学士学位论文—-一株鸭大肠杆菌e.coli-rcya及其对部分抗生素制剂的药敏试验.doc

本科毕业论文

题 目 一株鸭大肠杆菌E.coli RCya的分离鉴定及其对部分抗生素制剂的药敏试验

系 别 动物医学系
专 业 动物医学
年 级 2011级
学 号 222011602033114
姓 名
指 导 教 师 副教授
成 绩

二0一五年五月一十八日

目 录
任 务 书 1
文献综述 2
开题报告 5
正 文 7
摘 要 7
前 言 7
材料与方法 8
实验结果 9
分析与讨论 12
结 论 12
参考文献与附录 12
致 谢 13
指导教师评阅表 I
交叉评阅表 II
答辩记录 III

西南大学本科毕业论文（设计）任务书
论文（设计）题目 一株鸭大肠杆菌E.coli RCya及其对部分抗生素制剂的药敏试验
系别、专业 动物医学 动物医学 学生姓名 学号 222011602033114
指导教师姓名 开题日期 2014年4月25日
论文（设计）的主要内容（技术指标）与要求：
1.鸭致病性大肠杆菌的分离鉴定。
2.部分抗生素制剂对分离菌的药敏试验。
要求：
独立查阅资料和撰写综述，按试验要求独立写出试验方案和准备研究用的各种试剂，独立撰写毕业论文，并保证试验数据的客观、真实！通过本课题熟悉和掌握科研立项的一般流程，掌握常规的实验室细菌分离鉴定技术及复方抗生素制剂的抗菌机理。
进 度 安 排
2014年5月-7月： 病原的分离鉴定
2014年8月-12月：药敏试验
2015年3-5月：撰写论文
系意见：

注：1、任务书由指导老师填写。 2、任务书必须在第七学期13周前下达给学生。
文献综述
鸭大肠杆菌病的诊断与防控研究进展

摘要：本病是由大肠杆菌埃希氏菌的某些致病性血清型菌株引起的疾病总称。该文就该病的病原学、血清型、流行病学、临床症状与病理变化、诊断及防治等方面进行了综述。
关键词：鸭；大肠杆菌；流行病学；防治；研究进展

鸭大肠杆菌病（Duck.E.coli disease）是由埃希氏大肠杆菌引起的各种日龄鸭的急性败血性细菌病[1]，以心包炎、气囊炎、肝周炎、腹膜炎为主要特征。
1 病原学
大肠埃希氏杆菌是中等大小杆菌，其大小为1-3微米×0.5-0.7微米，有鞭毛，无芽胞，有的菌株可形成荚膜，革兰氏染色阴性。在170种O型抗原血清型中1/2左右对禽有致病性，但最多的是O1、O2、O78、O35四个血清型。本菌对一般消毒剂敏感，对抗生素及磺胺类药等极易产生耐药性[2]。
2 病型及临床症状与病理变化[3]
2.1 鸭胚和雏鸭早期死亡：该病型主要通过垂直传染，鸭胚卵黄囊是主要感染灶。鸭胚死亡发生在孵化过程，特别是孵化后期，病变卵黄呈干酪样或黄棕色水样物质，卵黄膜增厚。病雏突然死亡或表现软弱、发抖、昏睡、腹胀、畏寒聚集、下痢(白色或黄绿色)等，个别有神经症状。病雏除有卵黄囊病变外，多数发生脐炎、心包炎及肠炎。感染鸭可能不死，常表现卵黄吸收不良及生长发育受阻。
2.2 气囊病：气囊病主要发生于3-12周龄幼雏，特别是3-8周龄肉鸭最为多见。气囊病也经常伴有心包炎、肝周炎，偶尔可见败血症、眼球炎和滑膜炎等。病鸭表现沉郁、呼吸困难、有啰音和喷嚏等症状，气囊壁增厚、混浊，有的有纤维样渗出物，并伴有纤维素性心包炎和腹膜炎等。
2.3 大肠杆菌性急性败血症：本病常引起幼雏或成鸭急性死亡。特征性病变是肝脏呈绿色和胸肌充血，肝脏边缘钝圆，外有纤维素性白色包膜，各器官呈败血症变化，也可见心包炎、腹膜炎、肠卡他性炎等病变。
2.4 大肠杆菌性肉芽肿：病鸭消瘦贫血、减食、拉稀。在肝、肠(十二指肠及盲肠)、肠系膜或心上有菜花状增生物，针头大至核桃大不等，很易与禽结核或肿瘤相混。
2.5 心包炎：大肠杆菌发生败血症时发生心包炎。心包炎常伴发心肌炎，心外膜水肿，心包囊内充满淡黄色纤维素性渗出物，心包粘连。
3诊断
用实验室病原检验方法，排除其他病原感染(病毒、细菌、枝原体等)，经鉴定为致病性血清型大肠杆菌，方可认为是原发性大肠杆菌病；在其他原发性疾病中分离出大肠杆菌时，应视为继发性大肠杆菌病[4]。
4 防治
4.1 搞好禽舍空气净化：降低鸭舍内氨气等有害气体的产生和积聚是养鸭场必须采取的一项非常重要的措施[5]。常用方法如下：
4.1.1 药物喷雾:过氧乙酸：常规方法是用0.3%过氧乙酸，按30毫升/立方米喷雾，每周1-2次，对发病鸭舍每天1-2次；多聚甲醛：在25平方米垫料中加入4.5千克多聚甲醛，它可和空气中的氨中和，氨浓度很快下降，但21天后又回升到原来水平，因此应重新使用。
4.1.2 机械清除:及时清粪，并堆积密封发酵，及时通风换气。重视环境治理，饲养场地绿化，种草植树。
4.2 搞好种蛋：孵化厅及禽舍内外环境清洁卫生，并按消毒程序进行消毒，以减少种蛋、孵化和雏鸭感染大肠杆菌。
4.3 防止水源和饲料污染：可使用颗粒饲料，饮水中加消毒剂，如含氯或含碘消毒剂；水槽、料槽每天应清洗消毒。
4.4 药物防治：应选择敏感药物在发病日龄前1-2天进行预防性投药，或发病后作紧急治疗。
4.4.1抗生素:氨苄青霉素：按0.2克/升饮水或按5-10毫克/千克拌料内服；阿莫西林：按0.2克/升饮水；庆大霉素：2-4万微克/升饮水；土霉素类：按0.1-0.6%拌饲或0.04%饮水，连用3-5天。
4.4.2 合成抗菌药:磺胺嘧啶：0.2%拌饲，0.1-0.2%饮水，连用3天；磺胺喹恶林：0.05-0.1%拌饲，0.025-0.05%饮水，连用2-3天，停2天，再用3天；呋喃唑酮：0.03-0.04%混饲，0.01-0.03%饮水，连用3-5天，一般不超过7天。

参考文献：

[1]D ho Moulin M , Fairbrother J M . Avian pathogenic Escherichia coli (A PEC ) [J] .Vet Res,1999,30:299-316.
[2]鲍国连,韦强,季权安,等.鸭大肠杆菌病流行病学与病原特性研究[J].浙江农业学报,2001(03):33-37.
[3]李延龙,张其星,于占松.鸡大肠杆菌病的诊断综述[J].家禽科学, 2008(11):43-45.
[4]磨龙春,熊毅,邓朝阳,等.广西鸭大肠杆菌病的病菌血清型及防治[J].广西农业科学,2001(04):193-194.
[5]胡继明,魏芝贵.鸭传染性浆膜炎和大肠杆菌病的防治措施[J].农技服务2007(03):85-86.

西南大学本科毕业论文（设计）开题报告

论文（设计）题目
一株鸭大肠杆菌E.coli RCya的分离鉴定及其对部分抗生素制剂的药敏试验
系别专业
动物医学系 动物医学
年 级
2011级
开题日期
2014年4月25日
学 号
222011602033114
姓 名
陈甫
指导教师
孙裕光
1.本课题研究意义：
我们收集了临床病鸭很多例，经过多次分离鉴定，表明大肠杆菌和沙门氏菌比较常见，希望通过应用所学知识对生产上出现的病鸭做出临床诊断和实验室诊断，给出处置方案，同时验证部分抗生素制剂的抗菌效果，对指导用药提供试验根据,所以设计了这样的研究课题。

2.研究内容：
2.1鸭致病性大肠杆菌的分离鉴定
2.2 部分抗生素制剂对分离菌的药敏试验

3.技术路线、研究方法和研究进度：
3.1 技术路线
病鸭------剖检------临床诊断（初步诊断）-------微生物诊断（确诊）：平板划线接种------菌落特征鉴定-----细菌纯化培养------染色镜检---动物试验-----生化试验鉴定------种属（大肠杆菌）------血清型鉴定-------种（大肠杆菌）------药敏试验------抑菌圈大小-------敏感抗生素制剂。

3.2研究方法
3.2.1培养基的制备:麦康凯、蛋白胨20克，乳糖10克，蒸馏水1000毫升，牛胆盐5克，氯化钠5克，中性红0.03克，琼脂14克，PH为7.1-7.2
3.2.2普通肉汤培养基:牛肉膏3克，蛋白胨10克，氯化钠5克，蒸馏水1000毫升，PH为7.4-7.6（调节PH值用1mol/L的NaoH或1mol/L的HCL）
3.2.3革兰氏染色镜检：
（1）取黄色菌落和红色菌落稀释涂布于载玻片上，用酒精灯火焰固定；
（2）用草酸铵结晶紫染色1分钟；
（3）用自来水冲洗；
（4）加碘酸覆盖涂面染1分钟，用自来水冲洗，用吸水纸吸去水分；（5）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸取水分；
（6）最后用复红染色液染1分钟后，用自来水冲洗，用吸水纸吸干，镜检。
3.2．4细菌的纯化:
（1）取黄色菌落用三区划线法涂布于麦康凯培养基上，置于37摄氏度的恒温箱中培养24小时，观察菌落的形态和颜色。
（2） 取红色菌落用三区划线法涂布于麦康凯培养基上，置于37摄氏度的恒温箱中培养24小时，观察菌落的形态和颜色。
（3)取红色菌落在普通肉汤培养基上在37摄氏度的水浴恒温震荡仪上培养24小时。
3.2.5细菌的毒力测试
将培养好的菌液吸取5毫升注射在4只5日龄的鸭子上，另外同龄的4只不打菌液，作为对照组。
3.2.6生化鉴定
3.2.7药敏试验—打孔法

3研究进度
2014年5月-7月： 病原的分离鉴定
2014年8月-12月：药敏试验
2015年3月-5月：撰写论文

指导教师（签名）：
年 月 日
5.系意见：

系（盖章）
年 月 日
说明：开题报告应在教师指导下由学生独立撰写。在毕业论文（毕业设计）开始二周内完成，交指导教师是审阅，并接受学校和系检查。

正文
一株鸭大肠杆菌E.coli RCya的分离鉴定及其对部分抗生素制剂的药敏试验

西南大学荣昌校区动物医学系，重庆荣昌 402460

摘要：无菌采取荣昌某鸭场疑似大肠杆菌病死鸭的心脏、肝脏和脾脏等进行病原菌的分离、鉴定、生化试验、动物实验和药敏实验。实验结果表明：分离到的大肠杆菌对鸭子具有致病性，对6～10日龄的雏鸭具有较高的致死率。用兽药企业生产的在市场上销售的抗生素制剂做体外药敏实验，其结果发现盐酸多西环素注射液、硫酸阿米卡星注射液、盐酸左氧氟沙星注射液、痢菌净注射液、头孢他啶注射液、头孢曲松注射液极敏感；硫酸头孢喹肟注射液、卡拉注射液、硫酸黏菌素注射液高度敏感，磺胺间甲氧嘧啶注射液低度敏感；头孢噻呋钠注射液、头孢拉定注射液、氟苯尼考注射液不敏感。本研究的结果为临床鸭大肠杆菌病的预防和治疗提供理论指导，并为大肠杆菌的耐药性研究提供相关信息。
关键词：鸭；大肠杆菌；分离鉴定；抗生素制剂；药敏试验

Isolation and Identification of One Duck Escherichia Coli(E.coli RCya) and the Susceptibility Test of Antibiotic Agents

CHEN Fu
Department of Veterinary Medicine, Southwest University，Rongchang Campus, Chongqing, 402460，China

Abstract: By sterile Rongchang a duck suspected Escherichia coli and dead ducks in heart, liver and spleen of pathogen isolation, identification, biochemical test, animal experiment, and drug sensitivity test. Experimental results show that the Escherichia coli isolated from the duck with pathogenicity, of 6 ~ 10 day old ducklings has a high mortality rate. Veterinary drug production enterprises in the market sales of antibiotic agents do drug sensitivity test in vitro. The results showed that doxycycline hyclate injection, sulfuric acid amikacin injection and levofloxacin hydrochloride ofloxacin injection, mequindox injection and cefotaxime he pethidine injection, ceftriaxone injection is very sensitive, sulfate cefquinome injection, Carla sulfate injection molds of the puerarin injection is highly sensitive, sulfamonomethoxine daimeton injection low sensitivity, cephalosporin ceftiofur sodium injection, Cefradine injection, florfenicol injection test insensitive. The results of this study for clinical duck Escherichia coli disease prevention and treatment and provide a theoretical guidance, and provide relevant information for the study of drug resistance of Escherichia coli.
Keywords:duck; escherichia coli; isolation and identification; Antibiotic preparations ; drug sensitivity test

1 前言
近年来，养鸭模式在逐渐发生变化，零排放饲养肉鸭如雨后春笋般崛起，规模越来越大，产量越来越高，效益越来越明显。尽管如此，零星散养的、小型养殖场还比较多见，利用堰塘、水库、网床饲养商品鸭在全国各地比较普遍。环境条件差的、免疫工作不到位的，鸭病就经常发生，鸭常见的细菌病是大肠杆菌病和沙门氏杆菌病。
鸭大肠杆菌病（Duck.E.coli disease）又称鸭大肠杆菌败血症，是由大肠埃希氏杆菌的某些致病血清型菌株或条件致病性菌株引起鸭全身或局部感染的一种细菌性传染病，是鸭的一种重要常发病[2]。本病解剖变化出现纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎。大肠杆菌病的发病率和病死率有明显的季节性，但在春秋两季多发，病死率在夏冬两季达到高峰。本病的传染源主要是病禽和带菌的禽类，如他们的尸体和粪便、被污染的饲料、饮用水、养殖场地、水塘、种蛋及相关工具都是传染源。当健康鸭感染上大肠杆菌病，不一定马上发病，等到机体抵抗力下降时，细菌随血液分布全身，引发败血症[3]。另外，寄生虫和吸血虫也可以引发本病的发生。
然而目前养鸭场患病鸭的治疗多采用GMP兽药厂生产的抗生素制剂来治疗，而不是用药敏纸片上所标示的纯抗生素制剂来治疗。所以药敏试验就用荣昌县兽药市场销售的抗生素制剂来完成。
本研究的结果为临床鸭大肠杆菌病的预防和治疗提供理论指导，并为大肠杆菌的耐药性研究提供相关信息。
2材料与方法
2.1材料
2.1.1病料：荣昌某鸭场畜主送检的病鸭表现为排绿色稀粪、腹围较大、精神萎靡、站立时腹部下垂、呈现企鹅状。剖检为肝脏肿大、呈现青铜色、脾脏肿大，呈现紫黑色、心包上有一层纤维渗出物、腹腔中有淡黄色腹水等，采取病变的鸭心脏、肝脏、脾脏。疑似鸭大肠杆菌病。
2.1.2 培养基 营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、麦康凯培养基和伊红美蓝培养基，均按常规方法配置[4]。
2.1.3 生化试剂 硫化氢、乳糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇、甲基红（MR）、二乙醇（VP）、靛基质（吲哚）、枸橼酸盐、过氧化氢等。
2.1.4 试验动物 8只6～10日龄，体重约150克的雏鸭购买于荣昌县畜禽市场。
2.1.5 药物 痢菌净（主要成分乙酰甲喹）、盐酸左氧氟沙星注射液（主要成分左氧氟沙星）、磺胺间甲氧嘧啶注射液（主要成分磺胺间甲氧嘧啶）、硫酸头孢喹肟注射液（主要成分硫酸头孢喹肟）、头孢噻呋纳注射液（主要成分头孢噻呋钠）、盐酸多西环素注射液（主要成分盐酸多西环素）、氟苯尼考注射液（主要成分氟苯尼考）、硫酸阿米卡星注射液（主要成分硫酸阿米卡星）等市场销售的兽药制剂。
2.2试验方法
2.2.1病原的采集、染色培养 无菌采取荣昌某鸭场送检病死鸭的心脏、肝脏、脾脏和脑组织等明显病变部位，直接触片，革兰氏染色、镜检。在无菌操作台里接种在麦康凯琼脂平板培养基上。将接种了细菌的麦康凯培养基放于37℃的培养箱中培养24小时。观察形态结构、颜色变化。再取特征明显的菌落接种于伊红美蓝培养基上，同样在37℃的培养箱中培养24小时。观察结果，再取菌落特征明显的菌落在普通斜面培养基上纯化培养，勾取纯化细菌在普通肉汤培养基上放于37℃的水浴恒温震荡仪中培养24小时。另外，对菌落特征明显的菌落进行革兰氏染色，再镜检。培养好的斜面放在4℃的冰箱中保存。
2.2.2 细菌的形态学观察 勾取菌落特征明显的菌落做镜检观察细菌的形态学。
2.2.3生化鉴定 在无菌操作台中，勾取分离纯化得到的细菌分别接种于半固体培养基、葡萄糖发酵管和三糖铁琼脂培养基中。放于37℃的培养箱中培养。其中，糖酵解、VP、甲基红、吲哚在37℃的培养箱中培养24～48小时即可观察结果；枸橼酸盐实验则需要再培养7d观察培养基颜色的变化。
2.2.4 致病性检验 将购买的8只雏鸭随机分成两组，每组4只。一组为试验组，另外一组为对照组。在相同的环境、相同的饲养条件下进行实验。在试验组雏鸭的腓肠肌上注射5ml的菌液。另外对照组都注射菌液，隔离饲养。观察结果，并纯化细菌。
2.2.5 药敏试验 配制普通琼脂培养基平板，将平板均匀划为两区、打孔、用划线法将被检细菌涂布到普通培养基上[5]，再用移液枪移取待测药物注入打好的孔中，做到满而不溢、标记、放在37℃的恒温箱中培养24小时、取出平板观察是否有抑菌圈和测量抑菌圈的大小、记录结果。
3 结果
3.1 剖检结果
肝脏肿大、呈现青铜色、脾脏肿大且有轻微出血，呈现紫黑色、心包上有一层纤维渗出物、腹腔中有淡黄色腹水等病变，是鸭大肠杆菌的临床病理变化。
3.2 细菌分离培养
将接种了细菌的麦康凯培养基放在37℃的恒温培养箱中培养24小时后观察菌落，在麦康凯培养基上形成了微小的红色菌落、在伊红美蓝培养基上形成了黑色带金属光泽的小菌落、接种在普通培养基上的则形成了圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落[6],可基本确定为鸭大肠杆菌。
3.3 细菌的形态学
涂片、革兰氏染色阴性呈红色。在油镜下观察到无芽孢的直杆菌，蓝色，两端钝圆，散在或成对存在，可基本确定为鸭大肠杆菌。
3.4 生化鉴定
将分离纯化得到的细菌分别接种于半固体培养基、葡萄糖发酵管和三糖铁琼脂培养基中，在37℃的培养箱中培养24小时。试验显示：所分离菌株对蔗糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、MR试验均呈阳性；V-P试验呈阴性。该分离菌株符合大肠杆菌的生化反应特性。结果如表1.
表1：分离菌种的生化试验
Table 1: biochemical test of bacteria separation
实验试剂
待测菌的反应模式
标准菌反应模式
吲哚
甲基红（MR)
二乙醇（VP）
枸橘酸盐
硫化氢
乳糖
蔗糖
麦芽糖
甘露醇
过氧化氢
-
+
-
-
-
+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
V
+
+
+
注：+，90%～100%阳性；-，0～10%阳性；+/-，大多数菌株阳性/少数阴性；-/+，大多数阴性/大多数阳性；V是种间有不同反应。
3.5 毒力测定试验
取分离纯化的细菌接种在普通肉汤培养基上在37℃的恒温水浴震荡仪上培养24小时后观察到，培养液变浑浊，底部有沉淀和锥形瓶壁上有白色菌环。
取菌液5ml注射在试验组的8只雏鸭上，采用腓肠肌注射法。第二天观察结果，被注射了菌液的4只雏鸭全部死亡。剖检后出现肝脏肿大、呈现青铜色、脾脏肿大且有轻微出血，呈现紫黑色、心包上有一层纤维渗出物、腹腔中有淡黄色腹水等病变。取病变严重的组织继续在麦康凯培养基上分离培养，结果是在麦康凯上出现红色菌落、涂片、镜检观察形态类似大肠杆菌。对照组没有出现死亡的现象，表明该分离菌有很强的致病性，对研究该鸭场的大肠杆菌病有重要意义。
2.6 药敏试验
配制普通琼脂培养基平板，将平板均匀划为两区、打孔、挑取待测菌于少量灭菌的生理盐水制成细菌浑浊液，用灭菌棉签将待测菌液混悬液均匀而致密的涂布于平板培养基上，再用移液枪移取待测药物注入打好的孔中，做到满而不溢、标记、放在37℃的恒温箱中培养24小时、取出平板观察是否有抑菌圈和测量抑菌圈的大小、记录结果。实验显示：盐酸多西环素注射液、硫酸阿米卡星注射液、盐酸左氧氟沙星注射液、痢菌净注射液、头孢他啶注射液、头孢曲松注射液极敏感，硫酸头孢喹肟注射液、卡拉注射液硫酸黏菌素注射液高度敏感，磺胺间甲氧嘧啶注射液低度敏感，头孢噻呋钠注射液、头孢拉定注射液、氟苯尼考注射液不敏感。如表2。
表2 :抗生素制剂药敏试验结果
Table 2 :antibiotic agents susceptibility test results
抗生素制剂
抑菌圈直径（mm）
头孢噻呋钠注射液
硫酸头孢喹肟注射液
头孢他啶注射液
头孢曲松注射液
卡拉注射液
磺胺间甲氧嘧啶注射液
硫酸黏菌素注射液
硫酸阿米卡星注射液
痢菌净注射液
盐酸左氧氟沙星注射液
头孢拉定注射液
盐酸多西环素注射液
氟苯尼考注射液
0
18mm
25mm
21mm
18mm
9mm
15mm
40mm
30mm
26mm
0
40mm
0
注：抑菌圈直径>20mm，为极敏感；抑菌圈直径为15～20mm，为高度敏感；抑菌圈直径为10～14mm，为中度敏感；抑菌圈直径<10mm，为低度敏感；抑菌圈直径为0的为不敏感[4]。
4讨论分析
4.1菌落形态特性、生化鉴定可以确定分离菌是鸭大肠杆菌且具有较强的致死性。
根据细菌的分离培养、细菌的形态学观察、细菌的生化鉴定表明分离得到的细菌为大肠杆菌。根据试验动物的结果表明，在注射了5ml菌液的15只雏鸭中，接种后12-24小时内全部死亡，说明分离得到的大肠杆菌具有很强的致死率。
4.2采用兽药企业生产的抗生素制剂做药敏试验对养殖场具有应用价值和现实意义。
根据体外药敏试验结果表明：盐酸多西环素注射液、盐酸左氧氟沙星注射液、硫酸阿米卡星注射液、头孢他啶注射液、头孢他啶注射液对分离的致病性大肠杆菌具有极其敏感的作用；硫酸头孢喹肟、硫酸粘菌素对致病性大肠杆菌具有高度敏感的作用，所以不能够仅根据商品名去判断其功效。这对临床用药具有指导作用。
4.3大肠杆菌普遍耐药的现象及其耐药机制。
根据体外药敏试验结果表明：头孢噻呋钠注射液、头孢拉定注射液、氟苯尼考注射液没有抑菌作用。随着时间的推移，埃希氏大肠杆菌的耐药率不断上升，多重耐药菌株剧增，耐药谱增宽。头孢菌素类抗生素耐药率相同且普遍低 。长期添加抗菌药物进行预防，在用药后病情等到有效控制后没有及时停药等，导致大肠杆菌产生耐药性[7]，大肠杆菌可通过多种方式阻止抗菌药物透过胞浆膜，如大肠杆菌细胞壁水孔或外膜非特异性通道功能改变而造成某些广谱青霉素类、头孢类抗生素的耐药性 。为了保证养禽业的健康发展，大肠杆菌的防治必须综合考虑，以免发生耐药性、药物残留及中毒反应，给人们的食品安全带来隐患。在发病时原则最为敏感的药物治疗，注意药物的休药期。
5.结论
5.1 分离鉴别出一株耐药鸭大肠杆菌。
5.2筛选出对鸭大肠杆菌有极其敏感的抗生素制剂，在临床用药上具有指导意义。

参考文献

[1]李东,潘琦,韦凤英,等.中国优质家禽产业化育种制种探索[J].中国家禽, 2006(22):1-4.
[2]黄虹.鸭大肠杆菌病的流行病学调查[J].畜禽业, 2014(06):58-59.
[3]陈文静,韩先干,何亮,等.鸭致病性大肠杆菌的分离鉴定及其生物学特性分析[J].中国动物传染病 学报,2010(02):34-40.
[4]沙莎，宋振辉.动物微生物实验教程[M].重庆：西南大学出版社，2011，21-36.
[5]龚新辉,沙依兰古丽,汪萍,等.鸭大肠杆菌药敏试验研究[J]. 现代农业科技, 2011(06):331-335.
[6]蔡双双,张红,徐朋朋,等.鸭源致病性大肠杆菌的分离鉴定及致病性观察[J]. 湖北农业科学, 2011,50(1):118-121.
[7]张秀英,芦秀梅.大肠杆菌对兽医临床抗菌药物耐药情况分析[J].中国兽药杂志, 2003,37(3):33-35.

致谢：
大学生活一晃而过，回首走过的岁月，心中倍感充实，当我写完这篇毕业论文的时候，有一种如释重负的感觉，感慨良多。 
首先诚挚的感谢我的论文指导老师孙裕光老师。他在忙碌的教学工作中挤出时间来审查、修改我的论文。还有教过我的所有老师们，你们严谨细致、一丝不苟的作风一直是我工作、学习中的榜样；你们循循循善诱的教导和不拘一格的思路给予我无尽的启迪。 
最后感谢四年中陪伴在我身边的同学、朋友，感谢你们为我提出有意的建议和意见，有了你们的支持、鼓励和帮助，我才能充实的度过了四年的学习生活。

XII