病原菌的采样技术.pptx

病原菌的采样技术正确采集和处理标本n n无菌操作血液、脑脊液及穿刺液等-无菌操作粪便、肛拭子和咽拭子等-避免杂菌污染n n盛放容器无菌容器n n采集时间和部位在使用抗菌药物之前；选择合适的部位n n送检时间和方法做好标记填好送检单立即送检置运送培养基送检4保存运送35-37保温运送n n安全防护人、标本、环境选择合适的培养基和培养方法依据：标本来源、可能存在的病原菌n n血液、脑脊液 1.部分标本直接涂片染色镜检 2.培养基：血培养瓶/管、BAP（血平板）、MAC（麦康凯平板）/EMB（伊红美蓝平板）、CA（巧克力平板）、SA（沙保培养基）3.培养方法：同时在需氧、厌氧和CO2环境培养n n粪便、肛拭子 SS、MAC/EMB、TCBSn n痰、咽拭子 1.可直接涂片染色镜检 2.BAP、CA、SA、BCYE（军团菌培养基）3.在需氧、厌氧和CO2环境培养n n尿 1.做细菌计数 2.BAP、MAC/EMB、CAn n脓液、分泌物 1.可直接涂片染色镜检 2.EB(增菌肉汤)、BAP、MAC/EMB、CA 3.在需氧、厌氧环境培养n n生殖道标本 1.部分标本直接涂片染色镜检 2.EB、BAP、MAC/EMB、CA、SAn n眼耳口鼻标本 1.部分标本直接涂片染色镜检 2.EB、BAP、MAC/EMB、CA常见病原菌标本的采集血液、脑脊液n n采血时间与次数 用药前24小时内采34次血液标本，可使细菌检出率高达99%；一般在病人发热初期12天内或发热高峰时采集n n采血部位 一般从肘静脉采血，亚急性细菌性心内膜炎等病人则从肘动脉或股动脉采血n n采血量 成人510ml/次，婴幼儿15 ml/次n n脑脊液 采集35ml/次，35-37保温，立即送检粪便标本n n自然排便采集法 挑取有脓血、粘液或絮状物部分置采便盒/保存液/增菌液中送检n n直肠拭子采集法 置C-B保存液/增菌液中送检呼吸道标本n n咽拭采集法 尽量避免口腔正常菌群污染n n自然咯痰法用清水反复漱口，用力自气管深部咳出当日第一口脓痰，置无菌容器中尽快送检n n小儿取痰法n n气管镜采集法n n胃内采痰法 结核病人可用此法采集n n气管穿刺法 主要用于厌氧培养呼吸道标本采集注意事项n n痰液标本以晨痰为佳，咳前要充分漱口，减少口腔正常菌群的污染n n采集的痰液标本必须是肺深部的痰液而不是唾液n n标本采集后及时送检，以防某些细菌在外环境中死亡。作结核分枝杆菌或真菌培养的痰液如不能及时送检，应放入4 冰箱，以免杂菌生长n n做结核分枝杆菌检查，最好收集24小时痰液n n有1/4到1/2肺部感染的病人可能发生菌血症，可同时做血培养尿液标本n n中段尿采集法n n肾盂尿采集法 确定菌尿是否来自肾脏n n膀胱穿刺尿采集法 主要用于厌氧菌培养食物中毒检材的处理n n肛拭1.采用C-B保存液和液体硫乙醇酸盐培养基运送。2.C-B管：检验人员在接到C-B管样后，应立即用旋涡振荡器充分振荡混匀，然后用无菌吸管分别吸取混悬液0.51ml放入11种增菌液增菌培养，病人肛拭同时接种于11种平板培养基直接分离培养。3.液体硫乙醇酸盐培养基：置厌氧培养箱培养，病人肛拭同时接种血平板/SPS平板直接分离置厌氧培养箱培养。n n食品 应以无菌操作取适量食品，分别放入12种增菌液管中增菌培养。产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌分别按国标GB4789.13、14-2003作菌落计数。n n 外环境一般不采用直接分离培养。分别放入12种增菌液管中增菌培养。n n 呕吐物 需直接进行金葡肠毒素检测，用Mini VIDAS 全自动荧光免疫分析仪检测。同时进行细菌学检验。12种增菌培养液：n n亚硒酸盐增菌液/MM：培养沙门菌n n牛肉汤：培养金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌n n1%葡萄糖肉汤：培养链球菌n n7.5%NaCl肉汤：培养金黄色葡萄球菌n n嗜盐增菌液：培养副溶血性弧菌n n碱性蛋白胨水：培养霍乱弧菌n n肠道增菌液：培养致泻大肠埃希菌n nGN增菌液:培养志贺菌、变形杆菌n nLB1增菌液：培养单核细胞增生李斯特氏菌n n布氏肉汤：培养空肠弯曲菌n n硫乙醇酸盐培养液/脑心浸液：培养产气荚膜梭菌谢谢！