生物碱1市公开课一等奖百校联赛特等奖课件.pptx

第四节第四节 生物碱提取分离生物碱提取分离一.总生物碱提取 （一）水或酸水提取法 1.无机酸水（多用）水 （少用）第1页 2.方法：浸渍、渗滤、煎煮法。优点：无机酸盐在水中溶解度大，方法简便缺点：体积大、水溶性杂质多、难浓缩 3.初步去粗取精第2页3.1 离子交换树脂法强H+型阳离子交换树脂B+（树脂）中性水或乙醇洗杂质BHCl-BH+Cl-+R-H+BH R-BH+H第3页NH3水碱化 B（树脂）凉干亲脂有机溶剂提取总BR-H+NH3.H2O R-NH4+B+H2O含NH3水碱性乙醇洗脱B（较纯）酸水（乙醇）洗脱+BH（较纯）R-H+NH3.H2O R-NH4+B+H2O3.2 萃取法碱化酸水B 亲脂有机溶剂萃取总B第4页（二）醇类溶剂提取法 溶剂溶剂：甲、乙醇 60-80%乙醇、酸醇（B或BH+）方法方法：浸渍、渗滤、回流、连续回流法 优点：应用广泛，水性杂质少 缺点：脂性杂质多第5页除杂质除杂质：醇提取液 回收溶剂 酸水酸水 碱碱化化 亲脂性溶剂萃取（重复）亲脂性溶剂萃取（重复）水洗 干燥回收溶剂总总B B 注意注意：碱化前先加溶剂稀酸水液稀酸水液离子交换树脂离子交换树脂总总B B（三）亲脂性有机溶剂提取法 1.溶剂溶剂：氯仿、二氯甲烷、苯 乙醚（可先脱脂）第6页2.方法方法：浸渍、回流、连续回流法 BH+碱化 有机溶剂提取 （必要时重复进行，较纯）弱碱 水湿润 有机溶剂提取 （解吸附）（冷或热法）eg 长春碱和长春新碱PKa7.4 弱碱，含量极微 （长春花中60多種）水湿润苯提取 （注意防事故）第7页3.纯化纯化 提取液浓缩 酸水萃取 碱化 有机溶剂提取 B（较纯）优点:水溶性杂质少.缺点:设备要求高,溶剂价高、欠安全第8页二.生物碱分离 总B 几个类别 个别 （也有直接得到）（一）生物碱类别分离 按碱性、酚性、水溶性分五类 （P329 流程图投影）第9页（二）生物碱碱性差异分离1.利用生物碱pH梯度萃取法梯度萃取法：总B中各单体间碱性常存一定差异，可在pH不一样条件下进行分离，此法称。总B 溶CHCl3 酸性缓冲液萃取（PH高低）碱化 CHCl3等萃取，强碱先出回收溶剂 各B第10页总B溶酸水中加碱（pH由低高），CHCl3 等萃取，弱碱先出 回收溶剂各B 多缓冲PC（初步了解碱度）第11页eg千金藤非酚性叔胺碱各B分离 第12页两碱性差异生物碱，调pH简单萃取如莨菪碱和东莨菪碱（三）利用生物碱或其盐溶解度差异分离第13页eg1苦参中苦参碱和氧化苦参碱 第14页eg2中国粗榧中三尖杉碱和高三尖杉碱第15页eg3麻黄中麻黄碱和伪麻黄碱 (水中)草酸麻黄碱草酸伪麻黄碱 I-麻黄碱(1R,2S)d-伪麻黄碱(1S,2R)第16页（四）生物碱特殊功效基不一样分离 酚羟基：溶于NaOH 如鸦片中吗啡和可卡因分离 NaOH：溶-可卡因，不溶-吗啡 第17页内酯或内酰胺：NaOH皂化开环 酸化闭环 如喜树碱提取分离（P331工艺）第18页如苦参碱第19页其它利用衍生物性质差异分离 如异石榴碱氨基甲酸乙酯与 甲基异石榴碱 bp差异-蒸馏而分离第20页（五）色谱法分离 含量低，结构近似者1、吸附色谱法吸附剂：硅胶、氧化铝及纤维素、聚酰胺洗脱剂：苯、氯仿、乙醚或混合 有时需重复操作第21页实例：东贝母个甾体生物碱分离（331）第22页2、分配色谱法结构尤其靠近，吸附色谱分离不理想，用分配色谱分配色谱 eg三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱结构仅差一个亚甲基 第23页 搜集洗脱液第24页3、高效液相色谱法（HPLC）快速、灵敏度高、分离能力强，但分离量少。很多其它色谱法难分离混合物可用此法其它：制备性分离-中压或低压柱分离，或制备性TLC还有气相、凝胶过滤、电泳等总之，普通需各种方法配合应用第25页实例:花椒根中生物碱提取分离 用了几个柱色谱(投影)单体单体-TLC检验纯度纯度：三种溶剂展开单一斑点，结晶必重结晶-晶体均匀，色泽均匀，熔距短（1-2），再深入判定第26页三.水溶性生物碱提取与分离 季胺、COOH+N，可溶水和醇，不溶亲脂性有机溶剂水（酸水）、醇类提浓缩酸水碱化有机溶剂萃取碱水中 B分离分离（一）沉淀法碱水中B弱酸+生物碱试剂复合盐或盐净化、水解水溶性B第27页1.雷氏胺盐沉淀法试验室操作步骤（333）沉淀碱水酸化（PH2-3加新鲜雷氏胺盐饱和液生物碱雷氏盐水洗、抽干第28页柱色谱净化丙酮溶解生物碱雷氏盐过滤 丙酮液 上上AlAl2 2O O3 3柱柱Me2CO洗脱加Ag2SO4饱和液B.H2SO4 加BaCl2液B.HCl+BaSO4+AgCl过滤、蒸干水溶性B.HClB.HCl也可将丙酮液经过氯离子型阴离子型经过氯离子型阴离子型交换树脂柱交换树脂柱 B.HClB.HCl第29页2.磷钨酸、硅钨酸沉淀剂 生物碱复合物用Ba(OH)2 或 Ca(OH)2分解3.重金属盐沉淀剂 生物碱复合物 通H2S气体分解 第30页（二）溶剂法 碱水用与水不相溶有机溶剂萃取（正丁醇、异戊醇、氯仿甲醇混合）回收溶剂 水溶性B(三）离子交换树脂法 碱水 阳离子交换树脂 酸水洗脱 B.HCl 碱水洗脱 B第31页（四）其它 利用溶解度不一样分离+盐析 色谱法也惯用，不采取PH梯度法第32页 四 提取分离对生物碱结构影响 溶剂、酸碱、色谱、光线、空气等（一）溶剂影响-各种溶剂 eg1异喹啉类中苯拼菲啶类 碱醇中重结晶C8位引入烷氧基 第33页eg2罂粟果中血根碱 碱性丙酮8-丙酮基二氢血根碱 （P101）eg3常山根中常山碱 氯仿中加热 异常山碱(二）酸碱影响eg1 l-莨菪碱碱液 稀醇互变反应阿托品（消旋物）第34页eg2龙胆科中龙胆苦碱 氨水碱化龙胆碱eg3金鸡纳树皮中奎宁 酸化开环为奎宁毒eg4普托品型异喹啉类 叔胺碱 H+季胺碱 coulteropine三环盐及多环盐第35页(三）色谱分离影响 三氧化铝色谱法有时使结构改变eg飞燕草属中（delphinium staphisagria)种飞燕草碱 AL2O3 飞燕啶碱（新）（四）其它影响 eg1长春花属无水长春花碱 O2 白长春花碱 第36页或/CHCL3（Me2CO)中室温72h 证实eg2小檗科狮足草属植物 leontice leontopalum 花瓣碱 雷氏盐（或其氯化物、碘化物）离子交换树脂 狮足草碱 （霍夫曼降解）第37页