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糠醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵抑制的耐受性探究毕业论文.docx

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资源描述

1、合肥师范学院本科生毕业论文(设计)装订线 本科生毕业论文(设计)题目:糠醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵抑制的耐受性探究III摘 要本论文探究酸解小麦麸皮中产生的糠醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵抑制的耐受性。通过活性炭对小麦麸皮酸解液脱毒,研究活性炭浓度、温度和时间对酸解液中糠醛、5-羟甲基糠醛脱毒处理效果,发现在活性炭含量为1%、30、30 min条件下脱毒效果最优。以葡萄糖为碳源,添加不同浓度的糠醛与5-羟甲基糠醛进行苹果酸发酵,发现它们对苹果酸发酵的抑制作用与其浓度呈正相关。对小麦麸皮酸解液脱毒后,可以大量减少其中糠醛与5-羟甲基糠醛的含量,减小其对小麦麸皮发酵产生苹果酸的抑制作用。关键词

2、:小麦麸皮 糠醛 5-羟甲基糠醛 活性炭 苹果酸ABSTRACTThis paper explored furfural and 5-HMF which is produced by the acid solution of wheat bran for malic acid fermentation inhibition tolerated. Detoxification on wheat bran acid solution by activated carbon, activated carbon concentration, temperature and time on the ac

3、id hydrolysate toxic treatment removal effect offurfural, 5-HMF, find the optimal detoxification effect is under the condition of activated carbon content of 1%, 30 , 30 min. With glucose as carbon source, the effects of different concentrations of furfural and 5-HMF malic acid fermentation, found t

4、heir inhibitory effect on malic acid fermentation was positively correlated with concentration. The wheat bran acidsolution for detoxification, can greatly reduce the content of furfural and 5-HMF, reduced inhibition which produces malic acid fermentation of wheat bran.Key words: Wheat bran Furfural

5、 5-HMF Activated carbon Malic acid目 录1 引 言21.1本课题的目的及意义21.2国内外发展状况22 材料和方法22.1实验材料与试剂22.2实验用具与设备22.3实验方法23 结果与分析23.1小麦麸皮酸解液中糠醛与5-羟甲基糠醛含量测定23.2小麦麸皮酸解液的脱毒条件优化23.3探究糠醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵抑制的耐受性23.4小麦麸皮酸解液脱毒后对苹果酸发酵的影响24 讨 论2参考文献21 引 言装订线1.1本课题的目的及意义L-苹果酸在蔬菜和苹果中普遍存在,是一种极其重要的有机酸1;其口感与天然苹果的酸味相接近,是一种优良的酸味剂和保鲜剂;它具

6、有味道柔和,酸度大,滞留时间长等特点2。目前,在高档饮料与食品行业,L-苹果酸已经被广泛应用,其也用于治疗肝功能不全、肝衰竭和贫血等疾病,已经在医药上有着重要的作用。近几年,国内外对于L-苹果酸的需求量越来越大3。小麦麸皮是面粉生产中的副产品,其主要用途是作为饲料和发酵。小麦麸皮中含有大量纤维类物质,作为饲料的话,难以被动物吸收,从而造成资源浪费。我国每年生产的小麦麸皮约有2000万吨,若这些小麦麸皮中的纤维物质能够得到有效利用,则小麦麸皮的经济价值和社会效应将会得到很大提升。有文献指出可以对小麦麸皮进行烯酸处理,在高温条件下酸解小麦麸皮纤维,可产生木糖、葡萄糖、阿拉伯糖等单糖,且糖含量以及糖

7、化率较理想4,酸解小麦麸皮所产生的单糖可作为发酵生产L-苹果酸的原料。小麦麸皮作为一种可再生资源既得到合理利用,又增加了苹果酸的生产途径,降低了苹果酸的生产成本。在酸解小麦麸皮的过程中会产生糠醛、5-羟甲基糠醛等物质,这些物质会对后期菌种发酵利用糖化液有影响;本文对小麦麸皮酸解过程中糠醛、5-羟甲基糠醛等物质含量的多少进行测定,并且利用曲霉发酵制备苹果酸的特性,在发酵过程中分别添加糠醛、5-羟甲基糠醛等物质,研究这些物质对曲霉发酵苹果酸的影响及适应浓度等。 通过糠醛、5-羟甲基糠醛等物质对曲霉发酵苹果酸的影响研究,得到这些物质在苹果酸发酵过程中影响的条件以及适应浓度,对于日后利用小麦麸皮酸解后

8、发酵有着重要的指导意义。根据研究所得的结果可以对发酵制备苹果酸的条件进行改善,可以提高曲霉发酵苹果酸产酸率,使得苹果酸生产量得到提升。这样即提升了小麦麸皮的利用率,又降低了生产苹果酸的成本。1.2国内外发展状况L-苹果酸普遍存在于植物、动物及微生物细胞中,是生物体在代谢过程中产生的重要有机酸。L-苹果酸最早期的生产方法是提取法,是从生物代谢过程中提取出的。这种方法产量极低,后来发展有化学合成法,发酵法,酶催化法等多种方法2。在上个世纪初,人们研究发现某些霉菌和酵母可产生L-苹果酸。此后,人们尝试利用微生物法直接生产制取L-苹果酸,但由于成本高,生产规模小,未能够实现工业化5。1959年,日本的

9、Kitahara等利用短乳杆菌产生的富马酸酶催化化合制取富马酸转化成了L-苹果酸,使得苹果酸的研究进入了一个新的时期6,7。之后在此方面,日本进行了大量的研究,并领先于世界水平,他们将生产的L-苹果酸主要用于医药行业5。现在,天然糖质被世界上许多国家作为原料,采用霉菌单一菌种发酵,霉菌加酵母或者细菌混种发酵用来生产L-苹果酸,但产量不高。目前,工业上是先以苯为原料生产L-苹果酸,在通过化学催化法制备富马酸,在酶的催化生产L-苹果酸8,9。但是人们对食品安全越来越关注,以及对自身的健康意识越来越强,人们将目光逐渐转入到可在生物资为原料的全生物法发酵制备L-苹果酸。其中,制备L-苹果酸的微生物法有

10、两种,即“一步发酵法”和“两步发酵法”2。小麦麸皮作为面粉生产的副产物,每年有大量的产量,却不能够得到有效的利用。有文献指出可以利用酸解的方法对小麦进行处理,可以使小麦麸皮中的纤维物质转化为木糖、葡萄糖、阿拉伯糖等单糖,而且糖含量以及糖化率较理想4。我们可以将这些单糖用于发酵生产-苹果酸,这样就得到一种生产制备L-苹果酸的新途径,并且原料成本低廉,工艺较简单,设备要求低,是一种可行的生产路线。酸解小麦麸皮过程中会产生糠醛、5-羟甲基糠醛等物质,这些物质会对后期菌种发酵苹果酸利用糖化液有抑制影响,本文研究的是酸解小麦麸皮过程中糠醛、5-羟甲基糠醛含量特点,并且利用曲霉发酵制备苹果酸的特性,在发酵

11、过程中分别添加糠醛、5-羟甲基糠醛两种物质,研究这些物质对曲霉发酵苹果酸的影响及适应浓度等。2 材料和方法2.1实验材料与试剂实验材料:小麦麸皮(合肥市场购买);寄生曲霉(CICC40365)实验试剂:实验试剂纯度生产厂商硫酸分析纯(AR)上海博河精细化学品有限公司无水乙醇分析纯(AR)上海振企化学试剂有限公司活性炭(粉末)分析纯(AR)天津市永大化学试剂有限公司5-羟甲基糠醛分析纯(AR)上海晶纯试剂有限公司糠醛分析纯(AR)南开市光复精细化工研究所L-苹果酸分析纯(AR)上海晶纯试剂有限公司2,7-萘二酚分析纯(AR)上海晶纯试剂有限公司葡萄糖分析纯(AR)天津市博迪化工股份有限公司硫酸铵

12、分析纯(AR)上海试剂四厂KH2PO4分析纯(AR)西陇化工股份有限公司K2HPO4分析纯(AR)西陇化工股份有限公司MgSO47H2O分析纯(AR)天津市博迪化工股份有限公司CaCl22H2O 分析纯(AR)淮南市化学试剂厂 FeSO47H2O分析纯(AR)西陇化工股份有限公司 MnSO4分析纯(AR)上海上浦化工有限公司 2.2实验用具与设备实验用具:500 mL烧杯,250 mL锥形瓶,100 mL容量瓶,培养皿,研钵,滴定管,移液枪 实验设备:实验设备型号生产厂商电热恒温培养箱 DNP-90 82BS-上海新苗医疗器械制造有限公司 恒温水浴锅 HH-1金坛市杰瑞尔电器有限公司 低速离心

13、机 TDL-5-A上海楚柏实验设备有限公司 可见分光光度计 722S上海精密科学仪器有限公司 紫外分光光度计 UV762上海精密科学仪器有限公司 气浴恒稳振荡器 THZ-82B江苏金坛市医疗仪器厂 立式压力蒸汽灭菌锅 LDZX-50FB上海申安医疗器械厂 电子分析天平 FA1604上海衡平仪器厂 2.3实验方法2.3.1糠醛、5-羟甲基糠醛与苹果酸标准曲线制备与测定方法2.3.1.1 糠醛标准曲线制备与测定方法标准曲线制备:准确称取1 g糠醛标准品,用95%乙醇定容于100 mL容量瓶中,得到1%糠醛标准贮备液。用时将糠醛标准贮备液用50%乙醇准确稀释至100.00 mg/L,分别配制浓度为1

14、.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mg/L的梯度浓度标准溶液,以50%乙醇为空白,分光光度法测定OD276处吸光值,绘制标准曲线,建立标准曲线回归方程10。经测量不同浓度梯度的糠醛相对应的OD值如图2-1图2-1 糠醛标准曲线从该标准曲线可以看出,糠醛浓度在0.1010.00 mg/L之间对应的吸光度基本呈线性相关,得到糠醛标准回归方程为:y = 01899x - 0.0163 ;R = 0.9966,式中:y为吸光度:x为糠醛的浓度。样品测定方法:吸取样品1 mg/L样品,用50%乙醇溶液稀释(稀释后糠醛含量在1.0010.00 mg/L之间),混匀,分光光度法测定

15、OD276处吸光值,根据标准回归曲线方程计算出样品中糠醛含量。2.3.1.2 5-羟甲基糠醛与标准曲线制备与测定方法标准曲线制备:准确称取5 mg的5-羟甲基糠醛标准品,用蒸馏水定容于100 mL容量瓶中,得到浓度为50.00 mg/L的标准液,将50.00 mg /L 的标准液用蒸馏水稀释, 分别配制浓度为1.00、3.00、6.00、9.00、12.00、15.00、18.00、21.00 mg/L的梯度浓度标准溶液,以蒸馏水为调零液,分光光度法测定OD284处吸光值,绘制标准曲线,建立标准曲线回归方程11。经测量不同浓度梯度的5-羟甲基糠醛糠醛相对应的OD值如图2-2图2-2 5-羟甲基

16、糠醛标准曲线从该标准曲线可以看出,5-羟甲基糠醛浓度在1.0018.00 mg/L之间对应的吸光度基本呈线性相关,则得到5-羟甲基糠醛标准曲线回归方程为:y = 0.1236x + 0.0249;R = 0.9969,式中:y为吸光度,x为5-羟甲基糠醛浓度。样品测定方法:吸取样品1 mg/L样品,用蒸馏水稀释(稀释后5-羟甲基糠醛含量在1.0021.00 mg/L之间),分光光度法测定OD284处吸光值,根据标准回归曲线方程计算出样品中5-羟甲基糠醛糠醛含量。2.3.1.3 苹果酸标准曲线的制备与测定方法苹果酸的检测利用的是Goodban法12。 2,7 萘二酚溶液:取1 g 2,7 萘二酚

17、溶解在100 mL 98%浓硫酸中。此溶液可在4下保存数月13。准确称取苹果酸标准样品10.0 mg,用蒸馏水定容于100 mL容量瓶,所得到浓度为100.00 mg/L的标准液。将100.00 mg/L的标准液稀释,分别配制浓度为10.00、20.00、40.00、60.00、80.00、100.00 mg/L的梯度浓度标准溶液。将上述各标准溶液分别移入到已编号的试管中各1 mL,眼试管壁缓慢加入6.00 mL浓硫酸,并加入0.10 mL 2,7 萘二酚溶液,然后在100的沸水中水浴20 min,待溶液冷却到室温,分光光度法测定OD390处吸光值,空白对照采用蒸馏水,按以上方法相同处理。根据

18、所测吸光值绘制苹果酸标准曲线,建立苹果酸标准回归曲线方程。经测量不同浓度梯度的苹果酸相对应的OD值如图2-3图2-3 苹果酸的标准曲线从该标准曲线可以看出,苹果酸浓度在10.0080.00 mg/L之间对应的吸光度基本呈线性相关,得到苹果酸标准回归方程为: y = 0.0092x + 0.0307;R = 0.9979,其中y为吸光度,x为苹果酸浓度。样品测定方法:吸取样品溶液1.00 mL(苹果酸浓度控制在5.0080.00 mg/L)于干净试管中,取6.00 mL分析纯的浓硫酸,沿管壁缓慢加入,再加入0.1 mL 2,7 -萘二酚试剂,放入100水浴锅中加热20 min,冷却至室温后,分光

19、光度法测定OD390处吸光值,根据标准回归方程计算出样品中苹果酸含量。2.3.2小麦麸皮酸解液中糠醛与5-羟甲基糠醛含量测定小麦麸皮粉碎并过30目筛,在80烘干后室温保存。对上述处理后的小麦麸皮进行酸解,按照下列浓度配置酸解液:硫酸浓度为1.5%,底物即小麦麸皮纤维浓度为67 g/L。然后将配置好的酸解液在100下,酸解3个小时4。将酸解后的小麦麸皮溶液在3000 r/min下离心10 min,取上清液分别稀释200倍、300倍和400倍,以50%乙醇为调零液,分光光度法测定OD276处吸光值,根据糠醛的标准回归方程计算出糠醛含量,并计算出平均值;再次取上述稀释后的上清液,以蒸馏水为调零液,分

20、光光度法测定OD284处吸光值,根据5-羟甲基糠醛的标准回归方程计算出5-羟甲基糠醛含量,并计算出平均值。2.3.3小麦麸皮酸解液的脱毒条件优化使用活性炭吸附法脱毒,研究活性炭浓度、温度和时间对酸解液中糠醛、5-羟基糠醛脱毒处理效果。脱毒优化条件如表2-1表2-1 脱毒优化条件 分组分组优化参数12345活性炭浓度(%)0.511.52温度()30405060时间(min)2030405060根据表2-1的方案对小麦麸皮酸解液脱毒,并测出脱毒后酸解液中糠醛与5-羟甲基糠醛的含量,制作出糠醛与5-羟甲基糠醛的活性炭吸附性曲线。做三次平行组,结果取平均值,并进行单因素方差分析14。2.3.4探究糠

21、醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵抑制的耐受性2.3.4.1 寄生曲霉发酵苹果酸周期的探究本实验发酵所用的菌种为寄生曲霉。培养基配制方法:将土豆切成小块,取100 g土豆放入1 L水中在100煮沸30 min,过滤出滤液;在滤液中分别加入30 g的葡萄糖和18 g左右的琼脂,溶解,灭菌。在超净工作台上,用划线分离法在培养皿中分离出寄生曲霉,放入培养箱中培养。三天之后取出培养基,在斜面培养基中接种单个的菌落,得到纯种菌落,并制作种子培养液。按照以下配方配制苹果酸发酵液:葡萄糖100 g/L、(NH4)2SO4 2.5 g/L、KH2PO4 0.1 g/L、K2HPO4 0.5 g/L、MgSO47H

22、2O 0.1 g/L、CaCl22H2O 0.1 g/L、FeSO47H2O 0.5 g/L、MnSO4 0.1 g/L、NaCl 0.005 g/L15。将配置好的发酵液分别等量加入到4瓶250 mL的锥形瓶中,灭菌后分别在超净工作台上接入2 mL的寄生曲霉种子培养液,放入恒温摇床中200 r/min,30下培养。然后根据苹果酸标准曲线每隔24小时测得培养液中苹果酸的含量,做出苹果酸发酵产量的周期曲线,确定寄生曲霉发酵苹果酸的周期。2.3.4.2 糠醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵的影响利用单因素法探究糠醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵的影响,在相同的发酵液中分别添加等梯度浓度的糠醛或5-羟甲基

23、糠醛,在恒温摇床中以200 r/min,30条件下发酵相同时间。在发酵培养液中分别添加的糠醛或5-羟甲基糠醛含量,如表2-2表2-2 糠醛、5-羟甲基糠醛添加量 分组添加物12345糠醛(mg/L)1003005007009005-羟甲基糠醛(mg/L)100300500700900以上发酵液中除添加物以外,其发酵液成分,体积,接种量,发酵条件等条件均为一致,除此之外,每组发酵液都有空白对照组。发酵周期后,测出含有不同添加物发酵液中苹果酸的含量。2.3.5小麦麸皮酸解液脱毒后对苹果酸发酵的影响 分别以葡萄糖,小麦麸皮酸解液,以及脱毒后的小麦麸皮酸解液为碳源,配制相同发酵液(各发酵液中糖含量保持

24、相同),在200 r/min,30,发酵5天。观察不同碳源发酵苹果酸的产酸量。3 结果与分析装订线3.1小麦麸皮酸解液中糠醛与5-羟甲基糠醛含量测定经计算得到,小麦麸皮酸解液中糠醛的浓度为481.11 mg/L,5-羟甲基糠醛的浓度为573.37 mg/L。具体结果如表3-1所示表3-1 糠醛5-羟甲基糠醛含量OD值浓度(mg/L)稀释倍数样品浓度(mg/L)平均值(mg/L)糠醛0.44352.4212200482.25481.110.28021.5629300468.400.21761.2317400492.685-羟甲基糠醛0.37182.8066200561.32565.280.261

25、41.9134300574.020.19811.4012400560.513.2小麦麸皮酸解液的脱毒条件优化 3.2.1活性炭用量对酸解液脱毒效果的影响向小麦麸皮酸解液中分别添加粉末状的活性炭0.5%,1.0%,1.5%,2.0%。在60下搅拌30 min,观察其对小麦麸皮酸解液的脱毒能力,见图3-1图3-1 活性炭用量对酸解液脱毒效果的影响由图3-1可知,随着活性炭浓度的增加,酸解液中的糠醛与5-羟甲基糠醛含量在逐渐减小,所以活性炭对5-羟甲基糠醛与糠醛有一定的吸附能力,但当活性炭含量超过1%时,表中糠醛的曲线下降趋势缓慢,5-羟甲基糠醛的曲线无明显下降趋势;经方差分析得出活性炭的用量对糠醛

26、与5-羟甲基糠醛脱除有极显著影响(P0.01)。通过糠醛对苹果酸发酵影响发现当糠醛浓度大于100 mg/L时,对苹果酸发酵抑制作用增加不太明显;且有文献指出,随着活性炭含量的增大,对酸解液中糖含量有一定影响14。因此,选用活性炭含量为1%,此时糠醛脱去率为71.09%, 5-羟甲基糠醛脱去率为77.48%。3.2.2时间对酸解液脱毒效果的影响向小麦麸皮酸解液中添加活性炭含量均为1%,分别在60下搅拌20 min,30 min,40 min,50 min,60 min,观察其对小麦麸皮酸解液的脱毒能力14,见图3-2图3-2 时间对酸解液脱毒效果的影响通过图3-2可看出,2030 min的过程中

27、吸附性曲线有明显下降,但在3060 min无下降趋势;经方差分析得出时间对糠醛与5-羟甲基糠醛脱除有极显著影响(P0.01)。30 min后糠醛与5-羟甲基糠醛浓度上升原因可能是:活性炭的吸附为物理反应,过程是放热的,当吸附平衡时,温度过高破坏了吸附质和吸附剂间的范德华力,致使吸附量减少,所吸附的糠醛与5-羟甲基糠醛被解吸,导致吸附量下降16。因此,脱毒时间选用30 min,此时糠醛脱去率为75.82%,5-羟甲基糠醛脱去率为80.08%。3.2.3温度对酸解液脱毒效果的影响向小麦麸皮酸解液中添加活性炭含量均为1%,分别在30,40,50,60下搅拌30 min,观察其对小麦麸皮酸解液的脱毒能

28、力14,见图3-3图3-3 温度对酸解液脱毒效果的影响由图3-3可以看出,当温度在2030时,吸附性曲线呈下降趋势;3050时,吸附性曲线呈上升趋势;而5060时,呈下降趋势;经方差分析,发现温度对小麦麸皮酸解液中糠醛与5-羟甲基糠醛的脱去有显著影响(P0.05)。当温度为30时,吸附性曲线处于最低点,因此,可以确定脱毒温度应选择30,此时,糠醛脱去率为75.82%,5-羟甲基糠醛脱去率为77.31%综上所述,小麦麸皮酸解液的脱毒条件为活性炭含量1.0%、温度30、时间30 min。3.3探究糠醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵抑制的耐受性3.3.1寄生曲霉发酵苹果酸周期的探究以寄生曲霉为发酵菌种

29、,在恒温摇床中以200 r/min,30下发酵,每隔24小时测得苹果酸产生量如图3-4 图3-4寄生曲霉发酵苹果酸周期由图3-4可以看出,培养时间在12天时,寄生曲霉在此期间大量繁殖,苹果酸的产量增长缓慢;培养时间在23天时,苹果酸的产量增长比较明显;培养时间在34天时,寄生曲霉的数量以及活性都达到最佳值,苹果酸的产量增长速率达到最大;培养时间在45天时,碳源减少,苹果酸的增长速率变缓;当培养时间到第5天时,L-苹果酸的产量达到最大值;随着培养时间的增加,L-苹果酸的产量不再增长。因此,寄生曲霉发酵产生苹果酸的发酵周期为5天。3.3.2糠醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵的影响(1)糠醛对苹果酸发

30、酵的影响将发酵培养液分为两大组,每小组6瓶发酵液,含量都是50 mL,分别加入不同体积的糠醛,使得每组发酵液中糠醛含量成梯度,分别是0 mg/L,100 mg/L,300 mg/L,500 mg/L,700 mg/L,900 mg/L;每组接入的寄生曲霉种子培养基为2 mL,移入恒温摇床中在200 r/min,30条件下发酵5天。发酵完成后产酸量如图3-5 图3-5 不同浓度糠醛对苹果酸发酵的影响经方差分析可得出,糠醛含量对寄生曲霉发酵产酸量存在极显著影响(P0.01)。由图3-5可以看出糠醛对寄生曲霉发酵产生苹果酸有明显的抑制作用,随着发酵液中糠醛的浓度的增加,产酸量逐渐减小,即发酵液中糠醛

31、含量越高,苹果酸发酵产酸率就越低,糠醛的抑制作用就越明显。(2)5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵的影响将发酵培养液分为6组,每组发酵液含量是50 mL,分别加入不同体积的5-羟甲基糠醛,使得每组发酵液中5-羟甲基糠醛含量成梯度,分别是0 mg/L,100 mg/L,300 mg/L,500 mg/L,700 mg/L,900 mg/L;每组接入的寄生曲霉种子培养基为2 ml,移入恒温摇床中在200 r/min,30条件下发酵5天。发酵完成后产酸量如图3-6图3-6 不同浓度5-羟甲基糠醛对苹果酸发酵的影响经方差分析可得出,5-羟甲基糠醛含量对寄生曲霉发酵产酸量存在极显著差异(P0.01)。由图3-6

32、可以看出5-羟甲基糠醛对寄生曲霉发酵产生苹果酸也有明显的抑制作用,随着发酵液中5-羟甲基糠醛的浓度的增加,产酸量逐渐减小。但在5-羟甲基糠醛浓度高于300 mg/L时,曲线下降趋势变得缓慢,即再增加5-羟甲基糠醛含量时,其抑制作用随着5-羟甲基糠醛浓度增加而增加的不明显。综上所述可知,糠醛与5-羟甲基糠醛对寄生曲霉发酵产生苹果酸有明显的抑制作用。糠醛的含量越高,对苹果酸发酵的抑制作用越明显;而5-羟甲基糠醛浓度在高于300 mg/L时其抑制作用便不随其浓度的增加而有明显的提高。3.4小麦麸皮酸解液脱毒前后对苹果酸发酵的影响分别以葡萄糖,小麦麸皮酸解液,以及脱毒后的小麦麸皮酸解液为碳源,发酵产酸

33、量如图3-7所示图3-7 不同碳源发酵的产酸量经测量以葡萄糖、小麦麸皮酸解液以及脱毒后的小麦麸皮酸解液为碳源发酵苹果酸产酸量分别是25.43%、8.32%、15.56%,经方差分析得出不同碳源对苹果酸发酵有显著影响(P0.05)。从图3-7可以看出,小麦麸皮酸解液脱毒后发酵苹果酸的产量明显比未脱毒前高,因此对小麦麸皮酸解液脱毒可以明显提高其发酵产酸量。4 讨 论小麦麸皮酸解过程产生的糠醛与5-羟甲基糠醛对苹果酸抑制的作用随其浓度的升高而增加;使用活性炭对小麦麸皮酸解液进行脱毒,经探究得出脱毒的最适条件是在活性炭含量1.0%、温度30、时间30 min,在此条件下,小麦麸皮酸解液中的糠醛与5-羟

34、甲基糠醛的除去率在70%以上;通过此条件对小麦麸皮酸解液进行脱毒可以使得酸解液中糠醛与5-羟甲基糠醛含量下降到150 mg/L以下,可以使得这两种抑制物对酸解小麦麸皮酸解后的发酵抑制作用降低到最小。如今,苹果酸的需求量越来越大,出现了供不应求的局面5,小麦麸皮作为一种可再生资源,其作为原料发酵苹果酸是一种经济、可行的方式。小麦麸皮酸解成糖化液后,须使用活性炭在适合的条件下对其进行脱毒处理,使小麦麸皮酸解液中糠醛与5-羟甲基糠醛的抑制物浓度降低,以减小它们对酸解小麦麸皮发酵产生苹果酸的抑制作用,提高苹果酸发酵的转化率。参考文献1 刘建龙,刘建军,杨连生酶转化法酶转化法及微生物发酵法生产L-苹果酸

35、的研究进展J中国酿造,2005.(7):5-72 林海龙全生物法生产L-苹果酸的研究进展J安徽农业科学,2011,39(3):1523-15243 黄艳红,田延军,郝夕祥等L-苹果酸代谢流分析及高产菌株构建J山东食品发酵,2009,3(154):3-84 郭娜,姜绍通,李兴江等小麦麸皮纤维烯酸水解糖化工艺研究J安徽农业科学,2012,40(24):12232-122345 汪多仁,陈体庆L-苹果酸的开发与应用J饮料工业,2004,7(1):21-266 Yoav Peleg,Ayla Barak,Michael C et alMalic acid accumulationby Aspergil

36、lusflavus,.13C-NMR and isozyme analyses JApplMicrobiol Biotechnol,1989,(30):176-1837 O.Pines,S.Even-RamThe cytosolic pathway of L-malicacid synthesis in Saccharomyces cerevisiae: the role of fumaraseJAppl Microbiol Biotechnol,1996,(46):393-3998 王普,虞炳钧生物转化法生产L-苹果酸的研究J食品与发酵工业,1996,(1):18-239 郝大伟,裘娟萍生物

37、催化富马酸加氨合成天门冬氨酸的研究进展J氨基酸和生物资源,2008,(2):39-4310 张玉玉,宋弋,李全宏食品中糠醛和5_羟甲基糠醛的产生机理、含量检测及安全性评价研究进展J食品科学,2012,33(5):275-28011 汪勇,倪永年,朱惠芳液相色谱法测定酱油中的乙酰丙酸J南昌大学学报,2006,30(1):40-4212 Stark J B,Goodban A E,Owens H SPaper chromatography of organic acidsJAnalytical Chemistry,1951,23(3):413-41513 尹志梅,杨青,吴秀敏等L一苹果酸定量检测方

38、法J中国酿造,1999,4:33-3514 吴昊,姚嘉旻,刘宗敏等玉米籽皮稀酸水解液脱毒发酵制备丁二酸的可行性J农业工程学报,2009,25(2):267-27215 胡坚纯L-苹果酸产生菌黄曲霉Aspergillus flavus H-98发酵特性的研究J食品与发酵工艺,1999,5(2):1-916 王正烈,周亚平,李松林等物理化学M北京:高等教育出版社,20011. 基于C8051F单片机直流电动机反馈控制系统的设计与研究2. 基于单片机的嵌入式Web服务器的研究 3. MOTOROLA单片机MC68HC(8)05PV8/A内嵌EEPROM的工艺和制程方法及对良率的影响研究 4. 基于模

39、糊控制的电阻钎焊单片机温度控制系统的研制 5. 基于MCS-51系列单片机的通用控制模块的研究 6. 基于单片机实现的供暖系统最佳启停自校正(STR)调节器7. 单片机控制的二级倒立摆系统的研究8. 基于增强型51系列单片机的TCP/IP协议栈的实现 9. 基于单片机的蓄电池自动监测系统 10. 基于32位嵌入式单片机系统的图像采集与处理技术的研究11. 基于单片机的作物营养诊断专家系统的研究 12. 基于单片机的交流伺服电机运动控制系统研究与开发 13. 基于单片机的泵管内壁硬度测试仪的研制 14. 基于单片机的自动找平控制系统研究 15. 基于C8051F040单片机的嵌入式系统开发 16

40、. 基于单片机的液压动力系统状态监测仪开发 17. 模糊Smith智能控制方法的研究及其单片机实现 18. 一种基于单片机的轴快流CO,2激光器的手持控制面板的研制 19. 基于双单片机冲床数控系统的研究 20. 基于CYGNAL单片机的在线间歇式浊度仪的研制 21. 基于单片机的喷油泵试验台控制器的研制 22. 基于单片机的软起动器的研究和设计 23. 基于单片机控制的高速快走丝电火花线切割机床短循环走丝方式研究 24. 基于单片机的机电产品控制系统开发 25. 基于PIC单片机的智能手机充电器 26. 基于单片机的实时内核设计及其应用研究 27. 基于单片机的远程抄表系统的设计与研究 28

41、. 基于单片机的烟气二氧化硫浓度检测仪的研制 29. 基于微型光谱仪的单片机系统 30. 单片机系统软件构件开发的技术研究 31. 基于单片机的液体点滴速度自动检测仪的研制32. 基于单片机系统的多功能温度测量仪的研制 33. 基于PIC单片机的电能采集终端的设计和应用 34. 基于单片机的光纤光栅解调仪的研制 35. 气压式线性摩擦焊机单片机控制系统的研制 36. 基于单片机的数字磁通门传感器 37. 基于单片机的旋转变压器-数字转换器的研究 38. 基于单片机的光纤Bragg光栅解调系统的研究 39. 单片机控制的便携式多功能乳腺治疗仪的研制 40. 基于C8051F020单片机的多生理信

42、号检测仪 41. 基于单片机的电机运动控制系统设计 42. Pico专用单片机核的可测性设计研究 43. 基于MCS-51单片机的热量计 44. 基于双单片机的智能遥测微型气象站 45. MCS-51单片机构建机器人的实践研究 46. 基于单片机的轮轨力检测 47. 基于单片机的GPS定位仪的研究与实现 48. 基于单片机的电液伺服控制系统 49. 用于单片机系统的MMC卡文件系统研制 50. 基于单片机的时控和计数系统性能优化的研究 51. 基于单片机和CPLD的粗光栅位移测量系统研究 52. 单片机控制的后备式方波UPS 53. 提升高职学生单片机应用能力的探究 54. 基于单片机控制的自

43、动低频减载装置研究 55. 基于单片机控制的水下焊接电源的研究 56. 基于单片机的多通道数据采集系统 57. 基于uPSD3234单片机的氚表面污染测量仪的研制 58. 基于单片机的红外测油仪的研究 59. 96系列单片机仿真器研究与设计 60. 基于单片机的单晶金刚石刀具刃磨设备的数控改造 61. 基于单片机的温度智能控制系统的设计与实现 62. 基于MSP430单片机的电梯门机控制器的研制 63. 基于单片机的气体测漏仪的研究 64. 基于三菱M16C/6N系列单片机的CAN/USB协议转换器 65. 基于单片机和DSP的变压器油色谱在线监测技术研究 66. 基于单片机的膛壁温度报警系统

44、设计 67. 基于AVR单片机的低压无功补偿控制器的设计 68. 基于单片机船舶电力推进电机监测系统 69. 基于单片机网络的振动信号的采集系统 70. 基于单片机的大容量数据存储技术的应用研究 71. 基于单片机的叠图机研究与教学方法实践 72. 基于单片机嵌入式Web服务器技术的研究及实现 73. 基于AT89S52单片机的通用数据采集系统 74. 基于单片机的多道脉冲幅度分析仪研究 75. 机器人旋转电弧传感角焊缝跟踪单片机控制系统 76. 基于单片机的控制系统在PLC虚拟教学实验中的应用研究77. 基于单片机系统的网络通信研究与应用 78. 基于PIC16F877单片机的莫尔斯码自动译

45、码系统设计与研究79. 基于单片机的模糊控制器在工业电阻炉上的应用研究 80. 基于双单片机冲床数控系统的研究与开发 81. 基于Cygnal单片机的C/OS-的研究82. 基于单片机的一体化智能差示扫描量热仪系统研究 83. 基于TCP/IP协议的单片机与Internet互联的研究与实现 84. 变频调速液压电梯单片机控制器的研究 85. 基于单片机-免疫计数器自动换样功能的研究与实现 86. 基于单片机的倒立摆控制系统设计与实现 87. 单片机嵌入式以太网防盗报警系统 88. 基于51单片机的嵌入式Internet系统的设计与实现 89. 单片机监测系统在挤压机上的应用 90. MSP430单片机在智能水表系统上的研究与应用 91. 基于单片机的嵌入式系统中TCP/IP协议栈的实现与应用92. 单片机在高楼恒压供水系统中的应用 93. 基于ATmega16单片机的流量控制器的开发 94. 基于MSP430单片机的远程抄表系统及智能网络水表的设计95. 基于MSP430单片机具有数据存储与回放功能的嵌入式电子血压计的设计 96. 基于单片机的氨分解率检测系统的研究与开发 97. 锅炉的单片机控制系统 98. 基于单片机控制的电磁振动式播种控制系统的设计 99. 基于单片机技术的WDR-01型聚氨酯导热系数测试仪的研制 100. 一种RISC结构8

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