基于HPLC-CAD技术的...成分含量测定及其稳定性研究_郑妍.pdf

收稿日期：2022-04-03作者简介：郑妍，主管药师，从事药品质量控制研究与临床药学，E-mail:基于HPLC-CAD技术的天舒片中8种活性成分含量测定及其稳定性研究 郑 妍1，吴雪松2（1.周口市中心医院 药学部，河南 周口 466000；2.天津药物研究院有限公司，天津 300457）摘 要：目的 采用高效液相色谱联合电喷雾检测器（HPLC-CAD），建立同时测定天舒片中天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯含量的方法，并对天舒片的稳定性进行研究。方法 采用 Waters Xbridge Shield RP18色谱柱（250 mm4.6 mm，3.5 m），以乙腈:甲醇（1:1）（A）-0.02%五氟丙酸（B）为流动相，梯度洗脱，体积流量0.8 ml/min，柱温30，进样量20 l；CAD雾化温度为50，气压为61.5 psi，采集频率为10 Hz。同时测定天舒片在加速和长期稳定性试验条件下各成分含量的变化，为本品种稳定性和贮藏条件提供依据。结果 天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯的线性范围分别为1.5230.44，6.03120.60，3.1062.04，3.1062.02，0.6913.78，0.7114.22，1.9539.00和5.02100.44 g/ml（r0.997）；平均加样回收率为96.93%98.69%，RSD2.0%。稳定性研究结果表明，阿魏酸松柏酯在加速条件下含量有显著下降，提示本品种不宜在高温下长时间放置；长期稳定性试验条件下稳定性良好。结论 经方法学验证，该方法具有良好的灵敏度和准确度，为天舒片的全面质量控制提供科学依据。本品种可室温贮藏。关键词：高效液相色谱联合电喷雾检测器；天舒片；含量测定；稳定性中图分类号：R927 文献标识码：A 文章编号：1672-979X（2023）01-0058-07DOI：10.3969/j.issn.1672-979X.2023.01.011Content Determination and Stability Investigation of Eight Active Ingredients in Tianshu Tablets by HPLC-CADZHENG Yan1,WU Xue-song2 (Department of Pharmacy,Zhoukou Central Hospital,Zhoukou 466000,China;2.Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Co.,Ltd,Tianjin 300457,China)Abstract:Objective To develop an HPLC-CAD method for the simultaneous determination of eight active ingredients of gastrodin,parishin B,parishin C,parishin A,ferulic acid,coniferylferulate,senkyunolide A and 6,7-dihydroxyligustilide in Tianshu Tablets.Methods The chromatographic separation was performed on a Waters Xbridge Shield RP18 column(250 mm4.6 mm,3.5 m)with acetonitrile:methanol(1:1)(A)-0.02%pentafluoropropionic acid(B)as the mobile phase.The gradient elution was adopted at a flow rate of 0.8 ml/min,the column temperature was set at 30,and the injection volume was 20 l.The nebulization temperature of CAD detector was 50,the gas pressure was 61.5 psi,and the acquisition frequency was 10 Hz.At the same time,the content changes of components in Tianshu Tablets were determined by accelerated and long-term tests,which provided the basis for the stability and storage conditions of Tianshu Tablets.Results The linear ranges of gastrodin,parishin B,parishin C,parishin A,ferulic acid,coniferylferulate,senkyunolide A and 6,7-dihydroxyligustilide 58 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期were 1.52-30.44,6.03-120.60,3.10-62.04,3.10-62.02,0.69-13.78,0.71-14.22,1.95-39.00 and 5.02-100.44 g/ml(r0.997),respectively.The average recoveries were 96.93%-98.69%with the RSDs2.0%.The results of stability investigation showed that the content of coniferylferulate decreased rapidly under accelerated condition,which implied that the storage time of Tianshu Tablets under high temperature condition should not be too long.The stability under long-term condition was good.Conclusion The method is sensitive and accurate,which can be used for the overall assessment of the quality of Tianshu Tablets.This variety should be stored at room temperature.Key Words:HPLC-CAD;Tianshu Tablets;content determination;stability天舒片是由川芎与天麻两味传统中药组方而成，经现代药剂学技术进行剂型改造制成的中药复方制剂，现收载于2020年版中华人民共和国药典一部1，具有活血平肝、通络止痛之功效，用于淤血阻络或肝阳上亢所致的头痛日久、痛有定处，或头晕肋痛、失眠烦躁、舌质暗或有瘀斑、血管神经性头痛、紧张性头痛和高血压头痛见上述证候者。方中川芎活血化瘀、行气止痛，为君药；天麻熄风定惊、行走上窍，为臣药；二者组合配伍后产生协同作用，对偏头痛2-3、高血压眩晕4-5等具有良好的临床疗效。川芎主要活性成分是阿魏酸和洋川芎内酯A等为代表的酚酸类和苯酞类物质6-7，其中阿魏酸为本品种药典质量标准含量测定指标成分之一，具有镇痛、抗氧化、抗血小板聚集等药理活性，藁本内酯等苯酞类物质具有抗炎镇痛、抗动脉粥样硬化、保护大脑神经等药理活性6。天麻的主要活性成分是天麻素，是本品种药典质量标准含量测定另一指标成分，具有降压、抗自由基、中枢神经保护等多种药理活性8-9；此外，巴利森苷也是天麻中含量较高的一类成分，具有显著的镇痛活性10-11。电喷雾检测器（charged aerosol detector，简称CAD）作为近年发展迅速的一种新型质量型通用检测器，对各种结构类型的化合物具有良好的响应一致性，且灵敏、稳定、操作简单等优势，尤其适用于无紫外吸收物质的检测12-13，目前已在中药质量研究应用领域崭露头角14-15。目前关于天舒片的质量控制研究报道较少，其含量研究中也仅围绕阿魏酸和天麻素展开16-17，未见两种以上多成分的同时测定研究。中药复方制剂化学成分繁多复杂，多指标成分的质量控制更能准确反映其质量，鉴于此，本试验采用高效液相色谱联合电喷雾检测器（HPLC-CAD）技术，建立了同时测定天舒片中天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯等8种活性成分含量的方法，并进行稳定性研究，为天舒片多成分的质量控制提供有效手段，为其贮藏条件和保质期提供科学依据。1 仪器与试药1.1 仪器Dionex Ultimate 3000高效液相色谱仪联合Corona Veo电喷雾检测器（美国赛默飞世尔）；Waters Xbridge Shield RP18（250 mm4.6 mm,3.5 m）色谱柱（美国沃特世）；CPA225D型十万分之一天平，MSE型百万分之一天平（美国赛多利斯）；索式提取器（规格：601000 ml，江苏汇达）；HDM-250B型电子调温电热套（抚州金时速）；SHH-150GSD型药品稳定性试验箱（上海仪天）。1.2 药品与试剂 天麻素对照品（批号：110807-202010，含量以95.5%计）、阿魏酸（批号：110773-201614，含量以99.0%计）（中国食品药品检定研究院）；巴利森苷A对照品（批号：CFN93112，含量98.5%）、巴利森苷B对照品（批号：CFN93113，含量99.3%）、巴利森苷C对照品（批号：CFN93114，含量97.9%）（武汉中标）；阿魏酸松柏酯（批号：CHB201011，含量99.3%）、洋川芎内酯A（批号：CHB190927，含量98.5%）、6,7-二羟基藁本内酯（批号：CHB210306，含量98.8%）（成都克洛玛）。天舒片（规格：0.34 g/片，10片/板6板/盒；共6批，批号：1812331412，1812096209，1613528507，1306083864，1801072478，1812310265；江苏康缘）；川芎和天麻药材由天食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期 59津药物研究院有限公司吴雪松副研究员分别鉴定为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎、兰科天麻属植物天麻 Gastrodia elata Bl.的干燥块茎；阴性样品自制；甲醇（分析纯，天津科密欧）；甲醇（HPLC级，美国Sigma）；五氟丙酸HPLC级，梯希爱（上海）化成；水为自制超纯水。2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Waters Xbridge Shield RP18（250 mm4.6 mm，3.5 m）；流动相：乙腈:甲醇（1:1）（A相）-0.02%五氟丙酸（B相），梯度洗脱：08 min，12%A；817 min，12%A20%A；1725 min，20%A35%A；2550 min，35%A85%A；体积流量：0.8 ml/min；柱温：30；进样量：20 l；CAD雾化器温度为50，气压为61.5 psi，采集频率为10 Hz。2.2 溶液制备 2.2.1 混合对照品溶液 精密称取阿魏酸和阿魏酸松柏酯对照品适量，置入5 ml量瓶，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1 ml含阿魏酸0.6890 mg和阿魏酸松柏酯0.7108 mg的混合对照品储备液；分别精密称取天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、洋川芎内酯A、6,7-二羟基藁本内酯对照品适量，置入同一10 ml量瓶，精密加入混合对照品储备液1.0 ml，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成含天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、6,7-二羟基藁本内酯的浓度分别为0.1522，0.6030，0.3102，0.3101，0.0689，0.0711，0.1950和0.5022 mg/ml的混合对照品母液；精密移取混合对照品母液1.0 ml，置入10 ml量瓶，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1 ml含天麻素0.0152 mg，巴利森苷B 0.0603 mg，巴利森苷C 0.0310 mg，巴利森苷A 0.0310 mg，阿魏酸0.0069 mg，阿魏酸松柏酯0.0071 mg，洋川芎内酯A0.0195 mg和6,7-二羟基藁本内酯0.0502 mg的混合对照品溶液。2.2.2 供试品溶液 取本品10片，研细，精密称取约0.5 g，用滤纸包裹，置入索式提取器，加入70%甲醇250 ml提取2 h，将提取液浓缩至干，残渣转移至100 ml量瓶，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，用0.45 m微孔滤膜过滤，即得。2.2.3 阴性样品溶液 按天舒片拟定的制剂处方工艺分别制备川芎和天麻的阴性对照样品，按2.2.2项下方法制备供试品溶液，分别得缺川芎和缺天麻的阴性样品溶液。2.3 专属性试验 取混合对照品溶液、供试品溶液（批号：1812331412）和阴性样品溶液分别进样检测，记录各色谱图（见图1）。结果，天舒片供试品色谱图中天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯均达到基线分离，分离度均大于1.5，理论塔板数均大于7000，拖尾因子均在0.801.20；阴性样品图谱表明，天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A色谱峰来自于天麻，阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、6,7-二羟基藁本内酯色谱峰来自于川芎，阴性样品对各成分的检测均无干扰。t/min1.天麻素；2.巴利森苷B；3.巴利森苷C；4.巴利森苷A；5.阿魏酸；6.阿魏酸松柏酯；7.洋川芎内酯A；8.6,7-二羟基藁本内酯A.混合对照品溶液；B.供试品溶液；C.缺川芎阴性样品；D.缺天麻阴性样品图1 HPLC色谱图2.4 检测限与定量限考察取2.2.1项下配制的混合对照品溶液逐级稀释，至天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、6,7-二羟基藁本内酯的浓度分别为0.34，0.35，0.29，0.41，0.36，0.37，0.26，0.44 g/ml时，各色谱峰的信噪60 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期比（S/N）均在812，以此作为定量限；至8种成分的浓度分别为0.11，0.12，0.10，0.14，0.12，0.13，0.09，0.15 g/ml时，各色谱峰的信噪比（S/N）均在35，以此作为检测限。2.5 线性关系考察精密量取2.2.1项下配制的混合对照品母液1.0 ml，分别置入5，10，25，50,100 ml量瓶，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，得5种不同浓度的线性溶液；取各线性溶液，按2.1项下色谱条件进样测定，以质量浓度X（g/ml）为横坐标，峰面积Y为纵坐标，进行线性回归，计算并绘制标准曲线，结果见表1。表1 8种成分的线型方程、相关系数和线性范围（n=5）成分线性方程r线性范围/gml-1天麻素Y=1.871X+0.4620.99961.5230.44巴利森苷BY=1.863X-2.6090.9983 6.03120.60巴利森苷CY=2.057X-1.5480.99723.1062.04巴利森苷AY=1.789X-0.8640.99993.1062.02阿魏酸Y=1.803X+0.0480.99990.6913.78阿魏酸松柏酯Y=2.005X+0.8040.99920.7114.22洋川芎内酯AY=1.686X+0.5180.99971.9539.006,7-二羟基藁本内酯 Y=1.603X-0.0250.9998 5.02100.442.6 重复性考察 取天舒片样品适量（批号：1812331412），按2.2.2项下方法平行制备6份供试品溶液，分别进样测定天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯的峰面积，计算得到各成分平均含量依次为4.931，9.737，3.911，5.804，3.002，1.459，5.705，4.814 mg/g，RSD分别为1.12%，1.34%，1.65%，1.89%，2.11%，1.04%，0.77%和1.42%。结果表明方法重复性良好。2.7 中间精密度考察 取天舒片样品适量（批号：1812331412），由另一实验员于另一实验时间按2.2.2项下方法再次平行制备6份供试品溶液，分别进样测定天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯的峰面积，计算得到各成分含量RSD分别为1.33%，1.06%，1.24%，1.77%，2.02%，0.84%，1.27%和0.94%，结合重复性项下共12份供试品溶液中各成分含量RSD分别为1.55%，1.23%，1.65%，1.31%，1.85%，0.69%，1.15%和0.86%，表明中间精密度良好。2.8 进样精密度考察 取2.2.1项下混合对照品溶液连续进样6次，测得天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯峰面积的RSD分别为1.51%，1.77%，1.26%，1.07%，2.08%，1.42%，1.86%和0.68%，表明仪器进样精密度良好。2.9 稳定性考察 取天舒片（批号：1812331412）供试品溶液，分别于制备后室温下放置0，2，4，12，24 h和48 h后进样测定，结果供试品溶液在室温下48 h内稳定性良好，天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯峰面积的RSD分别为1.23%，0.84%，0.57%，1.24%，1.12%，1.24%，1.08%和0.74%。2.10 加样回收率考察 取天舒片样品（批号：1812331412，已知天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯的含量分别为4.931，9.737，3.911，5.804，3.002，1.459，5.705，4.814 mg/g）6份，每份取0.25 g，置入索氏提取器，分别加入天麻素（1.305 mg/ml）、巴利森苷B（2.107 mg/ml）、巴利森苷C（1.042 mg/ml）、巴利森苷A（1.316 mg/ml）、阿魏酸（0.852 mg/ml）、阿魏酸松柏酯（0.432 mg/ml）、洋川芎内酯A（1.202 mg/ml）、6,7-二羟基藁本内酯（1.013 mg/ml）对照品溶液各1 ml，按2.2.2项下方法制成加样供试品溶液，进样测定，计算8种成分的平均加样回收率（n=6）分别为97.55%，97.51%，96.93%，98.32%，96.97%，97.92%，97.86%和98.69%，RSD分别为1.91%，1.09%，0.37%，1.69%，0.72%，1.71%，1.36%和0.81%。表明方法的准确性良好。食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期 612.11 耐用性考察 取天舒片（批号：1812331412）供试品溶液，分别微小改变色谱条件（柱温2，流速0.1 ml/min，流动相初始比例1%，波长2 nm）下样测定，结果供试品溶液中天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯在各条件与原条件下含量的RSD分别为1.08%，1.33%，0.99%，1.76%，1.33%，1.09%，0.85%和0.79%。2.12 样品测定取6个批次的天舒片样品，每批平行制备2份供试品溶液，进样测定天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯的峰面积，分别计算含量，结果见表2。各批次样品中8种成分的含量分别为3.6054.931，7.9669.737，3.2143.911，5.0035.804，2.3353.114，1.1061.459，5.2015.733，4.3494.814 mg/g。表2 天舒片中8种活性成分的含量测定结果（n=2）批号含量/mgg-1天麻素巴利森苷B巴利森苷C巴利森苷A阿魏酸阿魏酸松柏酯洋川芎内酯AZ-藁本内酯18123314124.9319.7373.9115.8043.0021.4595.7054.81418120962094.2047.9663.3505.4093.0321.2235.2014.42716135285073.9859.3883.4995.3482.8081.1065.3054.35813060838643.6058.9033.2145.2152.3351.1795.7334.34918010724784.0749.1353.8685.0033.1141.2845.4074.51418123102653.6328.2373.5765.3152.6531.4015.5274.7162.13 药品稳定性考察2.13.1 加速试验 取天舒片样品3批（批号：1812331412，1812096209，1613528507），带包装放置入加速稳定性试验箱中（402，RH 75%5%）进行样品稳定性考察，并于0，1，2，3，6月取样检测样品中天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯的含量，记录各成分的含量变化情况，结果见表3。由表3可见，加速试验6月内，各成分的含量较0月总体呈降低趋势，其中阿魏酸松柏酯含量有显著降低，降低均达14%以上，其他各成分含量有略微降低，降低率均不超过6%。2.13.2 长期试验 取天舒片样品3批（批号为1812331412，1812096209，1613528507），带包装置入长期稳定性试验箱中（25 2，RH 60%5%）进行样品稳定性考察，并于0，1，2，3，6月取样检测天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A和6,7-二羟基藁本内酯的含量，记录各成分的含量变化情况，结果见表4。在长期试验6月内，各成分的含量较0月依然总体呈降低趋势，降低率均不超过3%，可视为无显著变化。3 讨论3.1 色谱条件的选择 本试验首先对比考察乙腈-水、甲醇-水、乙腈:甲醇（1:1）-水3种流动相体系，以及Waters XBridge C18、Thermo Hypersil C18、GL Sciences Inertsil ODS-3、Waters Xbridge Shield RP18等主流通用型色谱柱，结果表明，乙腈:甲醇（1:1）-水流动相体系结合Waters Xbridge Shield RP18色谱柱条件下各成分的分离情况最佳，但多数色谱峰形拖尾，故在此基础上将流动相水相加入适量五氟丙酸尝试峰形扫尾，经不同加入量的对比考察，0.02%五氟丙酸条件下结合适当的梯度优化可实现天麻素等8种成分的基线分离，且峰形良好，基线平稳。3.2 检测器的选择 本试验研究涉及的8种目标成分结构差异较大，其紫外最大吸收波长各不相同，采用传统的紫外检测器难以设定可兼顾各成分灵敏度的检测波长，单波长或双波长切换法均难以实现同时测定，而62 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期表3 天舒片加速稳定性试验8种成分的含量成分测定结果181233141218120962091613528507含量/mgg-1变化率/%含量/mgg-1变化率/%含量/mgg-1变化率/%天麻素 0月 4.931/4.204/3.985/1月4.901-0.614.207+0.073.972-0.332月 4.905-0.534.139-1.553.923-1.563月 4.836-1.934.103-2.403.875-2.766月4.701-4.663.986-5.193.781-5.12巴利森苷B0月 9.737/7.966/9.388/1月9.740+0.037.826-1.769.363-0.272月 9.712-0.267.834-1.669.368-0.213月9.607-1.347.783-2.309.183-2.186月 9.249-5.017.595-4.668.924-4.94巴利森苷C0月3.911/3.350/3.499/1月3.881-0.773.360+0.303.483-0.462月 3.813-2.513.311-1.163.397-2.923月 3.819-2.353.280-2.013.399-2.866月 3.726-4.733.208-4.243.309-5.43巴利森苷A0月 5.804/5.409/5.348/1月5.734-0.615.419+0.195.301-0.882月5.841-0.535.373-0.665.312-0.673月 5.632-1.935.319-1.665.218-2.436月 5.479-4.665.200-3.865.045-5.67阿魏酸 0月 3.002/3.032/2.808/1月2.971-1.032.994-1.252.793-0.532月 2.975-0.903.045+0.432.774-1.213月 2.946-1.872.983-1.622.778-1.076月2.941-2.032.956-2.512.732-2.71阿魏酸松柏酯0月 1.459/1.223/1.106/1月 1.439-1.371.209-1.151.086-1.812月 1.439-1.371.203-1.641.067-3.533月 1.409-3.431.166-4.661.027-7.146月 1.241-14.941.033-15.540.923-16.55洋川芎内酯A0月 5.705/5.201/5.305/1月5.675-0.535.133-1.315.201-1.962月 5.543-2.845.092-2.105.145-3.013月5.501-3.584.951-4.815.168-2.586月 5.488-3.804.968-4.485.105-3.776,7-二羟基藁本内酯0月 4.814/4.427/4.358/1月4.802-0.254.438+0.254.332-0.602月 4.817+0.064.387-0.904.367-0.213月 4.724-1.874.339-1.994.258-2.306月 4.622-3.994.244-4.134.202-3.58表4 天舒片长期稳定性试验8种成分的含量成分测定结果181233141218120962091613528507含量/mgg-1变化率/%含量/mgg-1变化率/%含量/mgg-1变化率/%天麻素 0月4.931/4.204/3.985/1月4.941+0.204.137-1.594.001+0.402月4.905-0.534.221+0.403.979-0.153月4.846-1.724.129-1.783.915-1.766月4.881-1.014.112-2.193.909-1.91巴利森苷B0月9.737/7.966/9.388/1月9.701-0.377.981+0.199.363-0.272月9.744+0.077.934-0.409.384-0.043月9.677-0.627.943-0.299.278-1.176月9.639-1.017.905-0.779.281-1.14巴利森苷C0月3.911/3.350/3.499/1月3.885-0.673.363+0.393.480-0.542月3.853-1.483.341-0.273.497-0.063月3.859-1.333.328-0.663.469-0.866月3.856-1.413.278-2.153.429-2.00巴利森苷A0月5.804/5.409/5.348/1月5.824+0.355.413+0.195.321-0.512月5.812+0.145.373-0.665.342-0.113月5.752-0.905.319-1.665.311-0.696月5.729-1.295.293-2.155.245-1.93阿魏酸 0月3.002/3.032/2.808/1月2.982-0.673.042+0.332.813+0.182月2.995-0.233.045+0.432.784-0.863月3.006+0.133.021-0.362.788-0.716月2.985-0.572.996-1.192.782-0.93阿魏酸松柏酯0月1.459/1.223/1.106/1月1.452-0.481.211-0.981.096-0.92月1.439-1.371.213-0.821.087-1.723月1.429-2.061.196-2.211.087-1.726月1.418-2.811.193-2.451.076-2.71洋川芎内酯A0月5.705/5.201/5.305/1月5.715+0.185.143-1.155.301-0.082月5.683-0.395.095-2.045.215-1.703月5.671-0.605.092-2.105.234-1.346月5.628-1.355.088-2.175.200-1.986,7-二羟基藁本内酯0月4.814/4.427/4.358/1月4.822+0.164.443+0.364.372+0.322月4.819+0.104.402-0.574.360+0.053月4.800-0.294.379-1.084.298-1.386月4.782-0.674.374-1.204.294-1.50食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期 63CAD检测器的响应则不依赖于共轭结构紫外吸收，其仅与进样质量相关，针对不同物质具有良好的响应一致性，且灵敏度高，基线平稳无干扰，故本实验选择CAD检测器进行研究。3.3 测定结果分析天麻素等8种成分为不同批次天舒片的共有成分，各批次样品中的天麻素和阿魏酸含量均符合中华人民共和国药典（一部）标准（天麻素不少于0.35 mg/片，阿魏酸不少于0.40 mg/片）1。为进一步验证HPLC-CAD法的准确性，本试验采用2020年版中国药典本品种含量测定项下方法1对1812331412，1812096209，1613528507的3批样品中天麻素和阿魏酸的含量进行测定，结果表明，天麻素含量均在3.55.0 mg/g内，阿魏酸含量均在2.03.0 mg/g内，与本试验建立的HPLC-CAD法检测结果基本一致。稳定性研究结果表明，加速试验条件下阿魏酸松柏酯含量有显著下降，提示本品不宜在高温条件下长时间放置；长期试验条件下，各成分含量均无显著变化，提示本品在室温条件下稳定性良好，可在室温条件下贮藏。其中阿魏酸松柏酯在高温条件下降解生成阿魏酸和松柏酯18；此外，文献报道苯酞类物质洋川芎内酯A在高温且有氧条件下不稳定19，易发生脱氢反应生成丁基苯酞，而加速试验条件下洋川芎内酯A含量未发生显著降低，表明本品包装密封性良好，隔绝氧气而避免了有效成分的降解。参考文献1 国家药典委员会.中国药典M.2020年版一部.北京:中国医药科技出版社，2020:628-629.2 刘娟琼,刘文斌,李天源.天舒片合用卡马西平治疗偏头痛的效果观察J.北方药学,2021,18(3):139-140.3 刘雪亮,谢灼骥,杨毅帮,等.天舒片合用卡马西平治疗偏头痛的疗效分析J.中国社区医师,2017,33(18):88-89.4 袁志俊,李小刚,何晓英,等.天舒片治疗后循环缺血合并高血压患者的临床疗效及其对内皮细胞膜微粒表达的影响J.实用心脑肺血管病杂志,2018,26(2):84-87.5 袁志俊,李小刚,何晓英,等.天舒片治疗后循环缺血孤立性眩晕合并高血压的疗效J.中国实用神经疾病杂志,2017,20(22):13-15.6 李海刚,胡晒平,周意,等.川芎主要药理活性成分药理研究进展J.中国临床药理学与治疗学,2018,23(11):1302-1308.7 鄢玉芬,徐双美,梁乙川,等.HPLC法测定不同贮藏条件下川芎中10种化学成分的含量J.中国药房,2019,30(6):807-812.8 张成宸,石京山.天麻的酚类成分及其中枢神经药理作用研究进展J.中药药理与临床,2019,35(2):167-174.9 于雪,胡文忠,姜爱丽,等.天麻的活性成分及功能性研究进展J.食品工业科技,2016,37(8):392-399.10 徐帮会,徐剑,张永萍,等.天麻 HPLC 指纹图谱及镇痛活性的谱效关系研究J.中草药,2019,42(11):2588-2592.11 单鸣秋,张丽,于生,等.HPLC-MS 法同时测定天麻饮片中8种活性成分J.中草药,2015,46(14):2087-2091.12 李心怡,蒋运斌,马逾英.电喷雾检测器在药物HPLC分析中的优势及应用进展J.中国药房,2017,28(15):2152-2156.13 Azeem H A,Paul H.Charged aerosol detection for liquid chromatography and related separation techniquesJ.Anal Bioanal Chem,2018,410(11):2663-2664.14 侯爱荣,邢晔忠,吴雪松.HPLC-CAD 法同时测定风湿定片中7种活性成分的含量J.中国药房,2018,29(23):3212-3216.15 白钢钢,袁斐,叶慧,等.HPLC-CAD法测定4种银杏叶制剂中萜类内酯类成分的含量J.药物分析杂志,2019,39(6):1102-1107.16 邓晓鸿,苟琰,李萍,等.HPLC测定天舒片中的天麻素和阿魏酸J.华西药学杂志,2014,29(4):474-475.17 张爱丽,毕宇安,仲艳.高效液相色谱法测定天舒片中阿魏酸含量J.中国药业,2006,15(20):19-20.18 马云桐,徐世军,廖海浪,等.HPLC 同时测定川芎、当归SFE-CO2萃取物中7种成分含量及阿魏酸松柏酯稳定性考察J.中国实验方剂学杂志,2017,23(9):24-29.19 左爱华,王莉,肖红斌.洋川芎内酯A和洋川芎内酯I的降解产物研究J.中草药,2012,43(11):2127-2131.64 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期