DB13_T 2211-2015 马铃薯抗早疫病室内鉴定技术规范(河北省).pdf

ICS 65.020 B 16 DB13?可北省出htTA 方标准DB 13/T 2211-2015 马铃薯抗早疫病室内鉴定技术规范lndoor identification standard of potato varieties resistance to early blight 2015-11-06发布2016-01-01实施河北省质量技术监督局发布本标准按GB!T1.1-2009规定起草。本标准由保定市质量技术监督局提出。本标准起草单位:河北农业大学。目IJ1=1 本标准主要起草人:杨志辉、朱华、杨毅洁、张维宏、刘丽丽、何佳旦。DB13/T 2211-2015 I DB13/T 2211-2015 马铃薯抗早疫病室内鉴定技术规范1 范围本标准规定了马铃薯品种(系)和种质资源对早疫病抗性的室内鉴定技术规程，包括马铃薯品种室内抗性鉴定方法、马铃薯品种(系)和种质资源对早疫病的抗病性分级标准及评价。本标准适用于马铃薯品种(系)和种质资源对早疫病抗性室内鉴定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注目期的引用文件，仅注H期的版本适用于本文件。儿是小注H期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。NY!T 496肥料合理使用准则通则NY!T 5222 马铃薯生产技术规程3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1 马铃薯早疫病potato early bl ight 由茄f连格子包(Alternariasolani)引起的马铃薯七的一种气流传播的真菌病害，主要为害马铃薯叶片，在叶片七形成具有同心轮纹的坏死J址，也可为害地七茎和薯块，形成坏死斑，该病发生程度与寄主生育期相关，主要表现为生育后期感病严重。3.2 接种体Inoculum 用于人工接和l而引起马铃薯早疫病的病原体，在本标准巾指用于接丰1的茄链格子包分生于包子悬浮液。3.3 室内抗性鉴定Resistance identification in lab 利用接种体对被鉴定材料叶片进行人工接种，创造病原菌侵染和发病所甫的最佳温、湿度以及光照条件，通过对接种叶片发病程度的科学界定(病恬分级)来评价被接种马铃薯对早疫病的抗性。3.4 对照品种Control variety 用于室内鉴定试验中的马铃薯感病品种和抗病品种。3.5 DB13/T 2211-2015 脱毒马铃薯种薯Virus-free seed potato 除去马铃薯X病毒CPVX)、马铃薯S病毒CPVS)、马铃薯Y病毒CPVY)、马铃薯A病毒CPVA)和马铃薯卷叶病毒CPLRV)等主要病毒的马铃薯种薯。3.6 病斑特征Lesion feature 被接种nl片发而后在不同马铃薯材料上的特异性表现。3.7 病m直径Lesion diameter 采用十手交叉法测定病斑的长度和宽度之丰口的平均值。4 室内抗性鉴定方法4.1 对照品种的选择选择对不同地区适应性强、抗性程度己生口的脱毒马铃薯作为室内抗性鉴定的对照品种。对南、品种包括伞个生产中主栽的感恼品种费乌瑞宫和伞个马铃薯抗忻测运单位提供的参考对照品种。4.2 栽培及管理被测马铃薯品种(系)、种质资源按NY!T5222要求进行田间种植:施肥按照NY!T496要求进行。4.3 日十片采集时间及要求待马铃薯生长至块茎膨大期时采集叶片，采集植株中下浦大小一致(宽度约为3cm),日伞无￥L圳、无病斑的f哇!*叶片，装入密封袋带l!J室内。4.4 接种前器皿及日十片的准备将含有10.5mol/L荼乙酸CNAA)和10g/mL盐酸网环京的O.5%水琼脂倒入灭菌玻璃lillCd=15cm)中，持琼月旨凝固后，将被测叶片叶柄插入水琼脂中，保持叶片正面朝上以备接种。4.5 接种体菌株的选择选择采自河北省不同地区、产自量大、致病力强的5个菌株作为早疫病抗性鉴定的菌株组合。4.6 接种体的制备将选择的半疫病雨雨株活化后接丰111到番茄汁培养某(番茄125g，琼脂粉5g，补充蒸情水至1000mL)巾，25C黑暗培养7d，然后用无南水冲洗，刮除南丝，在紫外光下照射5min10min,20C培养3d，再用无雨水忡洗分生于包子，将分生抱子悬浮i夜浓度调整到1X 105个/mL.备用。4.7 接种方法采用微量移液器准确量取4.6所制备的分生由于悬浮液25L.利用悬滴法接种到叶片正面中部的主脉附近，每个品种(系)或种质资源重复接种10个叶片。4.8 接种叶片的培养2 DB13/T 2211-2015 n片按不中后先置于25C黑暗条件下培养12h，以利于而原菌的侵入。然后，将接种n片放置在人工气候室或光照培养箱中，每天12h光照、12h黑暗，关照强度为8000Lux10000Lux，25C培养7d10d，以生产上主栽感捕品种充分发病为准，米确定具体培养时间。4.9 调查方法和数据处理从接种后第7d开始观察对照品种的发厢情况，待其充分发;而后开始马铃薯接种n片发厢情况和度调查。采用十字交义法测量接种发病n片而斑的长度和宽度，填写马铃薯接种n片发厢情况调查表(表1)，注JB;当大必须调1E完毕。表1马铃薯接种叶片发病情况调查表样品叶片编号长度(mm)宽度(mm)州斑特征2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均5 抗病性标准及评价5.1 抗性标准根据被测马铃薯接种叶片上病斑有无、病斑大小坟病斑上寄:层特征，制订了马铃薯抗早疫病室内鉴定标准，见表20表2马铃薯品种对早疫病抗性鉴定标准抗性类型发病级别病斑直径(mm)病斑特征免疫。O 无病脐十或仅有过敏性坏死斑高古r:d5 边缘无褪绿晕圄:病斑上无霉层。抗病2 5d1O 有褪绿号:圈，病斑上产生霉层，但霉层稀疏。J惑病3 lOd15 病跻十边缘有褪绿晕罔，病斑上产生均匀浓密的!在层。j主:d二(l+w)/2。其中d为病斑R径1为十子交义法测定病腑的长度w为十子交义法测定病斑。5.2 鉴别有效性判别3 DB13/T 2211-2015 只有当感捕对照品种充分发病，与预期发病级别一致，且每个处理9个叶片以上均匀发恼时，才视该批鉴定材料试验数据有效。5.3 抗性评价结果根据鉴定试验材料叶片的情斑特征，按表1判定马铃薯liil种(系)或种质资说对早疫娟的扩L性水平O马铃薯抗甲疫捕鉴定室内试验要求重复2欠，抗性类型相同才能出具抗性鉴定评价报告:若抗性类型不同，以发而级别高的抗性类型为准出具抗性鉴定评价报告。抗性鉴定评价报告式样参见附录A。4 DB13/T 2211-2015 附录A(资料性附录)抗性鉴定评价报告式样A.1 抗性鉴定评价报告式样技表A.lo表A.1 抗性鉴定评价报告样品名称样品编号样l日!数量收才大叫|可评价时间评价内容评价为法备鉴走结果概述5