环境卫生学及管理监测.ppt

医院消毒效果灭菌监测2024/5/12 周日1主要内容主要内容u 一、空气消毒效果监测一、空气消毒效果监测 u 二、手消毒效果监测二、手消毒效果监测 u 三、物品和环境表面消毒效果监测三、物品和环境表面消毒效果监测 u 四、使用中消毒液染菌量测定四、使用中消毒液染菌量测定 u 五、无菌医疗用品采样及检查方法五、无菌医疗用品采样及检查方法u 六、灭菌质量的监测六、灭菌质量的监测u 七七、医院消毒、灭菌、环境卫生学监测报告、医院消毒、灭菌、环境卫生学监测报告单单 2024/5/12 周日2医院消毒卫生标准医院消毒卫生标准 GB 159822012 2012年11月1日实施v是指不同对象经消毒与灭菌处理后，允许是指不同对象经消毒与灭菌处理后，允许残留的微生物最高限量，并要求不得检出残留的微生物最高限量，并要求不得检出乙型溶血性链球菌、沙门氏菌、金黄色葡乙型溶血性链球菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及其他致病菌。一般监测原则是按萄球菌及其他致病菌。一般监测原则是按国家标准执行，标本采集后应尽快进行监国家标准执行，标本采集后应尽快进行监测，送检时间不得超过测，送检时间不得超过4 4小时；若样品保小时；若样品保存在存在0-40-4度条件下，送检时间不得超过度条件下，送检时间不得超过2424小时。小时。2024/5/12 周日3一、一、空气消毒效果监测空气消毒效果监测 非洁净区域（不属于正负压状态）空非洁净区域（不属于正负压状态）空气消毒效果监测：气消毒效果监测：v（一）采样时间：（一）采样时间：在消毒处理后与进行医在消毒处理后与进行医疗活动前进行采样。疗活动前进行采样。v（二二）采采样样高高度度:应应设设在在距距地地面面（垂垂直直）80150cm高度范围内。高度范围内。v（三三）采采样样方方法法：根根据据其其采采样样原原理理分分：平平板板暴暴露法和微生物采样器法。露法和微生物采样器法。2024/5/12 周日4 1、平板暴露法、平板暴露法：布点方法布点方法（1 1）室内面积）室内面积30 30，设置内、中、外对角线设置内、中、外对角线3 3个点，内、外布点部位距墙壁个点，内、外布点部位距墙壁1m1m处，（一条对处，（一条对角线上取角线上取3 3个点即中心一点、两端距墙壁个点即中心一点、两端距墙壁1m1m处各处各取一个点）。取一个点）。盖盖盖盖盖盖2024/5/12 周日5v（2）室内面积）室内面积30，设设4角及中央角及中央5点，点，4角角布点部位距离墙壁布点部位距离墙壁1m处处，（东、西、南、北、（东、西、南、北、中五个点，其中东、西、南、北点均距离墙壁中五个点，其中东、西、南、北点均距离墙壁1m）。）。盖盖盖盖盖盖盖盖盖盖2024/5/12 周日6v（3 3）采样方法：）采样方法：将普通营养琼脂平板将普通营养琼脂平板（直径（直径9cm)9cm)放在室内各采样点处，采样高放在室内各采样点处，采样高度为度为 距离地面距离地面8080150cm150cm，采样时将平板，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，盖打开，扣放于平板旁，类类环境环境暴露暴露1 15min5min、类、类、类环境暴露类环境暴露5min,5min,盖好盖好立即送检。立即送检。v（4 4）检测方法：）检测方法：将采样后平皿置将采样后平皿置37 37 温箱培养温箱培养48h,48h,然后记录每个平皿上菌然后记录每个平皿上菌落数。落数。2024/5/12 周日7洁净手术室静态空气净化效果的监测洁净手术室静态空气净化效果的监测手术区手术区：级手术台两侧边至少各外推级手术台两侧边至少各外推0.9m,两端至少各外推两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域；后（包括手术台）的区域；级眼科专用手术室级眼科专用手术室手术区每边不小于手术区每边不小于1.2m；级手术台两侧边至少各外推级手术台两侧边至少各外推0.6m,两端至少各外推两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域；后（包括手术台）的区域；级手术台四边至少各外推级手术台四边至少各外推0.4m后（包括手术台）的区后（包括手术台）的区域；域；级不分手术区和周边区。级不分手术区和周边区。周边区周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。2024/5/12 周日8（一）采样时间：（一）采样时间：洁净手术室房间清洁洁净手术室房间清洁并擦试消毒后，使净化空调系统达到自净并擦试消毒后，使净化空调系统达到自净时间并处于开启状态，然后进行测试，室时间并处于开启状态，然后进行测试，室内应无工作人员。内应无工作人员。（二）监测人员要求：（二）监测人员要求：穿洁净服，戴口穿洁净服，戴口罩，手卫罩，手卫 生。动作要轻，避免产生二次污生。动作要轻，避免产生二次污染。染。2024/5/12 周日9（三）布点顺序（三）布点顺序：放置培养皿从总平面放置培养皿从总平面中最靠里中最靠里 的房间开始布置，依次向外，最的房间开始布置，依次向外，最后人员撤出。后人员撤出。每间房间也是从房间最靠里每间房间也是从房间最靠里的点开始布置，最后布置门附近的点，然的点开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。收取培养后人员撤出。收取培养 皿的顺序相反，从皿的顺序相反，从最外边的房间开始收，每间房间从门附近最外边的房间开始收，每间房间从门附近的培养皿开始收，最先布置的皿最后收，的培养皿开始收，最先布置的皿最后收，沉降时间略有差别。沉降时间略有差别。2024/5/12 周日10（四）检测方法：（四）检测方法：将血平板或普通营养琼将血平板或普通营养琼脂平板（直径脂平板（直径 9cm)放在室内各采样点处，放在室内各采样点处，采样点可布置在地面上或不高于地面采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上；在手术区检测时应无手术台，的任意高度上；在手术区检测时应无手术台，当手术台已固定时，检测高度应在台面之上当手术台已固定时，检测高度应在台面之上0.25m；在；在100级区域检测时，采样口应对级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他区域检测时，采样口均着气流方向；在其他区域检测时，采样口均向上。采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，向上。采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露暴露30min,盖好立即送检盖好立即送检.2024/5/12 周日11v（五）空白对照：（五）空白对照：第第1 1次对照为培养皿次对照为培养皿对照，每监测批次对照，每监测批次 中取中取1 1个培养皿做对比个培养皿做对比试验，培养皿不打开直接培养，试验，培养皿不打开直接培养，用于检用于检测培养皿是否合格。第测培养皿是否合格。第2 2次对照为微生物次对照为微生物室操作对照，每室或每区取室操作对照，每室或每区取1 1个对照皿，个对照皿，对操作过程对照试验，方法是模拟微生物对操作过程对照试验，方法是模拟微生物检测操作过程，但培养皿打开后应立即封检测操作过程，但培养皿打开后应立即封盖。两次对照结果必须为阴性。整个操作盖。两次对照结果必须为阴性。整个操作应符合无菌操作的要求。应符合无菌操作的要求。2024/5/12 周日12（六）布点方法（六）布点方法注意：乱流洁净室应尽量避开高效送风口正下方，同时注意：乱流洁净室应尽量避开高效送风口正下方，同时布点位置应避开障碍物。布点位置应避开障碍物。1、洁净度手术区百级周边区千级设置、洁净度手术区百级周边区千级设置13个点个点2024/5/12 周日132、洁净度手术区千级周边区万级设置、洁净度手术区千级周边区万级设置9个点个点 2024/5/12 周日143、洁净度手术区万级周边区十万级设置、洁净度手术区万级周边区十万级设置7个点个点2024/5/12 周日154、洁净度手术区十万级周边区三十万级设置、洁净度手术区十万级周边区三十万级设置5个点个点2024/5/12 周日165、洁净度十万级设置5个点2024/5/12 周日17计算方法：采样后的培养皿应计算方法：采样后的培养皿应37条件下培养条件下培养48h，并计算，并计算菌落数。菌落数的平均值均四菌落数。菌落数的平均值均四舍五入选位到小数点后舍五入选位到小数点后1位。位。注意手术区与周边区分别计算。注意手术区与周边区分别计算。2024/5/12 周日18卫生部卫生部医院洁净手术部建筑技术规范医院洁净手术部建筑技术规范 （GB50333-2002GB50333-2002）中洁净手术室等级标准（空态或静态）中洁净手术室等级标准（空态或静态）等级等级手术室手术室名称名称沉降法细菌最大平均浓度沉降法细菌最大平均浓度 表面最大表面最大染菌浓度染菌浓度空气洁净度级别空气洁净度级别手术区手术区周边区周边区手术区手术区周边区周边区特别洁净特别洁净手术室手术室0.20.2个个/30min/30min 9090皿皿0.40.4个个/30min/30min 9090皿皿5 5个个/cm2/cm2100100级级10001000级级标准洁净标准洁净手术室手术室0.750.75个个/30min/30min 9090皿皿1.51.5个个/30min/30min 9090皿皿5 5个个/cm2/cm210001000级级1000010000级级一般洁净一般洁净手术室手术室2 2个个/30min/30min 9090皿皿4 4个个/30min/30min 9090皿皿5 5个个/cm2/cm21000010000级级100000100000级级准洁净手准洁净手术室术室5 5个个/30min/30min 9090皿皿5 5个个/cm2/cm2300000300000级级1 1级眼科专用手术室周边区按级眼科专用手术室周边区按1000010000级要求。级要求。9090皿为采样直径皿为采样直径90mm90mm的培养皿。的培养皿。2024/5/12 周日192024/5/12 周日20（七七）平板暴露法结果计算：）平板暴露法结果计算：v平板暴露法按平均每皿的菌落数报告：平板暴露法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿（皿暴露时间）。暴露时间）。v注意事项：注意事项：类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；百级手术间自净时间为前采样；百级手术间自净时间为15分钟，万级分钟，万级手术间自净时间为手术间自净时间为30分钟。分钟。、类环境在消毒或规定的通风换气类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。后与从事医疗活动前采样。2024/5/12 周日21 2、空气微生物采样器采样法、空气微生物采样器采样法 略2024/5/12 周日22（八八）结果判断）结果判断：各类环境空气、物体表面菌落总数卫生标准各类环境空气、物体表面菌落总数卫生标准环境环境类别类别 范范 围围 空气平均菌落数空气平均菌落数1 1 物体表面平物体表面平均菌落数均菌落数 cfu/ccfu/ccfucfu/皿皿 cfu/mcfu/m3 3类类 洁净手术室、洁净手术室、符合符合GB50333GB50333要求要求15150 0 5 5其他其他洁净场所洁净场所4.04.0（30min30min）2 2类类非洁净手术部（室）；产房；导管室；血非洁净手术部（室）；产房；导管室；血液病病区、烧伤病区等保护性隔离病区；液病病区、烧伤病区等保护性隔离病区；重症监护病区；新生儿室等。重症监护病区；新生儿室等。4.04.0（15mi15min n）5 5类类母婴同室；消毒供应中心的检查包装母婴同室；消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区；血液透析灭菌区和无菌物品存放区；血液透析中心（室）；其他普通住院病区等中心（室）；其他普通住院病区等 4.04.0（5min5min）1010类类普通门（急）诊及其检查、治疗（注普通门（急）诊及其检查、治疗（注射、换药等）室；感染性疾病科门诊射、换药等）室；感染性疾病科门诊和病区和病区 4.04.0（5min5min）110 0注注1 1：cfucfu/皿为平板暴露法，皿为平板暴露法，cfu/m3 cfu/m3 为空气采样器法。为空气采样器法。注注2 2：平板暴露法检测时的平板暴露时间。：平板暴露法检测时的平板暴露时间。2024/5/12 周日23附：洁净手术室分级等等级手手术室名称室名称自自净时间手手术切切口口类别适用手适用手术提示提示（100级级）特特别洁净手手术室室15min关关节置置换手手术、器官移植手、器官移植手术及及脑外科、外科、心心脏外科和眼科等手外科和眼科等手术中的无菌手中的无菌手术（1000级级）标准准洁净手手术室室25min胸外科、整形外科、泌尿外科、肝胆胰胸外科、整形外科、泌尿外科、肝胆胰外科、骨外科和普通外科中的一外科、骨外科和普通外科中的一类切口切口无菌手无菌手术（10000级级）一般一般洁净手手术室室30min普通外科（除去一普通外科（除去一类切口手切口手术）、）、妇产科等手科等手术（100000级级）准准洁净手手术室室40min肝肝肠外科及外科及污染染类等等2024/5/12 周日24二、手卫生效果的监测方法二、手卫生效果的监测方法（一）采样时间：一）采样时间：一般要求在接触病人、从事医疗、护一般要求在接触病人、从事医疗、护理活动前进行采样。理活动前进行采样。（二）采样（二）采样方法方法及面积：及面积：方法：被检方法：被检人人五指并拢，用浸五指并拢，用浸有有无菌生理盐水采样液的无菌生理盐水采样液的棉拭子棉拭子一支一支在双手指曲面从指在双手指曲面从指根根到指端往返涂擦到指端往返涂擦2 2次，一只手涂擦面积约次，一只手涂擦面积约30c30c，涂擦，涂擦过程中过程中 同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入去，投入装有装有10ml10ml采样液采样液的试管内的试管内，及时送检及时送检。采样面采样面积按平方厘米（积按平方厘米（c c ）计算。若采样时手上有消毒剂残）计算。若采样时手上有消毒剂残留，采样液应含相应中和剂。留，采样液应含相应中和剂。2024/5/12 周日252024/5/12 周日26（三）检测方法：（三）检测方法：将采样管在混匀器上振荡将采样管在混匀器上振荡20秒秒或用力或用力 振打振打80次，用无菌吸管吸取次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，平皿个平皿，平皿内加入已溶化的内加入已溶化的45-48的营养琼脂的营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置待琼脂凝固，置361温箱温箱培养培养48h，计数菌落数。，计数菌落数。（四）计算方法：（四）计算方法：细菌菌落总数（细菌菌落总数（cfu/c）=平皿上菌落数平皿上菌落数采样液采样液稀释倍数稀释倍数/302（采样面积（采样面积c）。）。2024/5/12 周日27v （五）结果判断：（五）结果判断：医医务务人人员员手手卫卫生生规规范范手手消消毒毒效效果果应达到如下相应要求：应达到如下相应要求：卫卫生生手手清清毒毒监监测测的的细细菌菌菌菌落落总总数数应应10cfu/c10cfu/c，外外科科手手消消毒毒监监测测的的细细菌菌菌菌落落总总数数应应5cfu/c5cfu/c。2024/5/12 周日28v医务人员手卫生规范医务人员手卫生规范监测要求医疗机构监测要求医疗机构应应每季度每季度对手术室、产房、导管室、层流洁对手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴室、血液透析症监护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、烧伤病房、病房、烧伤病房、感染疾病科、口腔科等部感染疾病科、口腔科等部门工作的医务人员手进行消毒效果的监测；门工作的医务人员手进行消毒效果的监测；当怀疑医院感染暴发与医务人员手卫生有关当怀疑医院感染暴发与医务人员手卫生有关时，应及时进行监测，并进行相应致病性微时，应及时进行监测，并进行相应致病性微生物的检测。生物的检测。2024/5/12 周日29三、物品和环境表面消毒效果监测三、物品和环境表面消毒效果监测（一）采样时间：（一）采样时间：在消毒处理后或怀疑与医院感在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。染暴发有关时进行采样。（二）采样面积：（二）采样面积：被采物体表面面积被采物体表面面积100c取取全部表全部表 面；采样面积面；采样面积100 c，取，取100 c。2024/5/12 周日30v（三）采样方法（三）采样方法（棉拭子法、压印法两种）棉拭子法棉拭子法：用用55cm的标准灭菌规格版，放在的标准灭菌规格版，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一支，在规格板内横竖往返均匀涂抹棉拭子一支，在规格板内横竖往返均匀涂抹5次次，并随之转动棉拭子，可连续采样，并随之转动棉拭子，可连续采样14个规个规格板面积。剪去手接触部分，并将棉拭子放入格板面积。剪去手接触部分，并将棉拭子放入装有装有10ml采样液的试管内，立即送检。门把手采样液的试管内，立即送检。门把手等小型物体表面则采用棉拭子直接在物体表面等小型物体表面则采用棉拭子直接在物体表面按一定顺序涂抹采样，结果计算用按一定顺序涂抹采样，结果计算用cfuc。若若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。相应中和剂。2024/5/12 周日31 1、步骤、步骤 在55c规格板内横竖往返均匀涂抹各5次，连续采4个规格板面积 2024/5/12 周日32 2 2、计算方法：、计算方法：1 1）规规则则物物体体表表面面菌菌落落总总数数（cfu/ccfu/c）=平平均均每每皿皿菌菌落落数数采采样样液液稀稀释释倍倍数数/采采样面积（样面积（c c）；）；2 2）小小型型物物体体表表面面的的结结果果计计算算，用用cfu/cfu/件件表示。表示。2024/5/12 周日333、结果判断、结果判断环境类别环境类别 范范 围围 菌落总数菌落总数cfu/c致病菌致病菌类类 层流洁净手术室、层流洁净层流洁净手术室、层流洁净 病房病房5不得检出不得检出 类类非洁净手术部（室）；产房；导管室；血液病非洁净手术部（室）；产房；导管室；血液病病区、烧伤病区等保护性隔离病区；重症监护病区、烧伤病区等保护性隔离病区；重症监护病区；新生儿室等。病区；新生儿室等。5不得检出不得检出类类母婴同室；消毒供应中心的检查包装灭菌母婴同室；消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区；血液透析中心（室）区和无菌物品存放区；血液透析中心（室）；其他普通住院病区等；其他普通住院病区等10不得检出不得检出类类普通门（急）诊及其检查、治疗（注射、普通门（急）诊及其检查、治疗（注射、换药等）室；感染性疾病科门诊和病区换药等）室；感染性疾病科门诊和病区 10不得检出不得检出注：致病菌指溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌。母婴同室、早产儿室、婴儿室、注：致病菌指溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新新 生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。2024/5/12 周日34四、使用中消毒液染菌量测定四、使用中消毒液染菌量测定 v（一一）采采样样时时间间：采采取取更更换换前前使使用用中中的的消毒剂与灭菌器械保存液；消毒剂与灭菌器械保存液；v（二）采样量及方法：（二）采样量及方法：在无菌条件下，在无菌条件下，用无菌注射器抽吸用无菌注射器抽吸1.0ml被检样液，加入被检样液，加入9.0ml稀释液中混匀，须加入中和剂以中和被稀释液中混匀，须加入中和剂以中和被检样液的残效作用。检样液的残效作用。2024/5/12 周日35医院需要常备消毒剂的中和剂医院需要常备消毒剂的中和剂消毒剂消毒剂中和剂中和剂含含氯氯（碘碘）消消毒毒剂剂（有有效效氯氯或或碘碘0.1%0.5%)硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1%1.0%)过氧乙酸溶液（过氧乙酸溶液（0.1%0.5%）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1%0.5%)过氧化氢溶液（过氧化氢溶液（1.0%3.0%）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1%0.5%)醛类消毒剂醛类消毒剂0.3%甘氨酸甘氨酸洗必泰洗必泰、季按盐类消毒剂季按盐类消毒剂（0.1%0.5%）Tween80（0.3%)+卵磷脂（卵磷脂（0.3%）醇类与酚醇类与酚类消毒剂类消毒剂普通营养肉汤普通营养肉汤碱类消毒剂碱类消毒剂 等当量酸等当量酸酸类消毒剂酸类消毒剂 等当量酸等当量酸酸性氧化电位水酸性氧化电位水硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.5%)+PBS(0.03mol/L)复方消毒剂复方消毒剂Tween80+卵磷脂卵磷脂+硫代硫酸钠硫代硫酸钠2024/5/12 周日36（三）检测方法：（三）检测方法：v用无菌注射器抽取用无菌注射器抽取1.0ml消毒液，加入消毒液，加入9.0ml稀释液中稀释液中混匀，取混匀，取1ml接种接种平皿内，将冷却至平皿内，将冷却至40-45的溶的溶化营养琼脂培养基每皿倾注化营养琼脂培养基每皿倾注15ml-20ml，置，置36 1恒恒温箱培养温箱培养 72h，计数菌落数，怀疑与医院感染，计数菌落数，怀疑与医院感染爆发有关时，进行目标微生物的检测。爆发有关时，进行目标微生物的检测。消毒液染菌量（消毒液染菌量（cfu/ml)=平均每皿平均每皿菌落数菌落数10 稀释稀释倍数倍数2024/5/12 周日37（四）结果判断：（四）结果判断：v使用中使用中皮肤粘膜皮肤粘膜消毒液染菌量消毒液染菌量10cfu/ml,不得不得检出致病菌；检出致病菌；v其他其他使用中消毒液染菌量使用中消毒液染菌量100cfu/ml,不得检不得检出致病菌；出致病菌；v使用中灭菌用消毒液使用中灭菌用消毒液应无菌生长应无菌生长。v 注意：采样时应无菌操作，正确选用中和剂，注意：采样时应无菌操作，正确选用中和剂，采样后采样后1小时内检测。小时内检测。2024/5/12 周日38五、无菌医疗用品采样及检查方法五、无菌医疗用品采样及检查方法v1、采样时间、采样时间 在消毒灭菌处理后，存放时间内采样在消毒灭菌处理后，存放时间内采样v2、采样量及方法、采样量及方法 可用破坏性方法可用破坏性方法 对不能用破坏性方法的医疗用品可用浸有生理盐水采对不能用破坏性方法的医疗用品可用浸有生理盐水采样液的棉试子在被检物体表面涂抹采样。被采样物体样液的棉试子在被检物体表面涂抹采样。被采样物体表面表面100c,取全部表面；被采表面取全部表面；被采表面100 c，则取，则取100 c。v3、无菌检查、无菌检查:不得检出任何微生物。不得检出任何微生物。2024/5/12 周日39六六、灭菌质量的监测、灭菌质量的监测 压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌的的监测监测 过氧化氢低温等离子灭菌的监测过氧化氢低温等离子灭菌的监测 2024/5/12 周日40压力蒸汽灭菌的监测压力蒸汽灭菌的监测 v（一）物理监测法：一）物理监测法：每次灭菌应连续监测并每次灭菌应连续监测并记录记录 灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。v（二）化学监测法：（二）化学监测法：应进行包外、包内化学应进行包外、包内化学指示指示 物监测。采用快速压力蒸汽灭菌程序灭物监测。采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时，菌时，应直接将一片包内化学指示物置于待应直接将一片包内化学指示物置于待灭菌物品灭菌物品 旁进行化学监测旁进行化学监测。2024/5/12 周日41（三）生物监测法：（三）生物监测法：v生物指示剂有芽孢悬液、芽孢菌片以及菌片生物指示剂有芽孢悬液、芽孢菌片以及菌片与培养基混装（自含式）的指示管。与培养基混装（自含式）的指示管。v指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢（指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢（ACTT7953或或SSIK31 株），菌片含量为株），菌片含量为5.0105-5.0106cfu/片，片，在在1210.5 条件下，条件下，D值值为为1.0-1.9min。KT值值 19min,ST值为值为3.9min。2024/5/12 周日421、监测方法为：、监测方法为：v将生物指示物置于标准试验懈的中心部位。标准试将生物指示物置于标准试验懈的中心部位。标准试验包由验包由16条条41cm66cm的全棉手术巾制成。制作的全棉手术巾制成。制作方法：方法：将每条手术巾的长边先折成将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成层，短边折成2层，然后叠放，制成层，然后叠放，制成23 cm 23 cm 15 cm大小的大小的测试包。经一测试包。经一 个灭菌周期后，在无菌条件下取出标个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨准试验包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经水培养基中，经 561培养培养7d（自含式生物指示（自含式生物指示物按产品说明书执行），观察培养结果。物按产品说明书执行），观察培养结果。2024/5/12 周日43v2 2、采用快速压力蒸汽灭菌程序、采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌灭菌时，应直接时，应直接 将一支生物指示物，置将一支生物指示物，置于空载的灭菌器内，经于空载的灭菌器内，经 一个灭菌周一个灭菌周期后取出，规定条件下培养，观察期后取出，规定条件下培养，观察 结果。结果。v3 3、监测周期：、监测周期：生物监测应每周监测生物监测应每周监测一次。一次。2024/5/12 周日44（四）结果判断：（四）结果判断：v阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。染所致。2024/5/12 周日456 466 47过氧化氢等离子灭菌的监测过氧化氢等离子灭菌的监测 v一、物理监测法：一、物理监测法：每次每次灭菌灭菌应连续监测并记录每个应连续监测并记录每个灭菌周期的临界参数如舱内压、温度、过氧化氢的灭菌周期的临界参数如舱内压、温度、过氧化氢的浓度、电源输入和灭菌时间等参数。浓度、电源输入和灭菌时间等参数。v二、化学监测法：二、化学监测法：每个每个灭菌物品包灭菌物品包外应使用包外化外应使用包外化学指示物，作为灭菌过程的标志；每包内最难灭菌学指示物，作为灭菌过程的标志；每包内最难灭菌位置放置包内化学指示物，通过观察其颜色变化，位置放置包内化学指示物，通过观察其颜色变化，判定其是否达到灭菌合格要求。判定其是否达到灭菌合格要求。v三、生物监测三、生物监测法法：指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢（指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢（ACTT7953）监监测周期：应测周期：应每天每天至少进行一次灭菌循环的生物监测，至少进行一次灭菌循环的生物监测，监测监测方法应符合国家的有关规定。方法应符合国家的有关规定。2024/5/12 周日48 生物指示菌生物指示菌 生物监测周期生物监测周期压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌 嗜热脂肪杆菌芽孢嗜热脂肪杆菌芽孢 （ACTT7953）每周一次每周一次 过氧化氢等离子过氧化氢等离子 嗜热脂肪杆菌芽孢嗜热脂肪杆菌芽孢 每天至少一次每天至少一次 2024/5/12 周日49灭菌过程验证装置灭菌过程验证装置vPCD 对灭菌过程有预定抗力的模拟装置，用于评价对灭菌过程有预定抗力的模拟装置，用于评价 灭菌过程的有效性。其内部放置化学指示物时称化灭菌过程的有效性。其内部放置化学指示物时称化 学学PCD，放置生物指示物时称生物，放置生物指示物时称生物PCD。44 灭菌质量的监测灭菌质量的监测 441通用要求通用要求 4416 按照灭菌装载物品的种类，可选择具有按照灭菌装载物品的种类，可选择具有代表性的代表性的PCD进行灭菌效果的监测。进行灭菌效果的监测。2024/5/12 周日50注：注：1、新安装、移位、大修、灭菌失败、包装、新安装、移位、大修、灭菌失败、包装 材材料或被灭菌物品改变，应对灭菌效果进行重料或被灭菌物品改变，应对灭菌效果进行重 新评价，包括采用物理监测法、化学监测法、新评价，包括采用物理监测法、化学监测法、生物监测法进行监测（重复三次），监测合生物监测法进行监测（重复三次），监测合格后，灭菌器方可使用。格后，灭菌器方可使用。2、检测所用化学和微生物指示物必须经卫生、检测所用化学和微生物指示物必须经卫生部部 批准，并在有效期内使用。批准，并在有效期内使用。2024/5/12 周日517 52监测注意事项：监测注意事项：v1、采取的样本要有代表性及足够的样本数量，、采取的样本要有代表性及足够的样本数量，并应仔细分析污染来源；并应仔细分析污染来源；v 2、被采样本面积、被采样本面积100cm2取全部表面，被采取全部表面，被采样本表样本表面积面积100cm2取取100cm2；v3、若若消消毒毒因因子子为为化化学学消消毒毒剂剂，采采样样液液中中应应加加入入相应的中和剂；相应的中和剂；2024/5/12 周日534、采样时，尽量用大小一致的无菌棉签，并将、采样时，尽量用大小一致的无菌棉签，并将棉签通过采样管壁挤压，去除多余的采样液，使棉签通过采样管壁挤压，去除多余的采样液，使之处于湿润状态，而不是浸泡状态，然后按之处于湿润状态，而不是浸泡状态，然后按30角角度轻轻地有序地用力均匀地涂抹采样品，禁用度轻轻地有序地用力均匀地涂抹采样品，禁用干干棉签棉签采样；采样；5、送检时间不得超过、送检时间不得超过6h，若样品保存于，若样品保存于0-4，则不得超过则不得超过 24h;6、采样时应注意无菌操作规程，以保证结果的、采样时应注意无菌操作规程，以保证结果的准确性。准确性。2024/5/12 周日547、样液接种于平皿后应尽快倾注营养琼脂、样液接种于平皿后应尽快倾注营养琼脂培养基，避免样液干燥于平皿上，影响结果培养基，避免样液干燥于平皿上，影响结果的准确性。的准确性。8、倾注时琼脂培养基不得超过、倾注时琼脂培养基不得超过45，以防，以防损伤细菌或真菌。损伤细菌或真菌。倾注和摇动时，动作应尽倾注和摇动时，动作应尽量平稳，以利于细菌分散均匀，便于计数菌量平稳，以利于细菌分散均匀，便于计数菌落。勿使培养基外溢，以免影响结果的准确落。勿使培养基外溢，以免影响结果的准确性和造成环境的污染。性和造成环境的污染。9、每日观察细菌生长情况。培养至规定时、每日观察细菌生长情况。培养至规定时间间,计数最终结果的菌落数。计数最终结果的菌落数。2024/5/12 周日55环境卫生学监测结果分析流程 正视结果，不要盲目地重复采样细菌学数据超标 是 回忆采样过程 否 是否存在污染 到一线去查看设施和每个操作环 节，询问相关人员的日常操作方 法，检查操作记录 重复采样 否 判断是否存在问题 采取措施改进操作流程 是 56 568 2024/5/12 周日57