miR-183、miR-720诊断结直肠癌的价值及与TNM分期、p53和Ki67表达的关系.pdf

论著、诊断结直肠癌的价值及与 分期、和 表达的关系贲如银，贲如琴，季进锋，黄潇潇，黄浩，范玲玲基金项目：江苏省自然科学基金（）作者单位：江苏 南通，南通市肿瘤医院 综合内科第一及通信作者：贲如银，女，本科，主治医师，研究方向：消化系疾病，：【摘要】目的 探讨、诊断结直肠癌的价值及与 分期、和 表达的关系。方法 选取 年 月至 年 月在南通市肿瘤医院就诊的结直肠癌患者 例，同时选取结直肠息肉患者 例作为对照，比较结直肠癌和息肉患者、水平差异，分析、诊断结直肠癌的价值，同时分析、与结直肠癌临床病理特征的关系。结果 结直肠癌患者外周血、相对表达量分别为（）和（），明显高于结直肠息肉患者（）；外周血、诊断结直肠癌的 曲线下面积分别为 （：）和 （：），；分期 期患者外周血 和 相对表达量分别为（）和（），高于期患者（）；阳性表达患者外周血 和 相对表达量分别为（）和（），高于 阴性表达患者（）；阳性表达患者外周血 和 相对表达量分别为（）和（），高于 阴性表达患者（）；肿瘤大小 患者外周血 相对表达量为（），高于肿瘤大小 患者（）；外周血、与 分期、和 呈正相关（）。结论 结直肠癌患者外周血、水平升高，在诊断结直肠癌方面有一定应用价值，两者水平与结直肠癌 分期、表达、表达等存在相关性。【关键词】结直肠癌；相关性：文章编号：（），（，）：，：【】，（）（），（）中国肿瘤外科杂志 年 月第 卷第 期 ，（：）（：），（）（）（），（）（）（），（）（）（），（）（），（），（），【】；结直肠癌的发病率近年来逐年上升，由于结直肠癌早期阶段的临床表现缺乏特异性，导致多数患者在确诊时已至中晚期，该病已成为社会医疗资源的沉重负担。早期接受根治性手术治疗可提高疗效，延长患者的生存时间，因此临床上一直在寻找早期结直肠癌的诊断指标。基础研究已经证实，是一种抑癌基因，一旦发生突变，可导致抑癌作用丧失及肿瘤细胞的生长加速。是一种细胞核相关抗原，与肿瘤细胞的增殖过程有关，是目前临床诊断恶性肿瘤以及评估恶性程度的常用指标之一。微小核糖核酸（，）是一类微小、非编码 分子，参与调控基因表达、细胞增殖、分化、凋亡等生理过程。已有研究发现，及 在正常组织和胃癌组织中的表达不同，可作为胃癌诊断的新型肿瘤标记物。但目前关于、在结直肠癌诊断中的价值研究较少。本研究探讨、诊断结直肠癌的价值及与 分期、和 表达的关系，现报道如下。资料与方法 一般资料 选取 年 月至 年 月，在南通市肿瘤医院就诊的结直肠癌患者 例，同时选取结直肠息肉患者 例作为对照，结直肠癌和息肉患者年龄、性别等比较差异无统计学意义（），见表。纳入标准：均经病理学确诊；未接受放化疗等治疗；无局部或全身感染者；成年患者；患者及家属知情同意。排除标准：合并有其他恶性肿瘤者；有肝、肾等其他器官严重 疾 病。本 研 究 经 过 伦 理 委 员 会 批 准 通 过（）。检查方法所有患者均于清晨空腹状态下采集静脉血标本 ，加入无抗凝剂的离心管，静置 后于室温下离心处理，转速 ，时长 。取血清置入 管，冻存于 冰箱。参考血清 快速提取试剂盒说明书之要求提取血清总。以 为内参，逆转录反应体系：、；、；、。采用 型荧光定量 仪进行扩增和荧光信号检测。扩增条件：、个循环，、进行 个循环，重复 次。上 游 引 物 序 列，下游引物序列为试剂盒通用引物 序 列。上 游 引 物 序 列，下游引物序列 表 结直肠癌和息肉患者临床一般资料比较组别例数性别例（）男女年龄（岁）（）体质量指数（）（）结直肠癌（）（）结直肠息肉（）（）值 值 中国肿瘤外科杂志 年 月第 卷第 期 ，。每个反应体系中荧光信号达到设定阈值所经历的循环数即 值，采用 法计算 及 的相对表达水平，其中 目的基因。所有患者均经电子肠镜夹取病灶组织，采用 甲醛固定、梯度乙醇脱水、石蜡包埋及切片。将切片贴于载玻片后依次进行烤片、脱蜡、脱水、抗原修复，孵育一抗和二抗，加 显色，苏木素染色、中性树脂封片。实验过程中所用之单克隆抗体、显色试剂盒，免疫组化试剂盒等均购自北京中杉金桥有限公司。所有染色切片由两名病理医生单独阅片，得出一致结果为最终结果。及 阳性结果定义为细胞核呈棕黄色。阳性细胞率计 分，阳性细胞率计 分，阳性细胞率计 分，阳性细胞率计 分。染色强度：无着色计 分，浅黄色计 分，棕黄色计 分；棕褐色计 分。染色强度阳性细胞率评分为最终评分，最终评分 分判为阴性，分判为阳性。统计学处理 采用 软件，计量资料包括：、等，采用均数标准差（）表示，检验分析组间差异；性别采用例（）表示，检验分析组间差异；、与 分期、和 表达的相关性采用 秩相关分析；外周血、诊断结直肠癌的价值采用 曲线分析。表示差异有统计学意义。结果 结直肠癌和结直肠息肉外周血、比较 结直肠癌患者外周血、相对表达量明显高于结直肠息肉患者（），见表。表 结直肠癌和结直肠息肉外周血、比较（）组别例数相对表达量相对表达量结直肠癌 结直肠息肉 值 值 外周血、诊断结直肠癌的价值 外周血、诊断结直肠癌的 曲线下面积分别为 （：）和（：），截断值分别为 和 ，灵敏性分别为 和 ，特异性分别为 和 ，见图。图 外周血、诊断结直肠癌的 曲线图 外周血 与结直肠癌患者病理特征的关系 分期期患者外周血 相对表达量高于 期患者（）；阳性表达患者外周血 相对表达量高于 阴性表达患者（）；阳性表达患者外周血 相对表达量高于 阴性表达患者（）。见表。表 外周血 与结直肠癌患者病理特征的关系（）临床病理特征例数相对表达量 值 值性别 男 女 年龄 岁 岁 体质量指数 部位 结肠 直肠 分期 肿瘤大小 分化程度 低分化 中高分化 表达 阳性 阴性 表达 阳性 阴性 中国肿瘤外科杂志 年 月第 卷第 期 ，外周血 与结直肠癌患者病理特征的关系 分期 期患者外周血 相对表达量高于 期患者（）；肿瘤大小 患者外周血 相对表达量高于肿瘤大小 患者（）；阳性表达患者外周血 相对表达量高于 阴性表达患者（）；阳性表达患者外周血 相对表达量高于 阴性表达患者（）。见表。表 外周血 与结直肠癌患者病理特征的关系（）临床病理特征例数相对表达量 值 值性别 男 女 年龄 岁 岁 体质量指数 部位 结肠 直肠 分期 肿瘤大小 分化程度 低分化 中高分化 表达 阳性 阴性 表达 阳性 阴性 外周血、与 分期、和 表达相关性分析将结直肠癌患者外周血、与 分期、和 表达进行相关分析，外周血、与 分期、和 呈正相关（），见表。表 外周血、与 分期、和 表达相关性分析指标 值 值 值 值 分期 表达 表达 讨论结直肠癌是临床常见的消化系统恶性肿瘤，具有较高的发病率和死亡率。近年来随着国民生活水平的提高，高热量、高蛋白、高盐、高脂、低膳食纤维的饮食结构越来越常见，导致结直肠癌的发病率逐年升高。结直肠癌的发病机制比较复杂，涉及癌基因突变、活化、抑癌基因丢失、表达失调及调亡调节机制紊乱。结直肠息肉可认为是结直肠癌的癌前病变阶段。早期明确诊断对临床合理治疗具有指导意义。微小 是一类非编码 分子，可通过阻断降解、翻译等过程而参与调控人类肿瘤信号通路，在正常组织和肿瘤组织中的表达水平不同，在恶性肿瘤的诊断、疗效评估方面具有一定的价值。、是目前临床研究较多的微小，已有研究证实，、在乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭。因此本研究尝试探讨、在结直肠癌患者中的表达。本研究发现，结直肠癌患者外周血、相对表达量明显高于结直肠息肉患者；外周血、诊断结直肠癌的 曲线下面积分别为 和 。这一结果提示，结直肠癌患者外周血、水平升高，在鉴别诊断结直肠病变类型方面有一定的应用价值。这是由于 是保守进化的微小 族成员，可通过反向调节肿瘤抑制基因、控制分化或凋亡基因而促进恶性肿瘤的发生。可通过调节 转录因子而参与恶性肿瘤的发生。今后可将外周血、相对表达量作为鉴别诊断结直肠良恶性病变的辅助诊断指标。本研究还对比不同病情严重程度的结直肠癌患者的外周血 和 相对表达量，发现 分期期患者外周血 和相对表达量高于 期患者；肿瘤大小 患者外周血 相对表达量高于肿瘤大小 患者。这一结果提示，结直肠癌患者外周血 和表达水平与 分期和肿瘤体积有关。这中国肿瘤外科杂志 年 月第 卷第 期 ，是由于 分期晚、肿瘤体积大的患者体内肿瘤细胞增殖活性更强。循环中 和 大多来自脱落细胞，也可能是机体执行调控功能时主动分泌，其水平越高，提示肿瘤的复制活性更强，肿瘤 分期更晚、肿瘤体积更大。基础研究认为，基因类型包括野生型和突变型，其作用相反，其中野生型具有抑瘤作用，而突变型则具有促瘤作用。绝大多数人类肿瘤中可检测到不同比例的 突变。几乎存在于细胞有丝分裂的各个周期（除 期外），临床常用其评估恶性肿瘤细胞的增殖活性。本研究发现，阳性表达患者外周血 和 相对表达量高于 阴性表达患者；阳性表达患者外周血 和 相对表达量高于 阴性表达患者。上述结果提示，结直肠癌患者外周血、表达水平与 表达、表达情况有关。恶性肿瘤的发生和进展是由于肿瘤细胞的增殖与凋亡之间失去平衡所致，表达、表达阳性者细胞增殖更活跃，凋亡减少，大量脱落细胞释放至外周血，引起外周血、水平升高，并稳定存在于血清及组织中。本研究还通过进一步的相关性分析也证实了外周血、与 分期、和 呈正相关。这一结果提示，在今后的临床工作中可通过外周血、水平来辅助评估结直肠癌 分期、和 阳性情况，有助于临床明确诊断和评估结直肠癌病情，对临床具有一定的参考价值。综上所述，结直肠癌患者外周血、水平升高，在诊断结直肠癌方面有一定应用价值，两者水平与结直肠癌 分期、表达、表达等存在相关性。参考文献：李卓，高娟，王馨，等 结直肠癌实验室生物标志物研究进展 中华预防医学杂志，（）：常守凤，党雅梅，张晓玲，等 结直肠癌组织的 水平和 突变情况及临床意义分析 临床肿瘤学杂志，（）：温聪聪，周姝，刘华，等 内镜下特征联合 对早期结直肠癌黏膜下浸润的评估价值 同济大学学报（医学版），（）：赵建刚，赵光远，鲍双振，等 通过 轴调节结直肠癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭 中国比较医学杂志，（）：汪根良，华崇俊，张向明，等 靶向调控 抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭分子机制的研究 世界华人消化杂志，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：高娜，楚惠媛 微小 在恶性肿瘤中对蛋白酪氨酸激酶 调控作用的研究进展 中国生物制品学杂志，（）：张雅敏，刘金鹏，万伟，等 通过靶向 抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间充质转化 山西医科大学学报，（）：，：闫薛，张巍，张婷，等、及 在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义 川北医学院学报，（）：，（）：王娅南，魏亚宁，范翔宇，等 通过靶向调控 抑制胃癌进展 华中科技大学学报（医学版），（）：，（）：闫峰，罗玉敏，朱玲玲，等 野生型 诱导的磷酸酶 在细胞稳态调节中作用的研究进展 中国比较医学杂志，（）：张辉，叶颖江，周静 结直肠癌 突变状态与细胞命运决定子 表观遗传表达相关性研究 中华实验外科杂志，（）：丁剑锋，刘颖，靳钦，等 结直肠癌中、及 的表达及临床意义 重庆医学，（）：，（，），（）：，（）：修回日期：本文编辑：钦嫣中国肿瘤外科杂志 年 月第 卷第 期 ，