肾脏病理1.ppt

肾脏病理肾脏病理1 1目目 的的1.了解肾脏病理知识2.根据临床资料推断病理改变 基础篇阅片Anatomy of KidneyNote the positions of GlomerulusLoop of HenleyPCT,DCT,CTCortex,Medulla,Pelvis.肾活检病理的研究方法n光学显微镜检查 半薄切片和多种特殊染色方法n免疫病理学方法 免疫荧光、免疫组织化学n 电子显微镜检查 透射电镜、扫描电镜、免疫电镜要求：切片薄（要求：切片薄（3m），），有特殊染色。有特殊染色。肾小球数一般肾小球数一般10个个/切片。切片。观察：观察：光镜HE（苏木素伊红染色）：观察细胞核，分辨细胞种类，提示苏木素伊红染色）：观察细胞核，分辨细胞种类，提示GBM厚度。厚度。PAS（过碘酸雪夫氏染色）过碘酸雪夫氏染色）：观察观察GBM、TBM及细胞外基质（及细胞外基质（ECM），），但系膜基质（但系膜基质（MM）染得比实际宽，且染得比实际宽，且GBM很少用该染色。很少用该染色。PASM（六胺银）：六胺银）：GBM为主，为主，MM也很清楚（胶原也很清楚（胶原，LN，FN 呈黑色）呈黑色）。Masson：观察嗜复红蛋白（多提示免疫复合物），间质纤观察嗜复红蛋白（多提示免疫复合物），间质纤维化（胶原纤维均呈绿色，维化（胶原纤维均呈绿色，GBM、TBM、MM也为绿色，细胞核、免疫复也为绿色，细胞核、免疫复合物、血栓、血浆成分均呈红色）。合物、血栓、血浆成分均呈红色）。PASM+Masson：PASMassonHEPASM原理：原理：n一种抗体只能与相应的一种抗原特异性结合一种抗体只能与相应的一种抗原特异性结合n将荧光素标记在已知抗体上，用标有荧光素的已将荧光素标记在已知抗体上，用标有荧光素的已 知抗体与待检肾组织反应知抗体与待检肾组织反应n若肾组织中有与已知抗体相应的抗原存在，则两若肾组织中有与已知抗体相应的抗原存在，则两 者结合为者结合为抗原抗原-已知抗体已知抗体-荧光素免疫复合物荧光素免疫复合物n该复合物在具有紫外光源的荧光显微镜下观察，该复合物在具有紫外光源的荧光显微镜下观察，作为指示物的荧光素被激发放出鲜艳的荧光作为指示物的荧光素被激发放出鲜艳的荧光免疫荧光 要求：抗体和补体齐全，标本抗原性保存良好要求：抗体和补体齐全，标本抗原性保存良好特点：快而敏感，但不易保存特点：快而敏感，但不易保存观察：观察：（1）何种抗体沉积：）何种抗体沉积：球蛋白类球蛋白类:IgG、IgA、IgM：以确定参与免疫反应的球蛋白种类：以确定参与免疫反应的球蛋白种类 补体类补体类:C3、C1q 或或C4：以证实免疫反应过程中补体被激活的途：以证实免疫反应过程中补体被激活的途 径，即经典径，即经典(C1q)或旁路途径或旁路途径(C3)血浆蛋白类：血浆蛋白类：FRA(纤维蛋白原纤维蛋白原)特异性抗原：特异性抗原：如如HBsAg、HBcAg、k、入、入 等等 免疫荧光（2）沉积部位：沉积部位：Mes、GCW、TBM、A、BBM（3）形态：）形态：线状、颗粒状、团块状线状、颗粒状、团块状（4）强度（）强度（+）高倍镜下隐约可见高倍镜下隐约可见 +低倍镜隐约可见，高倍镜下可见低倍镜隐约可见，高倍镜下可见 +低倍镜可见，高倍镜下清晰低倍镜可见，高倍镜下清晰 +低倍镜清晰，高倍镜下耀眼低倍镜清晰，高倍镜下耀眼 +低倍镜耀眼，高倍镜下刺眼低倍镜耀眼，高倍镜下刺眼免疫荧光必要性：必要性：1、在光镜病理改变轻微的肾脏疾病，、在光镜病理改变轻微的肾脏疾病，EM检查检查 非常必要非常必要2、在伴特殊有形结构的肾脏疾病诊断中，、在伴特殊有形结构的肾脏疾病诊断中，EM具具 有非常重要的价值有非常重要的价值优点：定位准确优点：定位准确缺点：视野较小，观察局限、片面缺点：视野较小，观察局限、片面电镜观察：观察：1、足突是否融合、足突是否融合-广泛性、部分、节段性广泛性、部分、节段性2、基底膜的变化、基底膜的变化3、电子致密物的沉积部位与形状、密度、电子致密物的沉积部位与形状、密度4、肾小球固有细胞与系膜基质变化、肾小球固有细胞与系膜基质变化5、特殊有形结构物质的沉积部位与形态、特殊有形结构物质的沉积部位与形态电镜正常肾小球正常肾小球