杜仲叶胶颗粒形态、脂肪酸组成及胶分子量季节变化_刘萍.pdf

doi：10.11707/j.1001-7488.LYKX20210692杜仲叶胶颗粒形态、脂肪酸组成及胶分子量季节变化*刘萍谢宇峰袁婷贡献秦利军（贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵阳 550025）摘要：【目的】解析杜仲胶颗粒形态、膜脂肪酸组成及杜仲胶分子量的季节变化规律，分析胶颗粒形态差异和脂肪酸组成与杜仲胶分子量的相关性，为进一步阐明杜仲胶颗粒生物学功能、揭示杜仲胶合成机制提供参考。【方法】以10 年树龄杜仲成株新枝上 611 月叶片胶颗粒为材料，利用光镜和电镜观察不同生育期叶片杜仲胶颗粒形态差异，结合气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）分析胶颗粒脂肪酸组成与含量变化以及利用分子排阻色谱（SEC）测定杜仲胶特征参数，探讨杜仲胶颗粒形态与胶颗粒脂肪酸组成以及杜仲胶分子量和分子量分布间的相互联系。【结果】1）叶片胶颗粒粒径总体表现为随月份推移而逐渐增大。6 月份平均直径为 3.99 m，到 11 月份时增加到 6.7 m。小胶颗粒（d5 m）数量占比从 6 月份的 65.91%降至 11 月份的 19.09%，而大胶颗粒（d5 m）数量占比从 6 月份的 34.09%增至 11 月份的80.91%；2）脂肪酸测定表明，8、10、11 月份叶片杜仲胶颗粒中分别检测到 26、30 和 26 种脂肪酸，且有 15 种饱和脂肪酸相同，以棕榈酸（C16:0）含量最高，二十四碳酸（C24:0）次之。同时，发现有 7 种不饱和脂肪酸为 10 月份特有，而 3 种不饱和脂肪酸（肉豆蔻油酸（C14:1）、反式亚油酸（C18:2n6t）和-亚麻酸（C18:3n3）为 8 和 10 月份特有；3）杜仲胶特征参数测定表明，叶片中杜仲胶分子量的分布峰在 6、7、8、9、10、11 月份分别有 3、6、6、3、5、3 个。另外，611 月份的杜仲胶分子量分布值变化在 2.186.00，说明叶片中杜仲胶分子量在 6 月份差异小、分布集中，而在 11 月份差异大、分布零散。【结论】杜仲胶颗粒的粒径随月份推移逐渐增大，且大粒径占比逐渐升高。不同月份杜仲胶颗粒中除含有少数对生育期有依赖的特有脂肪酸。杜仲胶分子量随月份推移而增加并趋于稳定，且早期（68 月）以分子量差异不大的胶分子居多，而后期（911 月）以分子量差异较大的胶分子居多。关键词：杜仲；胶颗粒；形态；脂肪酸组成；分子量中图分类号：S718.43文献标识码：A文章编号：10017488(2023)04005711Seasonal Dynamics of Morphology,Fatty Acid Composition and Molecular Weight of Gum Particlesin Eucommia ulmoides LeavesLiu PingXie YufengYuan TingGong XianQin Lijun（Key laboratory of Plant Resource Conservation and Germplasm Innovation in Mountainous Region(Ministry of Education)College of Life Sciences/Institute ofAgro-Bioengineering,Guizhou UniversityGuiyang 550025）Abstract：【Objective】In this study,the seasonal variation in particle morphology,membrane fatty acid composition andmolecular weight of gutta-percha was investigated,and the correlation between particle morphology,and fatty acid compositionand molecular weight of gutta-percha was also analyzed,which would lay a theoretical foundation for further elucidating thebiological function of Eucommia ulmoides gum particles and revealing the mechanism of E.ulmoides gum synthesis.【Method】The rubber particles from leaves growing on the new branches of 10-year-old E.ulmoides were collected from June toNovember,and the morphological differences of rubber particles at different growth stages were observed by using lightmicroscope and electron microscope,and the composition and content of fatty acid in rubber particles were also analyzed by gaschromatography-mass spectrometry(GC-MS).Meanwhile,the characteristic parameters of rubber particles were determined bysize-exclusive chromatography(SEC).The relationships between the morphology,fatty acid composition of rubber particles,aswell as molecular weight and molecular weight distribution of rubber particles were investigated.【Result】1)The results showedthat the rubber particles size in E.ulmoides leaves increased gradually with the passage of months(from June to November),andthe average diameter was 3.99 m in June and increased to 6.7 m in November.The proportion of small rubber particles(d99%，Sigma-Aldrich）；专用于色谱分析的所有溶剂和试剂均为分析纯，购自 Systerm（马来西亚）；正己烷中的酯化剂TMS-DM（2M）购 自 Sigma-Aldrich 公 司。四 氢 呋 喃（tetrahydrofuran，THF）和 6 种 混 合 标 准 品（PStQuickMP-M，Mw=706 000，96 400，5 970，474，370 和 266）购自日本东华株公司（TOSOH Co.，Japan）。1.2试验方法 1.2.1杜仲胶颗粒的提取纯化杜仲胶颗粒的提取参照杨正伟等（2019）和赵德刚等（1999）的方法进行。将保存在80 超低温冰箱中的新鲜叶片迅速研磨成粉末，取 100 g 放入 1 L 烧瓶中，加入提取预冷的提取缓冲液 400 mL 进行杜仲胶颗粒的提取、纯化，然后保存在30%的甘油缓冲液中，置于20 低温冰箱备用。1.2.2杜 仲 胶 颗 粒 的 显 微 观 察 取 约 0.002 g 的611 月份的杜仲叶胶颗粒样品，置于干净的载玻片上，加 1 滴悬浮缓冲液，悬浮杜仲胶颗粒。盖上盖玻片并将悬浮的杜仲胶颗粒置于光学显微镜（OlympusBX43 optical microscope，OM，Japan，1 000）下观察其形态。同时，利用该显微镜标准内置测量系统测定各月样品的杜仲胶颗粒粒径并分类统计。杜仲胶颗粒的提取物每月样本设 3 个生物学重复，在显微视场内选择 5 个区域（5 cm 4.5 cm）进行粒径大小统计，即每月统计 300400 个杜仲胶颗粒。参照 Singh 等（2003）的方法，利用扫描电子显微镜（scanning electron microscopy，SEM）测定各月杜仲胶颗粒的形状和直径。1.2.3杜 仲 胶 颗 粒 中 的 脂 肪 酸 含 量 测 定 参 考Kittigowittana 等（2013）的方法和食品中脂肪酸外标法测定（中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会等,2016）提取杜仲颗粒中的脂肪酸，取80100 mg 纯化后的杜仲胶颗粒常规样品，置于 15 mL离心管中，加入100 L 十九酸甲酯作为内标。按如下的优化温度程序进行：初始柱温 80，保持 1 min，程序设定以10 min1 的速率升至 200，然后以5 min1 的速率升至 250；然后以 2 min1的速率升至最终温度 270 并保持 3 min；注射器和检测器温度为 290；氦气作为载气，流速为 1.2 mLmin1，分流比为 301。样品中脂肪酸含量按式（1）计算：Xi=AsiCstdiFiAstdim。（1）式中，Xi代表样品中每种脂肪酸的含量 g（100 g）-1；Asi代表测定液体中脂肪酸的峰面积；Cstdi代表在标准测定液的制备中吸取的脂肪酸甘油三酯标准工作液中所含有的标准品的质量（mg）；Fi代表各脂肪酸甘油三酯转化为脂肪酸的换算系数；Astdi代表标准测定液中各脂肪酸的峰面积；m 表示试样的称量质量（mg）。取该式在可重复条件下获得的 3 次独立测量值的算术平均值，并保留 3 位有效数字。1.2.4杜仲胶分子量（Mw）及分子量分布（MWD）分析将每组叶片样品的杜仲胶颗粒分别用 THF 溶解至浓度 1.0 mgmL1，在 50 水浴锅中孵育 12 h以 使 其 完 全 溶 解，然 后用 0.22 m 聚 四 氟 乙 烯（polytetrafluoroethylene，PTFE）膜过滤。用凝胶渗透色谱法，即 EcoSEC 系统（EcoSEC system，TOSOH，Japan）配备控制器（HLC-8320GPC）柱温箱（1060）以及钨光检测器（范围为 1.001.80 RI），测量杜仲胶的 Mw和 MWD。GPC 采用半微量 SEC 柱（TSK-GEL SuperMultipore HZ series），制备 PStQuick 聚苯乙烯标准试剂盒作为最小误差的标准样品。取 20 L 样品，将其通过 TSK 色谱柱（4.6 mm 150 mm，粒径 3 m），使色谱柱柱温箱保持在 40，流动相为 THF，流速为0.35 mLmin1，最后利用 EcoSEC-WS 工作站获得 Mw和 MWD。1.3统计分析所有结果均基于 3 次独立试验，表示为平均值（mean）标准差（SD）。用方差分析程序进行方差分析，用 SPSS Statistics 18.0 统计软件进行 T 检验，确定显著差异性（P0.05）。2结果与分析 2.1叶片胶颗粒的形态特征变化各月叶片的胶颗粒呈球形或椭圆形，形状略有不同（图 1）。总的来说，胶颗粒的粒径大小随月份增加而增大，但在 9 月份以后渐趋稳定（图 2）。平均粒径6 月份为 3.99 m，11 月份升为 6.07 m，后者显著大于前者（表 1）。为进一步研究叶片胶颗粒的粒径变化规律，分别将粒径5 m 的胶颗粒区分为小颗粒和大颗粒。研究表明，小胶颗粒的粒径从 6 月的 3.22 m 显著增加到至 11 月的 3.87 m，而大胶颗粒的粒径也从5.50 m 显著增加到 6.58 m（表 2）。另外，小胶颗粒的数量比例从 6 月的 65.91%降到 11 月的 19.09%，而大胶颗粒比例从 34.09%升到 80.91%（表 2）。2.2杜仲胶颗粒中的脂肪酸组成由表 3 可 知，用 气 相 色 谱-质 谱 联 用 仪（gaschromatography-mass spectrometer，GC-MS）监测到的各第 4 期刘萍等：杜仲叶胶颗粒形态、脂肪酸组成及胶分子量季节变化59 月的叶片胶颗粒脂肪酸数量在 8、10、11 月分别为 26、30 和 26 种。其中，饱和脂肪酸的种类相同，共 15 种。在这 3 个月中，饱和脂肪酸的平均含量占比为 61.35%、88.36%、79.32%，而不饱和脂肪酸的平均含量占比为38.65%、11.64%、20.68%（表 4）。以上结果表明，随着胶颗粒发育成熟，其饱和脂肪酸占比逐渐增加，不饱和脂肪酸占比则逐渐下降。在检测的饱和脂肪酸中，以棕榈酸（C16:0）、二十四碳酸（C24:0）、二十二碳酸（C22:0）、花生酸（C20:0）、硬 脂 酸（C18:0）、二 十 三 碳 酸（C23:0）、肉 豆 蔻 酸（C14:0）、十七碳酸（C17:0）、二十一碳酸（C21:0）含量较高。10 月份检测到 15 种不饱和脂肪酸，以顺式油酸（C18:1n9c）、亚油酸（C18:2n6c）、顺-8，11，14-二十碳三烯酸（C20:3n6）含量较高，无反式脂肪酸；而 8 月和 11 月份共检测到 11 种不饱和脂肪酸，以顺式结构的 油 酸（C18:1n9c）、亚 油 酸（C18:2n6c）、-亚 麻 酸（C18:3n3）、顺-11，14，17-二十碳三烯酸（C20:3n3）含 表 1各月叶片胶颗粒的平均直径比较 Tab.1Comparison of mean diameters of rubberparticles from leaves in different monthsm6月June7月July8月August9月September10月October11月November3.991.33c 4.761.43b 5.081.56b 6.181.52a 6.101.53a 6.071.38an=350。数据为平均值标准差。不同字母代表差异显著(P0.05)。The sample size is 350.Data are mean SD.Different lettersindicate significant differences(P0.05).20 m20 m20 m20 m20 m20 mA6 月9 月7 月10 月8 月11 月DBECF图 1光学显微镜下各月叶片的杜仲胶颗粒形态（1 000）Fig.1Optical microscope observation under 1 000 times of Eucommia ulmoides rubber particles from leaves in different months 10 m10 m10 m10 m10 m10 mA6 月B7 月CDEF8 月9 月10 月11 月图 2扫描电子显微镜下不同月份叶片杜仲胶颗粒的形态观察Fig.2SEM observation under 5 000 times of E.ulmoides rubber particles from leaves in different months60林业科学59 卷 表 2不同月份叶片胶颗粒的平均直径和比例Tab.2Average diameter and proportion of leaves rubber particles in different months月份Month小胶颗粒Small rubber particles大胶颗粒Large rubber particles平均直径Average diameter/m数量比例Proportion(%)平均直径Average diameter/m数量比例Proportion(%)63.220.75c65.915.500.83d34.0973.540.59b46.415.811.05cd53.5983.850.56ab39.366.051.19bc60.6493.810.31ab10.776.461.36a89.23103.820.27ab11.536.391.37ab88.47113.870.51a19.096.581.64a80.91SRPs:小胶颗粒(small rubber particles,d 5 m).LRPs:大胶颗粒(large rubber particles(d 5 m).表 3不同月份杜仲叶胶颗粒脂肪酸甲酯组成分析Tab.3Fatty acid composition of E.ulmoides leaves rubber particles in different months序号No.脂肪酸组成Fatty acid composition不同月份脂肪酸含量Fatty acid content in different months/g（100 g）18月August10月October11月November1辛酸甲酯Octanoic acid methyl ester(C8:0)0.001 10.000 10.002 00.000 20.001 20.000 22葵酸甲酯Decanoic acid methyl ester(C10:0)0.001 00.000 10.002 70.000 30.002 40.000 23十一碳酸甲酯Eleven carbonic acid methyl ester(C11:0)0.010 70.000 40.002 20.000 70.003 00.000 24月桂酸甲酯Lauric acid methyl ester(C12:0)0.007 90.000 20.013 90.002 30.016 80.001 35十三碳酸甲酯Thirteen carbonic acid methyl ester(C13:0)0.001 00.000 10.001 40.000 40.002 20.000 16肉豆蔻酸甲酯Myristic acid methyl ester(C14:0)0.152 90.003 70.178 00.015 70.267 00.008 97肉豆蔻油酸甲酯Myristoleic acid methyl(C14:1)0.003 30.000 10.000 90.001 78十五碳酸甲酯Fifteen carbonic acid methyl ester(C15:0)0.007 00.000 20.006 40.001 40.012 20.000 59十五碳一烯酸甲酯Hexadecanoic acid methyl ester(C15:1)0.010 60.000 410棕榈酸甲酯Palmitic acid methyl ester(C16:0)6.035 50.263 410.446 21.064 54.782 4 0.285 611棕榈油酸甲酯Palmitoleic acid methyl ester(C16:1)0.046 60.000 30.033 60.001 30.017 70.001 412十七碳酸甲酯Seventeen carbonic acid methyl ester(C17:0)0.114 00.001 50.152 60.031 60.192 30.002 113十七碳一烯酸甲酯Heptadecanoic acid methyl ester(C17:1)0.014 40.003 414硬脂酸甲酯Stearic acid methyl ester(C18:0)2.386 30.043 42.577 40.020 42.243 20.098 515反式油酸甲酯Elaidic acid methyl ester(C18:1n9t)16油酸甲酯Oleic acid methyl ester(C18:1n9c)2.107 20.111 01.019 80.011 90.446 80.015 017反式亚油酸甲酯Linoelaidic acid methyl ester(C18:2n6t)0.032 60.001 50.022 40.000 918亚油酸甲酯Linoleic acid methyl ester(C18:2n6c)4.368 70.058 32.712 20.153 11.234 40.054 819-亚麻酸甲酯-linolenic acid methyl ester(C18:3n3)3.561 81.664 21.904 21.179 120-亚麻酸甲酯-linolenic acid methyl ester(C18:3n6)21花生酸甲酯Arachidic acid methyl ester(C20:0)2.225 20.012 73.327 40.136 62.449 00.068 0第 4 期刘萍等：杜仲叶胶颗粒形态、脂肪酸组成及胶分子量季节变化61 量较高，此外还有反式亚油酸（C18:2n6t）。方差分析表明，8、10、11 月份杜仲胶颗粒的饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量差异不显著，但各月叶片胶颗粒中不饱和脂肪酸的种类存在特异性。如仅在 10 月份叶片胶颗粒中测到了十五碳一烯酸（C15:1）、十七碳一烯酸（C17:1）、二 十 碳 三 烯 酸（C20:3n6）、花 生 四 烯 酸（C20:4n6）、二十碳五烯酸（C20:5n3）、二十二碳六烯酸（C22:6n3）、二十四碳一烯酸（C24:1）；而肉豆蔻油酸（C14:1）、反 式 亚 油 酸（C18:2n6t）和-亚 麻 酸（C18:3n3）则特异性地在 8 月和 11 月叶片胶颗粒中存在。以上结果表明，杜仲叶胶颗粒中饱和脂肪酸主要以棕榈酸（C16:0）、硬脂酸（C18:0）、花生酸（C20:0）、二十二碳酸（C22:0）、二十三碳酸（C23:0）、二十四碳酸（C24:0）、二十一碳酸（C21:0）等饱和脂肪酸为主，而不饱和脂肪酸以油酸（C18:1n9c）和亚油酸（C18:2n6c）含量最高。2.3杜仲胶的分子量分布峰特征6、9 和 11 月的叶片杜仲胶有 3 个分子量分布峰续表 3 Continued序号No.脂肪酸组成Fatty acid composition不同月份脂肪酸含量Fatty acid content in different months/g（100 g）18月August10月October11月November22二十碳一烯酸甲酯Eicosanoic acid methyl ester(C20:1)0.067 70.000 20.053 20.001 30.045 10.001 623二十碳二烯酸甲酯Eicosadienoic acid methyl ester(C20:2)0.015 70.000 50.021 90.002 30.010 90.000 624二十碳三烯酸甲酯Eicotrienoic acid methyl ester(C20:3n3)0.249 20.005 00.001 90.000 10.116 60.005 825二十碳三烯酸甲酯Eicotrienoic acid methyl ester(C20:3n6)0.179 60.012 926花生四烯酸甲酯Arachidonic acid methyl ester(C20:4n6)0.002 00.000 127二十碳五烯酸甲酯Timnodonic acid methyl ester(C20:5n3)0.004 80.000 528二十一碳酸甲酯Twenty-one carbonic acid methyl ester(C21:0)0.396 10.006 80.685 00.078 80.580 70.004 029二十二碳酸甲酯Twenty-two carbonic acid methyl ester(C22:0)2.922 70.023 33.864 20.248 92.914 50.030 230芥 酸 甲 酯Erucic acid methyl ester(C22:1n9)0.009 90.001 20.019 40.010 60.009 30.001 531二十二碳二烯酸甲酯Docosadienoic acid methyl ester(C22:2)0.020 10.000 30.001 20.000 10.008 40.001 932二十二碳六烯酸甲酯甲酯Docosahexaenoate acid methyl ester(C22:6n3)0.005 40.001 533二十三碳酸甲酯Tricosanoic acid methyl ester(C23:0)1.721 20.051 12.322 40.081 11.748 00.096 534二十四碳酸甲酯Twenty-four carbonic acid methyl ester(C24:0)6.717 60.045 87.398 00.118 44.750 70.041 9 735二十四碳一烯酸甲酯Tetracotenoic acid methyl ester(C24:1)0.003 00.001 6 n=3.表 4各月份杜仲叶胶颗粒不同脂肪酸甲酯平均含量及比例分析Tab.4Analysis of the average content and proportion of different fatty acid methyl esters in E.ulmoides leavesrubber particles in each month月份Month不同类型脂肪酸平均含量及占比分析Analysis of average content and proportion of different types of fatty acids总饱和脂肪酸平均含量Average content of total saturatedfatty acids/g(100 g)1总不饱和脂肪酸平均含量Average content of total unsaturatedfatty acids/g(100 g)1总饱和脂肪酸平均占比Average proportion of total saturatedfatty acids(%)总不饱和脂肪酸平均占比Average proportion of total saturatedfatty acids(%)81.513 30.001 20.953 3 0.000 961.3538.65102.065 30.001 10.272 20.000 388.3611.64111.331 00.000 30.347 00.000 279.3220.6862林业科学59 卷 Mw1Mw2Mw3（P1，P2 和 P3），10 月份有 5 个分子量分布峰（P1，P2，P3，P4 和 P5），而 7 月和 8 月有 6 个分子量分布峰（P1，P2，P3，P4，P5 和 P6）（图 3）。对比前 3 个主要的分子量分布峰（P1，P2 和 P3），表明 P1 的最大重均分子量（）分别出现在 9、10、11 月份，分别为 3.74 105、3.24 105和 3.32 105（图 4A）；而 7 月和 8 月的 P1 平均分子量均较小，分别为 2.27 105和 2.38 105，均显著低于其他各月，P2 的重均分子量（）最大值在8 月，为 1.56 105，其次是 7 月的 1.47 105（图 4B）。P3 的重均分子量（）最大值在 7 月和 8 月，二者均极显著高于其他各月（图 4C）。7 月和 8 月叶片杜仲胶出现多峰低峰现象，说明各月的杜仲胶生物合成存在一定差异，以 7、8 月尤其显著。2.4杜仲胶的分子量分布特征天然杜仲胶的分子量是不均一的，重均分子量是MwMnMwMnMwMnMwMn按质量的统计平均分子量，记为（），而以分子数目统计平均则称为数均分子量，记为（）。由表 5 可知，杜仲胶的各分子量分布峰的重均分子量（）随时间推移均呈增加趋势，而数均分子量（）则逐渐下降。9 月后的增幅变化无显著差异，也趋于稳定。二者的比值（/）D 值最大值出现在 10 月，此时分子量分布峰有 5 个，分别为 P1、P2、P3、P4 和P5，平均值为 6.05，说明 10 月不同分子量的杜仲胶分子分布较分散，而 6 月则较为集中。2.5叶片胶颗粒粒径和脂肪酸与分子量特征参数的相关性MwMnMn对杜仲叶片胶颗粒粒径与分子量特性的相关分析发现（表 6），颗粒粒径与月份和 D 值极显著正相关（P 0.01），与显著正相关（P 0.05），与显著负相关；月份与显著负相关，与 D 值显著正相关。对 5000510152012350ABCDEF05005101520123456100500500510出峰时间 Peak time/min152012354650050051015201232010010051015201234550005101520123出峰电压 Peak volitage/mV图 3不同月份杜仲叶中杜仲胶分子量测定Fig.3Determination of molecular weight of gutta-percha in E.ulmoides leaves in different monthsA：6 月 June;B：7 月 July;C：8 月 August;D：9 月 September;E：10 月 October;F：11 月 November.500 000ABC400 000300 000分子量Molecular weight200 000100 0000678月份 Month月份 Month月份 Month910116789101167891011200 000150 000相对分子量Relative molecular mass100 00050 000025 00020 00015 000相对分子量Relative molecular mass10 0005 0000图 4分子量分布峰中 P1、P2 和 P3 分子量大小比较Fig.4Molecular weight comparison of P1,P2 and P3 in molecular weight distribution peaksA：P1；B：P2；C：P3.第 4 期刘萍等：杜仲叶胶颗粒形态、脂肪酸组成及胶分子量季节变化63 MwMnMwMn杜仲叶片脂肪酸成分与分子量特性的相关分析发现，C14:1、C18:2n6t、C18:3n3 与和呈极显著正相关，与 D 值呈极显著负相关；C10:0 与呈显著负相关；C11:0 与呈显著正相关，与 D 值呈显著负相关。C12:0 与 月 份 呈 极 显 著 正 相 关；C14:1、C18:1n9c、C18:2n6t、C18:2n6t、C18:3n3 与月份呈极显著负相关，C20:1 与月份呈显著负相关（表 7）。3讨论 3.1杜仲胶颗粒形态特征差异通过对杜仲叶胶颗粒粒径测定发现，胶颗粒粒径的大小随月份增加而增大，在 9 月份后逐渐趋于稳定。Singh 等（2003）在 H.brasiliensis 胶颗粒时研究发现，成熟胶颗粒电镜呈球形或梨形，且胶颗粒的直径通常为 0.082.0 m，而本研究发现杜仲胶颗粒呈球形或卵圆形，在 611 月的平均直径变化在 3.996.18 m 之间，显著大于 H.brasiliensis 胶颗粒，说明杜仲胶颗粒单位面积的膜上可能承载更多的脂质和蛋白等非胶组分，进一步表明杜仲胶颗粒结构的特殊性和功能的多样性。3.2胶颗粒脂肪酸组成及含量变化规律胶颗粒脂肪酸测定表明，8、10、11 月的杜仲胶颗粒饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸差异不显著，说明尽管颗粒粒径随月份增加，但其膜上的多数脂肪酸的含量没显著变化。在这些含量差异不显著的脂肪酸中，以棕榈酸（C16:0）、硬脂酸（C18:0）、花生酸（C20:0）、二十二碳酸（C22:0）、二十三碳酸（C23:0）、二十四碳酸（C24:0）、二十一碳酸（C21:0）等饱和脂肪酸以及-亚麻酸（C18:3n3）、亚油酸（C18:2n6c）、油酸（C18:1n9c）、二十碳二烯酸（C20:2）、顺芥子酸（C22:1n9）等不饱和脂肪酸含量较高。另外，在这 3 个月份中，仅在 10 月份 检 出 了 十 五 碳 一 烯 酸（C15:1）、十 七 碳 一 烯 酸（C17:1）、二 十 碳 三 烯 酸（C20:3n6）、花 生 四 烯 酸（C20:4n6）、二十碳五烯酸（C20:5n3）、二十二碳六烯酸（C22:6n3）、二十四碳一烯酸（C24:1），而肉豆蔻油酸甲酯（C14:1）、反式亚油酸甲酯（C18:2n6t）、-亚麻酸甲酯（C18:3n3）则仅在 8 月和 11 月特有。10 月份检测到的特有脂肪酸多为不饱和脂肪酸，而不饱和脂肪酸的增加可显著提高细胞膜流动性和细胞膜的抗氧化能力（Ballweg et al.，2017）。进一步分析表明，胶颗粒总饱和脂肪酸和总不饱和脂肪酸含量在 8 月份差异显著（P 0.05，表 4），而在 10 和 11 月份差异极显著（P 0.05，表 4），在各生育期中饱和脂肪酸始终占优势，是构成杜仲胶颗粒膜脂质的最常见脂肪酸类型。脂肪酸是构成多种生物膜（双/单 层）脂 质，如 磷 脂（phospholipids）、鞘 脂（sphingolipids）和糖脂（glycolipids）的重要结构分子，表 5不同月份叶片杜仲胶颗粒重均分子量、数均分子量和平均分子量分布的比较Tab.5Comparison of weight-average molecular weight,number-average molecular weight and molecular weight distribution averagediameter of E.ulmoides rubber particles in different months月份Month重均分子量MwWeight-average molecularweight（104）数均分子量MnNumber-average molecularweight（104）MwMn分子量分布值Molecular weightdistribution D（/）61.270.01d0.580.01c2.180.04d71.400.04c0.600.01b2.310.09cd81.700.10ab0.690.01a2.460.16c91.770.03a0.310.01d5.770.07b101.660.01b0.270.01e6.050.04a111.670.03b0.28.0.00e6.000.03aMwMnMwMnMw/Mnn=3，表示平均重均分子量。表示平均数均分子量。D值表示分子量分布值。数据为平均值标准差。不同字母代表差异显著（P0.05）。n=3,represents weight-average molecular weight.represents number-average molecular weight.The D value represents the molecularweight distribution value.D=.Data are mean SD.Different letters indicate significant differences(P0.05).表 6各月杜仲叶片胶颗粒平均粒径与胶分子量特性的相关性Tab.6Correlation analysis of the average diameter and molecular weight characteris