人教版教学课件菊花的组织培养课件市公开课一等奖百校联赛特等奖课件.pptx

承德二 中课题课题1 1 菊花组织培养菊花组织培养第1页 承德二 中右图为植物体细胞杂交过程示意图。据右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：图回答：（1 1）步骤）步骤是是 ，最，最惯用方法是惯用方法是 。（2 2）步骤）步骤普通惯用化学试剂是普通惯用化学试剂是 ，目标是，目标是 。(3)(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植在利用杂种细胞培育成为杂种植株过程中，利用技术伎俩是株过程中，利用技术伎俩是 ，其中步骤，其中步骤相当于相当于 ，步骤，步骤相当于相当于 。（4 4）植物体细胞杂交目标是取得新杂）植物体细胞杂交目标是取得新杂种植株。使种植株。使能够在新植物体能够在新植物体上有所表现，其根本原因是上有所表现，其根本原因是。去掉细胞壁，分离原生质体去掉细胞壁，分离原生质体酶解法酶解法聚乙二醇（聚乙二醇（PEG）诱导植物原生质体融合诱导植物原生质体融合植物组织培养植物组织培养脱分化脱分化再分化再分化远缘杂交亲本远缘杂交亲本遗传特征遗传特征杂种植株取得双亲遗传物质杂种植株取得双亲遗传物质第2页 承德二 中 （5 5）若远源杂交亲本）若远源杂交亲本A A和和B B都是二倍体，则都是二倍体，则杂种植株为杂种植株为倍体。倍体。（6 6）从理论上讲，杂种植株育性）从理论上讲，杂种植株育性。若。若利用传统有性杂交方法能否实现？利用传统有性杂交方法能否实现？。并说明现由并说明现由 。所以，这项研究对于培养作物新品种方面重大所以，这项研究对于培养作物新品种方面重大意义在于意义在于。（7 7）利用植物体细胞杂交方法培育作物新品）利用植物体细胞杂交方法培育作物新品种过程中，遗传物质传递是否遵照孟德尔遗传种过程中，遗传物质传递是否遵照孟德尔遗传规律？为何？规律？为何？。四四可育可育不能不能因为不一样种生物之间存在生殖隔离因为不一样种生物之间存在生殖隔离克服远缘杂交不亲和障碍，大大克服远缘杂交不亲和障碍，大大扩展了可用于杂交亲本组合范围扩展了可用于杂交亲本组合范围不遵照。因为在生物进行有性生殖过程中，才遵照孟德尔遗传不遵照。因为在生物进行有性生殖过程中，才遵照孟德尔遗传规律，而植物体细胞杂交育种过程不属于有性生殖规律，而植物体细胞杂交育种过程不属于有性生殖第3页 承德二 中学习目标学习目标熟悉植物组织培养基本过程。熟悉植物组织培养基本过程。了解细胞分化概念及脱分化，再分化。了解细胞分化概念及脱分化，再分化。课题重点与难点课题重点与难点课题重点：植物组织培养基本过程。课题重点：植物组织培养基本过程。课题难点：植物组织培养过程中使用课题难点：植物组织培养过程中使用无菌技术。细胞分化，脱分化，再分无菌技术。细胞分化，脱分化，再分化。化。第4页 承德二 中活动活动1：什么是细胞分化？什么是细胞分化？细胞分化原因和结果？细胞分化原因和结果？愈伤组织是怎样形成？有什么特点？愈伤组织是怎样形成？有什么特点？脱分化、再分化？脱分化、再分化？组织培养过程？组织培养过程？以及组织培养理论基础？以及组织培养理论基础？第5页 承德二 中一、细胞分化与全能性1.1.细胞分化：细胞分化：个体发育中，细胞在形态、结构和个体发育中，细胞在形态、结构和 生理功效上出现生理功效上出现稳定性稳定性差异过程。差异过程。特定时空下基因选择性表示。特定时空下基因选择性表示。形成各种组织器官。形成各种组织器官。结果：结果：原因：原因：定义：定义：第6页 承德二 中脱分化（去分化）再分化愈伤组织愈伤组织是经过细胞分裂细胞分裂形成，其细胞排列疏松而疏松而无规则无规则，高度液泡化液泡化呈无无定形定形状态薄壁薄壁细胞。第7页 承德二 中2.植物组织培养理论基础：细胞全能性：含有某种生物全套细胞全能性：含有某种生物全套遗传信息遗传信息任何一个活细胞，都含有发育成任何一个活细胞，都含有发育成完整个体完整个体能力，即每个生物细胞都含有能力，即每个生物细胞都含有全能性全能性。细胞全能性表示条件：细胞全能性表示条件：离体离体 一定营养物质、激素和其它外界条件一定营养物质、激素和其它外界条件第8页 承德二 中二、植物组织培养基本过程二、植物组织培养基本过程第9页 承德二 中活动活动2：影响组织培养原因？影响组织培养原因？菊花组织培养应注意问题？菊花组织培养应注意问题？第10页 承德二 中三、影响植物组织培养原因：三、影响植物组织培养原因：不一样植物组织培养难度不一样不一样植物组织培养难度不一样 同一个植物不一样组织培养难度不一同一个植物不一样组织培养难度不一样样 大量元素：大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等1、外植体选取、外植体选取2、培养基配制、培养基配制(MS培养基培养基)第11页 承德二 中3、不一样植物激素浓度，使用次序、不一样植物激素浓度，使用次序和使用量和使用量使用次序 试验结果 先生长素，后细胞分裂素 有利于分裂但不分化 先细胞分裂素，后生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提升 生长素细胞分裂素比值结果 比值高时 促根分化，抑芽形成 比值低时 促芽分化，抑根形成 比值适中 促进愈伤组织生长 第12页 承德二 中4、消毒、消毒在培养整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：在培养整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：5、pH、温度、光照、温度、光照菊花：菊花：pH=5.8 温度控制在温度控制在1822 每日光照每日光照12h第13页 承德二 中活动活动3：用自己用自己话把菊花把菊花组织培养操作流程培养操作流程给描述描述出来出来?（提醒：（提醒：怎样配制怎样配制MS培养基培养基?外植体外植体消毒应怎样进行消毒应怎样进行?接种、培养、移栽时应注接种、培养、移栽时应注意什么问题意什么问题?）第14页 承德二 中制备制备MS固体固体培养基培养基外植体消毒外植体消毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培四、试验操作四、试验操作 移移 栽栽冲洗冲洗酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌无菌水冲洗最少三次之上水冲洗最少三次之上第15页 承德二 中 试验操作试验操作（一）制备（一）制备MS固体培养基固体培养基1、配置各种母液、配置各种母液2、配置培养基、配置培养基定容定容 调调PH培养基分装培养基分装 3、灭菌、灭菌分装好培养基连同其它器械一起进行高压蒸汽分装好培养基连同其它器械一起进行高压蒸汽灭菌灭菌第16页 承德二 中1、选材：、选材：菊花茎段，取生长旺盛嫩枝菊花茎段，取生长旺盛嫩枝（二）外植体消毒（二）外植体消毒2、消毒：、消毒：流水冲洗流水冲洗酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌水冲洗最少三次之上无菌水冲洗最少三次之上第17页 承德二 中（三）接种（三）接种用用70酒精喷雾使空气消毒，酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟分钟1、接种室消毒、接种室消毒2、无菌操作要求、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后马上盖好瓶盖。都需要用火焰灼烧灭菌，接种后马上盖好瓶盖。3、材料切取和接种、材料切取和接种第18页 承德二 中4、接种注意事项、接种注意事项每接种一块外植体前，镊子需放入体积分每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为数为75酒精溶液中消毒一次，然后在酒精酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种灯火焰上烧一遍，冷却后再接种外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量依据锥形瓶大小确定，普通胡萝卜数量依据锥形瓶大小确定，普通胡萝卜34块，块，菊茎或叶菊茎或叶68块，也不要太少，以充分利用培块，也不要太少，以充分利用培养基中营养成份和光照条件养基中营养成份和光照条件插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分基部插入培养基利于吸收水分和养分第19页 承德二 中（四）培养（四）培养无菌箱中培养，定时消毒，无菌箱中培养，定时消毒，保持适宜温度，光照保持适宜温度，光照（五）移栽（五）移栽1、打开封口膜、打开封口膜2、清洗转移至消、清洗转移至消过毒蛭石或珍珠过毒蛭石或珍珠岩中岩中幼苗长壮后，移栽到土壤中幼苗长壮后，移栽到土壤中（六）栽培（六）栽培第20页 承德二 中思思 考考 在整个操作过程中，是怎样来实现无菌环境？在整个操作过程中，是怎样来实现无菌环境？1、培养基灭菌（高压蒸汽灭菌）、培养基灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体消毒（酒精、氯化汞）、外植体消毒（酒精、氯化汞）3、接种无菌操作（酒精、酒精灯、接种无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）灼烧）4、无菌箱中培养；、无菌箱中培养；5、移栽到消过毒环境中生存一段时间。、移栽到消过毒环境中生存一段时间。第21页 承德二 中总结植物组织培养过程总结植物组织培养过程:离离离离体体体体组组组组织织织织或或或或细细细细胞胞胞胞植植植植物物物物体体体体脱分化脱分化脱分化脱分化细胞分细胞分细胞分细胞分裂素裂素裂素裂素 生生生生长素长素长素长素愈愈愈愈伤伤伤伤组组组组织织织织芽芽芽芽根根根根细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 生长素生长素生长素生长素细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 生长素生长素生长素生长素再分化再分化再分化再分化植物细胞培养植物细胞培养植物细胞培养植物细胞培养不需要光不需要光不需要光不需要光需要光需要光需要光需要光第22页 承德二 中本课题内容小结菊花菊花组织组织培养培养基础知识基础知识试验操作试验操作植物体组织植物体组织培养培养影响组织培养影响组织培养原因原因细胞分化细胞分化细胞全能性细胞全能性组织培养过程组织培养过程营养营养激素激素环境条件环境条件MS固体培养基制备固体培养基制备外植体消毒外植体消毒接种接种培养培养移栽移栽栽培栽培第23页