聚维酮碘口服液万金水对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌作用研究.doc

聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌作用研究

实验单位（盖章）：南京农业大学
地 址：江苏省南京市卫岗1号
委托单位及地址：深圳市安多福动物药业有限公司；
深圳市盐田区盐田北山工业区
首席专家（署名）：江善祥
实验负责人（署名）：季辉
实验参与人（署名）：张冠军
实验日期：2023年3月
联系人：季辉
联系电话：
原始资料保存地点：南京农业大学动物医学院药理组

聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌
的体外抑菌作用研究

一、目的意义
本实验目的是研究聚维酮碘口服液（万金水）在体外条件下，对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌作用，为其在兽医生产中的合理使用提供理论依据。
二、实验时间与地点
2023年3月，南京农业大学动物医学院药理实验室。
三、实验人员
实验负责人：季辉，南京农业大学动物医学院基础兽医系，邮箱。
实验设计人：季辉。
参与者：张冠军，南京农业大学动物医学院基础兽医系。
四、实验菌株
猪大肠杆菌2株： ED115、ED117，南京农业大学动物医学院药理组保存；
禽沙门氏菌2株： F3、F5，安徽农业大学动物科技学院馈赠。
五、实验药物：
兽药名称：聚维酮碘口服液（万金水）
生产厂家：深圳市安多福动物药业有限公司提供
规格：0.5%，500 mL/瓶
生产日期：2023-01-10
生产批号：13011004
六、实验试剂
MH培养基：上海盛思生化科技有限公司，130101；
LB肉汤培养基：上海盛思生化科技有限公司，130801；
LB琼脂培养基：上海盛思生化科技有限公司，130901。
七、实验方案
本实验应用试管稀释法进行聚维酮合碘口服液（万金水）的实验室微生物杀灭实验，测定聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌的杀灭作用。
7.1细菌繁殖体悬液制备：
以无菌操作方式启动菌种管，用毛细吸管加入适量营养肉汤培养基，轻柔吹吸数次，使菌种融化分散。取含 5.0mL～10.0mL 营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，置 37℃ 培养18h～24h。用接种环取第1代培养的菌悬液，划线接种于营养琼脂培养基平板上，置 37℃ 培养 18h～24h。挑取上述第 2 代培养物中典型菌落，接种于营养营养肉汤，置 37℃ 培养 18h～24h，即为第 3 代培养物。
7.2 聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌的杀灭作用测定
实验采用试管稀释法测定( 3 反复)。实验时，取对数生长期的细菌（109cfu/mL）用生理盐水稀释到106cfu/mL供实验用，取10支灭菌试管编号，每管加入1mL稀释后的菌液，然后取浓度为80、40、20mg/L的聚维酮碘溶液1mL各加入三支试管中混匀，则实验浓度分别为40、20、10mg/L，另一只试管中加入1mL生理盐水作为阳性对照。作用10min后，每管分别取0.1mL用生理盐水按10倍比稀释，再取稀释后样品0.1mL进行平板计数，计算聚维酮碘口服液（万金水）的杀菌率。
八 结果
体外抗菌活性
通过实验分别测定了聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌、沙门氏菌的杀菌作用，具体结果见表1、2。由表可见，聚维酮碘口服液（万金水）三个浓度（40、20、10mg/L）分别与大肠杆菌、沙门氏菌作用10min后即可将细菌所有杀灭，细菌计数结果为0。
表1 聚维酮碘口服液（万金水）与大肠杆菌作用10min后细菌数（cfu/mL）
浓度（mg/L）
菌株号
ED115
ED117
40
0
0
20
0
0
10
0
0
阳性对照
2.64×106
7.7×105

表2聚维酮碘口服液（万金水）与沙门氏菌作用10min后细菌数（cfu/mL）
浓度（mg/L）
菌株号
F3
F5
40
0
0
20
0
0
10
0
0
阳性对照
2.4×106
1.2×106
九 讨论
聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌的抗菌活性
本实验采用试管稀释法，每管加入1mL稀释后的菌液，然后分别加入不同浓度的聚维酮碘溶液1mL，混匀后作用10min进行细菌计数，测定聚维酮碘口服液（万金水）的杀菌性能。结果显示分别在40、20、10mg/L的浓度下聚维酮碘与大肠杆菌和沙门氏菌作用10min，可将其所有杀灭。
文献报道各种碘制剂（碘伏、聚维酮碘等）的杀菌效果差别较大，分析因素重要为实验方法上的差异。不同实验方法得到的聚维酮碘的MIC或MBC为4.69mg/L~625mg/L。可见本实验结果与文献基本一致。
十 实验综合评估
综合上述实验结果与文献，实验方法对该药的体外抗菌活性影响较大。在本实验方法的条件下，聚维酮碘口服液（万金水）在40、20、10mg/L时对临床常见的细菌（大肠杆菌、沙门氏菌、）可以迅速杀灭。
重要参考文献
[1] 李继昌，鲁成武，符春燕，等.聚维酮碘消毒剂抑菌作用研究[J].黑龙江畜牧兽医，1998，（4）：27
[2] 刘全离.聚维酮碘体外抑菌效果实验观测[J].中国消毒学杂志，2023，25（1）：28-29
[3] 王玲，徐燕，陈越英，等.一种聚维酮碘消毒液对微生物杀灭效果的实验研究[J].中国消毒学杂志，2023，24（2）：135-137
[4] 陈祖毅，林立旺，环游，等.聚维酮碘杀菌性能及影响因素实验研究[J].中国卫生检查杂志，2023，20（2）：309-311

附：部分实验照片

图1 样品配制

图2 万金水与细菌作用10min后倒平板

图3 万金水与大肠杆菌作用10min后细菌计数平板（0为阳性对照、1为10mg/L、2为20mg/L、4为40mg/L）

图4 万金水与大肠杆菌作用10min后细菌计数平板（阳性对照与10mg/L实验组）

图5 万金水与沙门氏菌作用10min后细菌计数平板（0为阳性对照、1为10mg/L、2为20mg/L、4为40mg/L）

图6 万金水与沙门氏菌作用10min后细菌计数平板（阳性对照与10mg/L实验组）