点标识物光稳性比较第16页 与传统荧光探针相比，量子点激发光谱宽，且连续分布，即不一样大小纳米晶体能被单一波长光激发而发出不一样颜色光，而发射光谱成对称分布且宽度窄，而且光化学稳定性高，不易光解。量子点作为一个荧光探针在生物标识及诊疗领域有着广泛应用前景。(Nature,413:450-452)Absorption and emission spectra of a series of size-selected CdSe nanocrystals.(Nature Biotechnology,19:621622)第17页量子点标识过程示意量子点标识过程示意第18页量子点合成1 有机体系2 水相体系第19页 有机金属前驱体溶液有机金属前驱体溶液烷基金属烷基金属(如，二甲基镉如，二甲基镉)和烷基非金属和烷基非金属(如，二如，二-三三甲硅烷基硒甲硅烷基硒)主配体三辛基氧化磷主配体三辛基氧化磷(TOPO)及溶剂兼次配体三辛基磷及溶剂兼次配体三辛基磷Schematic procedure for the preparation of high quality nanocrystals via organometallic routes.(J.Am.Chem.Soc.1993,115,8706)有机金属法第20页量子效率高(可达 90%)荧光半峰宽窄(仅有 30 nm)是当前合成高质量量子点最成功方法之一反应条件过于苛刻，严格无氧无水操作原料价格昂贵，毒性太大，且易燃易爆优缺点第21页有机“绿色化学”法改进有机金属法 选取毒性小金属氧化物选取毒性小金属氧化物(CdO)(CdO)或盐或盐(Cd(OOCCH3)2(Cd(OOCCH3)2，CdCO3)CdCO3)选取长烷基链酸、氨、磷酸、氧化磷为配体；选取长烷基链酸、氨、磷酸、氧化磷为配体；以高沸点有机溶剂为介质以高沸点有机溶剂为介质降低了成本和对设备要求降低了成本和对设备要求降低了对环境污染降低了对环境污染Chem.Eur.,8,334.第22页 大多数生物分子都是亲水，有机相中纳米大多数生物分子都是亲水，有机相中纳米晶必须经过深入表面亲水修饰才能具备生物晶必须经过深入表面亲水修饰才能具备生物亲合性，亲水修饰过程不但需要复杂表面配亲合性，亲水修饰过程不但需要复杂表面配体交换，而且会破坏量子点发光性质。体交换，而且会破坏量子点发光性质。1 有机体系有机体系2 水相体系水相体系第23页J.Phys.Chem.B,106,7177.离子型前驱体，离子型前驱体，巯基小分子配体巯基小分子配体介质为水介质为水第24页经过回流使纳米晶逐步成核生长，因为水沸腾温度为 100，纳米晶没有明确生长界限造成量子点荧光半峰宽较宽，量子效率也较低，(仅有 310%)离心分级(选择性沉淀)来提升其量子效率第25页水热法制备 CdTe 纳米晶为在水溶液中直接设计合成高质量纳米晶开辟了新路径高温加紧了纳米晶生长速率和荧光半峰宽窄化高温加紧了纳米晶生长速率和荧光半峰宽窄化(黄绿光量子效率可达黄绿光量子效率可达30以上以上)Adv.Mater.,15(20),1712,Hao Zhang&Bai Yang et al.第26页第27页未经任何处理即可用于生物标识鼠细胞平均尺度为4 m.标识有标识有CdTe纳米晶鼠细胞荧光显微镜照片纳米晶鼠细胞荧光显微镜照片 （a)细胞本身；细胞本身；(b)发黄色发黄色CdTe纳米晶纳米晶.放大图象：放大图象：(c)发绿色发绿色CdTe纳米晶；纳米晶；(d)发红色发红色CdTe纳米晶纳米晶.第28页荧光量子点表面修饰表面效应是影响纳米粒子性质一个不可忽略原因表面效应是影响纳米粒子性质一个不可忽略原因水溶性是纳米晶用于生物标识必须处理水溶性是纳米晶用于生物标识必须处理 第29页量子点表面修饰树枝状分子配体修饰量子点树枝状分子配体修饰量子点第30页用量子点检测肿瘤细胞Quantum dots modified with antibodies to human prostate specific membrane antigen light up murine tumors that developed from human prostate cells.第31页用量子点检测肿瘤细胞 科学家们将转铁蛋白与量子点共价交联,让宫颈癌细胞“吞”进细胞内,使连接了量子点转铁蛋白依然含有生物活性，实现单色长久荧光标识观察。第32页 他们采取两种大小不一样量子点标识小鼠成纤维细胞,一个发射绿色荧光,一个发射红色荧光,而且将发射红色荧光量子点特异地标识在细胞内肌动蛋白丝上,而发射绿光量子点与尿素和乙酸结合,这么量子点与细胞核含有高亲和力,并且能够同时在细胞中观察到红色和绿色荧光，从而实现双色荧光标识观察。第33页在生物检测中其它应用把量子点分别同生物素、尿素、醋酸盐和某种抗体链接把量子点分别同生物素、尿素、醋酸盐和某种抗体链接了起来，成功抵达了特定细胞结构；了起来，成功抵达了特定细胞结构；能够有许各种分子用作量子点能够有许各种分子用作量子点导引物质导引物质，包含核酸、细，包含核酸、细胞膜上脂质、同载体蛋白质或载体糖联络紧密蛋白质，胞膜上脂质、同载体蛋白质或载体糖联络紧密蛋白质，还有一些药品能够把量子点导引到特定细胞结构中去；还有一些药品能够把量子点导引到特定细胞结构中去；研究人员研究人员正致力于量子点在神正致力于量子点在神经递质经递质研究（了解神研究（了解神经经信信号号传导传导研究）中研究）中应应用。他用。他们们将量子点将量子点标识标识在一个主要神在一个主要神经递质经递质5-5-羟羟色胺上色胺上,然后然后观观察了察了转转运蛋白是怎运蛋白是怎样样推推进进神神经递质经递质在将信号在将信号经过经过相相邻邻神神经细经细胞胞间间隙隙传递传递后，又回到后，又回到细细胞中胞中过过程程；能能够应够应用在医学成像技用在医学成像技术术中中 第34页量子点与蛋白偶联 伴随人类基因组计划(HGP)顺利完成,蛋白质组研究已经成为生命科学一个主要领域.需要建立一些快速、高效、高通量蛋白质分析方法.量子点荧光探针在一些方面能满足这些要求。第35页WillardWillard等人将巯基乙酸修饰量子点与生物素标识牛血清白蛋白等人将巯基乙酸修饰量子点与生物素标识牛血清白蛋白(QD-bBSA)(QD-bBSA)结结合后合后,使之与四甲基罗丹明标识亲和素使之与四甲基罗丹明标识亲和素(Sav-TMR)(Sav-TMR)作用作用,结果观察到量子点结果观察到量子点与四甲基罗丹明与四甲基罗丹明(TMR)(TMR)之间有荧光共振能量转移现象发生。之间有荧光共振能量转移现象发生。Science Science 1998,281:-.1998,281:-.这一结果表明这一结果表明,量子点可在蛋白质量子点可在蛋白质-蛋白质键合分析中作为荧光共振能量转蛋白质键合分析中作为荧光共振能量转移供体移供体.另外另外,将量子点与蛋白质芯片技术相结合将量子点与蛋白质芯片技术相结合,可大大提升蛋白质芯片检可大大提升蛋白质芯片检测灵敏度。测灵敏度。第36页量子点在其它方面应用Schematic representation of qdot targeting.Applied Biological Sciences,99(20):12617-12621.量子点用于活体方面研究量子点用于活体方面研究 将不一样将不一样CdSe/ZnSCdSe/ZnS核核-壳型量壳型量子点表面用不一样多肽修饰后子点表面用不一样多肽修饰后,注射到老鼠体内注射到老鼠体内,对活体切片后对活体切片后进行分析进行分析.结果发觉结果发觉:不一样多肽修饰量子不一样多肽修饰量子点可特异性结合到正常或发生点可特异性结合到正常或发生肿瘤老鼠肺部脉管系统。肿瘤老鼠肺部脉管系统。这些结果预示着量子点可能进行这些结果预示着量子点可能进行疾病诊疗和药品传递等方面研究疾病诊疗和药品传递等方面研究.第37页 量子点在基因组学、蛋白质组学、药品筛选以及细量子点在基因组学、蛋白质组学、药品筛选以及细胞成像等方面有着广泛应用前景，将量子点用于活体胞成像等方面有着广泛应用前景，将量子点用于活体实时、动态检测是当前一个发展方向实时、动态检测是当前一个发展方向.另外另外,应用多色量子点发展平行生物传感和检测技术应用多色量子点发展平行生物传感和检测技术也是当前一个发展热点也是当前一个发展热点,这些技术将把微流控技术、这些技术将把微流控技术、微阵列技术及量子点优点集中起来微阵列技术及量子点优点集中起来,有着辽阔发展前有着辽阔发展前景景.展望第38页磁性纳米材料及其在生物医学中应用第39页天然磁性纳米材料许多生物体内就有天然纳米磁性粒子，如磁性细菌，鸽子，海豚，石鳖，蜜蜂，人大脑等这里有大量课题需要研究，尤其需要有物理和磁学背景人员参加，有利于对问题了解第40页向磁性细菌1975年即发觉向磁性细菌年即发觉向磁性细菌-体内有一排磁性纳米粒体内有一排磁性纳米粒子子第41页人类大脑中平均含有人类大脑中平均含有20微克（约微克（约500万万粒）磁性纳米粒子粒）磁性纳米粒子第42页石鳖齿舌中含有大量石鳖齿舌中含有大量一维纳米磁性丝一维纳米磁性丝第43页从各种细菌中分离得到磁性氧化铁纳米粒子粒径均一、形貌规整。当前纳米磁性材料制备主要依赖于化学制备方法。第44页磁性纳米材料通常为氧化铁所组成，如Fe2O3、Fe3O4现行产品中，常见利用包埋或包覆磁性微粒，结合抗体以做为细胞分离与纯化步骤第45页磁性纳米材料合成取Fe2+与Fe3+混合加热，反应沉淀而得混合Fe3+及Fe2+在碱性条件下可形成Fe3O4纳米微粒第46页磁性纳米粒子表面修饰较高比表面积，所以含有强烈聚集倾向调整磁性纳米粒子与其它材料相容性和反应特征u采取有机小分子修饰粒子表面u采取有机高分子修饰粒子表面u采取二氧化硅修饰粒子表面第47页磁性纳米粒子有机高分子修饰用多肽稳定用多肽稳定-Fe2O3纳纳米粒子胶米粒子胶团团示意示意图图第48页磁性纳米粒子表面SiO2修饰能够屏蔽磁性纳米粒子之间偶极相互作用，阻止粒子发生团聚含有优良生物相容性、亲水性、稳定性采取水解有机硅氧烷方法制备尺寸均一SiO2微球技术已相当成熟，为制备高质量磁性微球提供确保第49页磁性纳米粒子表面SiO2修饰修饰修饰SiO2核壳形磁性纳米微球，表面接有功效性基团核壳形磁性纳米微球，表面接有功效性基团第50页磁性纳米粒子表面SiO2修饰气溶胶高温分解法制备中空和实心磁性气溶胶高温分解法制备中空和实心磁性SiO2微球微球TEM图及形成机理图及形成机理第51页磁性纳米粒子在临床诊疗和治疗磁性纳米粒子在临床诊疗和治疗中应用中应用体外体外(in vitro)应用：细胞、蛋白质、应用：细胞、蛋白质、DNA、细胞及病毒分离、分析和搜集、细胞及病毒分离、分析和搜集体内（体内（in vivo)应用：药品磁导向、辅助疾病诊疗和治疗应用：药品磁导向、辅助疾病诊疗和治疗第52页磁性纳米粒子在细胞分离中应用磁性纳米粒子在细胞分离中应用磁分离是利用功效化磁性纳米粒子表面配体（或受磁分离是利用功效化磁性纳米粒子表面配体（或受体）与受体（或配体）之间特异相互作用如抗体体）与受体（或配体）之间特异相互作用如抗体抗原和亲和素生物素等来实现对靶向生物目抗原和亲和素生物素等来实现对靶向生物目标快速分离。标快速分离。第53页细胞分离细胞分离磁分离过程示意图第54页细胞分离细胞分离磁分离过程示意图.用磁性粒子进行标识材料；未标识材料；第55页细胞磁分离技术优点细胞磁分离技术优点磁性载体与细胞识别过程基本上能够确保不破坏细磁性载体与细胞识别过程基本上能够确保不破坏细胞形态，同时也不影响非识别细胞胞形态，同时也不影响非识别细胞分离纯度能够高达分离纯度能够高达95-99.9%不影响细胞功效和活性，经磁分离细胞存活率能够不影响细胞功效和活性，经磁分离细胞存活率能够到达到达90%以上以上分离操作方便、快捷分离操作方便、快捷第56页细菌和病毒磁分离细菌和病毒磁分离对于病毒和细菌，常规检测方法检测限通常只能过到对于病毒和细菌，常规检测方法检测限通常只能过到100cfu/mlXu等最近发展基于磁性纳米粒子检测方法对细菌检测等最近发展基于磁性纳米粒子检测方法对细菌检测灵敏度能够到达约灵敏度能够到达约15cfu/ml第57页细菌和病毒磁分离细菌和病毒磁分离采取高温分解法制备了油酸油胺稳定FePt纳米粒子，然后经过表面修饰制备了万古霉素（Van）与FePt复合物（FePt-Van）第58页细菌和病毒磁分离细菌和病毒磁分离利用万古霉素与抗万古霉素肠球菌（VRE）和细菌细胞壁上末端多肽（DAla-D-ALa）之间氢键作用识别和富集细菌。第59页 利用药品载体磁性特点，在外加磁场作用下，磁性纳米载利用药品载体磁性特点，在外加磁场作用下，磁性纳米载体将富集在病变部位，进行靶向给药体将富集在病变部位，进行靶向给药靶向传输第60页磁性纳米粒子应用负载在磁性纳米粒子药品在体内扩散示意图第61页磁性药品优点l药品使用量少l无须开刀即可将药品投放到患部l药品集中，不会对身体其余部分造成副作 用影响l结合MRI，可用于新药开发上对于疾病细胞活性、副作用及使用量分析第62页Fe3O4超顺磁性(Superparamagnetic)磁性微粒在有磁场存之下含有强大磁性，但在去除磁场之后，磁性也随之消失。因为这个情形，使Fe3O4磁性纳米微粒可跟踪、可回收也可定量分析，也在生物医学上最早被应用在临床磁共振成像MRI(Magnetic Resonance Imaging)Basic Concept第63页MRI技术能够用来对生物内脏器官和软组织进行无损快速检测，它已经成为诊疗软组织病变尤其是检测肿瘤最为有效临床诊疗方法之一。超顺磁性纳米粒子在磁共振成像中应用技术关键：增强病变组织与正常组织图像之间对比度以提升病变组织清楚度，需要选择适当造影剂来显示解剖学特征。第64页超顺磁性氧化铁纳米粒子被注入人体后，会出现显著分布特异性。集中分布在网状内皮细胞 丰富组织和器官中，超顺磁性氧化铁颗粒在各组织和器官中分布将有利于提升该部位MRI成像对比度超顺磁性纳米粒子在磁共振成像中应用第65页细胞吞噬磁性粒子过程第66页当前治疗方法：化学药品疗法：缺乏特异性 放射线疗法：不宜长时间接收治疗 手术切除：给病人带来生理和心理痛苦 热治疗法：？磁流体致（过）热治疗肿瘤磁流体致（过）热治疗肿瘤第67页热疗法原理：依据肿瘤细胞和正常细胞对热敏感 性不一样，经过加热病灶部位来杀死肿瘤细胞方法。肿瘤细胞在38-40时活性受到抑制会趋向凋亡；在40-42时会严重受损，在短时间内死亡；43以上会快速破裂死亡。这就是肿瘤热疗法原理。而热疗不但能杀死肿瘤细胞，还能经过高温阻断肿瘤组织营养，抑制肿瘤血管形成和转移倾向。磁流体致（过）热治疗肿瘤磁流体致（过）热治疗肿瘤第68页热消融疗法（thermoablation）：通常把治疗温度控制在47以上疗法。能使肿瘤组织在高温下急剧坏死，但同时对正常组织也有一定损伤。过热疗法（hyperthermia）:把治疗温度控制在42-46之间疗法，重点介绍磁流体过热治疗肿瘤（magnetic fluid hyperthermia,MFH）方法。磁流体致（过）热治疗肿瘤磁流体致（过）热治疗肿瘤技术关键是什么？技术关键是什么？第69页磁致热早期：将一定尺寸磁性物质（磁针或磁棒）经过手术置于肿瘤部位，然后经过在外加交变磁场作用下发烧来到达杀死肿瘤细胞目标。致命缺点：肿瘤内部温度分布不均匀，造成局部温度过高治疗前后都需要手术植入或取出磁体磁流体致（过）热治疗肿瘤磁流体致（过）热治疗肿瘤第70页磁流体致（过）热治疗肿瘤磁流体致（过）热治疗肿瘤肿瘤热疗肿瘤热疗 利用各种物理能量利用各种物理能量(如微波、射频和超声波如微波、射频和超声波等等)所产生热效应所产生热效应,使使组织细胞温度升至组织细胞温度升至43以上治疗温度以上治疗温度,加速癌加速癌细胞死亡疗法。细胞死亡疗法。射频消融射频消融超声聚焦超声聚焦全身热疗全身热疗第71页磁流体致（过）热治疗肿瘤磁流体致（过）热治疗肿瘤MFH热疗原理热疗原理 MFH利用肿瘤细胞和正常细胞对热敏感性不一样，利用肿瘤细胞和正常细胞对热敏感性不一样，经过将磁流体注射到肿瘤组织，然后在外加交变磁场经过将磁流体注射到肿瘤组织，然后在外加交变磁场作用下产生能量，再将产生能量释放给肿瘤组织，因作用下产生能量，再将产生能量释放给肿瘤组织，因为肿瘤中血液供给不如正常组织充分致使肿瘤细胞中为肿瘤中血液供给不如正常组织充分致使肿瘤细胞中热量扩散较慢，结果造成局部温度升高（普通控制在热量扩散较慢，结果造成局部温度升高（普通控制在42-4642-46之间），从而到达杀死肿瘤细胞目标。之间），从而到达杀死肿瘤细胞目标。第72页动物试验动物试验1979年，Gordon小组首次采取葡聚糖修饰小尺寸（粒径为6nm）Fe3O4磁流体开展了对SD鼠乳腺肿瘤治疗研究。方法方法：100mg 葡聚糖修饰Fe3O4磁流体经过尾静脉注射方式在10min内注入试验鼠内，代谢48h后，将试验鼠置于强度为38kA/m,频率为450kHZ交变磁场中治疗12min结果结果：体外结果表明12min后，肿瘤组织温度增加了8。经过一星期治疗后经过一星期治疗后，1212只只试验鼠中有11只肿瘤已经退化。电镜观察发觉Fe3O4粒子除了集中分布在试验鼠肝、脾、肾器官以外，还分布在肿瘤细胞内部。第73页磁热疗磁热疗将磁性粒子输送至治疗区将磁性粒子输送至治疗区域，在外加交变磁场作域，在外加交变磁场作用下，磁性微粒因磁损耗用下，磁性微粒因磁损耗而发烧产生热疗作用疗而发烧产生热疗作用疗法。法。第74页细胞内热疗细胞内热疗Jordan等发觉等发觉癌癌细细胞吸收磁性粒子胞吸收磁性粒子量量是正常细胞是正常细胞8400倍；倍；含纳米铁磁微粒肿含纳米铁磁微粒肿瘤细胞极易受到磁瘤细胞极易受到磁热疗杀伤热疗杀伤 细胞内热疗含有极细胞内热疗含有极佳靶向性佳靶向性第75页与早期相比与早期相比优点优点：用于用于MFH治疗磁流体能够经过注射方式被注入到病患治疗磁流体能够经过注射方式被注入到病患部位，从而能够防止手术给患者带来痛苦部位，从而能够防止手术给患者带来痛苦含有超顺磁性磁流体较大尺寸磁棒有更高磁致热效率含有超顺磁性磁流体较大尺寸磁棒有更高磁致热效率纳米尺寸超顺磁性纳米颗粒能够很轻易地进入细胞或纳米尺寸超顺磁性纳米颗粒能够很轻易地进入细胞或组织内部，更均匀进分布在病患部位，有利于克服磁针组织内部，更均匀进分布在病患部位，有利于克服磁针或磁棒所面临涡流效应，造成受热部位温度不均匀或磁棒所面临涡流效应，造成受热部位温度不均匀第76页存在问题尺寸控制问题在水溶液中分散性生物相容性安全问题第77页总总 结结纳米磁性生物技术在医学临床上应用将会飞速发展 肿瘤靶向性治疗纳米技术，可望在内征服一部分恶性肿瘤 纳米磁性生物材料作为人体内植入物还存在一些弊端第78页 生物体系纳米结构矿化第79页 自然界中充满了各具特征生物矿化材料。贝壳、珊瑚、鱼骨、牙齿、细菌中磁性晶体等仅仅是生物所设计众多生物矿物种类一小部分。无机矿物与有机高分子共同组成许多复杂生物材料，这些材料含有各种各样形状，同时也含有各种功效，其结构这精细，功效之优异令人叹服。生物矿化魅力？第80页第81页第82页生物矿化材料主要无机成份，即碳酸钙、磷酸钙、氧化生物矿化材料主要无机成份，即碳酸钙、磷酸钙、氧化硅，、和铁氧化合物，均广泛存在于自然界中，甚至有硅，、和铁氧化合物，均广泛存在于自然界中，甚至有矿物（方解石、羟基磷灰石）从组成和结构方式来看与矿物（方解石、羟基磷灰石）从组成和结构方式来看与岩石圈中对应矿物都是相同，但一旦受控于这种特殊生岩石圈中对应矿物都是相同，但一旦受控于这种特殊生命过程，便含有常规陶瓷不可比拟优点。命过程，便含有常规陶瓷不可比拟优点。极高强度比很好断裂韧性减震性能表面光洁度生物矿化魅力第83页生物矿化：以生物材料为模板无机结构材料生成生物矿化：以生物材料为模板无机结构材料生成生物矿化：以生物材料为模板无机结构材料生成生物矿化：以生物材料为模板无机结构材料生成生物矿化常见元素：生物矿化常见元素：生物矿化常见元素：生物矿化常见元素：氢、碳、氧、镁、硅、磷、钙、氢、碳、氧、镁、硅、磷、钙、氢、碳、氧、镁、硅、磷、钙、氢、碳、氧、镁、硅、磷、钙、锰及铁锰及铁锰及铁锰及铁生物体内其它基本元素生物体内其它基本元素生物体内其它基本元素生物体内其它基本元素 氮、氟、钠、钾、铜、锌等氮、氟、钠、钾、铜、锌等氮、氟、钠、钾、铜、锌等氮、氟、钠、钾、铜、锌等则极少矿化则极少矿化则极少矿化则极少矿化非生物所需元素银、金、铅、铀等出现在外细胞壁中，非生物所需元素银、金、铅、铀等出现在外细胞壁中，非生物所需元素银、金、铅、铀等出现在外细胞壁中，非生物所需元素银、金、铅、铀等出现在外细胞壁中，而细胞内部则有锶、钡等元素沉积而细胞内部则有锶、钡等元素沉积而细胞内部则有锶、钡等元素沉积而细胞内部则有锶、钡等元素沉积生物矿化第84页生物矿物种类和功效化学式化学式俗名俗名实例例密度密度硬度（莫氏）硬度（莫氏）CaCO3方解石方解石乌龟壳、珊瑚壳、珊瑚2.713CaCO3文石文石海洋海洋动物、物、软体体动物外壳物外壳2.933.5-4CaMg(CO3)2白云石白云石棘皮动物牙2.853.5-4MgCO3菱美石菱美石海绵刺3.014Ca5(PO4)3(OH)羟基磷灰石基磷灰石骨、牙，幼年骨、牙，幼年软体体动物骨物骨3.1-3.25SiO2(H2O)无定形水合硅无定形水合硅海绵刺20-225.5-6.5CaF2萤石石-3.184CaSiO3硅灰石硅灰石-2.95生物器官中存在主要无机物第85页2020世纪世纪世纪世纪 20 203030年代，德国、丹麦、瑞典学者有偏光显微镜年代，德国、丹麦、瑞典学者有偏光显微镜年代，德国、丹麦、瑞典学者有偏光显微镜年代，德国、丹麦、瑞典学者有偏光显微镜对生物矿物进行系统观察对生物矿物进行系统观察对生物矿物进行系统观察对生物矿物进行系统观察50506060年代，西北欧及美国学者借助年代，西北欧及美国学者借助年代，西北欧及美国学者借助年代，西北欧及美国学者借助TEMTEM和和和和SEMSEM对生物矿物对生物矿物对生物矿物对生物矿物做了深入研究并建立了有机基质概念做了深入研究并建立了有机基质概念做了深入研究并建立了有机基质概念做了深入研究并建立了有机基质概念7070年代以来，伴随各种微观分析技术发展，人们探明了绝大年代以来，伴随各种微观分析技术发展，人们探明了绝大年代以来，伴随各种微观分析技术发展，人们探明了绝大年代以来，伴随各种微观分析技术发展，人们探明了绝大部分主要矿物体系结构和成份，并将生物矿物研究提升到无部分主要矿物体系结构和成份，并将生物矿物研究提升到无部分主要矿物体系结构和成份，并将生物矿物研究提升到无部分主要矿物体系结构和成份，并将生物矿物研究提升到无机化学、细胞生物学、分子生物学乃至基因水平机化学、细胞生物学、分子生物学乃至基因水平机化学、细胞生物学、分子生物学乃至基因水平机化学、细胞生物学、分子生物学乃至基因水平19881988年，我国化学家王夔将生物矿物概念介绍到国内，国内年，我国化学家王夔将生物矿物概念介绍到国内，国内年，我国化学家王夔将生物矿物概念介绍到国内，国内年，我国化学家王夔将生物矿物概念介绍到国内，国内研分才开始形成规模研分才开始形成规模研分才开始形成规模研分才开始形成规模进展概况第86页u英国英国英国英国MannMann小组把生物矿化过程分成了四个小组把生物矿化过程分成了四个小组把生物矿化过程分成了四个小组把生物矿化过程分成了四个阶段：阶段：阶段：阶段：超分子预组织超分子预组织超分子预组织超分子预组织 界面分子识别界面分子识别界面分子识别界面分子识别 矢量规划（化学处理）矢量规划（化学处理）矢量规划（化学处理）矢量规划（化学处理）细胞加工过程细胞加工过程细胞加工过程细胞加工过程生物矿化过程第87页生物矿化四个阶段及其功效示意图第88页Schematic diagram of nacreous（珍珍珠珠质质）structure.The organic thin film indicated between the layers also covers all other surfaces of each structural unit.生物矿物第89页生物矿化一个经典例子鲍鱼壳生物矿化一个经典例子鲍鱼壳鲍鱼壳珍珠层薄板状文石珍珠层含有特珍珠层含有特异断裂性能，异断裂性能，高于普通文石高于普通文石2-3个数量级！个数量级！第90页生物矿化一个经典例子鲍鱼壳生物矿化一个经典例子鲍鱼壳u 美国加州大学美国加州大学Belcher研究了从红鲍鱼壳中提取三个蛋白质家族研究了从红鲍鱼壳中提取三个蛋白质家族对鲍鱼壳矿物晶体控制作用：对鲍鱼壳矿物晶体控制作用：1.方解石形核蛋白方解石形核蛋白 2.控制方解石、文石相、位向、形貌多个聚阴离子蛋白控制方解石、文石相、位向、形貌多个聚阴离子蛋白 3.决定珍珠层文石板层尺寸和晶体大小基质蛋白决定珍珠层文石板层尺寸和晶体大小基质蛋白第91页生物矿化一个经典例子鲍鱼壳生物矿化一个经典例子鲍鱼壳u 鲍鱼在结构鲍鱼珍珠层时使用两种不一样结构形成机制：鲍鱼在结构鲍鱼珍珠层时使用两种不一样结构形成机制：1.原子和纳米水平上控制矿物结构和位向原子和纳米水平上控制矿物结构和位向 2.控制微米尺度上结构有序性控制微米尺度上结构有序性 第92页聚合物控制矿化含有多层结构方解石晶体方解石晶体仿生矿化方解石晶体仿生矿化第93页胶原蛋白调制碳酸钙晶体形貌胶原蛋白调制碳酸钙晶体形貌（a）不存在蛋白质时形成方解）不存在蛋白质时形成方解石晶体形貌；（石晶体形貌；（b）胶原蛋白浓）胶原蛋白浓度度10g/L时形成方解石晶体形时形成方解石晶体形貌貌第94页胶原蛋白调制所得碳酸钙晶体胶原蛋白调制所得碳酸钙晶体XRDXRD图谱图谱晶体模型K曲面F平面S阶梯面第95页生物矿化一个经典例子骨生物矿化一个经典例子骨层状骨结构图层状骨结构图 人工骨结构图人工骨结构图 第96页骨非细胞结构包含三个主要部分：骨非细胞结构包含三个主要部分：胶原胶原(质量百分数为质量百分数为20%)、羟基磷灰石、羟基磷灰石(HAp，质量百分数为，质量百分数为69%)和水和水(质量质量百分数为百分数为9%)。另外还有少许有机物质，如蛋白质、聚糖、。另外还有少许有机物质，如蛋白质、聚糖、脂类等。脂类等。其中胶原以微纤维形式存在，这也是骨含有良好其中胶原以微纤维形式存在，这也是骨含有良好韧性主要原因。胶原纤维尺寸约为韧性主要原因。胶原纤维尺寸约为100-nm。HAp(通常是通常是含碳磷灰石含碳磷灰石)晶体紧密而规律排列在胶原基体中，使骨含晶体紧密而规律排列在胶原基体中，使骨含有一定硬度。有一定硬度。HAp呈厚板状或细长杆状结晶，长度约为呈厚板状或细长杆状结晶，长度约为40-60 nm，宽度约为，宽度约为20 nm，厚度仅为，厚度仅为1.5-5 nm。HAp晶体晶体沿胶原纤维呈平行排列，方向与纤维长轴一致。胶原纤维沿胶原纤维呈平行排列，方向与纤维长轴一致。胶原纤维在骨板中沿哈佛氏管呈螺旋状排列。即使骨组成是常见胶在骨板中沿哈佛氏管呈螺旋状排列。即使骨组成是常见胶原纤维和原纤维和HAp，不过因为这两种物质形成了复杂而规律三，不过因为这两种物质形成了复杂而规律三维结构，使得骨骼含有断裂韧性高、弹性模量低、硬度适维结构，使得骨骼含有断裂韧性高、弹性模量低、硬度适中等特点中等特点骨组成及结构骨组成及结构第97页胶原钙磷盐体系体外矿化模拟胶原钙磷盐体系体外矿化模拟胶原钙磷盐体系体外矿化模拟胶原钙磷盐体系体外矿化模拟模拟体液模拟体液 37 CLysNHHO PPOOOOOOPOOO+LysPOOONH胶原普通由三条胶原普通由三条肽链绞合而成，肽链绞合而成，形似棒状形似棒状第98页磷酸化后，磷酸化后，磷酸根吸收磷酸根吸收峰出现峰出现NH2NH2NNPO3PO3HH22第99页细胞在生物矿化中作用细胞在生物矿化中作用u 细胞是矿化细胞是矿化“主人主人”：它控制和确保全部矿化条件：它控制和确保全部矿化条件:成矿离子成矿离子浓度、浓度、pH值、温度、抑制剂值、温度、抑制剂 1.浓聚生成沉淀离子浓聚生成沉淀离子 2.控制或抵制结晶形成控制或抵制结晶形成 3.造成细胞外矿化条件造成细胞外矿化条件第100页生物体系中二氧化硅纳米结构矿化生物体系中二氧化硅纳米结构矿化一个未知种类硅藻一个未知种类硅藻（a）硅藻细胞壳结构；）硅藻细胞壳结构；（b）硅藻细胞壳示意图；）硅藻细胞壳示意图；（c）硅藻细胞壳高分辩图）硅藻细胞壳高分辩图第101页生物体系中二氧化硅纳米结构矿化生物体系中二氧化硅纳米结构矿化生物体系中二氧化硅纳米结构矿化生物体系中二氧化硅纳米结构矿化（a）能够从水中大量吸收溶解硅源，聚集并形）能够从水中大量吸收溶解硅源，聚集并形成含有精细结构二氧化硅骨架结构，并在这个骨成含有精细结构二氧化硅骨架结构，并在这个骨架上包覆一层有机外壳；架上包覆一层有机外壳；（b）硅澡对硅需要不但仅是作为其结构壳，它）硅澡对硅需要不但仅是作为其结构壳，它还需要利用硅质体光催化作用和对新陈代谢过程还需要利用硅质体光催化作用和对新陈代谢过程感感 应来合成一些蛋白和应来合成一些蛋白和DNA；第102页二氧化硅仿生矿化二氧化硅仿生矿化 化学家们合成二氧化硅条件是严格控制，需要一化学家们合成二氧化硅条件是严格控制，需要一定温度、压力、定温度、压力、pH值等条件，反应时间也较长；值等条件，反应时间也较长；而在生物体内，生物矿化硅都是在温和生理条件而在生物体内，生物矿化硅都是在温和生理条件下快速形成，通地对生物体系研究，人们开始认下快速形成，通地对生物体系研究，人们开始认识到生物大分子是硅沉积催化剂、模板及成核骨识到生物大分子是硅沉积催化剂、模板及成核骨架；架；第103页二氧化硅仿生矿化二氧化硅仿生矿化 借鉴硅藻中多肽组分诱导硅生长机理，利借鉴硅藻中多肽组分诱导硅生长机理，利用一些特殊多肽，在温和条件下快速诱导用一些特殊多肽，在温和条件下快速诱导了纳米二氧化硅生成了纳米二氧化硅生成第104页二氧化硅仿生矿化二氧化硅仿生矿化 一聚赖氨酸四聚不赖氨一聚赖氨酸四聚不赖氨酸存在下硅酸钠水解行为，酸存在下硅酸钠水解行为，结果发觉一聚赖氨酸三结果发觉一聚赖氨酸三聚赖氨酸不能诱导含有特聚赖氨酸不能诱导含有特定形态二氧化硅粒子形成，定形态二氧化硅粒子形成，而在四聚赖氨酸存在下，而在四聚赖氨酸存在下，硅酸钠快速水解，生成直硅酸钠快速水解，生成直径约为径约为200纳米二氧化硅纳米二氧化硅粒子粒子四聚赖氨酸诱导生成四聚赖氨酸诱导生成二氧化硅二氧