基于Ni-MOF%40RGO修饰玻碳电极的电化学法无酶检测血液中的葡萄糖.pdf

D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 1-5 3 3 7.2 0 2 3.4.0 9 9*收稿日期:2 0 2 3-0 2-1 1基金项目:山东省自然科学基金(Z R 2 0 2 2 MB 1 1 5,Z R 2 0 2 2 MB 1 3 9).第一作者:王凤翔,男,1 9 7 9-,博士,讲师,硕士生导师;研究方向:传感器的构建及应用;E-m a i l:w a n g f e n g x i a n g q f n u.e d u.c n.通信作者:吕晓霞,女,1 9 7 7-,博士,副教授,硕士生导师;研究方向:电化学分析及催化;E-m a i l:x i a o x i a l v 0 6 3 51 6 3.c o m.基于N i-MO FR GO修饰玻碳电极的电化学法无酶检测血液中的葡萄糖*王凤翔,郭新杰,王 云,田佳阳,王 萍,吕晓霞(曲阜师范大学化学与化工学院,2 7 3 1 6 5,山东省曲阜市)摘要:选用一种水热法制备的金属有机骨架材料N i-MO F,将其与还原氧化石墨烯(R G O)复合,修饰在玻碳电极(G C E)表面,构建了用于葡萄糖检测的无酶传感器.以N i-MO FR G O/G C E为工作电极,A g/A g C l为参比电极,铂丝为对电极,将该三电极系统置于含有葡萄糖的标准碱性溶液中,于0.30.7V内进行扫描,记录葡萄糖的响应氧化还原电流.结果显示,葡萄糖的浓度在18 0M以内与其对应的峰电流呈良好线性关系,检出限为0.3 6M(S/N=3).基于N i-MO FR GO修饰电极对5 0M葡萄糖标准溶液平行测定5次,测定值的相对标准偏差为4.3%.对血清进行加标回收试验,葡萄糖的回收率为9 6.4%1 0 4.6%.关键词:镍-金属有机骨架材料;葡萄糖;电化学法;无酶检测中图分类号:O 6 5 7.1 文献标识码:A 文章编号:1 0 0 1-5 3 3 7(2 0 2 3)0 4-0 0 9 9-0 60 引 言糖尿病是一种由于葡萄糖代谢紊乱而无法治愈的慢性疾病,也会导致许多危及人类生命的并发症,早期诊断糖尿病是成功治疗的关键1.因此,开发实时、快速、高灵敏度的葡萄糖传感器具有重要意义.目前,已经建立了许多检测葡萄糖的方法.电化学方法因其简单、低成本和高灵敏度而被认为是最有效、适用于葡萄糖检测的方法之一2.葡萄糖氧化酶传感器起先被应用于葡萄糖的分析检测,但是,酶电极因为具有生物方面内在的不确定性,传统的葡萄糖氧化酶在制造过程中可能受多种因素影响而导致化学变形,影响存储和使用.比如在p H值低于2或p H值高于8的环境以及4 0以上都能导致葡萄糖氧化酶活性的丧失.因此,开发无酶葡萄糖传感器成为目前的研究热点之一3.金属有机骨架材料(MO F s)作为一种备受关注的功能材料,由金属离子/簇和有机连接体组成,在催化、储能和传感器等领域得到了广泛的应用,其中导电MO F s由于其高导电性和大孔隙体积,在水电解、超级电容器等应用中得到了广泛研究4-5.迄今为止,科研工作者们也利用MO F s及其复合材料作为传感器构建元件,增进对物质检测的选择性和灵敏度,包括对一些无机物和有机物及许多的药物分子、生物分子的检测6.在无酶葡萄糖检测方面镍基MO F(N i-MO F)也有相关报道.庞欢课题组7通过水和乙醇的混合溶解热法制备了N i-MO F纳米带,并成功修饰到玻碳电极上实现了葡萄糖的无酶检测.孙旭平团队8通过水和N,N-二甲基甲酰胺作为反应体系,通过溶剂热法制备了N i-MO F纳米球,同样实现了修饰到玻碳电极上并对葡萄糖进行了无酶检测,获得了较好的检测结果.但是他们在MO F s制备过程都用到了有机试剂,难免会带来一定的污染问题.另外,石墨烯是一种极薄的纳米材料,具有稳定性高、导电率高、比表面积大等优点,可用作灵敏传感材料,在电化学分析检测方面应用广泛9-1 0.本试验借助MO F s与石墨烯两者优势,选用一种通过水热法制备的金属有机骨架材料N i-MO F材料与还原氧化石墨烯(R GO)结合进行玻碳电极的修饰,利用N i-MO F多孔富集及电化学活性和 第4 9卷 第4期2 0 2 3年1 0月 曲阜师范大学学报J o u r n a l o f Q u f u N o r m a l U n i v e r s i t y V o l.4 9 N o.4O c t.2 0 2 3 R GO的高电子传导率构建无酶葡萄糖传感器.该电极合成方法简单、成本低、灵敏度高、重现性好,能够实现对血糖的检测,在电化学传感器领域具有一定的应用价值.1 试验1.1 仪器与试剂CH I 6 6 0 E电化学工作站,M i n i F l e x 6 0 0型X射线粉末衍射仪,J EM-2 1 0 0 P L U S型透射电镜,N E X-U S-4 7 0型红外光谱仪,G F L-7 0型恒温鼓风干 燥箱,M S-H-P r o大龙磁力搅拌器,M i l l i-Q纯水仪.多聚甲醛、1,3,5-三甲基苯、氢溴酸、乙酸、亚氨基二乙酸乙酯、无水碳酸钾、乙腈、氢氧化钾、氢氧化钠、4,4-联吡啶、硝酸钾、氯化钙、氯化镁、葡萄糖、多巴胺(D A)、抗 坏 血 酸(AA)、尿 酸(UA)、乳 糖(L a c)、果糖(F r u)、蔗糖(S u c)及其他所用试剂均为分析纯,试验用水为超纯水(1 8Mc m).1.2 仪器工作条件以不 同 材 料 修 饰 的 玻 碳 电 极 为 工 作 电 极,A g/A g C l为 参 比 电 极,铂 丝 为 对 电 极,电 解 质 为0.1M N a OH溶液,扫面范围为0.30.7V,所有的电化学测试均在室温下进行.1.3 试验方法1.3.1 N i-MO F的合成2,4,6-三甲基-1,3-间苯二亚氨基二乙酸配体(H4L)按吕等报道的方法合成1 1,合成步骤如图1所示.图1 H4L配体合成路线图1 11.3.2 还原氧化石墨烯的制备根据改进的H u mm e r s法1 2,由石墨粉制备氧化石墨烯(GO),然后按照文献制备还原氧化石墨烯(R GO)1 3.具体操作步骤如下:称取0.1gGO超声分散于2 0m L水中得到GO的分散液,再向分散液中缓慢加入0.2gN a B H4;将混合物在9 0 搅拌2 4h,然后真空抽滤,并用蒸馏水反复洗涤,得到的固体再次分散于少量水中,经冷冻干燥得R GO.1.3.3 玻碳电极活化将玻碳电极(G C E)在麂皮上分别用0.2 0.5m的A l2O3粉和0.0 2 0.0 5m的A l2O3粉抛光,分别用无水乙醇溶液和超纯水在超声波清洗机中超声清洗3m i n,最后用氮气吹干备用.1.3.4 工作电极的制备超声分散获得还原氧化石墨烯的乙醇悬浊分散液(6m g/m L),移取5L该悬浊液滴涂到已活化的玻碳电极表面,待其自然晾干,获得R GO/G C E电极.将2m gN i-MO F粉末分散于2m L0.0 5 w t%N a f i o n溶液中,超声2 0m i n后得到均相悬浮液,量取5LN i-MO F悬浮液滴涂在R GO/G C E电极表面,室温下自 然晾干,得到 工作电 极(N i-MO FR GO/G C E).为了对比,量取5LN i-MO F悬浮液直接滴涂到活化后的玻碳电极,室温下自然晾干,获得N i-MO F/G C E电极.1.3.5 葡萄糖的测定血清由曲阜师范大学校医院提供,且均为健康人体空腹血清样本.先将血清在4 0 0 05 0 0 0r/m i n下离心5m i n,取上清液1 0 0L加入到1 0m L电解液中,磁力搅拌均匀后,在三电极工作体系中进行检测,得葡萄糖的峰电流.2 结果与讨论2.1 N i-MO F和R GO的表征N i-MO F的粉末衍射和R G O的透射电镜图见001 曲阜师范大学学报(自然科学版)2 0 2 3年图2.图2(a)显示,所制备的N i-MO F的粉末衍射图谱与模拟数据图谱完全一致1 1,说明所得产物为目标MO F,便于检测物的富集.图2(b)显示所制备R G O较薄,表明制备成功,便于电子的传递和信号放大9.图2 N i-MO F和R GO的表征2.2 N i-MO F和N i-MO FR GO制备电极的电化学表征在浓度为0.1 M N a OH溶液中对裸玻碳电极(G C E)、N i-MO F修 饰 电 极(N i-MO F/G C E)和N i-MO FR G O修饰电极(N i-MO FR G O/G C E)进行电化学行为的考察,并作出相应的循环伏安曲线,比较不同电极的电流响应,电位控制在0.3 0.7V范围内.另外,不同电位扫描速率对N i-MO FR G O/G C E的电化学行为也被考察.结果如图3所示.由图3(a)可知G C E几乎没有表现出氧化还原峰,说明G C E在0.1 M N a OH溶液中没有电化学活性.而N i-MO F/G C E,在0.1M N a OH溶液中出现一对定义良好的电化学氧化峰和还原峰,分别在0.5 5V和0.5 0V.这可能归结于N i-MO F化合物具有良好的多孔结构和较大的比表面积,良好的导电性能和电催化性能.而在R GO的存在下,N i-MO FR GO/G C E对比N i-MO F/G C E在N a OH溶液中的循环伏安曲线呈现整体增大的趋势,这可能归结于R GO与N i-MO F化合物之间有协同效应,表明R GO修饰在电极上之后对电子的高传导能力可增强信号强度.在碱性条件下氧化反应二价N i转变成三价N i很容易发生,因此循环伏安曲线中氧化还原峰对应的二价/三价金属镍离子在修饰电极上也进行了相应的氧化还原反应1,其机理如下:N i()-MO F-+2 OH-N i()(O)(OH)-MO F2-+H2O+e-.图3 不同修饰电极的电化学行为和扫速对N i-MO FR GO修饰电极的影响 从图3(b)可以看出,N i-MO FR GO/G C E的一对特征氧化还原峰随着扫描速率从0.0 5V/s增加到0.9 0V/s呈现逐渐增大的趋势.N i-MO FR GO修饰电极的还原峰电位(Ep c)随着扫速不断增大往负方向移动,氧化峰电位(Ep a)随着扫速的不断增大 往 正 方 向 移 动,电 位 差(Ep)增 大,表 明N i-MO FR GO修饰电极表面发生的电化学反应为准电子转移动力学过程行为1 4.如图3(c)所示,对不同扫速下最高峰电流和电位扫描扫速平方根所做的拟合结果显示,氧化峰和还原峰电流均与电位扫描速率的平方根呈正比关系.由反应动力学理论,可判断N i-MO FR GO修饰电极在0.1 MN a OH101第4期 王凤翔,等:基于N i-MO FR GO修饰玻碳电极的电化学法无酶检测血液中的葡萄糖 溶液中发生电化学反应的快慢是受表面扩散控制过程而非吸附过程控制1 4.2.3 R G O用量对N i-MO F R G O修饰电极的影响在制作N i-MO FR GO修饰电极的过程中,对比考察了修饰在电极上的R GO的用量对其电化学响应的影响,其结果如图4所示.由图4可知,随着R GO乙醇溶液的浓度从2 m g/m L到6 m g/m L,N i-MO FR GO修饰电极的特征氧化还原峰峰均在增大,尤其当R GO浓度为6m g/m L时达到最大值,而当继续增大到7m g/m L时,呈下降趋势.说明R GO的用量存在最佳用量.图4 不同用量的R GO对修饰电极的影响(16分别代表2、3、4、5、7、6m g/m L的R GO用量)2.4 葡萄糖的电化学行为室温条件下,采用标准的三电极体系,铂丝电极为对电极,A g/A g C l电极为参比电极,裸玻碳电极或不 同 的 修 饰 电 极 为 工 作 极.电 位 扫 描 范 围 为0.30.7V,扫描速率为0.1V/s,分别在含有2 0M葡萄糖的0.1M N a OH溶液中进行循环伏安测试,考察N i-MO FR GO修饰电极对葡萄糖的电化学行为,结果如图5所示.说明葡萄糖的存在可明显影响N i-MO FR GO修饰电极的电化学行为,利用此信号的变化可制备用于葡萄糖的传感器.图5 不同电极对葡萄糖响应的循环伏安图(1)N i-MO FR GO/G C E,0.1 M N a OH溶液(2 0M葡萄糖);(2)N i-MO FR GO/G C E,0.1M N a OH溶液;(3)G C E,0.1M N a OH溶液(2 0M葡萄糖)2.5 标准曲线和检出限配制含有不同浓度葡萄糖的0.1M N a OH溶液作为电解质溶液,其中葡萄糖的浓度分别为0、1、5、1 0、2 0、4 0、6 0、8 0M.以铂丝电极为对电极,A g/A g C l电极为参比电极,N i-MO FR G O修饰电极为工作极.电位扫描范围为0.3 0.7V,扫描速率为0.1V/s,分别在含有不同葡萄糖的0.1M N a OH溶液中进行循环伏安测试.以葡萄糖浓度为横坐标,其对应的响应电流的峰电流为纵坐标绘制标准曲线,结果如图6(b)所示.由图6可知,葡萄糖浓度在1 8 0M以内与其对应的响应峰电流呈良好的线性关系,将葡萄糖浓度对峰电流差值(加入葡萄糖后的峰电流与未加葡萄糖时峰电流的差值)进行拟合,其线性回归方程为I(A)=0.0 3C(M)+0.5 3(R2=0.9 8 3),以3倍信噪比(S/N)计算出检测限为0.3 6M1 5.该结果与所报道的镍基无酶葡萄糖传感器相比1 6-1 8,检测范围上要更宽,最小检出限更低,能够作为一种性能优异的无酶葡萄糖传感器应用于葡萄糖检测.图6 不同浓度葡萄糖对应的电化学信号变化201 曲阜师范大学学报(自然科学版)2 0 2 3年2.6 精密度试验按照1.3.4节制备5个相同的N i-MO FR GO修饰电极,并对5 0M的葡萄糖标准氢氧化钠溶液进行测定,测定值的相对标准偏差(R S D s)为4.8%,表明该方法修饰的电极具有较好的再现性.用N i-MO FR GO修饰电极对5 0M的葡萄糖标准氢氧化钠溶液平行测定5次,测定值的R S-D s为4.3%,表明该方法的重现性较好.2.7 干扰试验在含有5 0M葡萄糖(G l u)的0.1M N a OH溶液中加入5 0M抗坏血酸(AA)、多巴胺(D A)、尿酸(UA)、果糖(F r u)、蔗糖(S u c)、乳糖(L a c)和钾钙镁离子,以1.2节的工作条件,用N i-MO FR GO修饰电极进行测定,结果如图7所示.结果表明,相同浓度的AA、D A、UA、F r u、S u c、L a c和钾钙镁离子对葡萄 糖的检测几 乎不产生 干 扰,N i-MO FR GO修饰电极具有一定的抗干扰能力.考虑实际人体中此类物质远低于葡萄糖的水平,说明该电极有望用于实际血液中的葡萄糖检测分析.图7 0.1M N a OH溶液中含5 0M葡萄糖(G l u)和依次加入5 0M干扰物时N i-MO FR GO修饰电极的循环伏安曲线2.8 样品分析按1.3.5节对所得血清样进行分析,并进行2个浓度水平的加标回收试验,重复测定5次,样品分析结果见表1,其中参考值为医院仪器测定结果.表1 样品分析结果(n=5)样品测定值/M加标量/M测定总量/M回收率/%14 0.11 04 8.39 6.44 4.8(参考值)2 06 2.91 0 4.625 1.31 05 9.59 7.04 8.0(参考值)2 07 3.41 0 2.9 由表1可知,用本方法测得的结果与医院仪器测定结果仍有差别,但基本接近;另外葡萄糖的回收率为9 6.4%1 0 4.6%,说明本方法的准确度较好.3 结 论本工作选用一种新的金属有机骨架材料N i-MO F,与还原氧化石墨烯结合,制备了N i-MO FR GO修饰的玻碳电极,基于该电极对葡萄糖的电化学响应,建立了电化学无酶检测葡萄糖的方法.该修饰电极所构建的无酶型葡萄糖传感器具有制备简单、灵敏度高、抗干扰能力强等优点,为葡萄糖的测定提供了一种实用和有效的方法.参考文献:1L U M X,D E NGYJ,L IYC,e ta l.C o r e-s h e l lMO FMO F c o m p o s i t e sf o rs e n s i t i v e n o n e n z y m a t i c g l u c o s es e n s i n gi nh u m a ns e r u mJ.A n a lC h i m A c t a,2 0 2 0,1 1 1 0:3 5-4 3.2CHE NDD,T I AN LL,Y I NC Y,e ta l.D e c o r a t i o no fC u Sn a n o c a g e s w i t hi n t e r n a la n de x t e r n a lC o(OH)2n a n o s h e e t st oj o i n t l yp r o m o t ee l e c t r o c a t a l y t i ca c t i v i t yf o r t h eh i g h l ys e n s i t i v ed e t e c t i o no fg l u c o s eJ.S e n s o rA c t u a tB-C h e m,2 0 2 0,3 2 3:1 2 8 6 9 2.3A D E E L M,R AHMAN M M,C A L I G I UR I I,e ta l.R e-c e n t a d v a n c e so f e l e c t r o c h e m i c a l a n do p t i c a l e n z y m e-f r e eg l u c o s e s e n s o r so p e r a t i n ga tp h y s i o l o g i c a l c o n d i t i o n sJ.B i o s e n sB i o e l e c t r o n,2 0 2 0,1 6 5:1 1 2 3 3 1.4T A J I KS,B E I TO L L AH IH,N E J A DFG,e ta l.R e c e n-t e l e c t r o c h e m i c a la p p l i c a t i o n s o f m e t a l-o r g a n i cf r a m e-w o r k-b a s e dm a t e r i a l sJ.C r y s t a lG r o w t h&D e s i g n,2 0 2 0,2 0:7 0 3 4-7 0 6 4.5WAN GKC,L IYP,X I EL H,e ta l.C o n s t r u c t i o na n da p p l i c a t i o no fb a s e-s t a b l e MO F s:ac r i t i c a lr e v i e wJ.C h e mS o cR e v,2 0 2 2,5 1:6 4 1 7-6 4 4 1.6D AN I E LM,MA THEW G,AN P O M,e t a l.MO Fb a s e de l e c t r o c h e m i c a l s e n s o r sf o rt h ed e t e c t i o no fp h y s i o l o g i-c a l l yr e l e v a n tb i o m o l e c u l e s:A no v e r v i e wJ.C o o r d i nC h e mR e v,2 0 2 2,4 6 8:2 1 4 6 2 7.7X I AOX,Z HE N GSS,L IXR,e t a l.F a c i l es y n t h e s i so fu l t r a t h i nN i-MO Fn a n o b e l t s f o rh i g h-e f f i c i e n c yd e t e r m i-n a t i o no fg l u c o s e i nh u m a ns e r u mJ.JM a t e rC h e mB,2 0 1 7,5:5 2 3 4-5 2 3 9.8Q I AO Y X,L I U Q,L U SY,e ta l.H i g h-p e r f o r m a n c en o n-e n z y m a t i cg l u c o s ed e t e c t i o n:u s i n gac o n d u c t i v eN i-301第4期 王凤翔,等:基于N i-MO FR GO修饰玻碳电极的电化学法无酶检测血液中的葡萄糖 MO Fa sa ne l e c t r o c a t a l y s tJ.JM a t e rC h e m B,2 0 2 0,8:5 4 1 1-5 4 1 5.9KAU S HA LS,KAUR M,KAURN,e ta l.H e t e r o a t o m-d o p e dg r a p h e n ea ss e n s i n gm a t e r i a l s:A m i n i r e v i e wJ.R S CA d v,2 0 2 0,1 0:2 8 6 0 8-2 8 6 2 9.1 0Z UOYX,XUJK,Z HU XF,e ta l.G r a p h e n e-d e r i v e dn a n o m a t e r i a l sa sr e c o g n i t i o ne l e m e n t s f o r e l e c t r o c h e m-i c a ld e t e r m i n a t i o no fh e a v y m e t a li o n s:ar e v i e wJ.M i c r o c h i m A c t a,2 0 1 9,1 8 6:1 7 1.1 1L V XX,TAN GSF,L ILJ,e ta l.I n f i n i t em e t a l-c a r-b o x y l a t en a n o t u b ec o n s t r u c t e d m e t a l-o r g a n i cf r a m e-w o r k sa n dg a ss o r p t i o np r o p e r t i e sJ.E u rJI n o r gC h e m,2 0 1 3:5 0 8 1-5 0 8 5.1 2GUOSJ,D ON GSJ.G r a p h e n en a n o s h e e t:S y n t h e s i s,m o l e c u l a re n g i n e e r i n g,t h i nf i l m,h y b r i d s,a n de n e r g ya n da n a l y t i c a la p p l i c a t i o n sJ.C h e m S o cR e v,2 0 1 1,4 0:2 6 4 4-2 6 7 2.1 3X UTQ,Z HANGQL,Z HE N GJN,e t a l.S i m u l t a n e-o u sd e t e r m i n a t i o no f d o p a m i n e a n du r i c a c i d i n t h ep r e s-e n c eo fa s c o r b i ca c i du s i n gP tn a n o p a r t i c l e ss u p p o r t e do nr e d u c e d g r a p h e n eo x i d eJ.E l e c t r o c h i m A c t a,2 0 1 4,1 1 5:1 0 9-1 1 5.1 4Z HAOJW,WE IL M,P E N GCH,e t a l.An o n-e n z y-m a t i cg l u c o s es e n s o rb a s e do nt h ec o m p o s i t eo fc u b i cC un a n o p a r t i c l e sa n da r c-s y n t h e s i z e dm u l t i-w a l l e dc a r-b o nn a n o t u b e sJ.B i o s e n sB i o e l e c t r o n,2 0 1 3,4 7:8 6-9 1.1 5WANGFX,GUZY,L E IW,e t a l.G r a p h e n eq u a n t u md o t sa saf l u o r e s c e n ts e n s i n gp l a t f o r mf o rh i g h l ye f f i-c i e n td e t e c t i o no f c o p p e r(I I)i o n sJ.S e n s o rA c t u a tB-C h e m,2 0 1 4,1 9 0:5 1 6-5 2 2.1 6MUY,J I ADL,HEYY,e t a l.N a n on i c k e l o x i d em o-d o i f i e dn o n-e n z y m a t i cg l u c o s es e n s o r s w i t he n h a n c e ds e n s i t i v i t yt h r o u g ha ne l e c t r o c h e m i c a lp r o c e s ss t r a t e g ya th i g hp o t e n t i a lJ.B i o s e n sB i o e l e c t r o n,2 0 1 1,2 6:2 9 4 8-2 9 5 2.1 7Z HU J H,J I ANGJ,L I U JP,e ta l.C N T-n e t w o r km o d i f i e dN in a n o s t r u c t u r e da r r a y sf o rh i g hp e r f o r m-a n c en o n-e n z y m a t i cg l u c o s es e n s o r sJ.R S C A d v,2 0 1 1,1:1 0 2 0-1 0 2 5.1 8WANGZG,HU Y,YANG W L,e ta l.F a c i l e o n e-s t e pm i c r o w a v e-a s s i s t e dr o u t et o w a r d sn in a n o s p h e r e s/r e-d u c e dg r a p h e n eO x i d eH y b r i d sf o rn o n-e n z y m a t i cg l u-c o s es e n s i n gJ.S e n s o r s-b a s e l,2 0 1 2,1 2:4 8 6 0-4 8 6 9.E n z y m e-f r e ed e t e c t i o no f g l u c o s e i nb l o o db ye l e c t r o c h e m i c a lm e t h o db a s e do nN i-MO FR G Om o d i f i e dg l a s s yc a r b o ne l e c t r o d eWANGF e n g x i a n g,G U OX i n j i e,WANGY u n,T I ANJ i a y a n g,WANGP i n g,L Y UX i a o x i a(C o l l e g eo fC h e m i s t r ya n dC h e m i c a lE n g i n e e r i n g,Q u f uN o r m a lU n i v e r s i t y,2 7 3 1 6 5,Q u f u,S h a n d o n g,P R C)A b s t r a c t:Am e t a l o r g a n i c f r a m e w o r k sN i-MO Fp r e p a r e db yh y d r o t h e r m a lm e t h o dw a s s e l e c t e d,a n d i tw a sc o m p o u n d e dw i t hr e d u c e dg r a p h e n eo x i d e(R GO)a n dm o d i f i e do nt h es u r f a c eo f t h eg l a s s yc a r b o ne-l e c t r o d e(G C E)t oc o n s t r u c t a ne n z y m ef r e es e n s o rf o rg l u c o s ed e t e c t i o n.U s i n gN i-MO FR GO/G C Ea st h ew o r k i n ge l e c t r o d e,A g/A g C la st h er e f e r e n c ee l e c t r o d ea n dp l a t i n u m w i r ea st h ea u x i l i a r ye l e c t r o d e,t h e t h r e e-e l e c t r o d es y s t e m w a sp l a c e d i nas t a n d a r da l k a l i n e s o l u t i o nc o n t a i n i n gg l u c o s e,a n d t h ep e a kc u r-r e n t so fg l u c o s ew e r e r e c o r d e d i n t h e r a n g eo f 0.30.7V.A s s h o w nb y t h e r e s u l t s,l i n e a r r e l a t i o n s h i p sb e-t w e e nv a l u e so f c o n c e n t r a t i o no f g l u c o s e a n d t h e i rp e a kc u r r e n tw e r ek e p tw i t h i n18 0M,w i t hd e t e c t i o nl i m i t so f 0.3 6M(S/N=3).G l u c o s es t a n d a r ds o l u t i o no f 5 0M w a sd e t e r m i n e d5t i m e s i np a r a l l e l b a s e do nN i-MO FR GO/G C E,a n dR S D so f t h ed e t e r m i n e dv a l u e sw a s4.3%.R e c o v e r yt e s tw a sm a d eo nh u-m a ns e r u m,g i v i n gr e s u l t s i nt h er a n g eo f 9 6.4%1 0 4.6%.K e yw o r d s:N i-MO F;g l u c o s e;e l e c t r o c h e m i c a lm e t h o d;e n z y m e-f r e ed e t e c t i o n401 曲阜师范大学学报(自然科学版)2 0 2 3年