柑桔皮渣发酵高蛋白饲料新工艺研究模板.doc

重庆市自然科学基金计划项目立 项 申 请 书项目名称： 柑桔皮渣发酵高蛋白饲料新工艺研究 所属专题： 其 它 申 请 者： 殷钟意 申报单位： 重庆工商大学（签章）联络电话： 62769652 申请日期： 3月 重庆市科学技术委员会二五年四月制填 写 说 明1、凡申报重庆市自然科学基金计划项目须填写此立项申请书。2、立项申请书由项目标主负担者填写，经项目主负担者工作单位审查同意后，通常项目一式三份、关键项目一式七份并附申报软盘一张报送重庆市科委。3、填写申请书前，请先查阅重庆市自然科学基金计划项目管理措施及相关要求，其中关键项目应围绕当年“项目指南”内容撰写。4、立项申请书所列内容全部要据实填写，表示应明确、完整、严谨、扼要（外文名词要同时用汉字表示）。5、项目组关键组员本人应在申请书上亲自署名以示同意合作。6、立项申请书一律要求用A4纸张打印，不然不予受理。7、全部申报材料恕不退还，请注意留底。一、基础信息项目名称柑桔皮渣发酵高蛋白饲料新工艺研究所属专题其 它负担单位重庆工商大学组织部门科研处单位地址南岸区学府大道5公里邮编400067单位性质11.高等院校 2.科研院所 3.企业 4.其它工商注册登记类型11.国有 2.集体 3.股份合作 4.联营企业 5.有限责任企业 6.股份7.私营企业 8.港澳台商投资企业 9.外资企业 10.其它企业单位法定代表姓名王崇举联络电话62769362手机66776681单位传真62769515项目责任人姓名殷钟意联络电话62769652手机E-mail项目关键合作单位计划类别11.自然科学基金 2.院士专题 项目关键服务行业11.农业 2.制造业 3.电子信息 4.医药化工 5.交通、能源 6.建筑建材 7.冶金 8.轻工纺织 9.社会事业 10. 其它项目所属技术领域31.电子信息 2.生物医药 3.现代农业 4.环境保护 5.新材料 6.光机电 7.交通 8.能源资源 9.社会事业 10.其它项目研究所属关键学科一级学科代码及名称二级学科代码及名称三级学科代码及名称代码：180名称：生物学代码：180.71名称：生物技术代码：180.7150名称：微生物工程起止时间.9-.12总投资6万元申请资助4万元关键研究内容(限100字) 以柑桔皮渣为碳源，以高氮农业副产品为氮源，筛选高产蛋白质饲料菌株，构建高效复合菌群，并确定最好配比；优化原料粉碎脱水、发酵及其产物灭菌干燥工艺，为推广应用打下基础。预期结果形式或达成目标(限100字)开发一个既能高产蛋白质饲料及氨基酸，又能缩短发酵时间优势复合菌群及最优工艺，使其蛋白质含量达30以上，其它指标达成家禽配合饲料国家标准；申请国家发明专利1项，发表关键期刊论文23篇。注：此简表选择项均为单选项。学科代码及名称按国家标准（可在市科委网站上查询）最少填至二级学科。二、项目组关键组员（含项目责任人）编号姓 名出生年月学历专业技术职称工作单位联络电话从事专业项目中分工每十二个月工作时间(月)签 字1殷钟意1966.3本科高级试验师重庆工商大学62769652化学主持，负责全部研究方案试验102郑旭煦1964.10博士教授重庆工商大学62768012生物医学工程项目策划,研究方案和试验方案设计 53彭洪光1944.6本科副教授西南大学（校外聘研究人员）68252960微生物工程发酵菌株筛选和工艺优化技术指导54王星敏1976.8硕士讲师重庆工商大学62769787应用化学辅料氮源选定75彭 荣1978.10硕士讲师重庆工商大学62769785应用微生物高产蛋白质饲料菌株筛选86崔 榕1968.9本科试验师重庆工商大学62769785化学菌株筛选和人工诱变87王 颖1978.11硕士重庆工商大学62763646环境工程发酵菌株筛选和工艺优化试验研究108吕 靖1980.04硕士重庆工商大学环境工程原料脱水、产物灭菌干燥工艺试验研究10910三、经费预算（单位:万元）经费起源预算经费支出预算科目预算数科目预算数其中市科技计划拨款部分1、市科技计划拨款4.01、小型仪器设备费1.01.02、国家部委拨款02、能源材料费2.02.03、行业主管部门拨款03、试验外协费2.00.54、区县科委拨款04、科研业务费1.00.55、单位自筹2.05、管理费6、其它资金06、其它费用起源预算累计6.0支出预算累计6.04.0市科技计划预算拨款年度累计经费4.0004.0注：1、市科技计划资助强度为：通常项目2-4万元，关键项目20-40万元。 2、通常项目不得提取管理费。四、申请书正文参考以下提要撰写，要求内容翔实、清楚，层次分明，专题突出。（一）立项依据和研究内容1、项目标立项依据（关键项目须附关键参考文件具体目录）1.1 目标意义柑桔是全球第一大水果，年产量达成1亿多吨。在柑桔生产方面，中国柑桔类年产量世界第一，据农业部统计，中国柑桔总产量已连续三年稳定在1000万吨以上，并估计到将达成1200万吨以上。伴随中国经济快速发展，人民生活水平也随之提升，对高品质柑桔加工产品需求也将会快速增加。部分柑桔加工企业在湖南、江西、重庆等地建立了大面积种植基地，比如，在重庆市万州区就已建立了和年产柑桔浓缩汁5万吨相配套原料基地，估计在未来几年中重庆市忠县、江津、奉节、巫山、长寿等产业基地将不停扩大，并建成20万亩柑桔现代化生产技术示范基地和年加工处理能力20吨以上橙汁加工生产线。不过，伴随柑桔原汁产量不停增加，柑桔加工副产品柑桔皮渣量也随之赠加，柑桔鲜食和加工下脚料桔皮数量约占柑桔产量50%。国外对桔皮渣处理关键采取优异设备提取其中香精油、-1-8-萜二烯、黄酮苷、果胶等物质，剩下部分经烘干后作为饲料添加成份或加入工程菌发酵生产乙醇。中国柑桔生产基地产量大，现在尚无配套大型设备将柑桔皮渣综合利用，基础上全部作为废弃物处理（需上交60元/吨垃圾处理费），造成柑桔皮渣大量堆积。这既是有效资源极大浪费，又对环境造成极大污染，影响生态平衡。采取微生物发酵方法将柑桔皮渣发酵成高蛋白动物饲料，是一个处理大量柑桔皮渣利用有效路径，既能够将废弃物资源化，费用低，无二次污染，又能为生产商发明经济效益，市场潜力大，必将得到广泛应用。1.2 柑桔皮渣发酵研究现实状况及存在关键问题现在中国已经有柑桔研究所对柑桔皮渣进行了微生物发酵生产高蛋白饲料研究，建立了以黑曲霉(2281)、康宁木霉(13016)、产朊假丝酵母(1807)为出发菌株复合菌系和对应工艺，但没有包含扣囊复膜孢酵母、白地霉等部分产较高蛋白质菌种，其液态发酵固体产品粗蛋白含量靠近10；而且发酵过程中展现胶糊状状态，影响微生物自由生长，不利于后期发酵产品烘干。其它相关柑桔皮渣发酵菌株筛选等方面报道甚少。柑桔皮含有丰富营养物质，其中糖类含量5565%,粗蛋白含量6.48.1%，粗脂肪含量为2.32.6%，粗纤维含量为9.510.6%，钙0.670.74%，磷0.270.29%，赖氨酸0.26%,精氨酸0.63%，亮氨酸0.37%；桔皮微量元素和维生素含量也很丰富，约含锰8.67 mg/Kg，铁67.57 mg/Kg，铜2.43 mg/Kg，胡萝卜素24.4 mg/Kg，VE61.7 mg/Kg。即柑桔皮渣可提供微生物生长所需要多种碳源，但其蛋白质和氨氮量全部很低，在以往研究中虽可用发酵方法将蛋白质含量提升510倍，但其蛋白总含量仍不能超出18%。若要大幅度提升发酵饲料蛋白质含量，就必需在柑桔皮渣中加入部分含氮量较高物质，比如：麸皮、秸秆、豆饼粕等作为辅助氮源，并经过微生物转化从根本上提升其蛋白质含量。1.3 柑桔皮渣发酵前期试验研究针对柑桔皮渣发酵实际运行中存在问题，课题组进行了以下试验研究：（1）在采取果汁厂产生柑桔皮渣作原料时，因为柑桔皮渣中水分只是部分榨出，还有小部分水分和柑桔皮渣一同排出，致使柑桔皮渣展现胶糊状状态，本课题组初步试验研究表明，这种胶糊状物是柑桔皮渣中水分混溶柑桔皮中含量为2030%果胶造成。若用这种胶糊状柑桔皮渣发酵，不仅影响微生物自由生长、对发酵产生负面影响，而且不利于后期发酵产品烘干。果胶是一个亲水性植物胶，基础化学结构是D-吡喃半乳糖醛酸1,4-糖苷键连接成高分子化合物，其分子由很多-半乳糖醛酸1-C和4-C经由氧桥连而成链状。果胶分子量1040万u，属直链多糖；且植物果胶对生物体有很好药用作用，如：排毒作用可排除生物体内铅、汞离子，降糖、降低胆固醇和防癌作用，由此，柑桔皮渣在发酵过程中还应保留果胶成份。经过一段时间试验证实，采取固态发酵前若将桔皮渣脱除水分并充足粉碎，在发酵过程中再加入既含有吸水隔离作用、又含氮量较高干性农副产品作为添加辅料（比如，麦麸和稻草），柑桔皮渣胶糊状态显著降低，发酵产品粗蛋白含量可靠近30%。所以采取脱水-粉碎-外加含氮辅料固态发酵方法不仅能够处理柑桔皮渣胶糊状问题，而且能为微生物提供可吸收氮源。所以本项目处理柑桔皮渣脱水粉碎及辅料筛选等工艺。（2）课题组同时试验了半液态发酵法（即固态物质加水稀释成粘稠流质物体），经过对最终流质产物溶解、超声细胞破碎，测定其上清液中可溶性蛋白含量约为1.04mg/g，其残渣中粗蛋白含量靠近20%。所以，我们认为，若发酵液中氨基酸含量较高并符合健康饮品标准，可深入研究半液态发酵工艺及发酵液分离和纯化，为开发健康饮料打下基础。此法不仅可得到粗蛋白含量较高蛋白饲料，而且又可能开发出一个新型健康饮料，既循环利用了资源，又发明了更高附加值更高产品。所以，本课题拟对已经有发酵工艺及菌种进行改善，构建高效复合发酵菌群，考察固液两种发酵方法，优化整个发酵工艺。2、项目标研究内容、研究目标、和拟处理关键问题2.1 研究内容本课题首先以柑桔皮渣作碳源，其它含氮量较高物质作氮源（比如麸皮、秸秆、豆饼粕等），经过多个单一菌种对柑桔皮渣发酵，筛选出优势固氮菌种，并构建高效复合发酵菌群，使粗蛋白产量增加；同时，考察固液两种发酵方法产蛋白情况及液态发酵液中氨基酸含量；其次，对整个发酵工艺进行研究，确定最优工艺步骤，包含柑桔皮渣含水率、接种量、pH、溶氧（DO）、C:N、无机盐添加量、温度、发酵时间等；最终，对发酵液分离提纯和发酵固体产品灭菌干燥工艺进行研究，经过对成品中霉菌含量及营养物质测定，确定一套最优灭菌干燥工艺。2.1.1 高效发酵菌群构建（1）生产高蛋白饲料菌株筛选。对米曲霉（Aspergillus oryzae）、黑曲霉（Aspergillus ficuun）、扣囊复膜孢酵母(Endomycopsis fibuligera)、啤酒酵母、酿酒酵母等进行单一菌株和混合菌株发酵试验，分别确定适合液态和固态发酵最好菌群。（2）将已筛选出菌种以不一样百分比混合，得到最好混合比，并以此百分比培养发酵种子液。（3）经过使用固态及液态发酵两种方法，比较此种子液发酵产物蛋白质及氨基酸含量，同时测定各菌种酶活力情况。2.1.2 柑桔皮渣发酵工艺研究（1）原料粉碎脱水。以柑桔果汁厂榨汁后废料为原料，拟采取螺旋式压榨机将原料粉碎并脱水，得到适宜粒径和含水率柑桔皮渣。（2）发酵辅料筛选。因为柑桔皮渣本身含氮量很低，需借助外加氮源。选择氮源辅料，包含麸皮、秸秆、米糠、豆饼粕、玉米芯等农业副产品，最终得到柑桔皮渣和辅料最好配比。（3）固态发酵工艺参数优化。将已培养好种子液，接种到配制好原料中，在不灭菌条件下发酵，经过单原因试验及SAS软件分析，确定发酵最优工艺（包含菌株接种量、培养基含水率、pH、DO、温度、发酵时间、发酵深度等参数）。 （4）液态发酵工艺优化。将已培养好种子液，接种到配制好已稀释原料中在不灭菌条件下发酵，关键考察发酵液中氨基酸含量及固态残渣中粗蛋白含量，并经过SASRSREG（响应面回归）过程进行数据分析，建立二次响应面回归模型，进而寻求最优对应因子水平，从而对发酵工艺进行优化。（5）发酵液分离及纯化。借鉴酿酒加工工艺步骤，使发酵液和固体残渣充足分离，并对发酵液脱色、纯化，以达成饮用标准。（6）灭菌干燥工艺研究。发酵固体产品最终一道工艺是灭菌和干燥，为了节省投资、减小能耗，拟将上述两个步骤合二为一。因为通常灭菌法温度较高，可能影响饲料中热敏性营养物质品质，所以，需经过深入试验研究，确定一套有效灭菌干燥工艺。2.2 研究目标本试验研究目标是，开发出一个含有既能高产蛋白质及氨基酸，又能够缩短发酵时间优势复合菌群；并对整个发酵工艺优化，取得生产高蛋白饲料及发酵饮料所需最优工艺条件（包含柑桔皮渣粒径和含水率、菌株接种量、pH、DO、C:N、温度、发酵时间、发酵深度及烘干过程中参数），最终确定一套柑桔皮渣发酵最优工艺，达成无二次污染、节能、提升经济效益目标。2.3 拟处理关键问题 （1）用于提升蛋白质含量菌群含有黑曲霉、绿色木霉等其孢子颜色较深菌种，在发酵过程中，发酵底物可能会出现黑色或绿色，这将严重影响发酵产物品质及外观。调整各菌种混合百分比及发酵参数,得到品质佳、外观好发酵产物。 （2）因为在构建复合微生物菌群时，多种菌种之间存在着交互作用，比如一些菌种可能产生部分抑制性代谢产物，比如乙酸或其它物质，这将严重抑制复合菌系生长。菌种之间这种作用将会严重影响其发酵结果，所以在培养种子液时一定要采取科学手段确定菌种最好混合百分比，并严格控制发酵参数。如其结果还是不尽如人意，可采取人工诱变方法得到变异菌种，但要对变异菌种所产生中间产物进行测定及对其稳定遗传菌株进行生化检测，确保不产生有毒物质。（4）为提升产品粗蛋白量，需添加部分天然含氮量较高干性辅料，如豆饼粕、麸皮、米糠类天然食品废渣。但在添加过程中，可能出现辅料含有毒性物质，需要对拟添加辅料作除毒预处理。 （5）寻求一套既经济、又有效固液分离方案，使固液完全分离，降低后续液体产品纯化工艺步骤。3、拟采取研究方案及可行性分析3.1拟采取研究方案（1）选定米曲霉、黑曲霉、扣囊复膜孢酵母、啤酒酵母、酿酒酵母等菌种。在相同外界条件下进行单一菌株和混合菌群对比发酵试验，采取凯氏定氮法（GB5009-1985）、考马斯亮兰分光光度法测定发酵产物粗蛋白、可溶性蛋白含量，确定产蛋白质最高菌株或混合菌群，以此作为研究发酵工艺出发菌群。（2）依据大多数文件及已经有试验经验，最好发酵菌群应该是多菌混合复合菌液，因为各菌种之间交互影响，需对菌群中各菌种百分比进行优化，经过多组菌种百分比混合试验得到一个最好百分比，以此种百分比为基准，采取中心组合设计法，经SASRSREG（响应面回归）过程进行数据分析，建立二次响应面回归模型，进而寻求最优对应因子水平，得到科学最好混合百分比及响应值。并以此百分比混合菌液作为发酵种子液培养，以后需对混和菌群蛋白酶和纤维素酶活性测定（蛋白酶活力测定采取福林-酚比色法，纤维素酶活力测定采取3，5二硝基水杨酸比色法），以明确混合菌群中各个菌株之间相互抑制作用最小。（3）若多种百分比混合菌发酵效果均不佳，则需确定一个本身蛋白质较高菌株进行诱变。方法以下，将此菌株接种到无菌液体培养基中，在恒温摇床中培养48h（扩大培养）；然后将扩大培养后菌株在不一样功率UV光下照射不一样时间，进行人工诱变；接着继续在LB培养基中接种培养三代以上，取得较稳定遗传子，最终将此诱变菌种保留并判定。（4）辅料确实定。拟采取5种重庆地域较丰富农作物废料即豆饼粕、米糠、麸皮、玉米皮、玉米心等作辅料。将5种辅料分别以不一样百分比和柑桔皮渣混合，在相同外界环境下（包含温度、pH、接种量、含水率、时间、发酵层深度）接入种子液发酵，依据测定粗蛋白质含量高低确定所用含氮辅料。（5）发酵工艺参数优化。采取单原因试验及SAS软件RSREG分析数据，确定柑桔皮渣粒径、含水率、菌种接种量、pH、C:N、DO、温度、发酵时间、发酵层厚度等参数，以达成优化整个发酵工艺目标。 （6）对液态发酵发酵液进行成份分析，包含：20种常见基础氨基酸，可溶性蛋白质及部分长链大分子物质，并对其进行脱色，纯化处理。为中试打下基础。（7）用实际饮料厂柑桔皮渣进行发酵试验，确定螺旋式压榨机工艺参数。考察不一样功率、不一样螺旋轴齿距对柑桔皮渣粒径、含水率影响。（8）灭菌干燥工艺参数确定。采取不一样温度烘干和不一样温度及风速风干发酵产物，经过对干燥成品中粗蛋白、可溶性蛋白、纤维素检测、霉菌含量及经济评价，确定最好干燥方法。同时，确定使营养成份保留最完整、灭菌效果最好灭菌方法及工艺。整个工艺步骤以下：蛋白质高产混合菌复合菌群液体，二级种子液柑桔皮渣压榨脱水调整pH调整C:N接 种发 酵灭菌干燥成 品过 滤纯 化成品灭菌干燥固态发酵粉 碎成 品粉 碎滤渣滤液液态发酵 3.2 可行性分析中国柑桔研究所取得过柑桔皮渣发酵生产高蛋白饲料研究结果，她们开创性工作为本课题研究打下了基础。本课题关键是针对柑桔研究现在阶段性结果中存在不足所作必需改善，所以本课题拟选择研究方案可行，拟采取技术路线合理。课题组组员专业技术覆盖面广，技术研究力量强，聘用了重庆市微生物发酵技术方面资深教授，在发酵方面积累了丰富研究和实践经验。填写本申报书之前，我们已对此领域中国外研究进展和应用现实状况进行了深入调研，而且着手开展了前期基础性试验（如高蛋白复合菌群筛选及其发酵工艺研究），为以后课题全方面开展奠定了基础。另外，重庆工商大学环境和生物工程学院、药品化学和化学生物学研究中心拥有优异试验仪器和分析仪器，能为我们试验研究提供良好技术平台。所以我们能够圆满地完成本课题研究任务。4、本项目标特色和创新之处（1）本项目标首要研究内容是筛选能高产蛋白质单一菌种或复合菌群，并针对柑桔皮渣本身氮源不足缺点，辅以高氮食品废渣作氮源，从发酵菌种和原料两个方面确保了发酵饲料高蛋白品质。（2）采取螺旋式压榨机脱水，降低和控制发酵原料含水率，处理胶糊状柑桔皮渣引发微生物不能自由繁殖和含水率高不易烘干等问题；（3）继固态发酵法后，又研究半液态发酵方法，同时取得很好品质发酵饮料和蛋白饲料，将柑桔皮渣充足利用，一次性开发出两种经济效应很好产品。（4）对整个发酵工艺步骤及运行参数进行优化，为中试研究打下基础。5、预期研究结果及项目标考评内容和指标（1、关键技术指标：包含形成新技术、新工艺、新装置、新产品、专利、标准（技术标准、企业标准）、论文专著数量及其水平等；2、经济考评指标；3、项目实施中形成试验室、研究室等；4、人才培养指标。）5.1 关键技术指标取得生产高蛋白饲料复合发酵菌群，优化整个工艺步骤和参数。使发酵产品蛋白质含量提升到30%以上，复合发酵菌群发酵时间缩短到2530小时；达成GBT5915-93仔猪、生长肥育猪配合饲料、GB8961-88奶牛精料补充料等中国国家标准或行业标准。申请国家发明专利1项，在关键期刊上发表论文23篇。5.2经济指标将柑桔皮渣资源化，不仅可节省废渣处理处理费用（60元/吨），而且能够60100元/吨价格出售饲料，提升厂家经济效益。5.3 人才培养（1）经过本项目研究，使12名老师晋升高一级职称；（2）培养环境工程专业硕士硕士12人；化学工程和工艺、生物工程专业34名本科生以本项目相关研究为题完成毕业设计（论文）。6、年度研究计划及年度考评指标.01.06 复合菌群筛选，得到蛋白质高产菌株最好配比；同时，筛选辅料，确定最好C:N比。.06.12 发酵工艺和参数优化研究，发酵液纯化技术研究，发酵产物灭菌干燥工艺研究。.01.07 整理资料，申请专利，发表论文，项目结题验收。（二）研究基础和工作条件1、工作基础 （1）依据相关文件选定黑曲霉、米曲霉、扣囊复膜孢酵母三种菌株作为出发菌株，并作了复合菌群优化，经过不一样菌种混合试验，确定了三菌混合发酵样品中粗蛋白含量最高。（2）已初步确定了三菌混合最好百分比，并得到了30%左右粗蛋白含量发酵样品。（3）探讨了在混菌百分比为1：1：1情况下工艺条件，其中包含菌液接种量、时间、温度、pH等，为深入研究打下基础。（4）建立了柑桔皮渣发酵饲料蛋白质及相关营养成份分析方法。这些试验研究为本项目标开展奠定了坚实基础。2、工作条件（1）重庆工商大学环境工程学院、药品化学和化学生物学研究中心有优异试验仪器和分析仪器，能为本课题研究提供良好技术平台。（2）课题组组员专业技术覆盖面广，技术研究力量强。聘用了重庆市微生物发酵技术方面资深教授，在发酵方面积累了丰富研究和实践经验。（3）课题组对微生物发酵等技术已经有很好前期研究基础。3、申请人简历 项目申请人殷钟意于1990年毕业于渝州大学化学系化学教育专业，获本科，评为高级试验师，关键从事试验教学和科研工作，关键研究方向是应用化学、环境保护技术。近5年发表关键论文有：（1）固定相络合萃取剂处理水中苯酚性能研究，重庆环境科学，.24（5） （2）聚丙烯型大孔树脂对水中油脂吸附性能研究，西南师范大学学报（自），.29（3）工业含铬废水络合萃取处理工艺研究，化学研究和应用，.16（4）（4）聚丙烯加热改性制备大孔吸附树脂工艺及应用研究，化学研究和应用，.15（6）（5）膜厚综正当确定磷化液，西南师范大学学报（自），.29（4）（6）聚丙烯型大孔树脂结构、性能和应用研究，塑料工业，.32（6）（7）固定相络合萃取剂处理水中六价铬性能研究和应用，表面技术，.33（4）（8）铬盐生产区土壤和农作物中铬含量情况调查分析，重庆工商大学学报(自)，.20(4)（9）从橙皮中提取香精油工艺条件研究，天然产物研究和开发，.15（6）(10)重庆市郊土壤中锌调查分析，重庆工商大学学报（自），.21（3）(11)包含络合萃取剂大孔树脂处理水中六价铬研究，会议论文，.44、负担或完成重庆市科委资助科研项目情况(1)高浓度难降解工业废水固定床络合萃取技术研究，重庆市科委（攻关），- ,结果登记号：950Y0067； (2)新型吸附光催化复合材料治理难降解染料废水技术研究,重庆市科委(攻关), -，结果登记号：950Y0068；(3)活性炭纤维负载TiO2光催化降解焦化废水研究，重庆市科委（应用基础），-；(4)光催化SBR处理有机磷农药废水研究(协议号：CSTC BB7079), 重庆市科委（应用基础）,.10-.12；(5)阿尔茨海默病天然活性药品筛选和物质基础研究，重庆市科委关键自然科学基金，.9-.12。（三）查新汇报（关键项目需附查新汇报）五、申请者承诺我确保上述填报内容真实性。假如取得资助，我和本项目组成组员将严格遵守重庆市自然科学基金计划项目管理措施相关要求，切实确保研究工作时间，按计划认真开展研究工作，按时报送相关材料，按要求做好结题工作。 申请者（签字）： 年 月 日 六、申请者所在单位及合作单位审查和确保1. 申请者所在单位学术委员会审查意见（包含：对项目标意义、特色和创新之处及申请者研究水平和治学态度等签署具体意见）：该项目在中国同行研究基础上，对发酵菌种及工艺进行了深入优化，其产品粗蛋白含量有了显著提升，有一定创新性，采取微生物发酵方法使废弃物资源化，不仅处理了废弃物处理问题，还可发明经济价值，对现代环境保护和社会经济发展全部含有推进作用。申请者治学严谨并有一定科研能力，曾数次参与科研项目，可负担此项目。 学术委员会主任（签章） 年 月 日2. 申请者所在单位审查意见和确保已按重庆市自然科学基金计划项目管理措施相关要求对申请人进行了资格审查，对申请书内容进行了审核，同意学术委员会审查意见，并确保在项目取得资助后做到以下几点： （1）确保对研究计划实施所需人力、物力和工作时间等条件给支持。 （2）严格遵守重庆市科委相关资助项目管理、财务等各项要求。 （3）督促项目责任人和本单位项目管理部门按重庆市科委要求立即报送相关报表和材料并按期结题。 （4）如项目获同意资助，本单位将确保对该项目实施中经费不足部分给配套。需要说明其它问题： 单位责任人（签章） 单位（签章） 年 月 日3. 合作单位审查意见和确保同意参与合作研究，确保对参与合作研究人员时间及工作条件支持、督促其按计划完成所负担任务。合作单位1（签章） 合作单位2（签章）七、审查意见市科委业务处审查意见： （签章） 年 月 日