肿瘤标志物检验.ppt

肿瘤瘤标志物志物检验本章内容n概述n肿瘤标志物的测定n胚胎性抗原标志物n糖类抗原标志物n酶类抗原标志物n激素类抗原标志物n基因类标志物 第一节第一节 概述概述 肿瘤标志物的发展概况肿瘤标志物的发展概况 肿瘤标志物的定义肿瘤标志物的定义 肿瘤标志物的分类肿瘤标志物的分类 肿瘤标志物的应用肿瘤标志物的应用概概 述述n癌症对人类健康和生命的威胁很大。它和心血管疾患一起，癌症对人类健康和生命的威胁很大。它和心血管疾患一起，已成为医学上的两大难关。全世界已成为医学上的两大难关。全世界5252亿人口中，每年约有亿人口中，每年约有700700万人新患癌症，每年约有万人新患癌症，每年约有500500多万人死于癌症，多万人死于癌症，几乎每几乎每6 6秒钟就有一名癌症患者死亡。近年来，我国癌症的发病率呈秒钟就有一名癌症患者死亡。近年来，我国癌症的发病率呈上升趋势，恶性肿瘤居城市人口死因的首位。上升趋势，恶性肿瘤居城市人口死因的首位。n随着医学的进步和发展，诊断方法不断进步可以使大约随着医学的进步和发展，诊断方法不断进步可以使大约80-80-90%90%的癌症得到确诊，而且，的癌症得到确诊，而且，1 13 3的癌症患者能在早期发现。的癌症患者能在早期发现。世界卫生组织作出的最新权威性结论：世界卫生组织作出的最新权威性结论：癌症患者如果能早期癌症患者如果能早期发现，治愈率可达发现，治愈率可达8080以上。以上。因此，早期肿瘤诊断已成为全因此，早期肿瘤诊断已成为全世界医务人员长期以来极尽全力研究的热门课题。世界医务人员长期以来极尽全力研究的热门课题。20082008年城乡居民前十位疾病死亡专率及死亡原因构成年城乡居民前十位疾病死亡专率及死亡原因构成顺位城市农村死亡原因(ICD-10)死亡专率(1/10万)构成(%)死亡原因(ICD-10)死亡专率(1/10万)构成(%)1恶性肿瘤恶性肿瘤166.97166.9727.1227.12恶性肿瘤恶性肿瘤156.73156.7325.3925.392心脏病121.0019.65脑血管病134.1621.733脑血管病120.7919.62呼吸系病104.2016.884呼吸系病73.0211.86心脏病87.1014.115损伤及中毒31.265.08损伤及中毒53.028.596内分泌营养和代谢疾病21.093.43消化系病16.332.657消化系病17.602.86内分泌营养和代谢疾病11.051.798泌尿生殖系病6.971.13泌尿生殖系病5.700.929神经系病6.341.03神经系病4.350.7010精神障碍3.690.60精神障碍4.270.69十种死因合计十种死因合计92.3692.36十种死因合计十种死因合计93.4693.4620082008年我国卫生事业发展统计公报年我国卫生事业发展统计公报 卫生部统计信息中心肿瘤标志物发展概况肿瘤标志物发展概况1845 Bence-Jones 本周蛋白本周蛋白1930 Zondek HCG1959 Markert 同工酶同工酶1963 Abelev AFP1965 Gold&Freeman CEA1969 Hubner&Todaro 癌基因癌基因1975 Kohler&Milstein 单克隆抗体单克隆抗体1978 Herberman 提出肿瘤标志物概念提出肿瘤标志物概念1979 英国第英国第7届肿瘤发生届肿瘤发生 TM被确认并应用临床被确认并应用临床 生物学和医学会议生物学和医学会议1980 Koprowski CA19-91981 Bast et al CA1251981 Colcher et al CA72-41984 Kufe et al CA15-3.诊断肿瘤有二大类方法诊断肿瘤有二大类方法n医学影像学方法医学影像学方法n检验诊断学、核医学方法。这里讨检验诊断学、核医学方法。这里讨论的肿瘤标志物的测定，就属于这论的肿瘤标志物的测定，就属于这一类。一类。肿瘤标志物的定义肿瘤标志物的定义 肿瘤标志物（肿瘤标志物（Tumor MarkerTumor Marker，TMTM）：）：是由是由肿瘤细胞产生的，存在于细胞、组织或体液中，能肿瘤细胞产生的，存在于细胞、组织或体液中，能用化学或免疫方法定量的、能证实癌肿存在（或在用化学或免疫方法定量的、能证实癌肿存在（或在某一脏器存在）的、能监测肿瘤治疗和预后的物质。某一脏器存在）的、能监测肿瘤治疗和预后的物质。这些物质必须在正常人中不存在或者是在癌肿患者这些物质必须在正常人中不存在或者是在癌肿患者中出现的水平显著高于正常人。中出现的水平显著高于正常人。肿瘤标志物的分类肿瘤标志物的分类细胞肿瘤标志物：细胞肿瘤标志物：位于细胞中的物质或抗原，如激素位于细胞中的物质或抗原，如激素受体、白血病表型、分子基因等。受体、白血病表型、分子基因等。体液肿瘤标志物：体液肿瘤标志物：病理情况下，浓度增加时可在血液、病理情况下，浓度增加时可在血液、尿液或其他体液中测得的物质，如尿液或其他体液中测得的物质，如AFPAFP、CA19-9CA19-9、CEACEA、CA15-3CA15-3等。等。肿瘤表型标志物：肿瘤表型标志物：酶、胚胎性抗原、异位性蛋白、酶、胚胎性抗原、异位性蛋白、激素等激素等,出现于癌细胞转化和临床进出现于癌细胞转化和临床进展阶段。展阶段。肿瘤基因标志物：肿瘤基因标志物：基因突变、基因表达异常等，出基因突变、基因表达异常等，出现于癌前起动阶段。现于癌前起动阶段。肿瘤标志物的分类肿瘤标志物的分类（化学特性）（化学特性）癌胚抗原类标志物癌胚抗原类标志物 糖类抗原标记物糖类抗原标记物酶类标志物酶类标志物激素类标志物激素类标志物癌基因癌基因其他其他理想的肿瘤标志物的标准理想的肿瘤标志物的标准 特异性特异性100%100%灵敏度灵敏度100%100%器官特异性器官特异性 与肿瘤大小或分期有关与肿瘤大小或分期有关 能进行疗效观察能进行疗效观察 与预后有关与预后有关 可靠的预测价值可靠的预测价值 然而目前所应用的肿瘤标志物均未达到上述要求，但如然而目前所应用的肿瘤标志物均未达到上述要求，但如正确合理使用，仍有很大临床价值，关键是要正确评价肿瘤正确合理使用，仍有很大临床价值，关键是要正确评价肿瘤标志物检测的临床意义。标志物检测的临床意义。肿瘤标志物的临床应用肿瘤标志物的临床应用 正常人群中的筛查正常人群中的筛查 有症状者的辅助诊断有症状者的辅助诊断 癌症的临床阶段的分期癌症的临床阶段的分期 疾病进程的预后指标疾病进程的预后指标 评估治疗方案评估治疗方案 判断癌症是否复发判断癌症是否复发 治疗应答的监测治疗应答的监测普普 查查一般不适宜对无症状人群进行普查一般不适宜对无症状人群进行普查 以以CEA普查结肠癌为例：普查结肠癌为例：肿瘤标志物用于普查的五项原则肿瘤标志物用于普查的五项原则应十分清楚该肿瘤的发病率应十分清楚该肿瘤的发病率应能检测早期肿瘤应能检测早期肿瘤该肿瘤的早期治疗比晚期治疗更经该肿瘤的早期治疗比晚期治疗更经济有效济有效测定方法的灵敏度、特异性和重复测定方法的灵敏度、特异性和重复性良好性良好普查所需费用能被接受普查所需费用能被接受定定 位位 TM基本上不能对肿瘤定位基本上不能对肿瘤定位 极少数极少数TM如如PSA，甲状腺球白等具甲状腺球白等具器官特异性，但不是肿瘤特异性。器官特异性，但不是肿瘤特异性。确确 诊诊 通常不能进行确诊通常不能进行确诊因为因为TMTM无足够的灵敏度，不能排除假阴性结无足够的灵敏度，不能排除假阴性结果。但本周蛋白果。但本周蛋白(多发性骨瘤）、多发性骨瘤）、AFPAFP（肝癌）肝癌）、-HCG-HCG（绒毛膜癌）和降钙素（绒毛膜癌）和降钙素（C-C-细胞癌）细胞癌）等有助确诊。等有助确诊。分分 期期 大多数大多数TM与疾病分期有关，且浓度与与疾病分期有关，且浓度与肿瘤大小通常存在关联肿瘤大小通常存在关联但并不能根据个体测得值来判断肿瘤大但并不能根据个体测得值来判断肿瘤大小，也不能以小，也不能以TM TM 浓度精确指示各期肿瘤，浓度精确指示各期肿瘤，因为各期肿瘤的因为各期肿瘤的TMTM浓度范围极广，且互浓度范围极广，且互相重叠。相重叠。预预 后后术前术前TMTM浓度增加，术后降低，表示这些浓度增加，术后降低，表示这些TMTM对此肿瘤有预后价值。对此肿瘤有预后价值。在病程监测中，在病程监测中，TMTM的浓度增加或降低与的浓度增加或降低与疾病的预后密切相关疾病的预后密切相关。TM评价治疗有效性方案评价治疗有效性方案（Beastall,1991)无效：无效：TM浓度与治疗前相比下降浓度与治疗前相比下降50%有效：有效：TM浓度与治疗前相比下降浓度与治疗前相比下降90%显效：显效：TM浓度下降至临界值以下浓度下降至临界值以下影响血液和体液中肿瘤标志物浓度的因素影响血液和体液中肿瘤标志物浓度的因素1 1肿瘤的大小和肿瘤细胞的数目：肿瘤越大细胞越多，肿瘤的大小和肿瘤细胞的数目：肿瘤越大细胞越多，肿瘤标志物的浓度越高。肿瘤标志物的浓度越高。2 2肿瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物的速度：肿瘤细胞合肿瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物的速度：肿瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物的速度越快，血液循环中肿瘤标志物的浓成和分泌肿瘤标志物的速度越快，血液循环中肿瘤标志物的浓度越高。度越高。3 3肿瘤组织的血液供应好坏：若血液供应差，血液循环中肿瘤组织的血液供应好坏：若血液供应差，血液循环中肿瘤标志物的浓度低。肿瘤标志物的浓度低。4 4肿瘤细胞是否有坏死和坏死的程度：肿瘤肿瘤细胞是否有坏死和坏死的程度：肿瘤细胞坏死后，释放出大量肿瘤标志物，使肿瘤局部细胞坏死后，释放出大量肿瘤标志物，使肿瘤局部和血液中肿瘤标志物的浓度升高。和血液中肿瘤标志物的浓度升高。5 5肿瘤细胞的分化程度和肿瘤的分期：肿瘤肿瘤细胞的分化程度和肿瘤的分期：肿瘤细胞分化程度越差，恶性程度越高，越晚期，产生细胞分化程度越差，恶性程度越高，越晚期，产生的肿瘤标志物越多。的肿瘤标志物越多。6 6肿瘤细胞是否表达和合成肿瘤标志物：肿瘤细胞是否表达和合成肿瘤标志物：有些肿瘤细胞不表达、不携带肿瘤标志物，则有些肿瘤细胞不表达、不携带肿瘤标志物，则在血液和体液中就检测不到。在血液和体液中就检测不到。7 7肿瘤标志物在体内的降解和排泄速度：肿瘤标志物在体内的降解和排泄速度：若肝、肾功能差，排泄速度慢，则肿瘤标志物若肝、肾功能差，排泄速度慢，则肿瘤标志物在体内可异常升高。在体内可异常升高。分析前分析前 1.1.标本采集对检测结果的影响标本采集对检测结果的影响:前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、导尿和直肠镜前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、导尿和直肠镜检查后，血液检查后，血液PSAPSA和和PAPPAP值可升高值可升高(宜在此操作过后宜在此操作过后一周取样）；一周取样）；肝、肾功能异常和胆道排泄不畅、胆汁淤滞等均肝、肾功能异常和胆道排泄不畅、胆汁淤滞等均可造成如可造成如CEACEA、ALPALP、GGTGGT等浓度增高。等浓度增高。肿瘤标志物检测的影响因素肿瘤标志物检测的影响因素 某些药物会影响肿瘤标志物的浓度，如抗雄激素治某些药物会影响肿瘤标志物的浓度，如抗雄激素治疗前列腺癌时可抑制疗前列腺癌时可抑制PSAPSA产生，导致产生，导致PSAPSA假阴性结果。假阴性结果。唾液和汗液污染标本可使鳞状上皮细胞癌相关抗原唾液和汗液污染标本可使鳞状上皮细胞癌相关抗原（SCCSCC）、）、CA 19-9CA 19-9浓度升高，浓度升高，CEACEA也会轻度升高。也会轻度升高。2.2.标本保存对检测结果的影响标本保存对检测结果的影响:血液标本采集后应及时离心，若从采血到血清血液标本采集后应及时离心，若从采血到血清分离的间隔时间分离的间隔时间60min60min，NSE NSE浓度会从血小板中释浓度会从血小板中释放而增高；保存於放而增高；保存於44冰箱中，冰箱中，2424小时内测定；如在小时内测定；如在2 23 3个月内测定，则应个月内测定，则应-20-20保存，避免反复冻融。保存，避免反复冻融。酶类和激素类肿瘤标志物不稳定，易降解，应酶类和激素类肿瘤标志物不稳定，易降解，应及时测定或低温保存。及时测定或低温保存。由于红细胞和血小板中也存在神经元特异性烯由于红细胞和血小板中也存在神经元特异性烯醇化酶（醇化酶（NSENSE），因此，样本溶血可使血液中），因此，样本溶血可使血液中NSENSE浓度增高（浓度增高（RBCRBC中有大量的中有大量的NSENSE，1%1%的溶血可使血的溶血可使血清清NSENSE升高升高5ug/L)5ug/L)。黄疸血样本，会引起黄疸血样本，会引起PSAPSA的检测值升高。的检测值升高。分析中分析中 1.1.测定方法和试剂对检测结果的影响：测定方法和试剂对检测结果的影响：从方法学来看，肿瘤标志物测定方法很多，有放射免疫从方法学来看，肿瘤标志物测定方法很多，有放射免疫测定法，酶联免疫测定法，化学发光免疫测定法等，每种测测定法，酶联免疫测定法，化学发光免疫测定法等，每种测定方法有自己的精密度和重复性，但手工操作的方法重复性定方法有自己的精密度和重复性，但手工操作的方法重复性较差，误差比较大，操作时要特别认真；用自动化仪器进行较差，误差比较大，操作时要特别认真；用自动化仪器进行测定，重复性好，误差小。测定，重复性好，误差小。有研究报道，有研究报道，使用使用1212种不同的种不同的CEACEA试剂盒检测某试剂盒检测某一混合血清中一混合血清中CEACEA的浓度，结果其差异超过的浓度，结果其差异超过100%100%。导导致分析间误差的主要原因是没有测定的标准化，包致分析间误差的主要原因是没有测定的标准化，包括缺乏统一的抗原、抗原成分、校正品和参考方法括缺乏统一的抗原、抗原成分、校正品和参考方法等。等。因此，在工作中要尽量使用同一种方法，同一因此，在工作中要尽量使用同一种方法，同一种仪器和同一厂家的试剂盒进行测定。种仪器和同一厂家的试剂盒进行测定。2.2.交叉污染对检测结果的影响：交叉污染对检测结果的影响：当测定非常高浓度标本时，交叉污染成为一个导当测定非常高浓度标本时，交叉污染成为一个导致假阳性的潜在问题。所以应不时地复查有无标本被致假阳性的潜在问题。所以应不时地复查有无标本被交叉污染。交叉污染。3.3.嗜异性抗体对检测结果的影响：嗜异性抗体对检测结果的影响：大多数肿瘤标志物的测定中常使用一对鼠单克隆抗体来与大多数肿瘤标志物的测定中常使用一对鼠单克隆抗体来与肿瘤抗原反应，如果病人血清中存在嗜异性抗体（特别是人抗肿瘤抗原反应，如果病人血清中存在嗜异性抗体（特别是人抗鼠抗体），它可能在两种鼠单克隆抗体间起鼠抗体），它可能在两种鼠单克隆抗体间起“桥梁桥梁”作用，导作用，导致在无抗原的情况下，出现肿瘤标志物浓度增高的假象。致在无抗原的情况下，出现肿瘤标志物浓度增高的假象。分析后：分析后：1参考值范围：不同标本如血液、尿液、胸、参考值范围：不同标本如血液、尿液、胸、腹水等，必须有不同的参考值。腹水等，必须有不同的参考值。不同地区、不同人群、不同方法、不同试剂和不同地区、不同人群、不同方法、不同试剂和设备应建立自己的参考值范围。设备应建立自己的参考值范围。治疗治疗0123456月 2 2病人基础测定值的变化，对于结果的分析极有价值。病人基础测定值的变化，对于结果的分析极有价值。故应监测病人治疗前、治疗中和治疗后各个阶段肿瘤标志物含故应监测病人治疗前、治疗中和治疗后各个阶段肿瘤标志物含量的变化，最好画一张肿瘤标志物含量的变化的曲线图，以便量的变化，最好画一张肿瘤标志物含量的变化的曲线图，以便综合分析。综合分析。3 3一般病人的结果在排除检测方法引起的误差后，一般病人的结果在排除检测方法引起的误差后，上升或下降上升或下降2525都有临床价值。对于测定结果特别异都有临床价值。对于测定结果特别异常的标本必须复查，以防测定误差。常的标本必须复查，以防测定误差。4 4由于肿瘤标志物测定其临床意义的特殊性，必须由于肿瘤标志物测定其临床意义的特殊性，必须加强与临床的交流和沟通当改变肿瘤标志物检测方法加强与临床的交流和沟通当改变肿瘤标志物检测方法和试剂时，必须通知临床，否则会影响结果的判断。和试剂时，必须通知临床，否则会影响结果的判断。5 5必须知道肿瘤标志物的半寿期（手术后必须知道肿瘤标志物的半寿期（手术后降到一半所需的时间），这有助解释某些肿瘤降到一半所需的时间），这有助解释某些肿瘤标志物，如标志物，如AFPAFP和和hCG hCG 的浓度变化，对于临床疗的浓度变化，对于临床疗效判断有重要意义。效判断有重要意义。主要肿瘤标志物经手术后半寿期肿瘤标志物肿瘤标志物半寿期半寿期参考范围参考范围CEA34天天10ng/mLCA19-98.5天天37UmlAFP45天天10.9ng/mLPSA2.33.2天天4ng/mLHCG1220小时小时2.9mIU/mLCA15-3815天天28U/mlCA1254.8天天35U/mlSCC20分分1.5g/LCYFRA21-14天天3.3ng/mL胚胎抗原类标志物胚胎抗原类标志物甲胎蛋白甲胎蛋白 AFP（alpha-fetoprotein）1 胎儿发育早期，由肝脏和卵黄囊合成的一胎儿发育早期，由肝脏和卵黄囊合成的一种血清糖蛋白，电泳时位于白蛋白和种血清糖蛋白，电泳时位于白蛋白和11球蛋白球蛋白之间，胎儿出生后不久即逐渐消失。成人血清之间，胎儿出生后不久即逐渐消失。成人血清中含量甚微。中含量甚微。AFP异质体异质体 刀豆素刀豆素（ConA）AFP异质体异质体小扁豆凝集素小扁豆凝集素 （LCA）LCA结合型结合型AFP 25，原发性肝癌，原发性肝癌 500g/LAFP500g/L持续持续1 1个月或个月或AFP200g/LAFP200g/L持续持续2 2好好个月，应高度怀疑肝癌，同时应有医学影像学个月，应高度怀疑肝癌，同时应有医学影像学好好的证据参与诊断的证据参与诊断v低浓度（低浓度（5050200g/L200g/L）持续时间超过）持续时间超过2 2个月的个月的好好患者，应视为肝癌的高危人群患者，应视为肝癌的高危人群v当谷丙转氨酶（当谷丙转氨酶（ALTALT）正常，用）正常，用AFPAFP来诊断肝来诊断肝 h1h1癌，可取性可达癌，可取性可达100100n在进行肝癌诊断时，应排除由妊娠、活动性肝炎、在进行肝癌诊断时，应排除由妊娠、活动性肝炎、生殖腺胚胎癌、继发性肝癌和少数消化道肿瘤等生殖腺胚胎癌、继发性肝癌和少数消化道肿瘤等引起的引起的AFPAFP升高，通常由非原发性肝癌引起的升高，通常由非原发性肝癌引起的AFPAFP升高，一般都不会高于升高，一般都不会高于400g/L400g/L。n3.63.65.25.2的胆管上皮癌、的胆管上皮癌、8484以上的肝母细胞以上的肝母细胞癌和癌和7070左右的生殖性畸胎瘤及较少比例的胰腺左右的生殖性畸胎瘤及较少比例的胰腺癌、肺癌、肾癌和白血病患者也可出现癌、肺癌、肾癌和白血病患者也可出现AFPAFP低浓度低浓度的异常升高。的异常升高。良性病变中的良性病变中的AFPAFP升高升高n升高一般是散在的和暂时的升高一般是散在的和暂时的n肝炎病人，肝炎病人，1010升高，水平升高，水平50g/L50g/L；n肝硬化病人，肝硬化病人，3030升高，水平升高，水平 500g/L35U/ml的病人中有的病人中有95%在第二次手术时仍有肿在第二次手术时仍有肿瘤存在瘤存在n早期复发的监测早期复发的监测:75%:75%的患者在肿瘤复发前一年左右时间的患者在肿瘤复发前一年左右时间CA125CA125的水平就已升高的水平就已升高（二）糖类抗原（二）糖类抗原19-9（CA199）CA19-9是胰腺、胃和肠癌的标记物。是胰腺、胃和肠癌的标记物。正常人群血清正常人群血清CA19-9阳性的临界值为阳性的临界值为 37U/ml 癌组织中的浓度要高于正常组织或炎性组癌组织中的浓度要高于正常组织或炎性组织；是胰腺癌诊断较好的指标，还可用于织；是胰腺癌诊断较好的指标，还可用于胃肠癌的检测和筛选。胃肠癌的检测和筛选。伴有黄疸的良性疾病患者也可出现伴有黄疸的良性疾病患者也可出现CA19-9CA19-9升高，但一般不升高，但一般不 120/ml120/ml，经临床处理后可，经临床处理后可恢复到正常值范围。恢复到正常值范围。CA19-9的临床应用的临床应用 诊断诊断-可以作为胰腺和胆管癌较好的标志物可以作为胰腺和胆管癌较好的标志物用于临床，胰腺癌的阳性率可达用于临床，胰腺癌的阳性率可达70%92%，胆管癌为，胆管癌为66.7%-对胃癌、肝癌和结直肠癌的阳性率分对胃癌、肝癌和结直肠癌的阳性率分别可达别可达25%60%、56%60%，18%58%疗效监测疗效监测 治疗中及术后含量下降乃至正常表示治疗中及术后含量下降乃至正常表示治疗方案正确。治疗方案正确。复发跟踪复发跟踪 升高可作为肿瘤复发转移的亚临床升高可作为肿瘤复发转移的亚临床诊断或重要的辅助诊断指标。诊断或重要的辅助诊断指标。CA19-9水平在胰腺癌诊断中反应参水平在胰腺癌诊断中反应参数的比较数的比较反应参数反应参数CA 19-9CA 19-9CA 19-937 U/ml72 U/ml170 U/ml敏感性敏感性81%76%66%特异性特异性79%90%95%PV+80%89%93%PV-80%89%93%三、酶类标志物三、酶类标志物 根据来源可分为两类：根据来源可分为两类：h 组织特异性酶：因组织损伤或变化使储存在组织特异性酶：因组织损伤或变化使储存在 细胞中的酶释放（如前列腺特异性抗原）细胞中的酶释放（如前列腺特异性抗原）h 非组织特异性酶：主要是肿瘤细胞代谢强，非组织特异性酶：主要是肿瘤细胞代谢强，特别是无氧酶酵解增强，大量释放入血液中（如特别是无氧酶酵解增强，大量释放入血液中（如已糖激酶）已糖激酶）（一）前列腺特异性抗原（一）前列腺特异性抗原（PSA）h PSA是前列腺的特异性标记物是前列腺的特异性标记物属于器官特异性抗原，不具备肿瘤特异性属于器官特异性抗原，不具备肿瘤特异性h PSA属于酶类肿瘤标记物，具有糜蛋白酶属于酶类肿瘤标记物，具有糜蛋白酶 样和胰蛋白酶的活性样和胰蛋白酶的活性h PSA在正常男性含量小于在正常男性含量小于4 g/Lh游离游离PSAPSA在正常男性含量小于在正常男性含量小于1 1 g/Lg/Lh前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎和前列前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎和前列腺损伤都会导致血清腺损伤都会导致血清PSAPSA升高升高h血清血清 PSAPSA在男性其他正常组织中和患其他在男性其他正常组织中和患其他癌肿时血清癌肿时血清PSAPSA都不会升高。都不会升高。前列腺癌的诊断前列腺癌的诊断644358总准确率总准确率899191PV-(%)402833PV+(%)592744特异性特异性(%)799286敏感性敏感性(%)血清血清PSA超声超声直肠指检直肠指检诊断方法诊断方法 在区别良性与恶性前列腺疾病时测定游离在区别良性与恶性前列腺疾病时测定游离PSAPSA（f-f-PSAPSA）与总）与总PSAPSA（tPSA)tPSA)的比率或复合的比率或复合PSA(cPSA)PSA(cPSA)与与tPSAtPSA的比的比率更有临床价值。率更有临床价值。f-PSAf-PSAtPSA tPSA 大于大于25%25%：多为良性病人。多为良性病人。f-PSAf-PSAtPSA tPSA 小于小于10%10%：多为前列腺癌。多为前列腺癌。cPSAcPSA在前列腺癌病人血清中的含量明显高于良性肿瘤病在前列腺癌病人血清中的含量明显高于良性肿瘤病人人（二）神经原特异性烯醇化酶（二）神经原特异性烯醇化酶（NSE）同功酶类肿瘤标志物，正常仅存于神经组织同功酶类肿瘤标志物，正常仅存于神经组织和红细胞中和红细胞中正常人血清值为正常人血清值为 13 g/L小细胞肺癌、神经母细胞瘤和神经内分泌肿小细胞肺癌、神经母细胞瘤和神经内分泌肿瘤及脑损伤时升高瘤及脑损伤时升高待测标本绝对禁止溶血，溶血可出现待测标本绝对禁止溶血，溶血可出现NSE血血清水平升高清水平升高NSE的临床意义的临床意义NSE在小细胞肺癌中的阳性率明在小细胞肺癌中的阳性率明显高于对照组，显高于对照组，NSE可可作为小细作为小细胞肺癌的高特异、高灵敏的肿瘤胞肺癌的高特异、高灵敏的肿瘤标志物标志物跟踪监测癌肿病情进展和疗效判断跟踪监测癌肿病情进展和疗效判断 -肺癌肺癌 NSE高于高于11.8 g/L预示肺癌患者生存期较预示肺癌患者生存期较短；化疗短；化疗24小时后小时后 NSE下降是治疗效果良好下降是治疗效果良好的标志。的标志。其他癌症其他癌症v癌症复发的早期标志，尤其是存在癌症复发的早期标志，尤其是存在胸腔、肝、骨骼、脑、脊髓转移胸腔、肝、骨骼、脑、脊髓转移vNSE升高的癌症患者升高的癌症患者5年存活率仅年存活率仅为为5%12%NSE的临床应用的临床应用60.966.8PV-(%)10084.2PV+(%)10093.7特异性(%)43.043.0敏感性(%)鉴别小细胞肺癌与良性肿物鉴别小细胞与非小细胞肺癌NSE反应参数反应参数四、激素类肿瘤标志物四、激素类肿瘤标志物 激素类肿瘤标志物根据分泌激素的激素类肿瘤标志物根据分泌激素的部位不同而分为正位性激素和异位性激部位不同而分为正位性激素和异位性激素两类。素两类。不同类型的恶性肿瘤可分泌不同种不同类型的恶性肿瘤可分泌不同种类的异生性激素或分泌出同一种的激素，类的异生性激素或分泌出同一种的激素，而同一种肿瘤细胞可分泌一种或多种不而同一种肿瘤细胞可分泌一种或多种不同的异生性激素。同的异生性激素。人绒毛膜促性腺激素（人绒毛膜促性腺激素（HCG）h糖蛋白类激素，由蛋白核心与位于羧基端糖蛋白类激素，由蛋白核心与位于羧基端 的以唾液酸为终止的侧链组成的以唾液酸为终止的侧链组成h两个亚基组成两个亚基组成:&:与与 -LH,TSH 和和 FSH相同相同:与与-LH有交叉有交叉h由合胞体滋养层细胞产生由合胞体滋养层细胞产生 h被证实是一种原始物质被证实是一种原始物质 (可作为一种有用的肿瘤标志物可作为一种有用的肿瘤标志物)HCG临床应用：临床应用：hHCG上升：几乎所有绒毛膜上皮细胞癌、上升：几乎所有绒毛膜上皮细胞癌、70%的非精原细胞性睾丸癌，胃肠道、肺、的非精原细胞性睾丸癌，胃肠道、肺、乳腺肿瘤乳腺肿瘤时亦可见。时亦可见。hHCG水平与肿瘤大小、疾病预后有关水平与肿瘤大小、疾病预后有关h脑脊液中脑脊液中HCG上升提示肿瘤有脑转移上升提示肿瘤有脑转移h可用于监测治疗可用于监测治疗五、基因类标志物的测定n癌基因n原癌基因n抑癌基因癌基因、抑癌基因与生长因子的关系癌基因、抑癌基因与生长因子的关系癌基因癌基因抑癌基因抑癌基因细胞细胞细胞细胞生长因子生长因子正调控正调控负调控负调控产物产物终末分化增 殖癌基因所编码的产物与细胞的肿瘤性转化相关。它以显性的方式癌基因所编码的产物与细胞的肿瘤性转化相关。它以显性的方式对细胞生长起阳性作用，并促进细胞增殖、转化。对细胞生长起阳性作用，并促进细胞增殖、转化。一、癌基因一、癌基因(oncogene)指在体外能引起细胞转化，在体内能诱发肿瘤的基因。指在体外能引起细胞转化，在体内能诱发肿瘤的基因。癌基因的名称一般用三个斜体小写字母表示癌基因的名称一般用三个斜体小写字母表示:myc、ras、src等。等。病毒癌基因病毒癌基因(virus oncogene,v-onc)存在于病毒基因组中的一段核苷酸片段存在于病毒基因组中的一段核苷酸片段（癌基因），它不编码病毒的结构成分，对（癌基因），它不编码病毒的结构成分，对病毒复制也没有作用，但可以使细胞持续增病毒复制也没有作用，但可以使细胞持续增殖、转化。如殖、转化。如src（一）病毒癌基因（一）病毒癌基因 调节和调节和调节和调节和启动转录启动转录启动转录启动转录 LTR gag pol env src LTR 长末端长末端长末端长末端重复序列重复序列重复序列重复序列癌基因癌基因正常的病毒基因正常的病毒基因正常的病毒基因正常的病毒基因产生病毒产生病毒产生病毒产生病毒核心蛋白核心蛋白核心蛋白核心蛋白产生逆转录产生逆转录产生逆转录产生逆转录酶和整合酶酶和整合酶酶和整合酶酶和整合酶 产生病毒产生病毒产生病毒产生病毒 外膜蛋白外膜蛋白外膜蛋白外膜蛋白产生产生产生产生酪氨酸酪氨酸 激酶激酶*病毒基因组结构病毒基因组结构如前，在该病毒基因结构中，它除含有病毒复制所需的基因如前，在该病毒基因结构中，它除含有病毒复制所需的基因（如（如gag、pol及及env）外，还含有一种特殊的转化基因即）外，还含有一种特殊的转化基因即src能导致所培养的细胞转化并呈恶性表型，也能在动物中引起恶能导致所培养的细胞转化并呈恶性表型，也能在动物中引起恶性肿瘤，这种基因被称为病毒癌基因（性肿瘤，这种基因被称为病毒癌基因（v-onc）。）。第一个被鉴定的蛋白质第一个被鉴定的蛋白质-是酪氨酸蛋白激酶基因，它来自是酪氨酸蛋白激酶基因，它来自 Rous Sarcoma Virus，称为，称为src目目 录录整合到基因组整合到基因组中的病毒中的病毒cDNA毗邻原毗邻原癌基因癌基因,并表达并表达一融合一融合mRNA内含细胞原癌内含细胞原癌基因基因,后者又被后者又被包装到病毒粒包装到病毒粒子中子中.（二）细胞癌基因（二）细胞癌基因n细胞癌基因细胞癌基因(cellular-oncogene,c-onc)从肿瘤组织细胞中分离出的致癌的基从肿瘤组织细胞中分离出的致癌的基因片段，即它是来自细胞中的致癌基因。因片段，即它是来自细胞中的致癌基因。（它由正常细胞基因组中的原癌基因（它由正常细胞基因组中的原癌基因(proto-oncogenes,pro-onc)转化而来。转化而来。二、原癌基因二、原癌基因1、概念：在正常细胞组织中存在的与癌基因相同相似的（高度、概念：在正常细胞组织中存在的与癌基因相同相似的（高度同源）核苷酸片段。同源）核苷酸片段。它是基因的正常版本，是癌基因的前体，这类基因的表达产物它是基因的正常版本，是癌基因的前体，这类基因的表达产物与正常细胞的生长，增殖、分化及调控等相关。与正常细胞的生长，增殖、分化及调控等相关。正常情况下，这些正常情况下，这些原癌基因原癌基因处于静止或低表达的状态，对细胞无处于静止或低表达的状态，对细胞无害，对维持细胞正常功能具有重要作用，当其被活化时，细胞发害，对维持细胞正常功能具有重要作用，当其被活化时，细胞发生癌变。生癌变。2 2、细胞原癌基因的特点、细胞原癌基因的特点.广泛存在于生物界中，从酵母到人的细胞普遍存在；广泛存在于生物界中，从酵母到人的细胞普遍存在；.基因序列高度保守；基因序列高度保守；.作用通过其产物蛋白质来体现；作用通过其产物蛋白质来体现；.某些物理、化学及感染性因等能使原癌基因激活。某些物理、化学及感染性因等能使原癌基因激活。它们既可以被导入逆录病毒而活化成病毒癌基因（它们既可以被导入逆录病毒而活化成病毒癌基因（v-onc），也），也可因突变或异常表达而活化成细胞癌基因（可因突变或异常表达而活化成细胞癌基因（c-onc）。活化的癌）。活化的癌基因能诱导细胞的异常增殖和肿瘤发生。基因能诱导细胞的异常增殖和肿瘤发生。3 3、细胞原癌基因的分类及其产物、细胞原癌基因的分类及其产物生长因子，如生长因子，如sis，生长因子受体，如生长因子受体，如fms、erbB，蛋白激酶及其它信号转导组分，如蛋白激酶及其它信号转导组分，如src、ras、raf，与细胞周期调控相关的蛋白，如与细胞周期调控相关的蛋白，如RB、P53、bcl-1转录因子，如转录因子，如myc、fos、jun等。等。细胞外生长因子细胞外生长因子 sis-P28跨膜的生长因子受体跨膜的生长因子受体c-src、c-abl、c-mos、c-raf细胞内信号传导体细胞内信号传导体c-src、c-abl、c-ras、c-mas、H-ras、K-ras、N-ras、crk核内转录因子核内转录因子 myc、fos与细胞周期调控相关的蛋白，如与细胞周期调控相关的蛋白，如RB、P53、bcl-1原癌基因的产物原癌基因的产物目目 录录（原癌基因）（原癌基因）三、抑三、抑 癌癌 基基 因因Anti-oncogenes抑癌基因抑癌基因(cancer suppressive gene,anti-oncegene)抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因成的基因。在在70年代广泛研究癌基因之前，通过体细胞杂交、年代广泛研究癌基因之前，通过体细胞杂交、流行病统计学及细胞遗传学分析已指出，存在能抑制细胞转化的流行病统计学及细胞遗传学分析已指出，存在能抑制细胞转化的基因表型。基因表型。（一）、抑癌基因的基本概念（一）、抑癌基因的基本概念 关于肿瘤细胞的增生能被某种基因产物抑制的概念，关于肿瘤细胞的增生能被某种基因产物抑制的概念，首先来自体细胞杂效试验。首先来自体细胞杂效试验。Harris于于1969年发现，正常年发现，正常细胞与肿瘤细胞融合所产生的杂交细胞不再具有致瘤性，细胞与肿瘤细胞融合所产生的杂交细胞不再具有致瘤性，提示从正常细胞来的某种基因起抑制肿瘤发生的作用。而提示从正常细胞来的某种基因起抑制肿瘤发生的作用。而当融合细胞丧失了含有这种特殊基因痤的染色体时，则可当融合细胞丧失了含有这种特殊基因痤的染色体时，则可以重现其致瘤性，从而证明该染色体携带抑癌基因。以重现其致瘤性，从而证明该染色体携带抑癌基因。细胞杂交试验细胞杂交试验正常细胞正常细胞肿瘤细胞肿瘤细胞非肿瘤型杂交细胞非肿瘤型杂交细胞杂交融合杂交融合肿瘤细胞肿瘤细胞1 1肿瘤细胞肿瘤细胞2 2杂交融合杂交融合非肿瘤型杂交细胞非肿瘤型杂交细胞正常细胞正常细胞失去某些基因失去某些基因肿瘤细胞肿瘤细胞（二）、常见的抑癌基因（二）、常见的抑癌基因癌基因、抑癌基因与肿瘤发生癌基因、抑癌基因与肿瘤发生（一）获得启动子与增强子（一）获得启动子与增强子（二）基因易位、重排（二）基因易位、重排（三）原癌基因扩增（三）原癌基因扩增（四）点突变（四）点突变（五）甲基化程度降低（五）甲基化程度降低出现新的表达产物出现新的表达产物 出现过量的正常表达产物出现过量的正常表达产物出现异常、截短的表达产物出现异常、截短的表达产物一、癌基因活化的机制一、癌基因活化的机制癌基因被激活的结果癌基因被激活的结果二、原癌基因激活与肿瘤发生二、原癌基因激活与肿瘤发生（一）、（一）、ras 基因变异与肿瘤发生基因变异与肿瘤发生 （二）、（二）、myc 基因变异与肿瘤发生基因变异与肿瘤发生 （三）、（三）、neu 基因变异与肿瘤发生基因变异与肿瘤发生（四）、（四）、bcl 基因变异与肿瘤发生基因变异与肿瘤发生（五）、（五）、mdm2 基因基因三、抑癌基因失活与肿瘤发生三、抑癌基因失活与肿瘤发生（一）视网膜母细胞瘤基因（一）视网膜母细胞瘤基因（Rb基因）基因）Rb（人类视网膜细胞瘤）基因是第一个被克隆的（人类视网膜细胞瘤）基因是第一个被克隆的抑癌基因。抑癌基因。Rb的突变导致视网膜瘤。散发性的突变导致视网膜瘤。散发性Rb发发生较晚，一般只危及一眼，遗传性生较晚，一般只危及一眼，遗传性Rb往往危及双往往危及双眼，眼，3岁左右发病形成多个肿瘤。岁左右发病形成多个肿瘤。在在G1期期Rb与与E2F结合，抑制结合，抑制E2F的活性，在的活性，在G1/S期期Rb被被细胞周期蛋白依赖性激酶细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2）磷酸化失活而释放出）磷酸化失活而释放出转录因子转录因子E2F，促进蛋白质的合成，使细胞周期运行。，促进蛋白质的合成，使细胞周期运行。1、Rb基因基因105KD、27个外显子，含个外显子，含25个个AA残基，单链，去磷酸化为活性残基，单链，去磷酸化为活性形式。形式。2、Rb基因的生物学功能基因的生物学功能（1）、监控、限定细胞周期按程序进行（负调控）、监控、限定细胞周期按程序进行（负调控）（2）、抑制）、抑制C-myc、C、fos 的转录，负调控细胞增殖的转录，负调控细胞增殖（3）、结合存在与细胞中的异常蛋白，病毒蛋白防止其使细胞）、结合存在与细胞中的异常蛋