DB1302∕T 509-2020 青贮玉米中8种氨基甲酸酯农药残留量的测定液相色谱-质谱∕质谱法(唐山市).pdf

ICS 65. 020. 01 B 04 DB1302 唐山市山巳ET圃，方标准DB 1 302fT 509一-2020青贮玉米中8种氨基甲酸醋农药残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法2020-08-20发布2020-09-20实施唐山市市场监督管理局发布目IJ1=1 本标准按照GB/T1. 1-2009给出的规则起草。本标准由唐山市市场监督管理局提出并归口。本标准起草单位:唐山市食品药品综合检验检测中心。DB 1302/T 509一-2020本标准主要起草人:赵海涛、王帅、闰艳华、张贺凤、杜雪娜、王磊、王雅静、汤恩i疑、张亮、周彦成、刘会会、张谊、薄会娜、湛毅强、薛凤珍、李丽援。I DB1302/T 509-2020 l 范围青贮玉米中8种氨基甲酸醋农药残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法本标准规定了采用液相色谱-质谱/质谱法测定青贮玉米中8种氨基甲酸醋农药残留量的方法。本标准适用于青贮玉米中8种氨基甲酸醋农药残留量的测定，其他同类型农药残留量的测定可参照执行。本标准定量测定的8种农药测定下限为0.04mg/kgo 2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规则和试验方法3 原理试样经乙腊匀浆提耳叉，氯化铀盐析，氨基固相萃取柱净化，用二氯甲炕+甲醇(95+5)洗脱农药，液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量。4 试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水为GB/T6682规定的一级水。4.1 乙睛，色谱纯。4. 2 甲醇，色谱纯。4. 3 二氯甲炕，色谱纯。4.4 氧化铀.140 C烘烤4ho 4. 5 氨基固相萃取柱1000mg. 6 mL 4. 6 滤膜，0.22m有机系滤膜。4. 7 淋洗液:二氧甲皖+甲醇(95十5.体积比)。4.8 8种氨基甲酸醋农药标准品见表10表18种氨基甲酸醋农药标准品序号中文名浓度/Cmg!kg) 纯度/C %) l 涕灭威亚)X1000 三:962 涕灭威l)X1000 二主963 灭多威1000 二主964 3在基克百威1000 二三96溶剂甲醇甲醇甲醇甲醇DB1302/T 506-2020 表18种氨基甲酸醋农药标准品(续序号中文名浓度/(mg!kg) 纯度/(%) j窑剂5 涕灭戚1000 主96L尸醇6 L尸茶戚1000 主96L尸醇7 异丙戚1000 主96L尸醇8 克百威1000 二三96甲团于4. 9 标准j窑液自己制4.9.1 混合标准溶液分别取各农药标准储备液50!lL于5mL容量瓶中用丙酣分别稀释定容到5mL，配成浓度为10阳/mL的使用液，密封储存于4oc冰箱，备用。4. 9. 2 基质混合标准工作溶液耳又样品空白溶液分别配制0.02!lg/mL、0.04!lg/mL、0.06!lg/mL、0.08!lg/mL、0.12g/mL、0.16问/mL、O.32g/mL的基质混合标准工作液，现用现配。5 仪器设备5. 1 i夜相色谱-质谱/质谱仪，配有电喷雾离于源(EST)。5. 2 破壁料理机。5.3 氮吹仪。5.4 涡旋混合器。5.5 分析天平:感量0.01 g。5.6 均质器。5. 7 容量瓶5mL。5.8 移液器2mL5.9 样品瓶2mL.带聚四氟乙烯旋盖。6 测定步骤6. 1 试样制备取不少于1000g样品，去除其中杂物，将样品四分缩分至250g，粉碎后密封，制成试样备用，剩余i式样于18oc保存。6. 2 提取称取25g (精确至0.01g)样品于200mL烧杯中，加入50mL乙睛，用均质器匀浆提取2min后用滤纸过滤，滤j夜收集到装有6g氧化铀的100mL具塞量筒中(氧化饷量以足量饱和即可)，剧烈震荡30s，在室温下静置30min，使乙睛和水相分层。6. 3争化2 DB1302/T 509-2020 从具塞量筒中的乙睛层中吸取10.00mL上洁液于15mL试管中，在80c的氮吹仪上缓慢吹至近干，加入2.0mL二氯甲:民+甲醇(95+5)，在涡旋混合器上祸旋30s，待净化。将氨基国相萃取柱用3.0mL二氯甲皖+甲醇(95+5)预淋洗，条件化，当溶液液面达到柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用15mL刻度离心管接收洗脱液，用4mL二氯甲:皖+甲醇(95+5)冲洗试管后淋洗氨基因相萃取柱，并重复三次，收集洗液，在50c的氮吹仪上缓慢吹至近干，加入2.0mL甲醇混匀，经O.22m的有机系滤膜过滤后移入2mL自动进样器样品瓶中，待测。6.4 测定条件6.4.1 液相色i普条件6.4. 1. 1 色谱柱H18，(50m日lX3.00 mm, 2.60口m)0 6.4.1.2 柱温40c 0 6.4.1.3 进样量2L6.4.1.4 流速O.40 mLlmino 6.4.1.5 流动相A:甲醇B:5 mmol甲酸按+0.05%甲酸水溶液，梯度洗脱条件见表20表2梯度洗脱条件时间/minA (甲醇)/% B (5mmo1甲酸钱+0.05%甲酸水溶液)/% O. 00 O. 50 5. 00 8. 00 8. 01 10. 00 6.4.2 质谱参考条件6.4.2.1 离子源:电喷雾离子源(ESI)0 6.4.2.2 扫描方式:正离子扫描。6.4.2.3 监测方式:多反应监测(MRM)0 6.4.2.4 雾化气流量3.0Llmino 6.4.2.5 干躁气流量15.0Llmino 6.4.2.6 加热块温度400c。6.4.2.7 DL管温度400c。6.4.2.8 8种氨基甲酸醋农药质谱参数见表30100 。90 10 5 95 5 95 90 10 100 。表38种氨基甲酸醋农药质谱参数化合物名称保留时间Cmin) 定量离子定性离子涕灭威亚lYX3.008 207.10/89.00 207. 10/132. 00; 207. 10/89. 00 涕灭威t风3.236 240.10/86.00 240.10/86.00; 240.10/223.00 灭多威3.908 163.05/88.00 163.05/88.00; 163.05/106.05 3搓基克百威4.601 238. 10/163. 10 238.10/163.10; 238.10/181. 20 涕灭威5. 330 208. 10/116. 0。208. 10/116. 00; 208. 10/89. 10 碰撞电压(V) 14: 8 21: 8 8: 10 14: 10 15; 20 3 DB1302/T 506-2020 表38种氨基甲酸醋农药质i普参数(续)化合物名称保留时间定量离子定性离子碰撞电压(min) (V) L尸荼威6.202 202. 05/145. 05 202.05/145.05; 202.05/127.05 9: 27 异丙威6.208 194. 10/95. 0。194. 10/95.00; 194. 10/137. 10 20: 15 克百威6. 157 222.30/165. 10 222.30/165.10; 222.30/123.10 17; 20 6.5 液相色i普-质谱/质谱测定6.5.1 定性测定在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离于均出现，而且所选择的离子丰度比与标准品的高于丰度比相一致(相对丰度50%，允许:1:20%偏差:相对丰度20%-50%，允许:1:25%偏差:相对丰度10%-20%, 允许:1:30%偏差:相对丰度王10%，允许:1:50%偏差)，则可判断样品中存在这种农药。6. 5. 2 定量测定本标准中液相色谱-质谱/质语采用外标-校j在曲线法定量测定。为减少基质对定量测定的影响，定量用标准溶液应采用基质混合标准工作洛液绘制标准曲线，并且保证所测样品中农药的响应值均在仪器的线性范围内。8种氨基甲酸酷农药的多反应监测CMRM)色谱图见附录A。6. 6 平行试验按上述步骤对同一试样进行平行试验。6. 7 空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。6. 8 结果计算和描述按式(1)计算试样中8种氨基甲酸醋农药的含量，计算结果需将空白值扣除。式中:V 1000 x = c x -x-=-:.:. (1) m 1000 X一试样中被测组分残留量，单位为毫克每千克Cmg/kg)C一从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升(阳/mL)V一样品溶液最终定容体积，单位为毫升CmL)m一样品溶液所代表最终试样的质量，单位为克Cg)0 计算结果应扣除空白值。7 测定下限、精密度7. 1 测定下限本方法8种氨基甲酸酷农药测定下限为0.04mg/kgo 4 DB1302/T 509-2020 7. 2 精密度在重复性条件下，获得的2次独立测试结果的绝对差值不得超过重复性限(r)0精密度数据表见表4。在再现性条件下，获得的2次独立测试结果的绝对差值不得超过再现性限(R)。精密度数据表见表40表4精密度数据表农药名称含量重复性限再现性限含量重复性限再现性限含量重复性限再现性限Cmg/kg) (r) (R) Cmg/kg) Cr) (R) Cmg/kg) (r) CR) j弟灭威亚嗣0.04 o. 0027 0.0064 o. 08 0.0036 o. 0076 0.2 0.0129 o. 0075 涕灭威t风0.04 o. 0032 0.0075 o. 08 0.0059 o. 0105 0.2 0.0243 o. 0597 灭多威0.04 o. 0029 0.0056 O. 08 0.0046 O. 0095 0.2 0.0126 O. 0394 3一捏基克百威O. 04 O. 0067 O. 0094 O. 08 O. 0038 O. 0093 0.2 O. 0135 0.0473 涕灭威O. 04 O. 0025 O. 0061 O. 08 O. 0052 O. 0109 0.2 O. 0127 O. 0423 甲茶威O. 04 O. 0038 O. 0072 O. 08 O. 0042 O. 0079 0.2 O. 0394 O. 1185 异丙威O. 04 O. 0024 O. 0042 O. 08 O. 0037 O. 0086 0.2 O. 0297 O. 0156 克百威O. 04 O. 0036 O. 0068 O. 08 O. 0058 O. 0128 0.2 O. 0337 O. 1542 5 6 DB1302/T 506-2020 附录A(资料性附录)8种氨基甲酸醋农药的多反应监测(MRM)色i普图8种氨基甲酸醋农药的多反应监测(MRM)色谱图见图A.lo3 2 5 阻四口5田田D4民阻D3由田D2田D1民阻D2.75田3.253.50 3.75 4.00 4.25 4.50 4.75田5.25国5.75田6.256.50川n黠+)问川卧中叫C旺巳酌叫E川川-斗咀0田阳m叫0皿跚叫o田叫0叫|隆j革i威阳m 0(+) CE:-14 屈才g叫4.101口3盯7叫+叶)CE-斗才so140000 130臼)J囚民)J才才。)J1田民)J吸刀田8回回7田田6回回5回回4田田3回回2回回1回回2.75 3.00 3.25 3.50 1弟灭威亚2一涕灭威嗣3一灭多威4一克百威3.7E 6 产4回4.25 4.50 5一甲茶威63-是莱克百威7一涕灭威8一异丙威4.7E 7 I 11 、飞、-一一一5田5.25 5.50 5.75 6.0C 6.25 图A.18种氨基甲酸酣农药的多反应监测(MRM)色谱图6.5川。