麻黄细辛附子汤干预Notc...g细胞纠正Th2偏移的研究_倪钰莹.pdf

中国中医急症 2023年2月第32卷第2期JETCM.Feb.2023，Vol.32，No.2 研究报告 麻黄细辛附子汤干预Notch通路调控Treg细胞纠正Th2偏移的研究倪钰莹孙彤彤范淑月吴璐蔚高婧崔颖刘敏（北京中医药大学，北京 100029）中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：1004-745X（2023）02-0200-05doi：10.3969/j.issn.1004-745X.2023.02.003【摘要】目的 探究麻黄细辛附子汤对Th2偏移、Treg细胞功能及Notch信号通路的干预作用。方法 体外培养CD4+T细胞，流式细胞仪鉴定纯度，使用白细胞介素-4（IL-4）、干扰素-抗体（Anti-IFN-）诱导建立Th2细胞分化模型，DAPT及麻黄细辛附子汤干预24 h后收集上清及细胞，ELISA检测白细胞介素-5（IL-5）、干扰素-（IFN-）、转化生长因子1（TGF-1）含量，RT-PCR检测T细胞特异性转录因子（T-bet）、转录因子结合蛋白-3（GATA-3）、叉头翼状螺旋转录因子3（FOXP3）、Notch1 mRNA表达，Western blotting检测T-bet、GATA-3、FOXP3、Notch1蛋白表达。结果 1）较之空白组，模型组IL-5含量升高，IFN-、TGF-1含量降低（P 0.01）；较之模型组，各给药组IL-5含量降低，IFN-、TGF-1含量升高（P0.01）。2）较之空白组，模型组T-bet、FOXP3 mRNA 表达降低，GATA-3、Notch1 mRNA 表达升高（P 0.01）；较之模型组，各给药组 T-bet、FOXP3 mRNA表达升高，GATA-3、Notch1 mRNA表达降低（P 0.01）。3）较之空白组，模型组T-bet、FOXP3蛋白表达降低，GATA-3、Notch1蛋白表达升高（P0.01）；较之模型组，各给药组T-bet、FOXP3蛋白表达升高，GATA-3、Notch1蛋白表达降低（P0.01）。结论 1）麻黄细辛附子汤能够下调IL-5分泌和GATA-3表达，促进IFN-分泌和T-bet表达，纠正Th2偏移。2）麻黄细辛附子汤有助于Treg细胞分化增殖，能够促进TGF-1分泌和FOXP3表达。3）麻黄细辛附子汤能够通过抑制Notch1表达，促进Treg细胞功能发挥，纠正Th2偏移。【关键词】变应性鼻炎麻黄细辛附子汤Notch信号通路Treg细胞Th2偏移Study on the Intervention of Mahuang Xixin Fuzi Decoction in Notch Pathway to Regulate Treg Cells toCorrect Th2 ShiftNi Yuying，Sun Tongtong，Fan Shuyue，Wu Luwei，Gao Jing，Cui Ying，Liu Min.BeijingUniversity of Chinese Medicine，Beijing 100029，China.【Abstract】Objective：To explore the intervention effect of Mahuang Xixin Fuzi Decoction on Th2 shift，Treg cellfunction and Notch signaling pathway.Methods：The CD4+T cells were cultured in vitro，and the cell purity wasidentified by flow cytometry.The Th2 cell differentiation model was established by induction with IL-4 and Anti-IFN-.The supernatant and cells were collected after DAPT and Mahuang Xixin Fuzi Decoction intervened for 24hours.ELISA was used to detect the IL-5，IFN-and TGF-1 content.The expressions of T-bet，GATA-3，FOXP3and Notch1 mRNA were detected by RT-PCR，and the expressions of T-bet，GATA-3 and FOXP3 proteins were detected by Western blotting.Results：1）Compared with the blank group，IL-5 content was increased and IFN-andTGF-1 content was decreased in the model group（P 0.01）.Compared with the model group，IL-5 content wasdecreased and IFN-and TGF-1 content was increased in each administration group（P 0.01）.2）Compared withthe blank group，the expression of T-bet and FOXP3 mRNA was decreased and the expression of GATA-3 andNotch1 mRNA was increased in the model group（P 0.01）.Compared with the model group，the expression of T-betand FOXP3 mRNA was increased and the expression of GATA-3 and Notch1 mRNA was decreased in each administration group（P 0.01）.3）Compared with the blank group，T-bet and FOXP3 protein expression was decreased andGATA-3 and Notch1 protein expression was increased in the model group（P 0.01）.Compared with the modelgroup，T-bet and FOXP3 protein expression was increased and GATA-3 and Notch1 protein expression wasdecreased in each administration group（P0.01）.Conclusion：1）Mahuang Xixin Fuzi Decoction can down-regulateIL-5 secretion and GATA-3 expression，and promote IFN-secretion and T-bet expression to correct the Th2 shift.基金项目：国家自然科学基金项目（81774375）通信作者（电子邮箱：）-200中国中医急症 2023年2月第32卷第2期JETCM.Feb.2023，Vol.32，No.2变应性鼻炎（AR）是由IgE介导的，以阵发性喷嚏、流鼻涕和鼻塞为特征的I型变态反应性疾病。其发病机制主要由功能性CD4+T细胞亚群失衡引起，包括Th1/Th2免疫失衡，即Th2介导的过度活动和Th1反应的抑制1。Treg细胞也被证实在免疫抑制和气道炎症的恢复中起着至关重要的作用，可能参与AR的发病过程2。麻黄细辛附子汤在临床上运用广泛，AR一直是其治疗的优势病种。该方可通过干预多细胞-多靶点，调节免疫炎症反应，干涉凋亡、代谢等生物过程诸多方面对AR发挥治疗作用3。Notch信号通路广泛参与T细胞的发育和分化，并与许多免疫系统疾病密切相关4。麻黄细辛附子汤是否通过该通路调节Th1/Th2平衡，干预Treg细胞功能尚不明确。本研究拟通过细胞实验探讨麻黄细辛附子汤对Th2偏移、Treg细胞功能、Notch信号通路的干预作用。现报告如下。1材料与方法1.1实验动物C57BL/6J雄性小鼠，6周龄（205）g，购于斯贝福（北京）生物技术有限公司，许可证号：SYXK（京）2020-0033，SPF级饲养。本研究经北京中医药大学动物实验伦理委员会审查通过，伦理号：4-2021102702-4042。1.2试药与仪器麻黄、细辛、附子购自北京仟草中药饮片有限公司；（3，5二氟苯乙酰基）-L-丙氨酰基-L-2-苯基苷氨酸叔丁酯（DAPT）（批号：33812，MCE）；CD4+T CellIsolation Kit、T Cell Activation/Expansion Kit、CytoBoxTh2（批 号：5200907399，5201110745，5210300999，Miltenyi）；CD3、CD4抗体（批号：51000735，51001183，Proteintech）；CCK-8 试剂盒（批号：SY501，DOJINDO）；干扰素（IFN-）、白细胞介素-5（IL-5）、转化生 长 因 子-1（TGF-1）、ELISA 试 剂 盒（批 号：L211005311，L211103251，L211005311，云克隆）；RNA提取试剂盒、反转录试剂盒、预混型qPCR试剂盒（批号：A3A2060，A4A0492，A4A0177，艾科瑞）；T细胞特异性转录因子（T-bet）、转录因子结合蛋白-3（GATA-3）、叉头翼状螺旋转录因子 3（FOXP3）、Notch1 抗体（批号：00071014，10004469，00051274，00088737，Proteintech）；CO2培养箱（型号：311，Thermo）；流式细胞仪（型号：Cantoll，BD Biosciences）；多功能酶标仪（型号：Safire2，Tecan）；实时荧光定量PCR仪（型号：MA-6000，Molarray）等。1.3CD4+T细胞提取与纯度检测C57小鼠颈椎脱臼后超净台内无菌剥离脾脏，使用注射器针柄在细胞筛网上将脾脏研磨均匀，PBS溶液冲洗，红细胞裂解液裂解红细胞，经磁珠阴性分选后得到CD4+T细胞悬液。取100 L细胞悬液加入CD3、CD4抗体各10 L，4 孵育30 min后流式细胞仪检测T细胞纯度。1.4药物制备、CCK-8毒性检测1.4.1中药水提液制备将麻黄、细辛、附子3味药按照6 3 9的比例称量，加入纯净水后煎成1 g/mL的中药浓缩液，4 下12 000 r/min离心30 min，收集上清液，0.22 m细菌滤器过滤后置于-20 备用。1.4.2麻黄细辛附子汤及DAPT最佳干预浓度CD4+T细胞以每孔1105个/100 L接种于96孔板中，加入10 L不同浓度的麻黄细辛附子汤和DAPT溶液，培养24 h后加入10 L CCK-8溶液，4 h后酶标仪读取OD值。1.5造模及给药CD4+T细胞以2.5106/mL/孔的密度接种于6孔板内，分为空白组、模型组、DAPT组和麻黄细辛附子汤高、中、低剂量组，空白组加入含 10 ng/mL 白细胞介素-2（IL-2）的完全培养基，其余各组加入含10 ng/mLIL-2、10 ng/mL IL-4、10 g/mL Anti-IFN-的Th2分化诱导培养基，每组均加入MACSIBead颗粒刺激T细胞增殖，培养6 d后，以1107/mL/孔的密度接种于新的6孔板，并分别给药刺激，24 h后收集细胞及上清进行后续实验。1.6指标检测1.6.1ELISA检测上清液中IL-5、IFN-、TGF-1含量根据试剂盒说明书检测上清液中IL-5、IFN-、TGF-1含量。1.6.2RT-PCR 检测 T-bet、GATA-3、FOXP3、Notch1mRNA 表达提取总 RNA，检测浓度后反转录成cDNA，加入相应引物后进行PCR扩增，以GAPDH作为内参，数据采用2-Ct方法分析。引物序列见表1。1.6.3Western blotting 检测 T-bet、GATA-3、FOXP3、Notch1蛋白表达提取蛋白并定量。电泳，转膜，封闭后，4 过夜孵育一抗，二抗孵育1 h，ECL显影液显影，Image J软件分析蛋白条带灰度值。1.7统计学处理采用 SPSS20.0 统计软件。计量资料以（xs）表示。多组样本间比较采用单因素方差分析，方差齐时，2）Mahuang Xixin Fuzi Decoction helps the differentiation and proliferation of Treg cells，and can promote TGF-1secretion and FOXP3 expression.3）Mahuang Xixin Fuzi Decoction can promote Treg cell function and correct Th2shift by inhibiting Notch1 expression.【Key words】Allergic rhinitis；Mahuang Xixin Fuzi Decoction；Notch signaling pathway；Treg cells；Th2 shift-201中国中医急症 2023年2月第32卷第2期JETCM.Feb.2023，Vol.32，No.2用 LSD 法进行多重比较，方差不齐则采用非参数检验。P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1磁珠分选纯度、CCK-8检测结果流式细胞仪检测CD4+T细胞纯度达98.7%，见图1。CCK-8结果显示，麻黄细辛附子汤质量浓度在2550 mg/mL区间时与细胞活性成反向调节趋势，为了探究本方的干预作用与药物浓度的关系，后续选择25、40、50 mg/mL进行实验。DAPT在浓度为3.25 mol/L时细胞活性最大，后续选用该浓度进行干预。见表2。2.2各组细胞上清液IL-5、IFN-、TGF-1含量比较见表3。与空白组相比，模型组IL-5含量显著升高，IFN-、TGF-1含量显著降低（P0.01）；与模型组相比，麻黄细辛附子汤高、中、低剂量组及DAPT组IL-5含量均降低，IFN-、TGF-1含量均升高（P0.01）。2.3各组细胞T-bet、GATA-3、FOXP3、Notch1 mRNA表达水平比较见表 4。与空白组相比，模型组细胞中 T-bet、FOXP3 mRNA相对表达量显著降低，GATA-3、Notch1mRNA 相对表达量显著升高（P 0.01）；与模型组相比，麻黄细辛附子汤高、中、低剂量组及DAPT组细胞中T-bet、FOXP3 mRNA相对表达量显著升高，GATA-P1代表淋巴细胞群，Q3代表CD3+T细胞，Q4代表CD4+T细胞群图1细胞磁珠分选纯度表2各组T细胞活性比较（xs）组别中药0 mg/mL组中药0.1 mg/mL组中药1 mg/mL组中药2.5 mg/mL组中药5 mg/mL组中药10 mg/mL组中药25 mg/mL组中药50 mg/mL组中药100 mg/mL组DAPT 0 mol/L组DAPT 1.5 mol/L组DAPT 3.25 mol/L组DAPT 6.5 mol/L组DAPT 11 mol/L组DAPT 22.5 mol/L组DAPT 45 mol/L组n3333333333333333细胞活性1.000.001.350.02*1.650.10*2.360.07*3.750.06*4.560.04*5.550.10*2.290.04*4.090.08*1.000.001.600.361.800.281.600.281.650.191.410.121.370.08注：与中药0 mg/mL组比较，P0.01；与DAPT 0 mol/L组比较，P0.01。组 别空白组模型组DAPT组高剂量组中剂量组低剂量组n333333IL-511.832.4877.251.61*22.431.9341.991.0047.671.9434.883.06IFN-127.8813.4512.583.88*92.955.3148.414.3732.930.3772.661.40TGF-140.450.3612.440.43*38.620.2219.640.2916.940.1225.350.39表3各组细胞上清液中IL-5、IFN-、TGF-1含量比较（pg/mL，xs）注：与空白组比较，P0.01；与模型组比较，P0.01。下同。组 别空白组模型组DAPT组高剂量组中剂量组低剂量组n333333T-bet1.000.070.330.05*0.790.020.560.030.410.000.820.03GATA-31.000.081.780.04*0.990.031.430.051.720.021.100.06FOXP31.000.020.580.02*1.170.040.720.050.710.020.920.03Notch11.000.071.610.07*1.040.091.340.071.240.041.110.04表4各组细胞T-bet、GATA-3、FOXP3、Notch1 mRNA相对表达量（xs）基因名称T-betGATA-3FOXP3Notch1GAPDH正向/反向FRFRFRFRFR引物序列ATTGGTTGGAGAGGAAGCGGGCACCAGGTTCGTGACTGTACCATTACCACCTATCCGCCCTTCACACACTCCCTGCCTTCTGATCCCCCTCTAGCAGTCCCGTCTGAAGGCAGAGTCAGGTGTGGCTTCCTTCTACTGCGCTTTGCCGTTGACAGGGTTGGGTGAAGGTCGGTGTGAACGCTCGCTCCTGGAAGATGGTG表1引物序列-202中国中医急症 2023年2月第32卷第2期JETCM.Feb.2023，Vol.32，No.23、Notch1 mRNA相对表达量显著降低（P0.01）。2.4各组细胞T-bet、GATA-3、FOXP3、Notch1蛋白表达水平比较见图 2、表 5。与空白组相比，模型组细胞中 T-bet、FOXP3蛋白表达量显著降低，GATA-3、Notch1蛋白表达量显著升高（P 0.01）；与模型组相比，麻黄细辛附子汤高、中、低剂量组及DAPT 组细胞中T-bet、FOXP3蛋白表达量显著升高，GATA-3、Notch1蛋白表达量显著降低（P0.01）。3讨论AR发病机制复杂，主要与Th1/Th2失衡，Th2免疫应答增强有关。Th1细胞分化不足被认为是Th2细胞过度分化的主要原因5。然而，近年来研究表明，Treg细胞在调节机体免疫反应、防止Th2过度应答中发挥着重要作用6。在AR患者中观察到Treg细胞数量减少和功能缺陷。增加Treg细胞数量、改善抑制功能可能是调节 Th2 反应的合理策略7。因此，深入研究CD4+T细胞分化失衡的发病机制及其调节机制，可以为AR等变态反应疾病的治疗提供新的方向。麻黄细辛附子汤出自 伤寒论，由麻黄、细辛、附子组成，方中麻黄散寒邪而发表，附子温肾阳而补虚，细辛通彻表里，为麻附之臂助，3药合用有散寒通窍、温阳固表之效。大量临床和实验研究均证实本方对防治AR优势显著、效果突出8-9。课题组前期研究发现，本方能够改善AR小鼠过敏症状，增加Th1细胞因子及转录因子表达，降低Th2细胞因子及转录因子表达，逆转Th2偏移，恢复Th1/Th2平衡10-11，然而对其调节机制未有研究，所以本实验在前期研究基础上通过体外细胞实验对麻黄细辛附子汤纠正Th2偏移作用机制进行深入探究。正常生理状态下，机体 Th1/Th2 维持动态平衡。过敏原刺激后，Treg细胞免疫抑制功能下调，Th1/Th2平衡向Th2方向偏移12。Th1细胞分泌IFN-、IL-2等细胞因子，能够抑制嗜酸性粒细胞募集，减少IgE产生，减轻Th2反应13。Th2细胞分泌IL-4、IL-5、白细胞介素-13（IL-13）等细胞因子，可以促进变态反应疾病的发生并加重过敏反应症状14。Treg细胞作为免疫反应的负调控细胞，通过分泌抑制性细胞因子白细胞介素-10（IL-10）、TGF-1、细胞-细胞接触、与抗原提呈细胞相互作用以抑制 Th0 向 Th2 细胞分化，诱导效应T细胞凋亡，缓解呼吸道过敏性炎症15。T-bet、GATA-3、FOXP3为Th1、Th2、Treg特异性转录因子，调控Th1、Th2、Treg 分化及功能16。Th1、Th2、Treg细胞因子、转录因子表达的改变可作为衡量AR发生发展的重要指标。Notch 信号通路参与调节淋巴细胞的活化和分化。Notch通路由受体和配体组成，被激活后，Notch的胞内区（NICD）被-分泌酶释放并移位到细胞核，与 DNA 结合蛋白相互作用，调节靶基因的表达17。DAPT 为-分泌酶抑制剂，可以阻断 Notch 信号传递。研究表明，Notch1激活是Th2偏移的关键因素，可以促进 GATA-3、IL-4 的表达，诱导 Th2 细胞分化18。此外，Notch1对Treg细胞具有负向调控作用，可以阻断Notch1信号，促进FOXP3表达，使Treg细胞分化增加19-20。本实验结果表明，与空白组比较，模型组Th1细胞因子IFN-、转录因子T-bet显著降低，Th2细胞因子IL-5、转录因子GATA-3显著升高，Treg细胞因子TGF-1、转录因子FOXP3显著降低，Notch1表达显著升高，表明IL-4、Anti-IFN-干预CD4+T细胞后可以激活Notch通路，抑制Th1、Treg分化，引起Th2优势应答。而麻黄细辛附子汤干预后可以逆转上述现象，上调Th1相关表达，下调Th2相关表达，恢复Th1/Th2平衡，且能够上调 FOXP3 表达，增加抑制性细胞因子TGF-1的分泌，促进Treg细胞分化。研究表明，本方可以降低Notch1表达。结合Notch通路对Th2及Treg细胞的调控作用，推测本方可能通过抑制Notch信号通路，靶向调节Th1、Th2细胞因子、转录因子，对Th1/Th2失衡起到直接的干预作用。此外，抑制Notch通路，增加Treg细胞分化，改善Treg细胞免疫抑制功能进而纠正Th2偏移,可能是本方的另一作用途径。T-bet62 KDaGATA-350 KDaFOXP355 KDaNotch1120 KDaGAPDH37 KDaABCDEFA：空白组。B：模型组。C：DAPT 组。C：高剂量组。E：中剂量组。F：低剂量组。图2各组细胞T-bet、GATA-3、FOXP3、Notch1蛋白表达条带组 别空白组模型组DAPT组高剂量组中剂量组低剂量组n333333T-bet1.190.050.630.04*1.120.051.000.040.950.021.110.01GATA-30.930.171.400.15*0.840.141.010.030.970.130.860.09FOXP31.090.150.370.04*1.250.120.940.121.100.091.250.02Notch10.880.021.390.09*0.730.100.980.041.100.150.920.07表5各组细胞T-bet、GATA-3、FOXP3、Notch1蛋白表达比较（xs）（下转第216页）-203中国中医急症 2023年2月第32卷第2期JETCM.Feb.2023，Vol.32，No.219王春霞，高培阳，韩宽怀，等.参苓白术散联合肠内营养对危重病患者预后的影响：多中心随机对照研究 J.中国中西医结合杂志，2020，40（1）：41-45.20孙琳琳，钱云，陆小伟.老年患者卒中后肺炎死亡相关因素分析 J.南京医科大学学报：自然科学版，2020，40（2）：259-262.21 LUNA CM，BLANZACO D，NIEDERMAN MS，et al.Resolution of ventilator-associated pneumonia：prospective evaluation of the clinical pulmonary infection score as an early clinical predictor of outcomeJ.Crit Care Med，2003，31（3）：676-682.22 CARCEL C，WOODWARD M，WANG X，et al.Sex mattersin stroke：A review of recent evidence on the differences between women and men J.Front Neuroendocrinol，2020，59：100870.23 ZUMLA A，RAO M，WALLIS RS，et al.Host-directed therapies for infectious diseases：current status，recent progress，and future prospectsJ.The Lancet.Infectious diseases，2016，16（4）：47-63.24杨满丽，杜欣珂，阚晓溪，等.呼吸系统感染性疾病与组织“损伤-修复”平衡：病理特征、治疗与中医药特色 J.中国中药杂志，2021，46（24）：6366-6376.（收稿日期2022-08-30；修回日期2022-11-19）综上所述，麻黄细辛附子汤可以干预Notch信号通路，促进Treg细胞活化及功能发挥，纠正Th2偏移，恢复Th1/Th2平衡，从而对AR起到治疗作用。麻黄细辛附子汤治疗AR是多分子、多途径免疫反应的结果，未来可对其他机制进行探索。参考文献1MCFADDEN JP，THYSSEN JP，BASKETTER DA，et al.Thelper cell 2 immune skewing in pregnancy/early life：chemical exposure and the development of atopic disease and allergy J.Br J Dermatol，2015，172（3）：584-591.2 罗超，曾佐静，彭顺林.调节性T细胞在变应性鼻炎免疫应答中的作用 J/OL.中国免疫学杂志：1-15.3 潘佳创，刘男男，张艺，等.麻黄细辛附子汤治疗变应性鼻炎的中药复方科研思路 J.世界中医药，2021，16（18）：2784.4 JIAO WE，SUN L，XU S，et al.Notch2 suppresses the development of allergic rhinitis by promoting FOXP3 expressionand Treg cell differentiationJ.Life Sci，2021（284）：119922.5 Berker M，Frank LJ，Gener AL，et al.Allergies-A T cellsperspective in the era beyond the TH1/TH2 paradigmJ.Clin Immunol，2017（174）：73-83.6 ZHAO ST，WANG CZ.Regulatory T cells and asthma J.JZhejiang Univ Sci B，2018，19（9）：663-673.7 LAN F，ZHANG N，Bachert C，et al.Stability of regulatory Tcells in T helper 2-biased allergic airway diseases J.Allergy，2020，75（8）：1918-1926.8 孙彤彤，闫军堂，倪钰莹，等.王庆国教授辨治过敏性鼻炎经验探析 J.浙江中医药大学学报，2022，46（6）：633-636.9 刘男男，于雪，张艺，等.麻黄细辛附子汤对变应性鼻炎小鼠线粒体氧化应激损伤AMPK-PGC-1通路的影响 J.环球中医药，2021，14（11）：1926-1931.10潘利叶.小青龙汤和麻黄细辛附子汤交叉干预两种不同AR模型机制的方证相应研究 D.北京：北京中医药大学，2016.11纪雯婷，胡京红，于雪，等.麻黄细辛附子汤干预树突状细胞IL-4/STAT6的研究 J.世界中医药，2018，13（9）：2272-2275，2280.12PALOMARES O，AKDIS M，MARTN-FONTECHA M，et al.Mechanisms of immune regulation in allergic diseases：therole of regulatory T and B cells J.Immunol Rev，2017，278（1）：219-236.13LI P，TANG MS，KAN LL，et al.The immuno-modulatory activities of pentaherbs formula on ovalbumin-induced allergicrhinitis mice via the activation of Th1 and Treg cells and inhibition of Th2 and Th17 cells J.Molecules，2021，27（1）：239.14 ROCHMAN Y，DIENGER-STAMBAUGH K，RICHGELSPK，et al.TSLP signaling in CD4+T cells programs a pathogenic T helper 2 cell state J.Sci Signal，2018，11（521）：eaam8858.15 BOONPIYATHAD T，SZENERZC，AKDIS M，et al.Therole of Treg cell subsets in allergic diseaseJ.Asian Pac JAllergy Immunol，2020，38（3）：139-149.16 SPINNER CA，LAZAREVIC V.Transcriptional regulation ofadaptive and innate lymphoid lineage specification J.Immunol Rev，2021，300（1）：65-81.17 RADTKE F，FASNACHT N，MACDONALD HR.Notch signaling in the immune system J.Immunity，2010，32（1）：14-27.18 WEBB LM，TAIT WOJNO ED.Notch signaling orchestrateshelminth-induced type 2 inflammation J.Trends Immunol，2019，40（6）：538-552.19 LIU L，DENG YQ，JIAO WE，et al.Maggot extracts promoteregulatory T cell differentiation by up regulating Foxp3 in allergic rhinitis J.Am J Transl Res，2021，13（12）：13540-13554.20 JIAO WE，WEI JF，KONG YG，et al.Notch signaling promotes development of allergic rhinitis by suppressing Foxp3expression and Treg cell differentiation J.Int Arch AllergyImmunol，2019，178（1）：33-44.（收稿日期2022-08-27）（上接第203页）-216