JJG 714-90 血细胞分析仪检定规程.pdf

J J五中 华 人民 共 和国 国 家 计 量 检 定 规 程J J G 7 1 4-9 0血 细 胞 分 析 仪1 9 9 0 守9月 2 8 日批准1 9 9 1 牟 2 月!日 实施国 家 技 术 监 督 局目录一概述”“”“一”二“一(1)二技术要求 .”一(1)三检定条件 “”“”“”(2)四 检 定 项目 和 枪定 方法 ”“，“，”，一。(3)五 检定结果处理和 检定周期”“(9)附录 附录1 血细 胞粒子标准物质的稀释 方法.一“，.“一(1 0)附录2 血红蛋白 标准物质的稀释方法 ”“.”一(1 2)附录3 实验数据记录丧 “”“”一(1 3)附录4 格拉布斯准则“”“.”。”(1 6)附录5 检定证书(背面)格式”“”.(1 S)血细胞分析仪检定规程V e r i f i c a t i o n R e g u l a t i o n o f Bl o o d Ce l l An a l y z e r尸啼冲峥岭峥峥峥冲、仓备JJ G 7 14-90:全备、s.a.o.s.a.矿 本检定规程经国家技术监督局于1 9 9 0 年 9 月 2 8日批 准，并 自1 9 9 1年2月1日起施行-归口单位，上海市技术监瞥局起草单位。上海市测试技术研究所本规程技术条文山起草单位负责解释。本规 程全要 耘草人:张 巧 生 参加起草人.梁铭元 黎桂娟(上海市测袱未研究所)(上海中山医院)(上海市测试技术研究所)J J G 1 1 4-9 0共1 8 页第 1 页血细胞分析仪检定规程 本规 程适用 于新制造、使 用中和 修理后 的血细 胞分析仪以 及血细胞计数仪和血红蛋白测定仪的检定。一概述 血细胞分析仪(以 下简 称分析仪)是医 用计量仪器.它可以测母iW 液中红细胞数(R B C),自细胞数(WB C)和血红蛋白的浓度(H b),分 析仪主 要应用于医院血液临 床检验，也广泛应用于医药、化工和科研部门的血液检验和颗粒计数。在分析仪中 血细胞的计数一般采用电阻 法.它利用宝石小孔作传AA 器，当传感器吸取定量的血细胞样品液后，便将血细胞数转换成对应的电脉冲数.电脉冲经放大、电压甄别和整形后，通过测 定电 脉冲数就确定了血细胞数.血红蛋白 的测 定一般采用比 色原 理.它利 用光电 元件作 传感器，由传感器将血红蛋白浓度的变化转换成对应电压信号的变化。电压信号经放大运算后，通过测定电压变化的大小确定血红蛋白的浓度。二技术 要求 1 外观 1.1分析仪应附有产品说明书、产品合格证书以及配套附件。1.2分析仪 不应有影响 工作性能的 机械损伤，各旋钮、开关应定位准确，功能良 好，样品台应平稳整洁。1.3分析仪上必须标明型号、出厂日 期、编号及厂名。2空 白 2.1红细胞空白计数不大于0.0 2 x 1 0 /L.2.2白细胞空白计数不大于。,2 x 1 0 /L.2.3血 红蛋白空白测定值 不大于2 B/L.3 交叉污染率共i s 页第z页J J G 1 1 4-9 03.1红细胞交叉污染率不大于 2%.3.2白 细胞 交叉污染率 不大于2%.3.3血红蛋白交叉污染率不大于2%.4 准确度4.1红细胞计数准确度优子士6%.4.2自细胞计数准确度优于士S O%.4.3血红蛋白测定准确度优子士(3+3%x C)g/L.注:C为血红蛋白 浓度值，单 位为B I L.5 变异系数5.1 红细 胞计数的变异系数不大予2.5%.5.2白细 胞计数的变异系数 不大于3.5%.5.3血红蛋白测定的变异系数不大于 1.5%。三检定 条件6 检定条件6.1检定室内的温度为(2 0 士，)七。住:对于特殊仪器，其 检定室温度可很据说明书的要隶确定。6.2检定室内的相对湿度不大子8 0%.6.3电 源电 压需经过电 子交流稳压器的稳 压.6.4检定 室内 有较好的防尘措施。6.5远离强电磁场的干扰源.7 检定设备7.1标准物质.a，红 细咆 粒7-标准物质的技术要求应符合表1 的规定。b.白圣 用 胞粒子标准 物质的技术要求应符合表1 的 规定.。AMT 蛋白 标准物质的技术要求应符合表2 的 规定。7.2空白稀释液 v白稀怪演需经 4 禅漏斗抽滤.登终霭家汁量行政部门批准、顷布并具有相应标准物质 制迪计里器具许可证的单 位提洪的标准物质，JJG7 1 4 一 日 0共18页第 3 页7.3移液管:S Q m L，A级.7。4容量瓶:1 00 m L，A级。7.5量杯:2 5 m上.7.6 分度吸杆:0。2 5mL。A级。裹(1 压)红细响粒 子标准 物炭白细胞 拉子标 准物质一 孺-一面 矿 一 准确 夏(%)标 准 值准 确度(%)士 22 X 1 0，士 3一土:一士 3士 名s x l o，E一灰 一 灰灰灰灰粇.士 21 1 丫 1 0 9士 马1 4 x I 0.土，陀:红细饱位子 称准物而 相对下今而的胎释倍数为郭。倍，白细饱拉于标准物质相 时于奈血的牙 释倍数为初 倍.表2一绍至不 袋 石 一念)注:血红蛋白杯准物质相对于全 血的界释倍数为2 51涪.7.77。8混匀器。电子交流稳压器:A C2 2 O V.I k w 四检定项目和检定方法8 外观检查用目测 检查分析仪的涂漆、镀层和 玻璃器件，用手拨动各旋钮、开共1 8 页第4 贾J J G 7 1 4-9 0关和 样品台，以 及检查紧固 件的紧固情况，分析仪有关的 技术文件一应具齐，其铭 牌字迹清 晰。9 检定前准备 9.1分 析仪、粒子标准物质、血 红蛋白 标准物质以及稀释 液在渔定室内的r l I 1,:平A it j.间应 不小可Z h。9.2接iiY 1+1 源预热 1 5 m i n.将分析仪各开关和旋钮按分析仪的说明书进行预调.1 0 空白检定 1 0.1空白的检定 取2 5 m L 空白稀释演臂于2 5 m L 清洁量杯中，按常规测试 方法违续测 量二次，不计结果.另 取2 0 m L 空白 稀释液连 续测 量五次，舍去第一个测量 值，其余填入附 录3 的表1 中.1 0.2红细胞空白 的检定 取4 5 m L 红细胞空白 稀释液，按1 0.1 款检定，其四次的 平均值应符合 2.1 款的要求.1 0.3白 细胞空白 的检定 取4 5 m L 白 细 胞空 白 稀 释 液，按1 0.1 款 检 定，其 四 次 的平 均 值应符合2.2款的要求。1 0.4血红蛋白 空白 的检定 取适量血红蛋白稀释液，按1 0.1 款检定，其四次的平均值应 符合 2.3 款的要求.1 1 交叉污染率的检定 1 1.1 交叉污染率的检定 a.取低值样品2 0 m L摇匀后，置于清洁量 杯中，按常规测 试方法连 续测量四次，舍去第一个测量值，其余 填入附录3 的 表2 中。b.取高值样品2 0 m L 摇匀 后，置于清沽量杯中，按常规测试方法连续测量四次，舍去第一个测量值，其余填 入附录3 的 表2 中。c 取上述同一低值样品2 0 m L摇匀 后，置1 清洁量 杯中，按常规测 试方法连 续测量四次，舍去 第一个测 量值，其余填入附录3 的表2中.J J C 7 1 4-3 0共1 8 页第5#(d,交叉污染率(c o)的计算c o=J Z-!x 1 0 0%(1)止 一/了式中 了 高值样品的平均值;1 1 前 一 次 低 值 样品 的 平 均 值。T,后一次低值样品 的平均值.1 1,2红细 胞交叉污染的 检定 取高值为6,5 x 1 0 z/L t l:细胞粒子标准物 质2 0 M L，低值为2,5x 1 0/L 红细晌粒 子标准物质4 0 m L,按1 1,1 款检定，其结果应符合3,1 款的要求.1 1.3白细 胞交叉污染率的 检定 取高值为 1 4 x 1 0 a/L白细胞P 子标 准 物 质 2 0 m L,低值为2 xx 1 0 /L 白细响片子标准物质4 0 m L，按1 1,1 款检定，其结果应符合 3,2款的要求.1 1.4血 红子白 交叉污染 率的检定 取高值为2 0 0 g/L的 血红蛋白标准 物质2 0 m L,低值为5 0 盯L血红蛋白 标准物质4 0 m L,按1 1,1 款检定，其结 果应符合3,3 款的要求.1 2 准确度的检定 1 2.1红细胞计数准确度 的检定 a.红细胞粒子标准物质的选抒 红细 胞粒子标准物质可采用生物粒子标准 物质或非 生物粒 子棕准物质，但在一次检定过程中 要采用 同一类型的粒子 标准物质;1$子标准 物质的 稀释倍数应与分析仪规定 的稀释倍数一致，而且粒子标准物质的稀释液也应与分析仪规定的稀释液一致.b,取标准 值为4,5 x 1 0 1=/L红细胞粒子标准物质2 0 m L,置于2 5 m L量杯中.c，将牡子标准 物质放置混匀器中，混匀3 0，d,按常规冽试方法测量红细胞粒子 标准物质，连续测量六次，舍去第一个测 量值，其余填入附录3 的表3 中.共1 8 页 第6 贾3 3 G 7 1 4-9 0一 一，甲，-，I,?声 -:.二 一分 卜几 一一 注。(口呀于在n 板卜 可沙准啊聂植的分析仪，鑫测量标准值为4.s x i o;/L红细咆t 2;标)ft 物居时，可调整测星A,使2 q R植与拉子标A物啧标准位一致.一H iMSP，应a1 4 刊 红 h n W p 汁嗽准 确度价的 全 过 程结束.()P,因小孔阻果。泄M.校准等原因J致便侧IRM后一个数据时。凭测拉子标准物质液母少子i o mL时，则需要补充原粒子标准物贵，然后按c 与d步骤量新操作.。.取空白稀释液2 5 m L,置于量杯中，按常规测试方法测量 一次，不计结果.f,取称准值为6.5、1 11 a/L 红细胞粒子 标准物质2 0 m L,置于 量杯中，按 c,d,e 少骤操作.，.取标准值为S.5 x 1 1 3 z/L红细胞粒 子标准物质 2 0 m 1，置于量杯中，按c,d,e 步澳操作.h.取标准值为3.5 x 1 0/L红细胞粒子标准物质2 0 M L,置于量杯中，按c,d,”步骤操作.i.取标准值为2.5 x 1 0 /1 红细胞粒 子标准物质2 0 m L,置 子贫杯巾，按 c，d，e 步骤操作.1 2.2白细响计数准确度的检定 a.白细胞粒子标准物质的it 择 根据被检分 析仪祈采用的VP血剂应 适当选择白细肺子棕准物质.当溶血剂对白细胞的外形大小无影响时，应采用常用的白细胞粒子 标准 物质;若 济血剂对白细胞的外形大 小有影响，此时应选择与 之相对应的白细胞粒子标准物质.白 细胞粒子标准物质可用生物粒子标准物质或非生物粒子标准物质.但在一次检定过程中要采用同一类型的粒子标准物质，粒子标准物质的稀释 倍数应与分析仪的稀释 倍数一致，而且粒 子标准物 质的稀释掖也应与分析仪的稀释液一致.b.取标准仇为g x I O e/L 的白细 胞粒 子标准物质2 0 m Lm L员杯，1 .，置 于 2 5c。将粒子标准物质放在混匀器中，混匀3 0 s.d.按常规测试方法测量白细胞粒子标准物质，连续 测量六次，舍去第一个测星位，其余填入附录3的表3中.注，(0对于味价上 可佼礁测髦值的分析仪，在测量标准值为.、1 0+几的白细胞粒于标fi 物质时，叫调整侧盆值，使t ul 最值 与杖子标准物质的标准值一致.一且调整后，应打C7 1 4-9 0共i s 页第 7页IV持 到白细饱计数准确度检定的全过程结束，(2)若因小孔阻塞、泄泪、枝准等原因，待测傲最后一个数据时，被测拉子标准物质的液盈少于t o mL时，则需要补充原杖子标准物质，然后按c,d步吸重新操作.e,取 空白 稀释 液2 0 m L，按 常 规 测 试 方 法 测 量 一 次，不 计结 果.f,取 标准值为1 4 x 1 0 /L 的白细胞粒子标准物质2 0 M L,置于量杯中，按c,d,e 步骤操作。s，取标准值为1 1 x 1 0 /L 的白 细胞粒子株准物质2 0 M L,置子量杯 中，按 c,d,e 步骤操作.h,取标准值为5 x 1 0 /L的白细胞粒子标准物质2 0 m L,置子量杯中，按。，d，。步骤操作.j,取标准值为2 x 1 0 /L 的白细 胞粒 子标准物质2 0 M L,置于耸杯中，按。，d,。步骤操作.1 2,3血红蛋白准确度的检定 。.血红蛋白栋准物质的选择 根据被测分析仪 所采用的测量方法，应选择与之相对 G 的血红 蛋白标准物质.当果用H i C N方法时，应采用氰化高铁血红蛋白标准物质.在一次检定过程中 要采用同一类型的 血红蛋白 标准物质，而且血红蛋白 标准 物质 的稀 释倍数应与分析仪的稀释倍数一致，同时血红蛋白标准物质的稀释液也应与分析仪的稀释液一致.b,取标准 值为1 0 0 叮L 血红蛋白 标准物质2 0 m L,置于2 5 m L 量杯中。.按常规测试方法测量血红蛋白 粽准物质，连续 测 量四次，舍去第一个M i l 量值，其余填入附录 3的表3中。注:心 对于1-1:.T V 板上可梗准测量值的分析仪，在俭定前可用梗准i4液调雄或在测证标准值为1 0 0 g/L血红乍白标准物质时，调整测量值，使测量值与血红蛋白标准物质的标准A-致.而且，一旦周 I后应N t 5 到血红禹白准确变检定的全过程结束 (夕 若因胆S a t彼准,原因，待蒯 Nk最后一个娥据时，被测血红 K 白标准物质的液量少于 mL时，则得耳补布r 1 标IE 物9i后重新m作一次.d,取 空白稀释液2 5 e r.L，按常规 测试方法测量一次，不计结果。e,取棕准 值为2 0 0 盯L 的血红蛋白标 准物质2 0 m L,置于最杯中，按c,d步骤澡作.;七 1 8 页第8页J J G 7 1 4-9 0 f.取标准值为1 5 0 叮L 的血红蛋自标准 物质2 0 m L,盆予童粉中，按c,d步骤操作。g.取U准值为5 0 S/L的 血红蛋白 标准物质2 0 m L,t于f杯中，按 c,d 步骤操作。1 2.4准确度的计算 根据格拉布斯准则剔除 可疑值后，按下式分别计算红细胞计数、白细胞计数和血红蛋白检定的准确度.即A 二又一 X,Xox 1 0 0(2)式中 叉 一分析仪测量值的平均值，Xo-栋准物质的标准值.其准确度分别符合4.1,4.2以及 4.3 款的要求。1 3 变异系数的检定 1 3.1变异系数的检定 。.取中值的标准物质2 0 m L,混匀后，置于 2 5 m L浩洁景杯中，按常规测试方法连续测 量六次，舍去第一个测量值，其余填入附 录3的表3中。b.另 取2 0 m L 上述同一标准物质与 上次测量余下的标准物质混匀后，继续 连续测量六次，舍去第一个测量值，将其余值填入附录3的表 3中。1 3.2红细 胞计数的变异系数检定 取标准值为4.5 x 1 0 /L 红细胞粒子标准物质4 0 m L,按1 3.1款检定.1 3.3白 细胞计数的变异系 数检定 取标准值为8 x J O a/L白细 胞粒子标准物质4 0 m L，按1 3.1 款检定.1 3.4血红蛋白 的变异系数枪定 取标准值为1 0 0 叮L血红蛋 白标准物质4 0 M L，按1 3.1 款检定。注:根据其体情况可适当选取血红蛋白标滋物质的故t.打c 7 1 4-9 0共i s 页第 9 页 1 3,5变异系数的计算 根据格拉布斯准则剔除可 疑值后，按下式计算红细 胞计数、白细胞计数和血红蛋白检定的变异系数.即C V=借、习(X 一 X)z(3)件一 1式中 测量次数，X,第 次的测 量值，X-n次测量的平均值.它们的变异系数(C V)应分别符合5,1,5,2 和5,3 献的要求。五检定结果处理和检定周期 1 4 经检定合格的血细胞分析仪发给检定证书，不合格的发给 检定结果通知书.1 5 检定周期不得超过一年。t 1 8 页第1 0 或i r e 1 4-9 0附录附录 1 血细 胞粒子标准物 质的 稀释方法 1 血细胞粒子标准物质的稀释 1.1关 于粒子 标准 物质稀释的说明 对仅有高、中、低三种数值的血细胞粒子标准物质，:必须采用稀释方法，再增加二种数值，以满足检定的需要.1.2血细胞粒子标准物质的 稀释 取高值、低值血细胞粒 子标准物 质分别 馄匀后，用5 0 m L移液管和 1 0 0 m L 容量瓶，按等比例混合.此时容量瓶巾的血细胞粒子 扮准物质的数值应等于高、低血细胞粒子标准物质数值的算术平均值.2 粒子标准物质稀释倍数的调整 一般白细胞粒子标准物质的稀释倍数为5 0 0倍，红细胞粒子标准物质的稀释倍数为5 0 0 0 0 倍.当粒 子标准 物质的稀 释倍数与分析 仪要求的稀释倍数不一致时，必须调整粒子标准物质的稀释倍数.2.1稀释倍数的调整 按公式(幼 计算粒子标准物质的体积v,即 P。，r t=一 二=Y.I.(1)式中 P、血细胞粒子标准物质的稀释倍数，P,-调整后血细胞粒子标准物质的稀释倍数 1 Vi-容量瓶的体积 2.2调整后的血细胞粒子标准物质的 数值修 正 当添加空白 稀释液的空白计数值不能忽略时，必须修正调整后的血f r l!,rv子标准物质的数值.。很据规程中的第 1 0条测出空白稀释掖的空白计数值，b。恨据公式(2)计算修正后的血细胞 粉 了标准扎质的头际位3 J C 1 1 4-9 o共i s 第U 负Ap。即 V。一V矛玉n 二了玉 1+，=七二一n.犷2(2)式中 A、血细胞粒子 标准 物质调整后的数值;A,-稀 释倍数为尸，时，分析仪测出稀释液的空白 计 数值。3 稀释液的选用 一般血细胞粒子 标准物质是医用0,9%生理盐水或通用标准稀 和液(通用标准稀释液配有通用标准溶血剂).俭定 时分析仪使用稀释液与血细胞粒子标准 物质所采用的稀释液应一致(一般被检分析仪都有专用稀释液和沽血剂).当 被检分析仪 专用稀释液与血细胞粒子扮准物质 不一致时，可 用生理 fi 水 替代，但是，若用 生理盐水替代后，发现计数误差超出规定要求时，则不宜使用生理盐水。共1 8 页第1 2 页刀C 7 1 4-9 0附录 2 血红蛋白 标准物质的稀释方法 1 血红蛋白标准物质的稀释 1.1关于血红 蛋白 标准物质稀释 的说明 对仅有高、低值血红蛋白标准物质时，必须采用稀释方法，再增加几种数值，以满足检定的需要。1.2血红蛋白标准物质的稀释 用勿 m L移液管和 1 0 0 m l,容最瓶将高、低值血红蛋白株准物 质按等比例混合，此 时容R:瓶中的 血红蛋白 标准 物质的数值应等于高、低血红蛋白 标准物质数值的算术平均值.注:低m血红蛋白标准物质的9磕可以为雾，即为塞白稀释液。、2 血红蛋白标准物质稀释倍数的 调整 一般血 红蛋白 标准物质的稀释倍数为2 5 1 倍.当株准物质的稀释倍数与分析仪要求 的稀释倍数不一致时，必须调整标准物质的稀释倍数。按下 式计算血红蛋白标准物 质的休积V、。即 P，v.=Y，尸2式中 P，血 红蛋白 标准 物质的稀释倍数，尸:调整后血红蛋白 标准物质的 稀释倍数，V -容量瓶的体积.J J G 7 1 4-9 Q共1 8 页第1 3 页附录 3裹 1实验数据记录表空白值测试数据衰亚州|”一 红 细 胞 0 0%/L)次致 一1 1测 量 值 一 平 均共1 s 贞第1 4 贡I S G 7 1 A-9 07 J C 7 1 4-s o共i s 页第i s 页四 I-一三 一一一 井兰 少 坦:一血 _一妇_。，一 一 一一;(，5翎够把辑晰概 .濒霭淄侧，冈葺，盆心的(此.。嘴一白一知.尺It次。口二.二.2.。二召.。唯卜9。洲。的卜忍。d。坦9粼仲。冷关妙胭侧期哪.截林彩廿钾喇盆，己Y乙 伙犀刃除翻塑勺5(已D)9 g:一卜4 一 一 u5、稣一熟厂气城岌僻暇峨书灰拼峰眯似足侧侣樱亩翻翁的娜共i s 页第1 6 页J J C 11 4-s 0附 录 4格拉布斯准则 设一组测 定值为X1,X 2-X“为自 然数从1-n)，则其平均值为 X,即分 X 4X=挂(1)标准偏差为S a,即_ ,(X,-X)2如果某测 定值X P 与 平均值X有 偏差U P=(2)X P 一 X时，当班1x(a,拄)橄谊衰“0.0 1，子0.0 10.061.1 6i s毛7.491.767.842.102.22 一牛381T18_-2B空.822.85S.412.442.472.60-2.662.88 【2.3 2 212.012-6 62.8 810I1 一:.4 1.4 8 一 2.1 82.242.9 42.801 皿2.65二.皿 p，一2.3 习142.已 6T.612.9 62.62“一”一 令 9 9O l 一 卜里.日吐皿.口63.10.7i翻一肠-幼J J G 7 1 a-9 0共i s 页第1 7 丈 I Up 1 A(a.n)S a l 3)此时，则x P应被剔除 从a n)4 与被洲次”及给定的置 信水平有关 的数值.表1 列出了A(a哟的数他.共:H 页y:l c 页J J G 门4-C附录 5检定证书(背面)格式)Aq目RBCW BCHh 空白交 叉污is 串 变异系 数i o-0/Li o 9/L1 g/L./.%RBC(1 0-=/L)W B C(t o o/L)H b(9/LJ标 准 植一itq _ flu一准 确 度标 准 fr,ip 明 员 植I测 徽 值 一一!准 确 度备践s