网织红细胞计数.doc

网织红细胞计数
1．项目名称
网织红细胞计数
2． 检验目的
2．1观察贫血疗效
2．2骨髓移植后监测骨髓造血恢复
2．3其他疾病协诊等 临床实验室
3．检验原理：网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，甲蓝活体染色后，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或新亚呈浅蓝或深蓝色的网状结构。
4．性能参数
4．1重复性
4．2分析和计算参数：百分比（%）
4．3样本量：染液量=1：1
4．4精密度
5．原始样品系统：
全血
6．容器和添加剂类型
容器采用真空负压专用抗凝管，添加剂类型为0.109M乙二胺四乙酸钾
7．试及显微镜
7．1 10G/L新亚甲蓝（或煌焦油蓝）生理盐水溶液：
新亚甲蓝 1.0G
枸橼酸钠 0.4G
氯化钠 0.85G
溶于双蒸馏水100ML中，混匀，过滤后备用。
7．2 显微镜
7．2．1 商标
8．校准程序:显微镜的验证，光路系统校正
灯泡大约半年更换一次
9．程序步骤：
9．1标本采集与要求
9．1．1标本采集：
抽取静脉血1.8ml，加入到含有乙二胺四乙酸钾溶液的抗凝真空试管中，并轻轻颠倒10次使之充分混匀，不得有凝块、不得形成泡沫，总量不得超过2.0±0.2ml，并在试管上做好标识。采血应避免溶血，采血后2小时内送到检验科，需要运输时应在低温条件下运输。采集标本时宜“一针见血”,以防止组织损伤。
9．1．2不合格标本的处理
对凝固、有凝块、采血量不符合要求、无条码或无标识等不合格的标本,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的标本,按程序文件《样品核收、登记和保存程序》处理
9．1．3标本保存
检测应在标本采集后2小时内完成,2～8℃保存不超过4小时,分析后的标本保存

三天。
9．2检验前准备
9．2．1把接收到的标本按顺序编写序号。
9．2．2准备清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片、盖玻片、毛细管，玻璃笔。
9．3病人标本的检验
9．3．1取小试管1支加10G/L新亚甲蓝盐水溶液2滴。
9．3．2加入末梢血（或EDTA钾抗凝静脉血）2滴于上述试管中，混匀。
9．3．3室温下放置10~15MIN后，取1滴制成薄片。
9．3．4油镜下至少计数1000个红细胞中网织红细胞数。
9．3．5计算 网织红细胞百分数=计数1000个红细胞中的网织红细胞数/1000
网织红细胞绝对数（个/L）=网织红细胞百分比数*红细胞数/L
【注意】
1． 活体染色时间不能过短。室温低时，放37摄氏度恒温箱。
2． 最好制两张片，每张计数1000个红细胞，避免分布不均引起的误差。涂片要薄而均匀，不使红细胞重叠。
3． 为计数方便，可于目镜中放一中间有孔硬纸，缩小视野便于计数。
4． 试剂应定期重配，以免变质沉淀。
5． 染液与血液比例约为1：1，严重贫血时可适量增加血液的比例。
10．质量控制
10．1显微镜法 网织红细胞目视激计数误差较大，影响因素主要有：操作人对网织红细胞认识不同；血涂片的好坏；计数红细胞数量的多少和计数方法等。
10．2仪器法 岁可计数红细胞10000~50000个，但如存在Howell-Jolly小体、有核红细胞、巨血小板，则可见假阳性。
11．干扰
12．参考区间
网织红细胞百分数
成人： 0.005~0.015
新生儿： 0.03~0.06
儿童： 0.005~0.015
网织红细胞绝对数：
成人： （24~84）*10*9/L
13．实验室解释：
13．1判断骨髓红细胞造血情况
13．1．1网织红细胞增多：表示骨髓红细胞生成旺盛。常见于：1.溶血性贫血，溶血时由于大量网织红细胞进入血液循环，RET可增至6%~8%或以上，急性溶血时，可达到20%左右，严重者可在50%以上，绝对值常超过100*10*9/L。急性失血后5~10D网织红细胞达到高峰，2周后恢复正常。2.放射治疗和化学治疗后，造血恢复时，可见RET短暂和迅速增高，是表明检测幼稚RET的变化骨髓恢复较敏感的指标。3.红系无效造血时，骨髓检查表明红系增生活跃，而外周网织红细胞计数正常或仅轻度高。
13．1．2网织红细胞减少：见于再生障碍性贫血、溶血性贫血再障危象时。典型的再生障碍性贫血网织红细胞计数低于0.005，网织红细胞绝对值低于15*10*9/L,为诊断其标准之一。

13．2观察贫血疗效 缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血治疗过程中，如RET增高，表明治疗有效，说明骨髓增生功能良好；如RET不增高，则表明治疗无效，并提示有骨髓造血功能障碍，需进一步检验。RET是贫血患者随访检查的项目之一。
13.3骨髓移植后监测骨髓造血恢复 骨髓移植后第21天，如RET大于15*10*9/L，常表明无移植并发症；RET小于15*10*9/L，伴中性粒细胞和血小板增高，可能为骨髓移植失败。
14.安全性防护措施
14．1在操作显微镜时应按照仪器作业指导书进行操作,防止受伤、触电等
14．2请带上橡胶手套进行染色、冲片,在工作完成后,用消毒液清洗双手,以免发生感染
14．3在涂片时应小心谨慎,应始终戴上橡胶手套,以避免发生细菌感染,若样本溅入眼睛或者伤口,须用大量清水冲洗,并立即就诊
14．4在配制染液时:如果试剂不慎落入眼睛,立即用大量清水冲洗,并接受治疗;如果不慎吞入试剂,立即向医生求助,喝入大量清水,并尽量呕出吞入试剂;如果试剂沾上皮肤或者手,用大量清水冲洗;在丢弃废液和消耗品时,请按照处理医疗、传染性、工业性废水的步骤进行处理,如果其中含有血样,可能导致细菌感染.
15．变异的潜在来源
15．1标本放置时间过长
15．2制片时用力不均匀使。细胞分布不均、细胞破碎。
15．3染色时间过长或过短。
16．参考文献
16．1 叶应妩.王毓三等《全国临床检验操作规程》第三版，东南大学出版社
16．2熊立凡主编《临床检验基础》第三版,人民卫生出版社

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（注：专业文档是经验性极强的领域，无法思考和涵盖全面，素材和资料部分来自网络，供参考。可复制、编制，期待你的好评与关注）