佰通生物生命4.0系统省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

生命生命4.04.0个性化健康管理系统个性化健康管理系统 刘小青刘小青 博士博士同济大学医学院教授同济大学医学院教授佰通生物科技首席科学家佰通生物科技首席科学家生命泉控股集团生命泉控股集团/美国中缅因州医养中心美国中缅因州医养中心PIPI第1页第2页1997-1997-：中科院生物物理所分子生物学博士：中科院生物物理所分子生物学博士-：美国哈佛大学医学院博士后及讲师：美国哈佛大学医学院博士后及讲师-：美国西南医学中心助理教授：美国西南医学中心助理教授 美国西南视网膜基金会美国西南视网膜基金会Harrington Harrington 试验室主任试验室主任PIPI-：葛兰素史克（：葛兰素史克（GSKGSK）干细胞研发部副总监）干细胞研发部副总监-至今：同济大学教授国家至今：同济大学教授国家973973干细胞研究重大专题课题组长干细胞研究重大专题课题组长-至今：苏州佰通生物科技有限企业首席科学家至今：苏州佰通生物科技有限企业首席科学家 苏州市姑苏领军人才及吴中区领军人才苏州市姑苏领军人才及吴中区领军人才 2 2015-015-至今：富利鑫控股集团造血干细胞首席科学家至今：富利鑫控股集团造血干细胞首席科学家-至今：至今：生命泉控股集团生命泉控股集团/美国中缅因州医养中心美国中缅因州医养中心PIPINatureGenetics(36):178-182(36):178-182引用引用422次次PNAS(101):13903-13908(101):13903-13908引用引用170次次PNAS(104):4413-4418(104):4413-4418引用引用83次次AmJPathol(168):519-528(168):519-528引用引用127次次u在Nature Genetics、PNAS等一系列国际权威期刊上发表了近40篇高引用率文章，引用累计屡次；申请国内外专利26件，14件授权。PLoS Genetics(6):e1000955(6):e1000955 引用引用65次次 Hum Mol Genet(18):2099-引用引用119次次 Gene Therapy (17):117-131 引用引用89次次 Hum Gene Therapy(21):993-1004 引用引用99次次代代表表结结果果刘小青第3页1）刘小青，一个干细胞培养基及其应用，.CN100146165.5（已授权已授权）。2）应明、刘小青，一个用于治疗糖尿病及其适应症药品组合，.CN1086727.9（已授权已授权）。3)刘小青，一个免疫细胞培养基、培养方法及应用，1032444.5.4）林剑、刘小青、洪岸、李校堃、陈小佳、李志英，成纤维细胞生长因子-2结构类似物，其生产方法及应用，ZL00117394.4（已授权已授权）。5）LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US7255856(已授权已授权)。6）LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US7255857(已授权已授权)。7）LiT，LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US7674458(已授权已授权)。8)LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US8173121(已授权已授权)。9)LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US8404231(已授权已授权)。10）LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.EP1706139(已授权已授权)。11）刘小青、黄俊，一个多ShRNA高效协同缄默基因方法及载体,.CN10588013.7（已授权已授权）。12）刘小青、应明、蹇丽华,药品筛选方法、用于促进胞外基质交联药品及其应用,.CN10413386.x，PCT/CN/087854（已授权已授权）。13）刘小青、应明、陈光风、郑龙坡，一个干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法，.CN10557941.6，PCT/CN/071173（已授权已授权）。14）LiuX,YingMandJianL,Adrugscreeningmethod,drugspromotingextracellularmatrixcross-linkingandtheapplicationsthereof.USPatentApplicationNo.#13884272.15）LiuX,YingM,ChenGandZhengL,Astemcellculturemediumanditsapplicationsaswellasastemcellculturemethod.USPatentApplicationNo.#13885000.16）刘小青,一个中药应用及其筛选方法和抗衰老药品,.CN1086734.9.17）刘小青，一个造血干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法，CN10283776.3.18）刘小青，一个造血干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法（香港15107918.7）19）刘小青，一个双室选择性细胞培养装置及其应用，CN10281271.3.20）刘小青，一个双室选择性细胞培养装置及其应用，CN20354728.4.21）刘小青，一个双室选择性细胞培养装置及其应用（香港15107920.3）22）LiuX.Adualchamberselectivelypermeabledeviceforcellcultureandtheapplicationsthereof.(USpatent,#14829865)。23）LiuX.Adualchamberselectivelypermeabledeviceforcellcultureandtheapplicationsthereof.(Europeanpatent，#15181334.2)。24)LiuX.Aculturemediumforhematoeiticstemcellsandtheapplicationsthereofaswellasthestemcellsculturemethod.(USpatent,#14829718)。25)LiuX.Aculturemediumforhematoeiticstemcellsandtheapplicationsthereofaswellasthestemcellsculturemethod.(Europeanpatent,#15181335.9)。专利情况第4页干细胞特征干细胞特征1.可自我更新2.可变成其它功效性细胞 可广泛于抗衰老、重大疾病治疗3.低丰度：万分之一4.分类：胚胎干细胞与成体（组织）干细胞第5页干细胞潜在临床应用干细胞潜在临床应用秃顶秃顶眼盲眼盲耳聋耳聋中风中风侧索硬化侧索硬化心肌梗死心肌梗死糖尿病糖尿病肌萎缩肌萎缩肿瘤肿瘤克罗恩病克罗恩病脑损伤脑损伤记忆缺点记忆缺点早老性痴呆症早老性痴呆症帕金森症帕金森症缺牙缺牙伤口愈合伤口愈合骨髓移植骨髓移植脊髓损伤脊髓损伤关节炎关节炎第6页胚囊胚囊(64-200个个细胞胞时期期)滋养滋养层内内细胞胞团多潜能胚胎干多潜能胚胎干细胞胞分化分化血液血液细胞胞心肌心肌细胞胞肝肝脏细胞胞神神经细胞胞肠道道细胞胞胰胰岛细胞胞胚胎干细胞胚胎干细胞第7页成体成体(组织组织)干细胞干细胞分离技术判定技术扩增技术分化技术第8页当前国内外干细胞治疗现实状况美国：允许诊所做自体干细胞治疗或美容。中国：干细胞培养条件不规范，事故频繁。第9页干细胞技术概况 干细胞技术在健康产业方面有很大前景，是当前个性化治疗方向，所以干细胞分离富集、扩增以及分化技术是干细胞治疗技术研发及产业化关键技术。预测，5年之内国际上干细胞领域将形成数5000亿美元市场需求。u市场需求与应用：干细胞基础研究（科研机构市场）干细胞胞抗衰老及临床治疗（医疗市场）第10页u自主知识产权低血清培养技术或无血清培养技术：1.高重现性，规模化生产；2.培养干细胞扩增时间加紧3-5倍；3.传代次数在5-10代以上，高于传统3代传代次数；4.细胞存活率提升30%以上；GMP条件下生产制剂，无病原体，无内毒素。干细胞扩增技术是干细胞产业化关键技术干细胞扩增技术是干细胞产业化关键技术第11页人干细胞特异性高表示或低表示基因Chen G et al.,Liu X*.Adipose stem cell-mediated treatment for acute liver failure.Stem Cell Research Therapy.(6)：40.Chen G et al.,Liu X*.VEGF-mediated proliferation of adipose tissue-derived stem cell.pLos One（8）：）：e73673.第12页P 0.05Control0.5ng cocktail/ml添加物与干细胞增殖速度线性关系 Cocktail(ng/ml)第13页AdvCellAninternationalBrand HBMSC(p2)HUMSC(p2)HADMSC(p2)AdvCellAdvCell干细胞培养基干细胞培养基第14页AdvCellAdvCell：细胞增殖速度比进口品牌快：细胞增殖速度比进口品牌快3-53-5倍倍第15页HBMSC(p10，100)AdvCell:AdvCell:全能性及表面标志物完全保持全能性及表面标志物完全保持AdipocyteformationCellsortingbysurfacemarkerschondrogeniccellformation第16页干细胞对疾病治疗效果u干细胞对糖尿病治疗效果：降低血糖，促进组织愈合u干细胞对肝衰竭治疗效果第17页科技查新及咨询汇报综合技术水平到达了“国内领先、国际先进水平”查新汇报查新汇报科技咨询汇报科技咨询汇报主要论文主要论文第18页注射前注射前2星期后星期后干细胞美容干细胞美容5星期后星期后第19页治疗前治疗前治疗后治疗后第20页治疗前治疗前治疗后治疗后第21页间充质干细胞对糖尿病治疗效果第22页对男性性功效改进第23页AdvCell 免疫细胞培养基免疫细胞培养基1.适用细胞：适用细胞：T、NK、DCCIK2.无血清培养基系列无血清培养基系列：优于Takara系列不带因子：300元500ml3.优化培养基系列优化培养基系列:1)优于Takara系列、AIMV、Exvivo2)等同Cellgenix.不带因子：800元500ml第24页50-200 mL外周血非单核细胞丢弃血浆保留免疫细胞（天然或修饰）单核细胞富集（专用仪器）悬浮贴壁培养1-3周109-10细胞回输AdvCell 免疫细胞培养基AdvCell免疫免疫细胞技术第25页免疫强化抗肿瘤技术免疫强化抗肿瘤技术1.NK 细胞技术2.CarT 细胞技术：靶向治疗靶标基因：cd19、cd20、cd30、cd33、cd138、cMet、egfrvIII、erbb、fap、gd-2、her2、Mesothelin、psma、wt1、ny-eso-1、cea、mart-13.PD1 抗体免疫激活技术 免疫抑制解除4.“鸡尾酒”疗法 免疫细胞PD1抗体联合免疫激活技术双室细胞放大培养技术第26页免疫细胞扩增速度比较免疫细胞扩增速度比较第27页扩增后免疫细胞对肿瘤抑制作用扩增后免疫细胞对肿瘤抑制作用CAR-T细胞治疗组NK 细胞治疗组DC细胞治疗组CIK细胞治疗组第28页AdvCell含酚红培养基系列DMEM 高糖基本培养基 间充质干细胞血清培养基 脂肪干细胞血清培养基 脐带干细胞血清培养基 骨髓间充质干细胞血清培养基哺乳细胞快速扩增培养基 间充质干细胞无血清培养基 脂肪干细胞无血清培养基 骨髓间充质干细胞无血清培养基脐带干细胞无血清培养基 哺乳细胞快速扩增无血清培养基 免疫细胞无血清培养基 免疫细胞优化培养基 造血干细胞无血清培养基 第29页造血干细胞无血清完全培养基 CIK细胞无血清培养基 CIK细胞优化培养基 DC细胞无血清培养基 DC细胞优化培养基NK细胞无血清培养基 NK细胞优化培养基 T细胞无血清培养基 T细胞优化培养基 第30页无酚红培养基系列DMEM 高糖无酚红基本培养基 间充质干细胞无酚红培养基 哺乳细胞快速扩增无酚红培养基 骨髓间充质干细胞无酚红培养基 脐带血干细胞无酚红培养基 脂肪干细胞无酚红培养基 间充质干细胞无酚红无血清培养基 造血干细胞无酚红无血清培养基 骨髓间充质干细胞无酚红无血清培养基 脐带干细胞无酚红无血清培养基 脂肪干细胞无酚红无血清培养基 第31页造血干细胞无酚红无血清完全培养基 哺乳细胞快速扩增无酚红无血清培养基 免疫细胞无酚红无血清培养基免疫细胞无酚红优化培养基 CIK细胞无酚红无血清培养基 CIK细胞无酚红优化培养基 DC细胞无酚红无血清培养基 DC细胞无酚红优化培养基 NK细胞无酚红无血清培养基 NK细胞无酚红优化培养基 T细胞无酚红无血清培养基 T细胞无酚红优化培养基第32页分化培养基 成骨分化培养基 成脂分化培养基 成软骨分化培养基第33页组织细胞分离培养相关产品 细胞培养优化添加物 细胞无血清冻存液 组织细胞分离消化液 组织淋洗液 胰蛋白酶-EDTA溶液 青霉素/链霉素溶液第34页 相关SCI研究论文BrunnerD,FrankJ,ApplH,SchofflH,Pfaller,GstraunthalerG,Theserum-freemediainteractiveonlinedatabase.Altex27,1-10.vanderValk,BrunnerD,SmetK,SvenningsenF,HoneggerP,KnudsenL,LindlT,NorabergJ,PriceA,ScarinoML,GstraunthalerG.OptimizationofchemicallydefinedcellculturemediaReplacingfetalbovineseruminmammalianinvitromethods.Toxicology In vitro.(24):1053-1063.ChenG,JinY,ShiX,QiuY,ZhangY,ZhangY,ChengM,WangX,ChenC,WuY,JiangF,ZhouH,FuQ,LiuX*.Adiposestemcell-basedtreatmentforacuteliverfailure.StemCellResearch&Therapy(InPress).ChenG,ShiX,SunC,LiM,ZhouQ,ZhangC,HuangJ,QiuY,WenX,ZhangY,ZhangY,YangS,LuL,ZhangJ,YuanQ,LuJ,XuG,JinZ,JiangC,YingM,LiuX.VEGF-mediatedproliferationofadiposetissue-derivedstemcell.pLos One（8）：e73673.YuanMetal.Transplantationofneuralstemcellsoverexpressingglialcellline-derivedneurotrophicfactorenhancesAktandErk1/2signalingandneurogenesisinratsafterstroke.Chin Med J.;126(7):1302-9.LiuY,LiS,YuanF,XiaJ,YuX,LiuX,YuG.InfrapatellarfatpadmaybebewithtendonrepairingabilityandcloselyrelatedwiththedeveloppingprocessofpatellaBaja.Medical Hypotheses(77):620-3.YangC,ZhouL,GaoX,ChenB,TuJ,SunH,LiuX,HeJ，LiuJ，YuanQ.Neuroprotectiveeffectsofbonemarrowmesenchymalstemcellsover-expressingGDNFonratswithintracerebralhemorrhageandneuronsexposedtohypoxia/reoxygenation.Neurosurgery(68):691-704.第35页企业标准第36页相关自我知识产权第37页第38页2.2.造血干细胞技术造血干细胞技术 造血干细胞是一类多功效成体干细造血干细胞是一类多功效成体干细胞，主要存在于骨髓，数量极其稀少，胞，主要存在于骨髓，数量极其稀少，通常以通常以CD34CD34阳性为细胞标志。阳性为细胞标志。1.产生血液细胞:调整血液细胞和免疫细胞再生及修复。2.横向分化形成心肌细胞、神经细胞、肝细胞、肾细胞、皮肤细胞及成纤维细胞等等各种功效细胞潜能。3.流向各个器官，参加疾病损伤和衰老器官再生和修复过程。第39页 干细胞抗衰老保健干细胞抗衰老保健 自体造血干细胞抗衰老保健，来重新激活自体细胞（CD34+），令体细胞逆向分化而产生大量造血干细胞，用来修复细胞、改进细胞代谢、激活衰老细胞功效、增加正常细胞数量、提升细胞活性、恢复细胞正常生理功效、改进细胞质量、预防和延缓细胞病变，从而到达康复疾病、反抗衰老目标。第40页造血干细胞形成机理开启 CD 34 基因关闭状态开启状态CD 34 基因造血干细胞基因表示活性高CD34 造血干细胞扩增技术造血干细胞扩增技术第41页动员剂50-200 mL外周血CD34-细胞丢弃血浆保留造血干细胞造血干细胞富集（CD34+磁珠/专用仪器）4-7天悬浮培养1-3周10910细胞回输AdvCell 造血干细胞培养基AdvCell 造血干细胞技术第42页造血干细胞培养及应用造血干细胞培养及应用第43页寿命延长造血干细胞技术1.理论基础理论基础（Nobel Prize）：寿命与细胞）：寿命与细胞染色体端粒长度成正比染色体端粒长度成正比.1.方法：方法：1）小分子（）小分子（TA65）提升端粒酶剂量提升端粒酶剂量 2）基因剂量）基因剂量：（1）瞬时过表示端粒酶瞬时过表示端粒酶 （2）永久性过表示端粒酶）永久性过表示端粒酶 第44页双室细胞培养技术第45页相关专利相关专利1）刘小青，一个造血干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法，CN10283776.3.2）刘小青，一个造血干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法（香港15107918.7）3）刘小青，一个双室选择性细胞培养装置及其应用，CN10281271.3.4）刘小青，一个双室选择性细胞培养装置及其应用，CN20354728.4.5）刘小青，一个双室选择性细胞培养装置及其应用（香港15107920.3）6）LiuX.Adualchamberselectivelypermeabledeviceforcellcultureandtheapplicationsthereof.(USpatent,#14829865)。7）LiuX.Adualchamberselectivelypermeabledeviceforcellcultureandtheapplicationsthereof.(Europeanpatent，#15181334.2)。8)LiuX.Aculturemediumforhematoeiticstemcellsandtheapplicationsthereofaswellasthestemcellsculturemethod.(USpatent,#14829718)。9)LiuX.Aculturemediumforhematoeiticstemcellsandtheapplicationsthereofaswellasthestemcellsculturemethod.(Europeanpatent,#15181335.9)。第46页 第47页第48页第49页当前干细胞技术产业化方向当前干细胞技术产业化方向1.干细胞培养基规模化2.个性化细胞美容与养生3.联合医院及科研单位进行细胞治疗4.个性化细胞文库5.网络抗衰老技术普及第50页年轻基因与干细胞活化技术国际独创网络抗衰老技术赖酰氨氧化酶1（LOXL1）在抗衰老中应用第51页1.1.改进胞外基质维护是抗衰老焦点之一改进胞外基质维护是抗衰老焦点之一第52页Liu et al,Nat.Genet.(36):178-182Liu et al.,Am J.Pathol.(168):519-528Yu G et al.,IOVS(49):2599-2605.Cenizo et al,Exp.Dermatology(15):574581阴道松弛阴道松弛+/+-/-+/+/2.2.我们在本事域贡献我们在本事域贡献 1 1）LOXL1LOXL1缺点小鼠病理改变缺点小鼠病理改变视网膜膜视网膜膜黄斑病变黄斑病变肺气肿肺气肿心血管异常心血管异常皮肤松弛皮肤松弛盆腔脱垂盆腔脱垂尿失禁尿失禁/尿驻留尿驻留WTLOXL1-/-WTLOXL1-/-WTLOXL1-/-WTLOXL1-/-WTLOXL1-/-阴茎脱垂直肠脱垂阴茎脱垂直肠脱垂第53页2 2）LOXL1 LOXL1 水平伴随年纪增加逐步降低水平伴随年纪增加逐步降低Liu et al.,Am.J.Path.(168):519-528Cenizo et al,Exp.Dermatology(15):574581 第54页大众媒体报道大众媒体报道第55页第56页第57页第58页3）提升体内LOXL1水平药品筛选感染感染人细胞人细胞刺激之后细胞刺激之后细胞Biochem Biophys Res Commun.Apr 18;446(4):1022-8.第59页4）提升体内LOXL1水平明星成份第60页5）形成自我知识产权已授权专利已授权专利 Li T,Liu X.Lysyl oxidase-like 1(LOXL1)and elastogenesis.US7255856.Li T,Liu X.Lysyl oxidase-like 1(LOXL1)and elastogenesis.US7255857.Li T,Liu X.Lysyl oxidase-like 1(LOXL1)and elastogenesis.EP1706139.Li T,Liu X.Lysyl oxidase-like 1(LOXL1)and elastogenesis.US7674458.Li T,Liu X.Lysyl oxidase-like 1(LOXL1)and elastogenesis.US8173121.Li T,Liu X.Lysyl oxidase-like 1(LOXL1)and elastogenesis.US8404231.第61页第62页已授权或受理相关专利已授权或受理相关专利刘小青、应明、蹇丽华刘小青、应明、蹇丽华,药品筛选方法、用于促进胞外基质药品筛选方法、用于促进胞外基质交联药品及其应用交联药品及其应用,.CN10413386.x,.CN10413386.x（已授权）（已授权）刘小青、应明、蹇丽华刘小青、应明、蹇丽华,药品筛选方法、用于促进胞外基质药品筛选方法、用于促进胞外基质交联药品及其应用，交联药品及其应用，.PCT/CN/087854.PCT/CN/087854。Xiaoqing Liu,Ming Ying and Lihua Jian,A drug screening method,Xiaoqing Liu,Ming Ying and Lihua Jian,A drug screening method,drugs promoting extracellular matrix cross-linking and the drugs promoting extracellular matrix cross-linking and the applications thereof.US Patent Application No.#13884272applications thereof.US Patent Application No.#13884272.第63页6）应用 把提升LOXL1水平药品分子做成化装品、保健品添加剂甚至药品，用于皮肤除皱、延缓器官衰老。1）化装品类型：眼睛除皱、面部除皱、洗浴液。2）保健品/健康食品类型：饮料添加物、食品添加物。3）临床药品：松皮病、肺气肿、盆腔脱垂、心血管异常、视网膜黄斑病变。第64页7)网络抗衰老系列产品（1）紧致肌肤面膜（2）美白面膜（3）精华原液（4）抗衰老口服液（5）男性饮品（6）活力精粹第65页网络抗衰老明星成份第66页网络抗衰老技术第67页第68页第69页第70页微信推广公共平台第71页第72页第73页抗衰老系列功效（1）使用2周之后肌肤弹性提升1倍以上，使用一年之后提升4倍以上；（2）使用2周之后肌肤紧致度提升0.5倍；使用一年之后提升4倍以上；（3）使用2周之后肌肤细胞活化度提升1倍以上；使用一年之后提升3倍以上。第74页男性饮品功效 经过数百人（40-50岁人群）试用后统计结果，使用一段时间仙蒂诗男性饮品后：1.平均天天2-4次阴茎勃起次数人数，由原来32%提升到现在 75%；2.勃起角度小于45度人群，由原来27%提升到现在78%。第75页活力精粹活力精粹 （Vigor Essence)Vigor Essence)第76页活力精粹功效活力精粹功效第77页政府资助及实体资助政府资助及实体资助1.国家973干细胞重大研究专题 -（课题组长）：500万 -（研究骨干）:150万2.国家985平台专题：200万3.上海市转化医学平台：480万4.上海浦江人才：20万5.上海杨浦高层次人才3310计划：60万5.国家自然科学基金（5个）：210万6.苏州吴中区领军人才：150万7.苏州姑苏领军人才：200万8.佰通生物科技：1500万9.生命泉控股集团：战略合作10.富利鑫控股集团：战略合作第78页