ATP生物荧光检测技术省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

评价医疗器械清洗效果北京创新世纪生化科技发展有限企业北京创新世纪生化科技发展有限企业ATP生物荧光检测技术生物荧光检测技术第第1页页 器械清洗目标：器械清洗目标：降低器械上微生物负荷；降低器械上微生物负荷；去除器械上有机物和无机物；去除器械上有机物和无机物；控制包装区污染，到达环境标准要求；控制包装区污染，到达环境标准要求；确保灭菌到达无菌保障水平（确保灭菌到达无菌保障水平（SAV）10-6 第第2页页ATP检测示意图残留污染物细菌细胞中含有ATP有机污染物中含有ATPO2萤光素酶荧光素反应发光细菌 含ATP有机物残留 第第3页页 清洗质量是确保灭菌成功前提清洗质量是确保灭菌成功前提降低微生物负荷：降低微生物负荷：去除大多数微生物后，再进行消毒和灭菌，才去除大多数微生物后，再进行消毒和灭菌，才能有效到达消毒灭菌效果；能有效到达消毒灭菌效果；去除微生物滋生条件，妨碍残留微生物繁殖去除微生物滋生条件，妨碍残留微生物繁殖（有机物、温度（有机物、温度）降低热源产生（革兰氏阴性杆菌灭活后，细胞降低热源产生（革兰氏阴性杆菌灭活后，细胞壁释放内毒素）壁释放内毒素）第第4页页深度清洁监测中ATP生物荧光法更全方面消毒不合格清洁不合格培养法：不合格培养法：不合格 ATP法：不合格法：不合格培养法：合格培养法：合格 ATP法：不合格法：不合格培养法：合格培养法：合格 ATP法：合格法：合格清洁不合格消毒合格、清洁合格有效去除残留有机物可阻断微生物滋生环境第第5页页 清洗质量是确保灭菌成功前提清洗质量是确保灭菌成功前提去除有机物或杂质：去除有机物或杂质：覆盖在器械上有机物或无机物，灭菌剂不易穿覆盖在器械上有机物或无机物，灭菌剂不易穿透，有效保护了细菌芽孢灭活。使用中脱落在透，有效保护了细菌芽孢灭活。使用中脱落在病人体内（转移其它病人），可引发脏器粘连病人体内（转移其它病人），可引发脏器粘连和伤口内感染，甚至危及病人生命。和伤口内感染，甚至危及病人生命。第第6页页ATP存在于细胞内ATP（三磷酸腺苷）存在于动物细胞、细菌细胞、植物细胞中，同类活细胞内含量基本一致；体细胞ATP含量大约为110-15 mol ATP；细菌细胞中ATP含量大约为210-18 mol ATP；细胞在自然凋亡情况下，ATP含量会有所改变；所以可经过ATP残留量，直接反应清洁效果。第第7页页技术原理技术原理沾染在物体表面、医疗器械上血液、组织液等体液中含有大量体细胞和细菌等污染物，这些生物污染能够经过ATP生物荧光法测出。萤光素酶在Mg2、ATP、O2参加下进行酶促反应放出光子仪器定量测定加入ATP标准品前后相对发光值RLU，从而获知污染物中ATP含量，来判断医疗器械污染程度和清洗效果污染程度和清洗效果。经过使用体细胞经过使用体细胞ATPATP消除技术，也可对残留细菌进行检测消除技术，也可对残留细菌进行检测。第第8页页ATP可重复性试验以细菌内ATP为指示物，取105大肠埃希菌（ATCC8099）菌悬液50L，加入无菌离心管中进行ATPATP含量测定并用菌落计数法对照含量测定并用菌落计数法对照；上述试验重复三天，天天同一管菌液重复测十次；将天天测次数与ATP含量之间关系进行曲线标定。菌落总数（CFU）第一天1.78104 第二天1.23104 第三天1.88104 第第9页页中国CDC消毒检测中心ATP生物荧光法与细菌计数法相关性研究金黄色葡萄球菌（ATCC6538）测定结果：菌落计数菌落计数相对光单位相对光单位CFULog(CFU)RLULog（RLU）2.791088.4545829016.662.781077.4423217006.372.761066.446999315.852.811055.45810964.912.751044.4481603.912.821033.459852.992.821022.451762.252.75101.441202.08表中cfu和RLU值均为5次试验结果平均值。中国消毒学杂志1001-7658（）03-0245-0448小时5秒y=1.3199x-0.8317R2=0.97780.001.002.003.004.005.006.007.008.009.000.001.002.003.004.005.006.007.00relative light unit(Log10)colony forming unit(Log10)金黄色葡萄球菌菌落数对数值与RLU对数值线性关系第第10页页中国CDC消毒检测中心ATP生物荧光法与血液残留相关性研究对不一样稀释度血液RLU观察：血液稀释度血液稀释度相对光单位相对光单位稀释度Log(倍数)RLULog（RLU）1.010-2-252977566.721.010-3-328780836.461.010-4-46065645.781.010-5-5738074.875.010-6-5.3351734.552.510-6-5.6194844.291.010-6-682073.911.010-7-711813.071.010-8-82872.461.010-9-91792.25中国消毒学杂志1001-7658（）03-0245-04血液稀释倍数对数值与RLU对数值线性关系第第11页页型号：型号：BT-112DBT-112D仪器灵敏度：器灵敏度：1010-18-18molatpmolatp用用途途：器器械械表表面面洁净度度、微生物微生物检测、水、水质检测等等型号：型号：PLUSPLUS仪器器灵灵敏敏度度：1010-1515molatpmolatp用用途途：物物表表洁净度及手度及手卫生生产品介绍微生物微生物检测试剂盒盒表面、管腔采表面、管腔采样器器100ul100ul水水质采采样器器第第12页页ATP技术检测使用方法1 1、取出拭子，涂抹器械表面（采样面积：按照管理规范要求）、取出拭子，涂抹器械表面（采样面积：按照管理规范要求）2 2、取样后放回试管、取样后放回试管、掰断掰断阀芯阀芯3 3、挤下试剂并振荡、挤下试剂并振荡4 4、放入仪器内检测、放入仪器内检测仪器检测时间仪器检测时间5 5秒钟秒钟涂抹2掰断阀芯3 挤入试剂5秒钟得到检测结果4中国疾病预防控制中心消毒所推荐使用此仪器评价医疗器械清洗效果中国疾病预防控制中心消毒所推荐使用此仪器评价医疗器械清洗效果参考标准值为参考标准值为RLURLU第第13页页怎样使用ATP 技术（1）低灵敏度仪器可用于重点科室低灵敏度仪器可用于重点科室物表和手卫生物表和手卫生监监测测 临床医务人员手卫生临床医务人员手卫生：手频繁接触物表：手频繁接触物表：各种设备操作表面、治疗车、床栏、床头柜、门把手、灯开关、水龙头等低风险器械表面低风险器械表面：如血压计袖带、听诊器等使用科室使用科室：ICU、NICU、烧伤病房、感染病房、手术室、新生儿病房、移植病房、透析室、血液科食堂等15秒秒第第14页页怎样使用怎样使用ATP 技术（技术（3）高灵敏度荧光仪可用于：高灵敏度荧光仪可用于：器械清洗效果检测器械清洗效果检测：管腔、内镜、外来器械重点监测；清洗步骤监测清洗步骤监测：酶洗、超声前后对比建立标准化清洗流程；水质检测水质检测：口腔科用水、血液透析、呼吸机湿化罐、医院水塔等器械消毒效果检测器械消毒效果检测：消化内镜、呼吸机管路等5秒秒第第15页页其它应用其它应用灭菌器械风险评定医用清洗剂评价全自动清洗机清洗评价水处理设备步骤监控空气微生物检测（配合空气采样器）.第第16页页非管腔类器械非管腔类器械 1、采样时间：清洗后干燥器械；、采样时间：清洗后干燥器械；2、采样面积：、采样面积：100cm2以上只采以上只采100 cm2,100cm2除手持部位全采；除手持部位全采；3、采样：佩戴无菌无粉手套、帽子、口罩，持器械手柄，从试管中取出采样、采样：佩戴无菌无粉手套、帽子、口罩，持器械手柄，从试管中取出采样拭子，在器械表面往返涂抹并转动拭子拭子，在器械表面往返涂抹并转动拭子5次，（齿部、关节部、沟槽部可重点涂次，（齿部、关节部、沟槽部可重点涂抹），将拭子放回试管；抹），将拭子放回试管；4、检测：掰断速流阀，挤下试剂，振荡、检测：掰断速流阀，挤下试剂，振荡15次，放入仪器检测。次，放入仪器检测。5、结果判定：、结果判定：RLU合格、合格、RLU4000警告、警告、RLU4000 不合格不合格采样要求第第17页页某三甲医院重点科室物表冰箱把手22582258使用中尺子使用中尺子21712171床把手18151815使用中听诊器使用中听诊器12991299暖箱窗口把手10571057三通管路接头922922护士站鼠标893使用中电话使用中电话725监护仪按钮667床尾遥控器522呼吸机面板458病历夹399操作台291手卫生（物表手卫生（物表)洁净后标准洁净后标准 30为合格为合格 30-100为警告为警告 100以上为不合格以上为不合格物表使用中检测标准物表使用中检测标准100为合格为合格 100-300为警告为警告 300以上不合格以上不合格第一次使用ATP荧光检测仪检测结果数值第第18页页某三甲医院重点科室物表手卫生（物表手卫生（物表)洁净后标准洁净后标准 30为合格为合格 30-100为警告为警告 100以上为不合格以上为不合格物表使用中检测标准物表使用中检测标准100为合格为合格 100-300为警告为警告 300以上不合格以上不合格冰箱把手125125使用中尺子使用中尺子105105床把手9898使用中听诊器使用中听诊器8787暖箱窗口把手7979三通管路接头6666护士站鼠标54使用中电话使用中电话48监护仪按钮35床尾遥控器29呼吸机面板25病历夹21操作台11连续使用ATP荧光检测仪干预监督三个月后检测数值第第19页页手卫生（物表手卫生（物表)洁净后标准洁净后标准 30为合格为合格 30-100为警告为警告 100以上为不合格以上为不合格物表使用中检测标准物表使用中检测标准100为合格为合格 100-300为警告为警告 300以上不合格以上不合格某三甲医院ICU感染病房采样部位数值培养结果6床病室内治疗台面110.4cfu/cm2固定护理固定护理6床病人护士床病人护士洗过手洗过手110.4cfu/cm26床床头桌台面562鲍曼不动杆菌、表皮葡萄球菌6床病人手床病人手指接触电线指接触电线312表皮葡萄球菌6床病人胸床病人胸前擦拭皮肤前擦拭皮肤256表皮葡萄球菌6床病人使床病人使专心电监护专心电监护仪按钮仪按钮560.4cfu/cm26床病人床尾480.4cfu/cm26床病人被服60.4cfu/cm2这是某医院ICU6号床物表检测数值，培养出鲍曼，葡萄球菌部位，ATP检测数值非常高，细菌培养物表合格，ATP数值很低。第第20页页小结：特点 1、全方面检测范围：全方面检测范围：ATP生物荧光检测技术可检测出残留在器械表面上体细胞、细菌等污染物，可全方面评价医疗器械清洗效果，是一个综合评价方法。2、现场快速检测：现场快速检测：操作简单，手持机15秒，台式机5秒可得到检测结果，实时快捷。3 3、定量检测模式：、定量检测模式：手持机RLU30，台式机RLU 4、检测项目：检测项目：能够做洁净度检测，ATP含量和细菌计数。5、数字化质量控制：数字化质量控制：可对清洗效果和操作步骤进行质量控制，建立数字化控制体系。检验医院重点部门污染情况和洁净情况；（手术室、新生儿病房、重症监护室、透析室、内镜室、病房、盥洗室等）第第21页页广东省某医院临床试验 使用RLU（相对发光值）对硬式腔镜操作齿钳、钳柄管腔清洗过程清洗过程和清洗效果清洗效果检测,及医疗器械、器具使用清洗机清洗前后清洗前后效果评价第第22页页钳柄管腔清洗调查取样面积4.66cm2，取样数量30。分析1、30例钳柄管腔经过初洗、酶洗、风吹干燥或清洗干燥后ATP含量100%呈下降趋势2、以RUL作为合格标准，有28例经过，合格率93%3、超声清洗步骤有14例样品ATP有升高现象，表示此超声清洗步骤存在二次污染。4、使用本系统可找到清洗过程中微弱步骤，提升工作效率。1号2号10号11号12号清洗前7223758792810426660213668184416176初洗后11264622474203052688931309酶擦冲水后20911693219713243390超声冲水后435514202301718574446第第23页页清洗机清洗医疗器械、器具前后效果评价取样部位:齿钳类取齿部和关节部位，弯盘等取内部全部部位，吸引器吸头取管腔内壁。分析 1、清洗干燥后ATP含量100%呈下降趋势。2、器械在清洗机中码放密度码放密度和码放方式码放方式 直接影响清洗机清洗效果。3、管腔类器械在清洗机中清洗效果不好，应使用专用管腔类清洗设备，或上机前对管腔类器械预先清洗。1号2号3号4号5号清洗前13278901925951342521365648906786579清洗后18074678 258067016987第第24页页ATPATP生物荧光检测技术可全方面评价医疗器械清洗效果生物荧光检测技术可全方面评价医疗器械清洗效果ATPATP生物荧光检测技术可检测出残留在器械表面上体细胞、细菌等污生物荧光检测技术可检测出残留在器械表面上体细胞、细菌等污染物，使清洗效果检测愈加全方面，是一个综合评价方法。染物，使清洗效果检测愈加全方面，是一个综合评价方法。使用快捷方便，使用快捷方便，5 5秒钟可得到检测结果，操作过程不超出秒钟可得到检测结果，操作过程不超出1 1分钟。分钟。可定量检测清洗效果。（可定量检测清洗效果。（RLU RLU）可对清洗效果和操作步骤进行质量控制，建立数字化关键点控制体可对清洗效果和操作步骤进行质量控制，建立数字化关键点控制体系。系。已列入即将颁布国家标准已列入即将颁布国家标准“医用清洗剂医用清洗剂”质量认定国家标准方法。质量认定国家标准方法。在已经公布在已经公布“医院消毒供给中心管理规范释义医院消毒供给中心管理规范释义”中提出用中提出用ATPATP法监测法监测评价清洗效果。评价清洗效果。第第25页页采取ATP检测技术院内感染控制流程血液透析和相关治疗用水复用医疗器械手卫生统计分析BT-112DPlusBT-112D物体表面有效降低院内感染风险有效降低院内感染风险第第26页页