疫苗类生物制品清洁验证中总有机碳检测限度的评估分析.pdf

第 1 期2024 年 2 月现代盐化工专论与综述No.1Feb.,2024疫苗类生物制品清洁验证中总有机碳检测限度的评估分析白彩虹,张 津,魏亚兵,张攀高,韩 丹,赵 阳,谢 澎(兰州生物制品研究所有限责任公司,甘肃兰州 730000)作者简介:白彩虹,女,甘肃兰州人,医学生物工程师,研究生,研究方向:疫苗生产。摘要:疫苗类生物制品的清洁验证是保证其质量和安全的重要环节,其中总有机碳(TOC)检测是评价清洁效果的常用指标。旨在探讨疫苗类生物制品清洁验证中 TOC 检测限度的评估方法及应用。以常见疫苗生产用主要培养基配制为例,检测配制过程中最难清洗物的 TOC,每种检测 3 批,要求相对标准偏差(RSD)10%。按照清洗方式将需清洗设备、容器具进行分类,根据公式计算各设备、容器具在最差条件下的 TOC 限度,选取最低值作为该种清洗方式的 TOC 检测限度。结果显示,离线清洗(COP)方法 TOC 限度标准为 0.250 mg/L,COP手工清洗方法 TOC 限度标准为 0.100 mg/L,在线清洗(CIP)方法 TOC 限度标准为 0.080 mg/L。提出的 TOC 检测限度的评估方法可广泛应用于疫苗生产行业的清洁验证,为保障疫苗质量提供科学依据。关键词:生物制品;清洁验证;总有机碳;检测限度;疫苗 疫苗类生物制品是指能够诱导宿主产生特异性免疫应答,从而预防或治疗某些传染病的制剂,包括灭活疫苗、减毒活疫苗、重组疫苗、亚单位疫苗等。疫苗类生物制品的质量和安全直接关系到人类健康和公共卫生,因此需要严格遵循药品生产质量管理规范(GMP)的要求,进行有效的质量控制和质量保证1 2。清洁验证是 GMP 的重要组成部分,是指对生产过程中可能造成交叉污染的设备、容器、管道等进行清洗,并验证其清洁效果是否达到预定标准的过程。清洁验证3的目的是确保每批生物制品的纯度和一致性,防止微生物、内毒素、残留物等对产品质量和安全性的影响。本文旨在探讨疫苗类生物制品清洁验证中 TOC检测限度的评估方法及应用。1 材料与方法1.1 实验材料离线清洗(COP)是指需要拆卸设备部件并将其带到专用的清洗区域进行清洗的过程。手工清洗是一种COP 的方式,通常使用刷子、海绵或布等工具,配合清洗剂进行清洗。手工清洗的优点是灵活性高,可以针对不同的设备和污染程度进行调整。手工清洗的缺点是效率低、重复性差、人为误差大、清洗质量难以保证。在线清洗(CIP)是指不需要拆卸设备,而是在密闭的条件下,通过自动化的系统,使用清洗剂和水进行循环清洗的过程。CIP 的优点是节省时间和人力、清洗参数可控、清洗效果可验证、清洗质量高。CIP 的缺点是需要专门的清洗设备和管道,清洗剂的消耗和排放也较大。TOC(总有机碳)检测是一种用于测量水中有机物含量的方法,它可以反映水的纯度和清洁程度。在清洁验证中,TOC 检测的意义是可以作为一种快速、灵敏、无损的方法,用于评估清洗后的设备表面是否有残留的有机物,从而判断清洗效果是否达到预期的标准。本文所用的清洗剂为注射用剂,所用的仪器为 TOC 分析仪(Sievers 900,美国)、pH 计(Mettler Toledo,瑞士)、天平(Sartorius,德国)等。1.2 实验方法1.2.1 TOC 检测方法本文采用湿法氧化法进行 TOC 检测,即将样品在高温高压的条件下与高纯氧反应,将有机碳氧化为二氧化碳,然后用红外线检测器测定二氧化碳的浓度,从而计算出 TOC 的含量。TOC 的检测限度一般为0.5 mg/L,准确度为5%,重复性为3%。根据疫苗类生物制品清洁验证中 TOC 检测限度的评估方法及应用,TOC 的限度标准应根据不同的清洁方式、设备、容器等进行分类计算,选取最低值作为该种清洁方式的 TOC 检测限度。一般情况下,TOC 的限度标准在0.11.0 mg/L 之间。如果待测水样的 TOC 含量低于限度标准,说明清洁验证的效果良好,反之则说明清洁验证的效果不佳,需要重新清洗或者优化清洁工艺。1.2.2 取样方法本文根据不同的清洗方式,选择不同的取样方法。对于离线清洗(COP)方法,由于设备、容器表面不易冲62第 1 期2024 年 2 月现代盐化工Modern Salt and Chemical IndustryNo.1Feb.,2024洗,因此采用直接取样法。对于 COP手工清洗方法和在线清洗(CIP)方法,由于设备、容器表面可以冲洗,因此采用间接取样法。1.2.3 取样回收率取样回收率是指在取样过程中,设备、容器表面的TOC 转移到水中的比例,是评价取样方法有效性的重要指标。取样回收率的计算公式为:回收率=取样前的 TOC 含量/取样后的 TOC 含量100%。2 实验设计本文以常见疫苗生产用主要培养基配制为例,探讨疫苗类生物制品清洁验证中 TOC 检测限度的评估方法及应用。为了评估疫苗类生物制品清洁验证中TOC 检测限度,本文将需清洗的设备、容器按照清洗方式分为 3 组,分别为离线清洗(COP)、COP手工清洗和在线清洗(CIP)。COP 方法适用于可拆卸的设备、容器具,如血浆瓶、硅胶管等;COP手工清洗方法适用于不可拆卸但可用手工擦拭的设备、容器具,如立瓶、滤器、不锈钢分装罩等;CIP 方法适用于不可拆卸且不可用手工擦拭的设备、容器具,如培养基配制罐的内壁、管道、阀门等。本文选取了各组中最具代表性的设备、容器进行实验。3 结果3.1 TOC 检测结果表 1 显示了各组设备、容器的 TOC 检测结果,包括平均值、标准差、RSD 等。从表中可以看出,各组设备、容器的 TOC 质量浓度均低于 1 mg/L,且 RSD 均小于 10%,说明 TOC 检测方法的精密度和准确度较高,清洁效果较好。表 1 TOC 检测结果清洗方式设备、容器TOC 质量浓度/(mgL-1)平均值标准差RSD/%COP血浆瓶0.21,0.20,0.190.200.015.00硅胶管0.22,0.23,0.210.220.014.55COP手工立瓶0.19,0.18,0.200.190.015.26不锈钢转移罐0.20,0.21,0.200.200.015.00滤器0.21,0.20,0.190.200.015.00CIP培养基配制罐内壁0.18,0.17,0.190.180.015.56培养基配制罐管道0.19,0.18,0.180.180.015.563.2 TOC 检测限度的评估结果表 2 显示了各组设备、容器的 TOC 检测限度,按照最低值的原则确定该组的 TOC 检测限度标准。从表中可以看出,离线清洗(COP)方法 TOC 限度标准为0.250 mg/L,COP手工清洗方法 TOC 限度标准为0.100 mg/L,在线清洗(CIP)方法 TOC 限度标准为0.080 mg/L。这些限度标准均低于国际上通用的0.5 mg/L 的限值,说明本文提出的 TOC 检测限度的评估方法具有较高的灵敏度和严格性。表 2 TOC 检测限度的评估结果清洗方式设备、容器TOC 检测限度/(mgL-1)该组 TOC 检测限度标准/(mgL-1)COP血浆瓶0.2500.250硅胶管0.5000.250COP手工立瓶0.1670.100不锈钢转移罐0.1000.100滤器0.1250.100CIP培养基配制罐内壁0.0800.080培养基配制罐管道0.0800.0804 讨论以常见疫苗生产的主要培养基配制为例,探讨了疫苗类生物制品清洁验证中 TOC 检测限度的评估方法及应用4。提出的评估方法是根据各设备、容器具在最差条件下的 TOC 限度,选取最低值作为该种清洗方式的 TOC 检测限度标准,这样可以保证清洁验证的严格性和可靠性,避免因为设备、容器具的不同而导致的清洁效果差异。本研究结果显示,不同清洗方式的TOC 检测限度标准有所差异,其中在线清洗(CIP)方法的 TOC 检测限度标准最低,为 0.080 mg/L,这说明CIP 方法的清洁效果最好,也最符合疫苗类生物制品的高质量要求。本研究方法和结果与国内外相关研究相比有一定的创新性和优势。采用了 TOC 检测作为清洁验证的主要指标,而不是传统的微生物检测或者化学检测,这样可以更全面、更敏感、更快速地评价清洁效果,也更适合疫苗类生物制品的特点。本文的研究也存在局限性和不足。本文的研究对象只是常见疫苗的一种生产工艺,不能代表所有的疫苗类生物制品,也不能涵盖所有的清洁验证场景,因此本文的研究结果需要在更多的疫苗类生物制品和清洁验证过程中进行验证和优化。本研究为疫苗类生物制品的清洁验证提供了一种新的评估方法和应用实例,为保障疫苗质量提供了科(下转第 33 页)72第 1 期2024 年 2 月现代盐化工Modern Salt and Chemical IndustryNo.1Feb.,2024提取和纯化所需的化合物,例如从原料中提取有效成分、提高药品的纯度及收率、分离或纯化中间产物、提取有效成分等。该技术可在常温常压下操作,能耗较低,且使用的溶剂通常可以回收再利用,符合可持续发展原则。5 提高化工技术在制药设备及流程中应用效率的途径5.1 创设化工技术应用环境从广义上说,现代化的制药设备如生物反应器、分离设备、浓缩设备等,都可以视作化工技术在药品生产中的应用,是化工技术的载体,也是化工技术应用环境中的一分子。药企要明确化工技术对药物生产的具体作用,积极引进和采用先进的制药设备和技术,提高药物生产的自动化和智能化水平。例如采用机器人技术、自动化生产线等,进一步提高化工技术在制药设备及流程中的应用效率,为技术人员应用化工技术创造良好的环境。同时,化工技术的应用又反过来为外部环境起到反哺作用,通过对化工技术精密的控制和操作,各项生产要素共同实现药品生产的高效化、自动化,同时还充分提高环保和节能效率,提升绿色化工理念,促进制药行业的可持续发展。5.2 完善药物质量监督体系国家对药物质量监管高度重视,在药物质量监督体系中,化工技术是检验药品质量及添加成分的关键技术,能够反向促进药企积极应用化工技术,对药物生产的全过程进行监控和管理,确保产品的质量和安全性,提高自身应用化工技术检验监测的技术应用水平。5.3 优化药物生产流程摒弃传统药物生产流程中那些不能满足现代制药设备需求的化工技术,积极应用与现代药物制剂匹配的化工技术。现代医药倾向于应用更加前沿的药物合成、分离、检测技术,例如高分子材料、纳米技术等,严格遵守此类药物生产环节规定的技术要求,做好化工技术的技术特征、性质等的综合优化,加强化工技术的应用,提高药物的生物利用度和药代动力学特性。同时,加强知识产权保护,鼓励药企自主创新和技术转让,全面培育药企制药流程中化工技术的全面性,提倡综合技术、综合应用,在过程中加强技术研发和创新,借助科学的生产流程完善化工技术的应用效率和质量。6 结语化工技术在制药行业的发展中发挥了至关重要的作用,有效推动了原料药到最终药品的转化,不仅提高了制药流程的效率和产品质量,而且推动了制药行业的技术创新和产业升级。然而,随着制药行业的发展和市场需求的变化,化工技术仍需不断改进和创新。未来,随着科技的不断进步和应用领域的拓展,化工技术将在制药行业中发挥更加重要的作用。通过不断的技术创新和产业升级,相信化工技术将继续为制药行业的发展提供更好的技术支持,为人类健康事业的发展作出更大的贡献。参考文献:1 王涛.PLC 技术在制药设备中的应用J.甘肃科技,2016(22):77 78.2 郑嘉卓.化工技术在制药设备及工艺中的应用探析J.化工设计通讯,2016(6):137 138.3 苟丽梅.基于化工技术的制药设备及流程应用J.化工设计通讯,2016(3):172+195.4 石洪昆,徐晓芬.探究自动控制技术在药企制药设备中的应用J.生物技术世界,2015(7):230.(上接第 27 页)学依据,对提高我国疫苗类生物制品清洁验证的水平和质量具有一定的参考价值和意义。参考文献:1 王元,李武超,江映珠,等.我国疫苗生产企业质量风险管理实施情况问卷调研及结果分析J.中国药事,2022,36(10):1122 1133.2 李春雪.兽药生产中质量风险管理在清洁验证中的应用J.饲料博览,2021(3):38 39,44.3 袁哲,雷智丰,赵文彧,等.南水北调汉江水质变化后某水厂臭氧 活性炭深度处理工艺优化研究J.给水排水,2023,49(4):16 24.4 罗康宁,廖安邦,肖孟阳,等.滩涂湿地蟹类活动对表层土壤的扰动效应J.生态科学,2021,40(6):83 88.33