赤霉素对α--淀粉酶的诱导作用.ppt

赤霉素对赤霉素对-淀粉酶的诱导作用淀粉酶的诱导作用.实验前对下列物品灭菌实验前对下列物品灭菌干净培养皿20个(按10组计，每组同学2个培养皿，一个实验组，一个对照组)用报纸包好；蒸馏水2瓶(250ml大三角瓶，每瓶盛有150mL蒸馏水)，用锡箔纸或报纸封口；大三角瓶2个，分别装有100mL蒸馏水和100mL 200ppm的赤霉素溶液（20mg赤霉素溶于少量酒精中，再溶于100ml蒸馏水），且瓶内浸有d1cm的滤纸小圆片。.I 赤霉素对赤霉素对-淀粉酶的诱导作用淀粉酶的诱导作用实验原理实验原理 禾谷类种子的糊粉层是一种分泌组织，它围绕着种子的胚乳。禾谷类种子的糊粉层是一种分泌组织，它围绕着种子的胚乳。当种子吸水后，糊粉层细胞受来自胚的赤霉素的诱导，合成当种子吸水后，糊粉层细胞受来自胚的赤霉素的诱导，合成或激活许多水解酶类，促使胚乳或基质中的淀粉水解。如果或激活许多水解酶类，促使胚乳或基质中的淀粉水解。如果把胚去掉，则去胚种子不能或很少产生淀粉酶，所以淀粉的把胚去掉，则去胚种子不能或很少产生淀粉酶，所以淀粉的水解不能发生；如果把外源的赤霉素施加到去胚的种子上，水解不能发生；如果把外源的赤霉素施加到去胚的种子上，则能诱导淀粉酶的产生，促进淀粉的水解。则能诱导淀粉酶的产生，促进淀粉的水解。.-淀粉酶淀粉酶（水解酶类）糊粉层细胞（分泌组织）产生赤霉素产生赤霉素胚乳或基质中的淀粉水解萌发种子的胚萌发种子的胚外源赤霉素外源赤霉素去胚的种子去胚的种子A:玉米颖果外型玉米颖果外型 B:玉米颖果纵切面玉米颖果纵切面种皮种皮胚胚胚乳胚乳子叶子叶胚芽胚芽胚轴胚轴胚根胚根糊粉层糊粉层.实验材料实验材料 小麦种子小麦种子实验设备实验设备 培养血培养血;刀片刀片;镊子镊子;滤纸滤纸;酒精灯。酒精灯。实验试剂实验试剂 赤赤霉霉素素;安安替替福福民民（20ml安安替替福福民民+80ml水水）;可可溶溶性性淀淀粉粉;琼琼脂脂;I-KI溶溶液液（2g 碘碘化化钾钾+1g 碘碘+300ml水）。水）。.实验步骤实验步骤 培培养养基基的的制制备备 取取预预先先剪剪碎碎的的琼琼脂脂0.4g,放放入入盛盛有有30mL蒸蒸馏馏水水的的烧烧杯杯，加加热热搅搅拌拌，待待琼琼脂脂完完全全溶溶解解,加加入入0.3g淀淀粉粉，继继续续加加热热煮煮沸沸，直直到到溶溶液液透透明明为为止止。在在燃燃烧烧的的酒酒精精灯灯旁旁，趁趁热热将将溶溶液液倒倒入入预预先先灭灭菌菌的的培培养养皿皿中中，并并立立即即盖盖好好(2 2个个培培养养皿皿：1 1个个作作对对照照，1 1个个用用于于GAGA诱诱导导-淀淀粉粉酶酶),),待待凝凝固固后备用。如果后备用。如果1010组同学一块配培养基，则需要组同学一块配培养基，则需要8g8g琼脂琼脂+6g+6g淀粉淀粉+600ml+600ml水。水。放置滤纸圆片放置滤纸圆片 将沾有将沾有200ppm的无菌赤霉素溶液的滤纸圆片，放在的无菌赤霉素溶液的滤纸圆片，放在培养基表面上，每个培养基上可放培养基表面上，每个培养基上可放4片（片（d1cm），另将沾有无菌水的），另将沾有无菌水的滤纸圆片同样贴于培养基上作对照用。以上操作保证滤纸圆片同样贴于培养基上作对照用。以上操作保证无菌操作无菌操作。种子的去胚，消毒和培养种子的去胚，消毒和培养 选取选取10-20粒大小均一的小麦种子，用刀粒大小均一的小麦种子，用刀片横切两半，留无胚部分用片横切两半，留无胚部分用20%安替福民消毒安替福民消毒15-30分钟，用无菌水冲洗分钟，用无菌水冲洗6次，放置在培养基的滤纸圆片上（次，放置在培养基的滤纸圆片上（1/1），盖上盖，于室温培养），盖上盖，于室温培养48 72小时。小时。现象观察现象观察 培养完毕后，用镊子小心除去小麦种子和滤纸圆片，用碘液培养完毕后，用镊子小心除去小麦种子和滤纸圆片，用碘液染色。观察淀粉的水解情况，并分析实验现象。染色。观察淀粉的水解情况，并分析实验现象。.注意事项注意事项赤霉素对赤霉素对-淀粉酶的诱导作用实验应该注意：淀粉酶的诱导作用实验应该注意：1.1.无菌操作无菌操作 2.2.将小麦的胚去彻底将小麦的胚去彻底 3.3.淀粉最好逐步加入，不要一次性倒入，防止液体溢出。淀粉最好逐步加入，不要一次性倒入，防止液体溢出。4.4.碘液染色时，每块滤纸片下面只滴一滴，最好滴在种子碘液染色时，每块滤纸片下面只滴一滴，最好滴在种子放置的位置。放置的位置。.实验现象实验现象.