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基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用 (C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 中南民族大学硕士学位论文英文缩略词I缩略词英文全称中文含义AAAra c hidonic a c id花生四烯酸APCIAtmospheric Pressure Chemic a l Ioniza tion大气压化学电离CerCera mide神经酰胺CIChemic a l ioniza tion化学电离CIDCollision induc ed dissoc ia tion碰撞诱导解离DAGDia c ylglyc erol甘油二酯DESIDesorption elec trospra y Ioniza tion解吸电喷雾电离DHADoc osa hexa enoic Ac id二十二碳六烯酸EIElec tron ioniza tion电子电离EICExtra c tion of ion c hra ma togra phy提取离子流图EliElec tron Impa c t Ioniza tion电子轰击电离ELSDEva pora tive Light Sc a ttering Detec tor蒸发光散射检测器EPAEic osa penta enoic a c id二十碳五烯酸ESIElec trospra y Ioniza tion电喷雾电离FAFa tty a c id自由脂肪酸FABIFa st Atomic Bomba rdment Ioniza tion快速原子轰击电离FDIField Desorption Ioniza tion场解吸电离FIField Ioniza tion场电离FIDFla me Ioniza tion Detec tor火焰离子化检测器FTICRMSFourier tra nsform ion c yc lotron resona nc e ma ss spec trometr傅立叶变换离子回旋共振质谱 仪GCGa s c hra ma togra phy气相色谱GC-MSGa s c hra ma togra phy-ma ss spec trometer气相色谱-质谱联用HILICHydrophilic Intera c tion Chroma togra phy亲水作用液相色谱HRMSHigh resolution ma ss spec trometer高分辨率质谱LODLimit of Detec tion检测限LOQLimit of Qua ntific a tion定量限LPCLysophospha tidylc holine溶血型磷脂酰胆碱LPELysophospha tidyletha nola mine溶血型磷脂乙醇胺MAGMonoa c ylglyc erol单甘油酯MALDIMa trix-a ssisted la ser desorption ioniza tion基质辅助激光解吸/电离MSIMa ss spec trometry ima gining质谱成像技术MTBEMethyl Tertia ry Butyl Ether甲基叔丁基酸MUFAMonounsa tura ted fa tty a c ids单不饱和脂肪酸NMRNuc lea r Ma gnetic Resona nc e核磁共振OPLS-DAOrthogona l Pa rtia l Lea st-Squa res Disc rimina tion Ana lysis正交最小偏二乘法分析PAPhospha tidic a c id磷脂酸PCPhospha tidylc holine磷脂酰胆碱PCAPrinc ipa l c omponent a na lysis主成分分析PEPhospha tidyletha nola mine磷脂乙醇胺PGPhospha tidylglyc erol磷脂酰甘油PIPhospha tidylinositol磷脂酰肌醇(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用PLS-DALea st-Squa res Disc rimina tion Ana lysis最小偏二乘法分析PSPhospha tidylserine磷脂酰色氨酸PUFAPolyunsa tura ted fa tty a c ids多不饱和脂肪酸Q-TOF MSQua drupole-time of flight ma ss spec trometer四极杆串联飞行时间质谱RTRetention time保留时间S/NSigna l/Noise信噪比SFASa tura ted fa tty a c ids饱和脂肪酸SIMSSec onda ry ion ma ss spec trosc opy二次离子质谱SMSphingomyelin鞘磷脂SPESolid pha se extra c tion固相萃取SPMESolid pha se mic roextra c tion固相微萃取TAGTria c ylglyc erol甘油三酯TICTota l ion c ha ra ma togra phy总离子流图TLCThin la yer c hra ma togra phy薄层色谱法UPLCUltra-Performa nc e Liquid Chroma togra phy超高效液相色谱(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 中南民族大学硕士学位论文摘要脂质在生物系统中扮演着重要的角色，如作为生命活动的能量储备场所、组成膜 系统、调控细胞的信号通路等。同时，作为人体重要的营养物质，脂质在不同的食品 中的组成差异很大，影响着食品的品质以及营养价值。因此，运用准确高效的定性和 定量方法分析脂质，对于了解食品成分、品质判别、掺假鉴别、产地溯源和食品安全 有着重要意义。本课题首先运用脂质组学方法分别对不同豆类卵磷脂以及蛋黄中的磷脂进行检 测，结合化学计量学分析，对不同食品中的脂质分子实现了高通量、高精度、高覆盖 的脂质组学分析。随后，将脂质组学方法应用于云南省野生食用真菌，更加全面的分 析其脂质组成，筛选生物标志物以区分不同种类野生真菌，为野生真菌脂质的组成及 品种鉴别提供依据。研究结果如下：1、利用超高效液相色谱-高分辨率质谱的脂质分析方法，对六种豆类中的卵磷脂 组成进行分析，结果表明：六种豆类中共鉴定出49种卵磷脂分子，不同豆类中的磷 脂种类和含量不同，其中鹰嘴豆和黄豆的卵磷脂含量明显高于其他豆类中的磷脂含量,并且在鹰嘴豆中鉴定出许多酸型卵磷脂和富含二十二碳六烯酸（DHA）侧链的卵磷 脂分子；超高效液相色谱-高分辨率质谱串联技术可作为脂质分析平台，用于分析豆 类卵磷脂的组成。2、利用柱层析技术纯化了七种不同物种的蛋黄磷脂，通过超高效液相-飞行时间 质谱串联技术对蛋黄磷脂进行鉴定，同时结合外标法，对磷脂分子进行定量分析。结 果表明：共检测到八类磷脂和87种磷脂分子，其中磷脂酰氨醇分子种类最多，为47 利I主成分分析表明，鸽子蛋蛋黄和鸡蛋蛋黄中的磷脂分子种类和浓度与其他蛋黄中 的磷脂分布有显著差异。层次聚类分析表明，鸽子蛋黄的磷脂与鸡蛋磷脂组成相似，可以归为一类；该研究为蛋类的磷脂组成提供了理论依据。3、利用脂质组学方法对八种云南野生真菌的甘油酯、甘油磷脂、鞘脂等脂质组 分进行分析。结果显示：共检测分析了 18类脂质和172种脂质分子；通过化学计量 学分析表明，牛肝菌和见手青的脂质组分相似，同时筛选出区分不同品种野生真菌的 生物标志物；脂质组学的方法能够高效快速的对野生真菌进行脂质组成分析，并能够 为野生真菌的品种鉴别提供依据。in(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用关键词：超高效液相色谱-高分辨率质谱，脂质组学，化学计量学，野生真菌Abstra c tLipids pla y muc h importa nt roles in biologic a l systems,suc h a s serving a s energy stora ge for life a c tivities,forming membra ne systems a nd regula ting c ell signa ling pa thwa ys.As one of the importa nt nutrients for the huma n beings,the c omposition of lipids va ries in different foods grea tly,whic h a ffec ts the qua lity a nd nutritiona l va lue of foods.Therefore,using a c c ura te a nd effic ient qua lita tive a nd qua ntita tive methods to a na lyze lipids is of grea t signific a nc e in the field of food c omposition a na lysis,qua lity identific a tion,a dultera tion disc rimina nt,geogra phic a l tra c ing a nd sa fety eva lua tion.In this projec t the lipidomic s method wa s firstly a pplied to detec t the phospha tidylc holine a nd phospholipids in different bea ns a nd egg yolk respec tively.Combined with the stoic hiometric a na lysis,the lipid molec ules in different food ma tric es were a na lyzed with high throughput,high prec ision a nd high c overa ge.Subsequently,the lipidomic s method wa s a pplied to the lipid a na lysis of wild edible fungi in Yunna n Provinc e to a na lyze the lipid c omposition of wild fungi more c omprehensively a nd sc reen bioma rkers to distinguish different types of wild fungi,whic h provided a ba sis for the lipids c omposition a nd disc rimina tion of wild fungi.The results were a s follows:1 The phospha tidylc holine in six bea ns were a na lyzed by ultra-high performa nc e liquid c hroma togra phy-high resolution ma ss spec trometry(UPLC-HRMS).The result indic a ted tha t a tota l of 49 kinds of phospha tidylc holine molec ules were identified.The spec ies a nd c ontent of phospholipids in bea ns a re different.The phospha tidylc holine c ontent of c hic kpea s a nd soybea ns is signific a ntly higher tha n tha t of others.Moreover,ma ny ether-phospha tidylc holine molec ules a nd dic osa hexa enoic a c id(DHA)a re identified in c hic kpea s;the ultra-high performa nc e liquid c hroma togra phy-high resolution ma ss spec trometry ta ndem tec hnology c a n be used a s a pla tform fbr lipid a na lysis to a na lyze the c omposition of bea ns phospha tidylc holine.2、Seven different spec ies of egg yolk phospholipids were purified by c olumn c hroma togra phy,a nd the phospholipids of egg yolks were identified by ultra-high performa nc e liquid-time-of-flight ta ndem ma ss spec trometry.The phospholipid molec ules,mea nwhile,were qua ntita tively a na lyzed through a n externa l sta nda rd method.The results showed tha t eight types of phospholipids a nd 87 types of phospholipid molec ules were identified,inc luding 47 types of phospha tidyletha nola mine molec ules whic h wa s the most.IV(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 中南民族大学硕士学位论文Princ ipa l c omponent a na lysis showed tha t the types a nd c onc entra tions of phospholipid molec ules in pigeon egg yolk a nd hen egg yolk were signific a ntly different from others.Hiera rc hic a l c luster a na lysis showed tha t the c omposition of pigeon egg yolk phospholipids wa s simila r to tha t of hen egg phospholipids whic h c ould be c la ssified into one c a tegory;this study provided a theoretic a l ba sis fbr the phospholipids c omposition of eggs.3、Using lipidomic s method to a na lyze the lipid c omponents inc luding glyc erides,glyc erophospholipids a nd sphingolipids of eight wild fungi pic ked in Yunna n provinc e.The results showed tha t a tota l of 18 lipids a nd 172 lipid molec ules were detec ted a nd a na lyzed;c hemometric a na lysis showed tha t the lipid c omponents of Boletus edulis a nd Boletus speciosus Frost were simila r with ea c h other.At the sa me time,bioma rker tha t c ould distinguish different spec ies of wild fungi were sc reened out.The method of lipomic s c a n effic iently a nd quic kly a na lyze the lipid c omposition of wild fungi,a nd provided a ba sis for the identific a tion of wild fungi.Keywords:UPLC-HRMS,lipidomic s,c hemometric s,wild fungi(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用目录英文缩略词.I摘要.IIIAbstra c t.IV第一章绪论.11.1 脂质的概述.11.1.1 脂质的定义和分类.11.1.2 甘油酯的结构.21.1.3 甘油磷脂结构.31.1.4 鞘脂类结构及其概述.41.2 脂类化合物的命名及其规则.51.3 脂类化合物的生物活性.71.4 脂类化合物及代谢产物与相关疾病的关系.71.5 脂质组学的研究进展.81.5.1 脂质的提取富集方法.81.5.2 脂质分析方法.101.5.3 数据分析.131.6 小结.14第二章 基于UPLC-HRMS技术对不同豆类中卵磷脂组分的分析.162.1 前言.162.2 实验仪器、试剂和材料.162.2.1 实验仪器.162.2.2 实验试剂.172.2.3 实验材料.172.3 实验方法.172.3.1 豆类磷脂的提取.172.3.2 豆类磷脂分析.172.3.3 豆类PC纯化.182.3.4 气相色谱分析豆类PC中的脂肪酸组成.182.3.5 利用UPLC-HRMS对豆类中PC分子进行定性分析.19VI(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 中南民族大学硕士学位论文2.4结果与讨论.192.4.1 各种豆类中PC的含量.192.4.2 各种豆类PC提取物的脂肪酸分析.202.4.3 PC分子的鉴定.212.4.4 各种豆类PC分子组成分析.232.4.5 各种豆类PC分子的主成分分析.252.4.6 聚类分析.272.5本章小结.28第三章 基于UPLC-Q-TOF MS技术对七种蛋类中磷脂组分的分析.303.2 实验材料和试剂.303.2.1 实验仪器.303.2.3 实验材料.313.3 实验方法.313.3.1 样品预处理.313.3.2 蛋类脂质的提取.313.3.3 蛋类脂质中磷脂的的纯化.313.3.4 蛋黄磷脂中脂肪酸分析.323.3.5 蛋黄磷脂分子鉴定及半定量分析.323.3.6 UPLC-Q-TOF 分析.323.4 结果与讨论.333.4.1 七种蛋黄磷脂的脂肪酸分析.333.4.2 磷脂的鉴定过程.333.4.3 不同蛋黄中的磷脂组成分析.353.4.4 蛋类磷脂组成的PCA分析.393.4.5 蛋类磷脂组成的分层聚类分析.403.5本章小结.41第四章脂质组学方法在八种云南可食用野生真菌脂质分析中的应用.424.1 前言.424.2 实验仪器、试剂和实验材料.434.2.1 实验仪器.43VII(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用4.2.2 实验试剂.434.2.3 实验材料.434.3 实验方法.444.3.1 菌类脂质的提取.44432菌类脂肪酸的气相分析.444.3.3 利用UPLC-HRMS进行脂质鉴定和半定量分析.444.4 结果与讨论.454.4.1 云南野生真菌的脂质提取率及脂肪酸分析.454.4.2 云南野生真菌的脂质鉴定过程.474.4.3 云南野生真菌中脂质组成分析.494.4.4 云南野生真菌中脂质成分的化学计量学分析.534.5 本章小结.56第五章全文结论.57参考文献.58致谢.69附录.70硕士期间参与发表的科研论文.89VIII(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 中南民族大学硕士学位论文第一章绪论脂类是人体内的重要营养元素之一，通常被定义为自然界中一类易溶于有机溶剂、难溶于水的小分子化合物山。长时间以来，人们更多的是聚焦于脂质的物理特性，如 脂类化合物亲油疏水性，其分子的结构特点很少有人关注。随着对脂类化合物研究的 深入，脂质逐渐被认为是影响人类生理及病理的重要代谢物质之一。根据Lipid Ma ps(美国国立卫生院推进的“脂质代谢途径研究计划”)显示，研究脂质的科学家将脂 质整理分类，并重新将脂质定义为“疏水的或两亲性的化合物”。目前，常见的脂 类大致可以分为八类：脂肪酸(Fa tty a c ids)、甘油酯(Glyc erolipids)、甘油磷脂(Glyc erophospholipids)鞘月旨(Sphingolipids)固醇脂(Sterol lipids)异戊烯醇脂(Prenol lipids糖脂(Sa c c ha rolipids)和聚酮化合物(Polyketides)。研究结果表明，脂质类物质不仅是机体的能量储存场所和细胞的能量来源，同时 脂质作为细胞膜结构的组成部分，与细胞信号传导、细胞凋亡、代谢缺陷等密切相关 4o紧随基因组学和蛋白组学概念的问世，华人学者Ha n xia nlin连同Ric ha rd W.Gross于2003年撰文总结并首次提出“脂质组学”的概念。脂质组学是系统研究脂 质类化合物的一门独立学科，作为大规模定性和定量研究脂类化合物并了解它们在不 同生理、病理条件下的功能和变化的方法学，能准确且全面的提供生物样品在不同生 理条件下的全脂信息谱图。然而，目前为止，脂质组学领域的研究广度和深度还远不 及基因组学和蛋白质组学领域的爆炸式发展，这在很大程度上是由于脂类的复杂性和 缺乏强有力的分析工具。随着现代分析技术的飞速发展及分析仪器的不断更新，气相 色谱、液相色谱及核磁共振光谱等分析方法已经被应用于脂质成分分析，在液相分离 技术和质谱仪的串联使用成功运用到脂质成分的定性和定量分析之后，脂质组学的研 究日臻成熟，使这一领域成为一个前景光明的研究领域，在药食质量控制、药物和生 物标志物开发方面有极大的应用前景。1.1 脂质的概述1.1.1 脂质的定义和分类前文提到，由Lipid Ma ps提出的脂质是“疏水的或两亲性的化合物”这一概念 被广大的研究者所接受。Fa ly等将脂质分成八大类，其结构如图1.1所示。(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用脂肪酸类0HNH鞘脂类 OH o甘油酯类异戊烯脂类HO7 HOX.HNO O固醇脂类图1.1 8大脂类化合物代表及其结构式Figure.1.1 Representa tion of 8 lipid c ompounds a nd their struc tura l formula e本文将以甘油酯、甘油磷脂、鞘脂类脂质为例，对三种脂质的结构进行详细的介绍。1.1.2 甘油酯的结构u.油脂质包括单酰基u.油酯、二酰基注油酯和三酰基U.油酯，是以u,油为基本 骨架，甘油结构上的羟基分别与1-3个脂肪酸分子酯化形成甘油酯，其具体结构如图 1.2所示。最广为人知的三酰基甘油酯，又称甘油三酯，其甘油骨架的三个酰基侧链 一般不同，为人体所需要的优质脂肪酸主要来源。在人体中，95%以上的脂肪都是以 甘油三酯的形式储存于脂肪组织之中网。2(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 中南民族大学硕士学位论文a.单甘油酯 Monoa c ylglyc erol MAG(18:0)c.甘油三酯 Tria c ylglyc erol TAG(16:0/18:2/22:6)图1.2甘油酯类化合物结构式Figure 1.2 Struc ture formula of glyc eride1.1.3甘油磷脂结构甘油磷脂，又称为磷脂，发现于1812年。甘油磷脂是以甘油为骨架，其极性头 部由磷酸及其衍生物组成，非极性部分为脂肪酸链，存在于自然界及细胞膜的双分子 层之中，包括磷脂酸、磷脂酰胆碱、磷脂乙醇胺、磷脂酰甘油、磷酸肌醇、磷脂酰丝 氨酸以及酸型磷脂和缩醛磷脂等。其主要类型结构如图L3所示。a.甘油磷脂母核Oc.磷脂酰胆碱 Phospha tidylc holine,PC(16:0/18:0)3(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用d.磷脂酸 Phospha tidic a c id,PA(16:0/18:1)Og.磷脂酰丝氨酸 Phospha tidylserine PS(16:0/18:2)h.醛磷脂 Ether Ester Lipids PC(16:0e/4:0)Oi.缩醛磷脂 Vinyl Ether(Pla sma logen)PC(P-18:0/18:l)图1.3磷脂类化合物的结构Figure 1.3 Struc ture of phospholipid c ompounds1.1.4鞘脂类结构及其概述如图1.4所示，鞘脂是在碱性氨基醇的骨架上修饰后产生的一系列庞大的化合物 家族，是由长链脂肪酸的酰基辅酶A和丝氨酸开始，随后转化为鞘磷脂、神经酰胺、4(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 中南民族大学硕士学位论文糖鞘脂和其它化合物。鞘脂在细胞膜生物学上发挥着重要的作用。鞘脂类化合物的产 生和代谢由相同的生物途径调控，在此过程中产生许多调节细胞功能的生物活性代谢 产物。这些代谢产物负责细胞内的信号转导和调节，并与许多疾病有着密切的关系。以鞘脂代谢酶抑制剂作为潜在药物的研究已经广泛开展。0HOH NH2b.植物鞘氨醇 Phytosphingosine 18:0d.羟基脂肪酸植物鞘氨醇 Cera mide a lpha-hydroxy fa tty a c id-phytospingosine Cer-AP(18:1/24:0)e.己糖神经酰胺羟基脂肪酸二氢鞘氨醇 Hexosylc era midc hydroxyfa tty a c id-dihydrosphingosineHexCer-HDS(18:0/16:0)图14鞘脂类化合物的结构Figure 1.4 Struc ture of sphingolipids1.2脂类化合物的命名及其规则上文中介绍到脂类的结构，主要包含脂肪酸及脂肪酸侧链、甘油骨架以及部分脂 质结构存在磷酸基团。脂肪酸类脂质按数字命名法，末端竣基碳定为c i,明确双键的5(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用个数以及位置。该命名规则如下：m:n(a Z/E),其中m表示碳原子个数，n表示双键 的个数，a代表双键的位置，Z/E表示双键的立体构型，例如FA 18:2(9Z,11E)(图 1.5所示)。含甘油骨架类脂质的命名，首先要依据其结构中的特征基团判断其是甘油 酯类或是甘油磷脂类。对于甘油酯类，先根据结构写出具体类型，如(MAG、DAG、TAG),然后再描述各酰基链的碳原子个数、双键数以及可能还有的氧原子的个数，确定脂肪酰基的组成。酰基侧链上的双键个数及立体构型和脂肪酸命名相同。如图 1.6所示，先确定结构中有甘油骨架并确定为甘油三酯类型，根据各个酰基侧链的结 构中碳个数分别为15、18、15,双键个数分别为0、1、0,s-2侧链上的双键构型为 Z式,确定该化合物的标准命名为TAG(15:0/18:1(9Z)/15:0)oOO图 1.5 FA 18:2(9Z,11E)的命名Figure 1.5 The nota tion of FA 18:2(9Z,11)O图 1.6 TAG(15:0/18:1(9Z)/15:0)的命名Figure 1.6 The nota tion of TAG(15:0/18:1(92)/15:0)对于甘油磷脂类结构的命名，与甘油酯的命名类似，先根据结构中的特征基团确 定分子类型，再描述各脂肪酰基侧链的碳原子个数、双键数目以及双键的构型。除甘油磷脂内所含的常规键型外,显示，如图1.7所示。当含有酸键和缩醛结构时，则在命名时需要对应的字符oa.PE(18:0p/18:l(9Z)Qo6(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 中南民族大学硕士学位论文b.PC(16:0e/22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)图1.7缩醛磷和脂酸型磷脂的命名Figure 1.7 The nota tion of vinyl phospholipid a nd ether phospholipid1.3 脂类化合物的生物活性近年来的脂质组学分析研究显示，真核细胞产生了大量的脂质川，这与脂质重要 的生理功能密不可分。脂质具有三种基本的生理功能：首先，由于脂质的相对还原状态，脂质主要以三酰基甘油和留醇酯的形式在脂滴 中储存能量。它们的主要功能是作为储能库，储存热量以及贮藏膜生物活动所需的脂 肪酸和固醇成分。第二，细胞膜的基质是由极性脂质组成，极性脂质有疏水性和亲水性两个部位,疏水部分自发地聚集和亲水部分与外界水性环境以及彼此相互作用的趋势是膜自发 形成的物理基础。脂质的两亲性是一种化学性质，使得细胞能够将其内部成分与外部 环境隔离开，同样地，细胞内的细胞器也基于这一原理相互分离开。第三，脂质可以在信号转导和分子识别过程中充当第一和第二信使，如磷脂通过 磷脂酶的催化作用，水解产生溶血磷脂、自由脂肪酸(如花生四烯酸)、磷脂酸、甘 油二酯等产物参与细胞信号的传导口 4磷脂酰肌醇的水解作为钙离子通道调节的主 要信号传递通路口引、甘油二酯可以充当第二信使，通过将蛋白激酶激活使得蛋白质 磷酸化，同时参与T细胞的活化增生14-咐；鞘脂类化合物在鞘氨醇激酶的作用下水 解生成的神经酰胺、鞘氨醇以及磷酸鞘氨醇可参与各种细胞信号传递，调控细胞的生 长、分化、衰老、死亡，同时还能调节炎症因子以及血管再生IM。两亲性脂质的水 解允许信号二分现象，即信号可以通过分子的疏水部分在膜内传播，也可以通过分子 的亲水部分传播通过胞质溶胶口叫 病理学，生物化学和遗传学的进步使得脂质类化 合物多样性的生物学作用成为新的焦点。1.4 脂类化合物及代谢产物与相关疾病的关系脂类化合物与许多疾病密切相关，研究表明，体内甘油二酯累积会造成脂毒性,导致细胞功能紊乱和细胞凋亡，同时还有可能引发糖尿病、癌症以及冠心病等2。，2工 溶血磷脂酰胆碱(LPC)能够对血脑屏障进行破坏并促进细胞炎症因子分泌，诱导中 枢神经系统的免疫反应RA并能使低密度脂蛋白含量降低，从而减少动脉粥样硬化的(C)1994-2023 China Ac a demic Journa l Elec tronic Publishing House.All rights reserved,http:/www.c 基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用风险。M.Ka hle等发现，含饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸酰基侧链的磷脂酰胆碱 的改变能够影响肝脏胰岛素抵抗。神经鞘脂（SM）通过鞘磷脂酶催化水解成为神经 酰胺，神经酰胺是重要的信号分子，调节代谢功能紊乱，例如胰岛素抵抗、胰腺P 细胞凋亡、线粒体代谢失调、非酒精性脂肪肝以及动脉粥样硬化等代谢疾病25,2%聚 酮类化合物是聚快类天然产物的合成前体，后者在生物化学和生态学方面有着巨大的 经济价值，研究发现，聚酮类化合物生物活性多样，具有抗菌、杀虫以及抗癌等多种 生物功能印，28。1.5 脂质组学的研究进展脂质组学提供了 一个强有力的工具来量化单个脂质的变化，可以帮助揭示疾病中 的脂质生物标志物，如糖尿病、癌症、动脉粥样硬化、高血脂、高血压、肺部疾病和 阿尔茨海默病。与核酸（DNA和RNA）和蛋白质不同，脂质在生理条件下相当紊乱,并且没有已知的结构与功能关系。因此，由于质谱技术和生物信息学的巨大进步，脂 质组学在发展中取得了长足的进展UI。脂质组学的分析流程大致包括化合物的提取分离及纯化、仪器分析以及数据处理，如图1.8所示:图1.8脂质组学流程图Figure.1.8 Proc edure of lipidomic s1.5.1 脂质的提取富集方法传统提取脂质的方法为Folc h法和Bligh-Dyer法，常用于生物样品中脂质的提取 和分离。基于混合溶剂对脂质的