服用非那雄胺的前列腺增生患者前列腺转录组景观特征分析.pdf

现代泌尿外科杂志临床研究服用非那雄胺的前列腺增生患者前列腺转录组景观特征分析周朗,刘可,陆敏,毕海,霍霄4,马潞林,刘承3（北京大学第三医院：1.泌尿外科；2.病理科，北京10 0 19 1；3.上海交通大学医学院附属第一人民医院泌尿外科临床医学中心，上海2 0 0 0 8 0;4.北京大学第三医院医学创新研究院基础医学研究中心，北京10 0 19 1)Analysis of prostate transcriptome landscape characteristics in benign prostatehyperplasia patients taking finasterideZHOU Lang,LIU Ke,LU Min,BI Hai,HUO Xiao*,MA Lulin,LIU Cheng(1.Department of Urology,2.Department of Pathology,Peking University Third Hospital,Beijing 1oo19l;3.Clinical Medical Center of Urology,Shanghai General Hospital,Shanghai 200080;4.Basic Medical ResearchCenter,Institute of Medical Innovation,Peking University Third Hospital,Beijing 100191,China)ABSTRACT:Objective To explore the effects of finasteride on the gene expression in patients with benign prostatichyperplasia(BPH)through transcriptome analysis.Methods Postoperative prostate tssues from patients who underwentprostatectomy at Peking University Third Hospital during Oct.2020 and Oct.2021 were collected.The patients were divided intomedication group and non-medication group based on whether they had taken finasteride for a long time before surgery,with8 patients in either groups.Transcriptome sequencing analysis was performed and the results were validated with qPCR andimmunohistochemistry analysis.Results Compared with the non-medication group,857 up-regulated and 806 down-regulatedgenes were screened in the medication group.Pathway enrichment analysis showed that finasteride induced down-regulation ofvascular endothelial growth factor D(VEGFD)expression in the focal adhesion pathway.Inter group network analysissuggested that the calcium signaling pathway was key in the entire process.GSEA enrichment analysis further revealed the upregulation of CD38 gene expression in the calcium signaling pathway.The qPCR and immunohistochemistry analysis supportedthe transcriptome results mentioned above,and found that androgen receptor(AR)expression was also increased.ConclusionFinasteride reduces prostate microvascular formation by downregulating the expression of VEGFD in the focal adhesionpathway,thereby reducing the risk of bleeding during prostate hyperplasia surgery.Long-term use of finasteride leads to the upregulation of CD38 expression in the calcium signaling pathway,which may lead to the development of finasteride resistance.KEY WORDS:benign prostate hyperplasia;finasteride;transcriptome analysis;vascular endothelial growth factor D;CD38;androgen receptor摘要：目的通过转录组分析从基因表达方面探讨非那雄胺对良性前列腺增生（BPH)患者的影响。方法收集2 0 2 0 年10 月一2021年10 月于北京大学第三医院接受前列腺电切术的患者，根据患者术前是否长期（6 个月）服用非那雄胺分为用药组和非用药组，两组各8 例。对两组患者的前列腺组织标本进行转录组测序分析，定量聚合酶链式反应（qPCR)及免疫组化分析验证其结果。结果用药组与非用药组相比，上调基因8 57 个，下调基因8 0 6 个。通路富集分析显示，非那雄胺导致焦点粘附通路中血管内皮生长因子D型（VEGFD)表达下调；组间网络分析提示钙信号通路为整个过程的关键通路；进一步对其进行基因集富集分析（GSEA)发现分化簇38(CD38)基因表达上调。qPCR及免疫组化验证支持上述转录组结果，同时发现雄激素受体表达升高。结论非那雄胺通过下调焦点粘附通路中VEGFD的表达减少前列腺微血管生成，进而降低BPH手术出血的风险，长期服用非那雄胺导致钙信号通路中CD38表达上调，可能与非那雄胺抵抗有关。关键词：良性前列腺增生；非那雄胺；转录组分析；血管内皮生长因子D型；分化簇38；雄激素受体中图分类号：R697.32良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，收稿日期：2 0 2 3-0 8-15基金项目：国家自然科学基金项目（No.82070778）通信作者：刘承，主任医师。E-mail：c h e n g liu m d 16 3.c o m作者简介：周朗，硕士研究生在读，住院医师。研究方向：前列腺增生。E-mail:刘可，副主任医师。研究方向：前列腺增生，尿动力学。E-mail:。系共同第一作者2024年2 月第2 9 卷第2 期文献标志码：A修回日期：2 0 2 3-10-2 3101D0l:10.3969/j.issn.1009-8291.2024.02.002BPH)是老年男性常见的外科疾病,50 岁以上的发病率约为50%，而8 0 岁以上的发病率超过8 0%1-2 1BPH患者前列腺移行带的上皮及基质细胞缓慢增殖导致前列腺体积增大，压迫尿道造成膀胱出口梗阻，从而导致以排尿困难、尿频、尿急、尿失禁等为主的下尿路症状(lower urinary tract symptoms,LUTS)的发生。http:/jmurology.xjtu.edu,cn;zgmnwk.cug.top102BPH的治疗药物主要包括两类：受体阻滞剂一一主要用于减弱近端尿道、膀胱颈部及前列腺平滑肌的收缩力，从而缓解膀胱出口梗阻症状3；5还原酶抑制剂（5alpha-reductase inhibitor，5A RI)抑制睾酮转化为生物活性更强的双氢睾酮，从而下调雄激素受体（androgen receptor，A R)的活性，减小前列腺体积，控制病情进展4。5ARI主要包括2 种临床疗效相似的药物：非那雄胺可抑制2 型5还原酶；度他雄胺可抑制1型和2 型5还原酶5，国内5ARI药物以非那雄胺为主。目前对于非那雄胺的研究多为临床研究或集中在组织细胞层面，本研究旨在通过对长期服用非那雄胺的BPH患者进行转录组景观特征分析，从基因方面研究非那雄胺对BPH患者的影响。1资料与方法1.1研究材料本研究材资料取自2 0 2 0 年10 月一2021年10 月于北京大学第三医院进行前列腺电切术的患者，术后留取少许前列腺组织进行转录组测序分析，同时根据患者术前是否长期服用非那雄胺分为用药组和非用药组，共入组16 例患者（两组各8 例）。本研究已通过北京大学生物医学伦理委员会批准（批准号IRB00006761-M2023047)。纳人标准：用药组：持续服用非那雄胺5mg1次/d半年以上，前列腺进行性增大且疾病进展需手术治疗的BPH患者；非用药组：未服用非那雄胺，前列腺进行性增大且疾病进展需手术治疗的 BPH患者。排除标准：服用抗肿瘤药物者；经尿道前列腺切除手术史者；未签署知情同意书者。其他材料 NanoPhotometer spectrophotometer、Agilent2100obioanalyzer购自上海吉凯基因有限公司；建库试剂盒为Illumina的NEBNextUltraTMRNALibrary PrepKit;甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glcer-aldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、分化簇 38(cluster of differentiation 38,CD38）、血管内皮生长因子D型（vascular endothelial growth factorD,VEGFD）、A R引物由上海生工生物工程公司合成；TalentqPCRPreMix（SYBR G r e e n）、Fa s t K i n gRTKit(WithgDNase)购自北京天根生化科技有限公司；QuantStudio3来自北京大学第三医院泌尿外科实验室GAPDH、C D 38、V EG FD、A R抗体购自武汉博士德生物工程有限公司。1.2研究方法1.2.1RNA的提取与检测采用标准提取方法从前列腺组织中提取RNA，然后用琼脂糖凝胶电泳确J Mod Urol,Vol.29 No.2 Feb.2024定前列腺样品的RNA完整度以及是否存在DNA污染，接着用NanoPhotometerspectrophotometer检测RNA纯度，再用Agilent2100bioanalyzer精确检测RNA完整性。1.2.2文库构建与质检以总RNA作为建库起始RNA,要求其总量1g。将含 polyA尾的mRNA富集起来，然后在NEBFragmentationBuffer体系中加入二价阳离子，目的是随机打断mRNA并以其作为模版,通过逆转录酶合成第一链cDNA,随后降解RNA链和合成第二链cDNA。得到双链cDNA后进行末端修复并加A尾，从中筛选出2 50 30 0 bp大小的cDNA片段进行聚合酶链式反应（polymerasechainreaction,PCR)扩增，最终得到的PCR产物经过纯化后作为文库。1.2.3测序数据分析及通路富集分析进行主成分分析确保两组之间具有可比性，使用DESeq2软件（1.16.1)分析两组间的差异性表达并筛选差异基因，筛选标准为log2Fold changell,P0.05。通过ClusterProfiler（3.4.4）软件实现差异表达基因的GO富集分析和KEGG通路分析，以P0.05作为为显著性富集的阈值。1.2.4定量聚合酶链式反应（quantitative PCR，qPCR)验证分析将转录组文库构建时得到的cDNA用SYBRGreen探针进行qPCR反应，剔除浓度不合格及因保存问题无法使用的样品后，两组各保留5例标本。使用QuantStudio3，反应条件：9 52min预变性、9 510 s变性、6 0 30 s退火延伸，反应40 个循环。引物序列见表1。结果分析指标为阈值循环数（Ct值），以2-AACt代表基因的相对表达量。表1引物序列基因名称GAPDHF:AGATCCCTCCAAAATCAAGTGGR:GGCAGAGATGATGACCCTTTVEGFDF:TGTTCCGATGTGGTGGCTGTTGR:TGGTTCCTGGAGATGAGAGTGGTCCD38F:CAACTCTGTCTTGGCGTCAGTATCCR:AAGGTAGCCTAGCAGCGTGTCCARF:GCTCCGCTGACCTTAAAGACATCCR:ACACCGACACTGCCTTACACAACGAPDH:甘油醛-3-磷酸脱氢酶；VEGFD：血管内皮生长因子D型；CD38：分化簇38；AR：雄激素受体；F：正向引物；R：反向引物。1.2.5免疫组化验证患者术后前列腺组织经由北京大学第三医院病理科统一进行石蜡包埋，切片。后http:/jmurology.xjtu.edu,cn;zgmnwk.cug.top引物序列(5 3)现代泌尿外科杂志续实验过程：切片脱蜡至水一抗原修复一3%（体积分数)的双氧水处理一画圈一血清封闭一一抗4过夜孵育一二抗室温孵育一显色一苏木素染核一脱水、透明、封片一镜检。免疫组化结果分析应用Aipathwell软件进行半定量分析，自动识别图像上阳性细胞及阳性强度并进行数据化分析，分析指标包括阳性细胞密度（阳性细胞数/待测组织面积）、平均吸光度值（累积吸光度值/阳性像素面积）、免疫反应评分(immune reactive score,IRS)（阳性强度X阳性细胞比率），每个病例每项指标取3张图片。1.3统计学方法用GraphpadPrism软件进行数据分析。对各组数据进行正态性检验（Shapiro-Wilk检验），若符合正态分布，数据用均数土标准差（士s)表示，组间采用独立样本t检验；若不符合正态分布，数据用中位数（范围）表示，组间采用非参数检验(Mann WhitneyU检验）进行比较，以P0.05，表2）。2.2主成分分析为了评估样本组间差异及组内重复情况，本文对用药组与非用药组样本进行了主成分分析（图1）。从图中可以看出两组样本组内聚合、组2024年2 月第2 9 卷第2 期103间分散，具有良好的可比性。表2 用药组与非用药组BPH患者的术前资料比较(士s)用药组临床信息(n=8)年龄/岁72.5011.45BMI22.982.74术前PSA2.911.78/(ng/mL)术前B超74.7938.1785.4248.060.490前列腺体积/cmBMI:身体质量指数；PSA：前列腺特异性抗原。回用药组回非用药组0.40-0.4PC1:第一主成分;PC2：第二主成分。图1用药组与非用药组样本的主成分分析图2.3差异基因筛选用药组患者与非用药组相比，共筛选出16 6 3个差异基因，其中上调基因8 57 个，下调基因8 0 6 个（图2、3），差异基因表达在组内基本一致，且组间差异较为明显。非用药组(n=8)72.126.8923.252.403.943.40-0.250.25PC1(71.38%)3210-1-2-3t值P值0.0790.9830.2060.839-0.7620.4590.6320.50聚类211234567用药组图中颜色越红，基因表达量越高；颜色越蓝，基因表达量越低。图2 用药组与非用药组患者差异基因表达聚类热图8123非用药组45678http:/jmurology.xjitu.edu,cn;zgmnwk.cug.top10410.07.5(d)01801-5.02.50-4图3用药组患者差异基因火山图2.4富集分析2.4.1GO功能富集分析GO是描述基因功能的综合性数据库，可分为生物过程和细胞组成分子功能3个部分，本研究主要对生物过程进行分析。主要富集的生物过程包括：组织细胞的发育、血液循环的调控、肌肉和心脏收缩的调控、离子转运过程的调控和细胞粘附过程等（图4）。regulation.ofsystemprocessanatomical structuredevelopmentdevelopmental processregulation of blood circulationmuscle contractionregulationoflocalizationmusclesystemprocessanatomical structure morphogenesisregulationof heartcontractionregulationofion transportregulation of membrane potentialregulationoftransportbiologicaladhesioncelladhesionregulation of biological qualityiontransmembranetransportiontransportmetalion transportsignalingcelljunction organization图4GO功能富集分析（排名前2 0)2.4.2KEGG通路富集分析及组间网络分析KEGG是整合了基因组、化学和系统功能信息的综合性数据库。主要富集的通路主要包括：钙信号通路、血管平滑肌收缩通路、焦点粘附通路、细胞外基质(extracellular matrix，ECM)受体相互作用通路等(图5）。焦点粘附是细胞与外部基质之间的一个重要连接点，它由多个蛋白质组成，包括整合素、钙蛋白、肌动蛋白等。焦点粘附的形成和稳定对于细胞调亡、增殖、迁移、分化等过程都具有重要作用。在该通J Mod Urol,Vol.29 No.2 Feb.2024路上发现VEGFD表达下调（表3），而VEGFD的表达可以调控血管生成，其在用药组表达下调提示非那雄胺可以减少前列腺微血管的形成，进而减少BPH手术的出血，这与在临床及细胞培养上的研究结论相一致6-7。下调基因：8 0 6正常基因：138 45上调基因：8 57阅值线-201og2(FC)0.15Calcium signaling pathvayVascular smooth muscle.contractionArrhythmogenic right ventricular cardio.Dilatedcardiomyopathy(DCM)CGMP-PKG signaling pathwayNeuroactive ligand-receptorinteractionFocaladhesionECM-receptorinteractionCAMP signaling pathwayArginine and proline metabolism240.200.25富集因子-log10(P值)654CircadianentrainmentHypertrophiccardiomyopathy(HCM)Glutamatergic synapseInsulin secretionOxytocin signaling pathwayAdrenergic signaling incardiomyocytesCholinergic synapseSalivary secretionPlateletactivationAxon guidance图5KEGG通路富集分析（排名前2 0)表3VEGFD、C D 38、A R差异基因统计情况基因log2Fold changeVEGFD-1.140 6CD382.243 6-1og10(P值)AR181614基因数目100?2003004005006000.30基因数目：2 0：3040500.150.20富集因子表达差异倍数2.214.740.44251.36VEGFD：血管内皮生长因子D型CD38:分化簇38；AR：雄激素受体。KEGG组间网络分析在通路分析的基础上进一步明确了各个通路之间的互相作用，能更加直观地反映各个通路间的联系，其中钙信号通路在KEGG组间网络分析中作为关键节点通路，与大部分通路相关联，研究意义重大（图6）。2.4.3钙信号通路基因集富集分析（gene setenrichment analysis,GSEA)）为了进一步明确钙信号通路相关基因的变化情况，本文对钙信号通路基因单独进行了GSEA富集分析，并绘制了显著性排名前2 0 的基因表达情况（图7）。从结果中发现，用药组患者相比于非用药组，CD38基因不仅上调显著，而且组间差异性较明显。2.5qPCR验证两组患者各个差异基因相对表达结果见表4，绘制箱型图结果见图8。结果显示，用药组患者相对于非用药组，VEGFD基因表达下降，CD38基因表达升高，AR基因表达升高（P均0.05）。q PC R验证结果与转录组分析结果一致。0.250.30http:/;zgmnwk.cug.top现代泌尿外科杂志表4用药组与非用药组患者 qPCR基因表达结果基因用药组(n=5)VEGFD0.0687(0.00340.3453)CD3862.41(8.5481.57)AR22.41(18.2537.11)VEGFD：血管内皮生长因子D型；CD38：分化簇38；AR：雄激素受体。Cocalineadlictionbeta-AlaninemetabolismMorphine addiction2024年2 月第2 9 卷第2 期Amphetarineadition105中位数(范围),2-ACi非用药组(n=5)P值0.723 8(0.48292.773 0)0.0165.33(1.0712.71)0.0321.94(0.1212.64)0.016ButanoatemetablsmNicotine adictionPhenyalanine metabolsmPhenylalanine,tyrostne and tryptophan biosynthestsArginine and prolinemetabollsmDopamineraic syapseTyroslpemetabolsmCircadiati entrainmentGlutamatergic synapseLong-term depressionGnPHsecretiodIntammatory mediator regulaton orrp-CbannglsSerotonergic synapseArachidontcacid metablsh/InsullnetionsecrAldosterone-reguiated Sodum reabsorpton-1og10(P值)AGE-RAGE sigpaling patiway in diabticomplicationssteroidbiossynthesisMelanogehestsArmyotrophiclateralsclerosis(ALS)AmoebiasisLonp-tormpotentiationMAPK signalng pathwayRas signaling,pathweyRopl slomaing pathwayTayroid hoomene signatng,pathwayPlatelet activatieAldosterone syntheslsand secretiopSallvaryseretionProtein digestion and absorption一46Cholesterolmetabollsm811Axon guldancesraua hormone synthestfrotolycans in caneelRepulation oractnecAMPstanaling pathwayAdheransjunctionAdrenerngic sigraling in cardiotyoeCrdiacmuscleeontractionTiant junctsonCellaesion moleules(CAMs)vitamin digeston and absorptionWntsignaling pathwaycoytosketetonArrhythmogenicrghtventricular cardiomyopatay(aRvc)钙信号通路FroenladhesionHypertrophic cardionvyopatby CHiCM)Dilated cardiotnyopathy(DCM)焦点粘附Bacterl linvaslon orepltheal cellsSmall callung.cancerECM-receptorinteraction基因数目2MicroRNAs.incancer9162229红色表示上调通路，绿色表示下调通路。图6 KEGG组间网络分析CHP2TACR3CNA15ERBB4ERBB3ERBB2GRPRCCKBRCHRM1CD38ADRB1ADRB2CDMK2BGRIN1CALML3CACNAIGADCY1NOS1ITPR2EGFR12图7用药组与非用药组患者钙信号通路基因集富集分析（GSEA)中排名前2 0 的差异基因表达3210-1-2-3345678用药组颜色越红表示该基因表达越强，颜色越蓝表示该基因表达越弱。12345678非用药组http:/jmurology.xjtu.edu,cn;zgmnwk.cug.top1062.6免疫组化验证免疫组化结果见表5，染色结果见图9。相较于非用药组患者，用药组VEGFD染色阳性细胞密度及平均吸光度值偏低（P0.05）；C D 38染色阳性细胞密度及平均吸光度值用药组高于非用515041003210用药组非用药组A：血管内皮生长因子D型（VEGFD);B:分化簇38(CD38);C:雄激素受体（AR)；*组间比较P0.05。图：用药组与非用药组患者qPCR分析基因表达结果箱型图（n=5）表5免疫组化半定量结果基因分析指标VEGFD阳性细胞密度*平均吸光度值*IRS评分*CD38阳性细胞密度平均吸光度值IRS评分AR阳性细胞密度平均吸光度值IRS评分VEGFD：血管内皮生长因子D型；CD38：分化簇38；AR：雄激素受体IRS：免疫反应评分；*数据用中位数（范围）表示。J Mod Urol,Vol.29 No.2 Feb.2024药组（P0.05)；A R染色平均吸光度值用药组高于非用药组（P0.05)。40r302050100?用药组非用药组用药组非用药组2.5071(1.63213.321 0)3.3850(2.85915.5532)0.4644(0.45190.5042)0.5524(0.51500.5674)1.6670(1.08302.4171)2.0001(1.41703.6672)5.22961.02934.19380.79950.72100.06320.57620.08354.00121.126 94.45830.68864.03232.26743.74210.61440.93180.06610.84260.08704.33330.99203.70831.72230用药组非用药组t值2.2483.912-0.9820.3492.3090.889(土s)P值0.0380.0070.2840.0410.0020.3430.7320.0370.389用药组um50?50LmC非用药组50umA、D:用药组和非用药组VEGFD染色结果;B、E:用药组和非用药组CD38染色结果；C、F:用药组和非用药组AR染色结果；VEGFD：血管内皮生长因子D型；CD38：分化簇38；AR：雄激素受体。图9 用药组与非用药组患者免疫组化染色结果示例（X400)http:/;zgmnwk.cug.top?50um现代泌尿外科杂志3讨论非那雄胺主要用于缓解 BPH导致的LUTS,延缓疾病进展，然而随着对非那雄胺研究的进一步深入,其对BPH 的其他作用也被发现。大量研究表明,术前应用非那雄胺可以减少BPH的术中出血，包括总失血量、每克切除前列腺组织的失血量、单位时间失血量及前列腺微血管密度（microvesseldensity,MVD)等指标6-7 。本研究通过对术前长期服用非那雄胺的BPH患者的转录组景观分析显示，用药组相比于非用药组，其VEGFD表达下调。以往认为VEGFD主要在新生淋巴管的形成过程中起作用,但最新研究发现，VEGFD的血管生成潜力与血管内皮生长因子A型（vascular endothelialgrowthfactorA，VEG FA)相当E8。因此，其表达的下调从基因表达层面减少了前列腺微血管的生成，达到减少BPH手术出血的目的。另一方面，非那雄胺影响了前列腺血液循环和平滑肌收缩的通路调控，使前列腺血流量减少，直接减少了BPH手术出血情况。此外，非那雄胺还与前列腺上皮细胞粘附等生物过程的调控有关。研究表明，一旦分化的上皮细胞或内皮细胞与其底层基质失去接触就会死亡，非那雄胺可以减少上皮细胞粘附，促使其与基质细胞分离，从而促进细胞调亡，减少新生血管生成9 ，进而达到减少手术出血的目的。非那雄胺治疗BPH的机制为减少睾酮转化为活性更高的双氢睾酮，下调AR的活性,而AR通过直接促进前列腺细胞增生、调节上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)以及募集巨噬细胞增强基质细胞增殖等方式促进BPH的进展10-12 。目前BPH患者发生非那雄胺抵抗的机制并不清楚，有研究发现可能与前列腺细胞增殖所依赖的AR通路依然活跃有关13-14。对前列腺癌AR表达的研究表明，Ca+和钙信号通路从多方面影响着AR的表达15。在激素敏感的前列腺癌细胞中,细胞内钙是AR基因表达的有效调节因子，同时钙能激活几种钙结合蛋白，包括钙调蛋白（calmodulin，C a M）。CaM和AR之间存在直接的相互作用，这对前列腺癌细胞中AR 的结构和功能稳定性至关重要。抗CaM药物如W-7,可能通过下调AR而用于前列腺癌的治疗16 。另一方面，许多研究表明雄激素通过AR的调控可调节前列腺癌细胞内Ca+的转运，引起细胞内Ca2+升高17-18 。由此可见，前列腺AR的表达调控与细胞内Ca+的调节密切相关。CD38是近年来研究肿瘤治疗的新靶点，可促进肿瘤的生长19 ,增加前列腺炎症的风险2 0 。CD382024年2 月第2 9 卷第2 期http:/jmurology.xjtu.edu,cn;zgmnwk.cug.top107基因作为钙信号通路的基因之一，目前研究最多的方向是其与癌症的发生发展。CD38是核糖环化酶家族的一种胞外酶，表达于免疫祖细胞表面。它的受体、配体和酶功能通过免疫调节、代谢、钙介导的信号转导、细胞粘附和迁移等过程参与肿瘤的发生和进展2 1。CD38催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+）代谢生成环状ADP核糖（cyclicADP-ribose，c A D PR），参与激动细胞内钙库和Ca+释放2 2 。在前列腺癌细胞中，此过程会诱导AR的表达，同时激活CaM,进而与AR结合，调节AR的稳定性和功能15，促进前列腺癌的进展。因此，在前列腺增生细胞中,我们猜测CD38表达的升高也会引起AR表达的升高，进而导致非那雄胺耐药性的产生。本研究的创新点主要在于国内外对于非那雄胺的研究大多为临床研究或集中在组织细胞层面，本研究从基因表达层面揭示了非那雄胺对BPH患者的作用，不仅可以进一步验证目前临床关于非那雄胺减少前列腺手术出血的结论，还为研究非那雄胺抵抗提供了一个新的思路。本研究的不足之处主要在于研究样本数量有限，后续需要进一步扩大样本数量；研究属于回顾性研究，,存在一定的选择偏倚。总而言之，通过对长期服用非那雄胺的BPH患者进行转录组景观分析，发现非那雄胺通过减少VEGFD的表达减少前列腺微血管生成，同时通过减少前列腺血流、减轻前列腺平滑肌痉挛以及影响前列腺上皮细胞粘附等过程使BPH手术出血减少。另一方面，CD38基因的表达上调可能导致AR表达被激活，进而参与非那雄胺抵抗的形成，但仍需要更多研究进一步验证。参考文献：1 BUSETTO GM,DEL GIUDICE F,DAGOSTINO D,et al.Efficacy and safety of Finasteride(5 alpha-reductase inhibitor)monotherapy in patients with benign prostatic hyperplasia:acritical review of the literatureJJ.Arch Ital Urol Androl,2020,91(4):205-210.2J LOKESHWAR SD,HARPER BT,WEBB E,et al.Epidemiologyand treatment modalities for the management of benign prostatichyperplasiaJJ.Transl Androl Urol,2019,8(5):529-539.3J ADASHEK JJ,GENOVESE G,TANNIR NM,et 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