食品仪器分析-高效液相色谱参考答案.doc

高效液相色谱 习 题
一、填空题
1.高效液相色谱分析是将流动相用高压泵输送，使压力高达 5 MPa以上，并采用新型的 化学键合固定相 ，是分离效率很高的液相色谱法。
2.高效液相色谱法的特点是 分离性能高 、 分析速度快 、 检测器灵敏度高 、 应用范围广 。
3.高效液相色谱法和气相色谱法的共同之处是 分离功能 、 分析功能 、 在线分析 。
4.高效液相色谱分析根据分离机理不同可分为四种类型，即 液固 色谱、
液液 色谱、 键合相 色谱、 凝胶 色谱。
5.高效液相色谱中的液一液分配色谱采用的新型固定相叫 化学键合相 ，它是利用
化学 方法将固定液 官能团键合 在载体表面上的。
6.通常把固定相极性大于流动相极性的一类色谱称为 正相 色谱。反之称为
反相 色谱。
7.高效液相色谱仪通常由 储液器 、 输液泵 、 梯度淋洗器 、 进样器 、 色谱柱 、 检测器 、 色谱工作站 七部分组成。
8.高效液相色谱仪中使用最广泛的检测器为 紫外检测器 ，另外还有 折光 检测器、
荧光 检测器等等。
9.高效液相色谱主要用于 分析沸点高 的、 分子量大 的、 受热易分解 的以及具有生理活性物质的分析。
二、判断题
Ö、Ö、´、´、Ö、Ö、´、Ö、´、Ö、´、Ö、Ö、´、Ö、´、´、Ö、´、Ö、Ö、´、´、´、´、´、´、´、Ö、´

1．液一液色谱流动相与被分离物质相互作用，流动相极性的微小变化，都会使组分的保留值出现较大的改变。 （ Ö ）
2．利用离子交换剂作固定相的色谱法称为离子交换色谱法。 （ √ ）
3．紫外吸收检测器是离子交换色谱法通用型检测器。 （× ）
4．检测器性能好坏将对组分分离产生直接影响。 （ × ）
5．高效液相色谱适用于大分子，热不稳定及生物试样的分析。 （Ö ）
6．高效液相色谱中通常采用调节分离温度和流动相流速来改善分离效果。 （ × ）
7．键合固定相具有机械性能稳定，可使用小粒度固定相和高柱压来实现快速分离。（ √ ）
8．在液相色谱中为避免固定相的流失，流动相与固定相的极性差别越大越好。 （ × ）
9．正相分配色谱的流动相极性大于固定相极性。 （ × ）
10．反相分配色谱适于非极性化合物的分离。 （ √ ）
11．高效液相色谱法采用梯度洗脱，是为了改变被测组分的保留值，提高分离度（× ）
12．液相色谱柱一般采用不锈钢柱、玻璃填充柱。 （ × ）
13．液相色谱固定相通常为粒度5～10μm。 （ × ）
14．示差折光检测器是属于通用型检测器，适于梯度淋洗色谱。 （ × ）
15．离子交换色谱主要选用有机物作流动相。 （ × ）
16．体积排阻色谱所用的溶剂应与凝胶相似，主要是防止溶剂吸附。 （ × ）
17．在液一液色谱中，为改善分离效果，可采用梯度洗脱。 （ √ ）
18．化学键合固定相具有良好的热稳定性，不易吸水，不易流失，可用梯度洗脱。（ × ）
19．液相色谱的流动相又称为淋洗液，改变淋洗液的组成、极性可显著改变组分分离效果。（ √ ）
20．液相色谱指的是流动相是液体，固定相也是液体的色谱。 （ × ）
21．高效液相色谱柱柱效高，能用液相色谱分析的样品不用气相色谱法分析。（ × ）
22．在液相色谱中，流动相的流速变化对柱效影响不大。 （ × ）
23．正相键合色谱的固定相为非（弱）极性固定相，反相色谱的固定相为极性固定相。 （ × ）
24．某人用凝胶色谱分离易高聚物样品，分离情况很差，他改变流动相的组成后，分离情况大为改进，这种说法对吗？ （ × ）
25．在离子交换色谱中使用的固定相也属于一种键合固定相。 （ √ ）
三、选择题
1．在液相色谱法中，按分离原理分类，液固色谱法属于（ D ）。
A、分配色谱法 B、排阻色谱法 C、离子交换色谱法 D、吸附色谱
2. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在（ C ）中被分离。
A、检测器 B、记录器 C、色谱柱 D、进样器
3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜？( B )
A、0.5μm B、0.45μm C、0.6μm D、0.55μm
4．在液相色谱中，为了改变色谱柱的选择性，可以进行如下哪些操作？( C )
A、改变流动相的种类或柱子 B、改变固定相的种类或柱长
C、改变固定相的种类和流动相的种类 D、改变填料的粒度和柱长
5. 下列用于高效液相色谱的检测器，（ D ）检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器 B、荧光检测器
C、蒸发光散射检测器 D、示差折光检测器
6. 在高效液相色谱中，色谱柱的长度一般在（ A ）范围内。
A、10～30cm B、20～50m C、1～2m D、2～5m
7. 在液相色谱中，某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力。（ C ）
A、组分与流动相 B、组分与固定相
C、组分与流动相和固定相 D、组分与组分
8. 液相色谱中通用型检测器是（ B ）。
A、紫外吸收检测器 B、示差折光检测器
C、热导池检测器 D、氢焰检测器
9. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（ D ）。
A、提高柱温 B、降低板高
C、降低流动相流速 D、减小填料粒度
10．在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是（ B ）。
A、改变固定相种类 B、改变流动相流速
C、改变流动相配比 D、改变流动相种类
11. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了（ D ）。
A、恒温箱 B、进样装置
C、程序升温 D、梯度淋洗装置
12. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是（ B ）。
A、贮液器 B、输液泵
C、检测器 D、温控装置
13. 高效液相色谱分析用标准溶液的配制一般使用（ A ）。
A、国标规定的一级、二级去离子水 B、国标规定的三级水
C、不含有机物的蒸馏水 D、无铅（无重金属）水
14. 高效液相色谱仪与普通紫外-可见分光光度计完全不同的部件是（ A ）。
A、流通池 B、光源 C、分光系统 D、检测系统
15. 高效液相色谱仪中高压输液系统不包括（ E ）。
A、贮液器 B、高压输液泵 C、过滤器 D、梯度洗脱装置 E、进样器
16. 在液相色谱中，为了获得较高柱效能，常用的色谱柱是（ B ）。
A、毛细管柱 B、直形柱 C、U形柱 D、螺旋形柱
17. 在色谱法中，任何组分的分配系数都比1小的是（ D ）。
A、离子交换色谱 B、气固色谱 C、气液色谱 D、空间排阻色谱
18. 反相液液色谱适合于分离（ D ）。
A、低沸点液体 B、高分子化合物 C、极性化合物 D、非极性化合物

四、简答题（略）
1．从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。
答：共同点：高效、高速、高选择性，兼具分析和分离功能，均可在线分析。
不同点：（1）流动相不同（2）固定相不同，GC粒度粗（100—250um），HPLC采用化学键合固定相，粒度小（3-10um）（3）应用范围不同（4）结构不同，HPLC有高压输液泵，GC的检测器更多。各有所长，互为补充。
2．在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么?
答：液相色谱中提高柱效的途径主要有：
（1）提高柱内填料装填的均匀性；
（2）改进固定相：
（3）粒度; 选择薄壳形担体; 选用低粘度的流动相;
（4）适当提高柱温
其中，减小粒度是最有效的途径。.
3．液相色谱有几种类型? 它们的保留机理是什么？在这些类型的应用中，最适宜分离的物质是什么？
答：液相色谱有以下几种类型：液-液分配色谱；液-固吸附色谱；化学键合色谱；离子交换色谱；离子对色谱；空间排阻色谱等。
液－液分配色谱的保留机理是通过组分在固定相和流动相间的多次分配进行分离的。可以分离各种无机、有机化合物。
液-固吸附色谱是通过组分在两相间的多次吸附与解吸平衡实现分离的。最适宜分离的物质为中等相对分子质量的油溶性试样，凡是能够用薄层色谱分离的物质均可用此法分离。
化学键合色谱中由于键合基团不能全部覆盖具有吸附能力的载体，所以同时遵循吸附和分配的机理，最适宜分离的物质为与液-液色谱相同。
离子交换色谱是通过组分与固定相间亲合力差别而实现分离的。各种离子及在溶液中能够离解的物质均可实现分离，包括无机化合物、有机物及生物分子，如氨基酸、核酸及蛋白质等。
空间排阻色谱是利用凝胶固定相的孔径与被分离组分分子间的相对大小关系，而分离、分析的方法。最适宜分离的物质是：蛋白质等生物分子的分离、高聚物等大分子分离（分子量大于2000）。
4．在液-液分配色谱中，为什么可分为正相色谱及反相色谱？
答：采用正相及反相色谱的分类法，是为了选择与固定相性能匹配的流动相，以降低固定液在流动相中的溶解度从而避免固定液的流失。当然，分离的对象也随之发生改变。
5．何谓化学键合固定相？它有什么突出的优点？
答：利用化学反应将固定液的官能团键合在载体表面形成的固定相称为化学键合固定相。
优点：固定相表面没有液坑,比一般液体固定相传质快的多；无固定相流失，增加了色谱柱的稳定性及寿命；可以键合不同的官能团，能灵活地改变选择性，可应用与多种色谱类型及样品的分析；有利于梯度洗提，也有利于配用灵敏的检测器和馏分的收集。
6．何谓梯度洗脱？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？
答：在一个分析周期内，按一定程序不断改变流动相的组成或浓度配比，称为梯度洗提，是改进液相色谱分离的重要手段。
梯度洗提与气相色谱中的程序升温类似，但是前者连续改变的是流动相的极性、pH或离子强度，而后者改变的温度。
程序升温也是改进气相色谱分离的重要手段。
7．高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有何不同之处？
答：在高效液相色谱中为了承受高压，常采用进样阀进样的方式，定量准确、重复性好。在GC中通常采用注射器进样，缺点是定量不准确。