DB42∕T 570-2009 中药材 茯苓菌种生产技术规程(湖北省).pdf

ICS 11. 120. 10 B 38 DB42 ?胡北省由巳,TJ 方标准DB42/T 570-2009 中药材获苓菌种生产技术规程Chinese Medicina Materials Production technology rule for Poria cocos pure culture 2009-10-26发布2010-01-01实施湖北省质量技术监督局发布DB42/ T 570一-2009寻|-L-仨司夜苓为多孔菌科真菌，其菌核是平中食药兼用资说，由于野生夜苓难以采挖，夜苓商品多由产|天农民使用人工分离、培育的菌种作为种训栽培提供。为规范夜苓菌种生产，提雨夜苓栽培产量及品质，促进夜苓产业的健康可持续发展，北京同仁堂湖北中药材有限公司、湖北省中医药研究院、华中农业大学科技人员在总结多年开展夜苓规范化种植研究及长期从事夜苓菌种生产经验的基础上，按照我国中药材生产质量管理规范CG叩门、食用菌菌种生产技术规和及湖北省食用菌菌种管理办法等综合技术要求，制订了本规程。11 DB42/ T 570-2009 中药材获苓菌种生产技术规程1 范围本标准规定了夜苓菌种生产技术规轩的术语和定义、菌种生产、母种生产、原种生产、栽培种生产、夜苓菌种质量标准与检验、菌种的储存与标签。本标准适用于湖北省夜苓菌种的规范化生f=。2 规范性引用文件湖北省食3 术语和定义叩号|用而成为本标准的条款。F毗日1吨引用文件，其随后所有的珍订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据冲F惟达成协议的各方研究。凡是不注日期的引用文件，其最新卡列术语和l定义适用于本标月1=。3. 1 夜苓Poria 多孔菌科j菌夜苓，n1 id COCOS (Schw. ) W o I f的菌枝，供药、食两用。3. 2 菌种pure cultu 经人工培养井可供进步军立l或34;1击使用的夜苓菌t全体及其生长基质生川成的繁殖材料也扫母丰j、原种、主1t古平1。3. 3 种苓mother sclerotium 经粘心培育、选碎，用于分出夜苓月平中的优质量，)，I-.f-(苓i:，.3. 4 菌龄ce门ages菌种Etl丝休的生长nJ问，叩WI利11接种至使用之间的问|宿n，Ji.2.5kg;5. 1. 3 生长旺盛，切开或掰开后，内部苓l勾色白，夜苓气味浓郁，有乳白色汁液或淡青色浆汁渗出:5.1.4 外皮完整，无虫咬损伤，无腐烂异味;5. 1. 5 种苓选定后要及时进行分离使用，若市暂短储存或运往他地使用，必须埋于湿沙中储存，以防T:躁。5. 2 培养基5.2. 1 配方:马铃薯(去皮)200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。5. 2. 2 配制:将马铃薯去皮，洗净，切片，如l水1000ml，东沸30min，过滤，滤液中加入琼脂，提至全部溶化，再加入葡码腑，搅拌溶化，补足水分至1000ml.分装于试管巾，主运上棉辈。5. 2. 3 灭菌:将配制的母种培养基置高压灭菌锅内，用O.1030MPa压力(泪皮121C)灭菌30min，趁热摆放斜面，冷却后备用。5. 3 组织分离5.3. 1 分离前准备:按无菌操作法对无菌室或无菌箱内的空气、环挠、操作台田、用具及移入的培养基试管吁:进行表面消毒灭菌，操作人员按无菌操作着装、手部消毒。5. 3. 2 种苓表面消寄:将选好的种苓用清水冲至无泥沙，待表面稍干后，移入无菌室净化工作台上。川J0.2%升示.!lX70%酒和ji先，进行在j泊dj: ，rlJ川无前水冲洗数i础，除1去面iiJ.j 议。打开紫外线灯J!刊JminIOmin。5. 3. 3 利，:苍山剖:持和l 苓衣Uim下，川l灭)注IJJ从手中苓的1央切注11，册升。5. 4 接手中5.4. 1 阳灭荫的解古Ij)J !，i:1卖出1F:近获苓J支内illJ2clll3cm处，挑1lX.O. 1 cm )!/、O.5cm Jit!，方的(1色苓肉，J主于试1/1斜Ht:1卡j占1-L 5.4.2 贴标签:将分肉、注和|l1111式f(i，l，I ，J:;J;签，其内容j句句衍介湖北节食川j茵茵种岱理办1;.) 规定。5. 5 培养与易IJ杂5. 5. 1 将试!(i11 -r 22 C 2 C t川市，);1卡轩111J ，:必Jd7才。5. 5. 2 :l:;51 2大，fiJ J!t!.i圭和l块)，J1/;1长:1(1巳绒毛收(rt夫子i右i。随;:n:l:;)卡nJllJ n延长，可J!t!.获苓i到丝O;JJI上不断延伸。5. 3. 3 拍养过和，Cl经;币观察纠生长的况，凡lf丝长边也、树收、不匀、戈旦:、污染莉，须具I圳出。5.5.4 1:种转告次数的控制L2次3次。6 原种生产6. 1 培养基6. 1. 1 配方:小友粒90%、松水hi10%、i/J/j油Cl%EV，lf，O. 5%NHNO!Dli: (NH,) ，SO，)。6. 1. 2 阻制:将支粒柏边，1徐t也轨、杂j页，洗净，直!JOC 1.,: 1 r-J古芥地巾浸泡10h，取出，V)jT, 与干的怡木屑1l匀，装于500m1 J店和l瓶(袋)ql，地装Jl1振舵，并梢压实，装至瓶(袋)启处。将另2 DB42/T 570- 2009 半松木j画用营养液润湿，覆盖于培养基表面，厚约O.5cm。揩净瓶(袋)内、外壁沾附物，塞棉塞，于L口。6. 1. 3 灭菌:将配制的原种培养基用O.1373MPa压力(泪I度126.C)灭菌2h.或用流通蒸汽(100.C)灭菌8h10h.冷却后备用。6. 2 接种:在无菌室内，用无菌操作法，挑取长宽各1.5cm左右的优质母种块(连同培养基).移于原种培养基上端中央，随即盖塞wt扎口。6. 3 贴标签:在接种后的原种瓶(袋)上贴上标签，其内容应当符合湖北省食用菌菌种管理办法规定。6. 4 培养与剔杂6.4. 1 将接种后的原种瓶(袋置于25.C30.C培养室中培养。6. 4. 2 当夜苓菌丝生长至瓶(袋)内2/3处时，移入10.C25.C的常混培养室内继续培养。6. 4. 3 接种后的母种块，在原种培养基内培养ld2d.可见夜苓菌丝恢复生长，并逐渐由母种块向外延伸。6.4. 4 站养过和中须经常检我菌丝生长情况，凡表现异常，特别是长速慢、菌丝稀疏、不匀、发黑、污染者须及时剔出，深坝。6. 5 清场:钊-批次的原种生产完成后，均应进行清场，包括清除生产中的废弃物，作好环境清洁，将物品定位，放置，并做好清场记录。7 栽培种生产7. 1 培养基7. 1. 1 配方:松木屑78%、米惊(麦款)20%、成糖1%、熟知召1%、水料比1: l. O l. 2。松木屑要求新鲜、丁服，无霉变，使川西n但经日IW4室内堆放于悚处理。7. 1. 2 旧制:首先将成相溶于水，将米楝(12)(:麦款)与j也有音lb匀，再加入松木屑.J、l匀，然后力11入lTii糖水翻11均匀.i如古1HI、含*军65%70%(即紧握拮养丛中:忏吏指尖稍儿渗水只Jt.主)。放置30mi口，待*分均匀渗入半:1中进行专;:.将菌种袋(12cm.自2Scm.)导4丝)撑开，装料.lj:袋400g左右.J.t.实，擦附袋口内外悍沾附Jr扎仁7.1 . 3 灭Th1:将上述料袋JHO. 13 7 3日i，-.rCJ(白皮126.C)灭菌2h.或川流通蒸汽ClOO.C)灭菌8h10h，冷却后备川j 。7. 2 接种7.2.1 在无菌室内.J IJ无菌操作法，将原种瓶(袋)-JJ开.:;-1:原种表面的菌膜及表面拮养物。7.2.2 mi妾种枪或接种匙驭5g左右略加+.:T芹的JR种块，移于沾儿;:=r t:;乔基上，封口。7.3 v!M;j;签:在接丰1J舌的菌袋上Wi上(EIJ有)标签，其内容符合，IIj t 1i凡叶菌菌种管理办法规定。7. 4 培养与剔杂7.4.1良i?l培养:将接种后的菌种袋111nj用转ffl起置于同泪培养室内，在25C30C击;度卡拮养。7.4. 2 1古1SU古养:待M丝生长延伸至培养丰:12cm3cm处，移入lO.C25.C的常由拮拌:圭;内继续培养，20d30d.干走苓菌丝可辰1芮菌袋。7. 4. 3 培养过科中，经常检件培养室泪、温)Jt变化及菌丝生长情况，发现菌丝长速明显缓慢，菌丝稀疏、不均、地图斑、发黑、杂菌污染，及时别出，深坪。3 DB42/ T 570- 2009 7.4. 4 菌丝满料后，逐一检我菌种质量，合格品装入专用包装袋内，按批号归类就地储存。7. 5 清场:4-批次栽培种生产完成后，均应进行清场，包括清除生产中的废弃物，作好环境的清洁，将物品归位，并做好清场记录。8 夜苓菌种质量标准与检验8. 1 母种质量标准与检验8. 1. 1 母种质量标准8. 1. 1. 1 菌龄30d:8. 1. 1.2 菌丝色白、均匀、致密、粗壮，夜苓特异香气浓郁:8. 1. 1.3 菌丝体表面可见晶莹的露滴状分泌物:8. 1. 1. 4 菌种试管完整无损，棉集严密，无杂菌污染。8.2. 1 原种质量平、a8. 2. 1. 1 菌龄20M8.2. 1. 2 雨丝生长日子峰，dii1、均匀、致宵，爬些现象|归，有根状索)L佳:8.2. 1. 3 fil丝休失瑞可见乳I已jfEi币j状分泌物，获苓特异香气浓郁:8.2.1.4 两种瓶(袋完耕无损，无杂菌污染。8. 2. 2 以手中检验8.2.2. 1 按照袄苓且非lJ.Y1句:一标准，在臼然)卡采取门!IJ1J去，于i养过和中经常观察轩菌种瓶(袋)内|坷丝生l投夭纣，川!8. 2. 2. 2 f儿L发现见I市囱￥目i丝长j比;斗-iolU州V圳I丐亏主二:严主J芝飞r挝，:亘自丝稀疏、不均、地图斑、;发4住位i之;段黑:、?污5亏.染f莉者1，阿1巧丐飞王a及时易却别IJ出:8.2.2. 3 丝:1fl.I(袋)1与长满J，:r:J-j共质最标准逐井l-L(袋)检企，合格料方可转入卢卡应工序，作为1*苓，l:J;J击和l生产的不1源:8. 3 栽培种质量标准与检验8.3. 1 &t种质材标准8.3.1. 1 菌龄30d60cl:8. 3. 1. 2 -Ui丝di(1致密，生长均匀，布满出i袋内:8.3.1.3 菌丝体尖圳可见lull当;:l市状分i必物，袄苓特异乎?二气浓郁;8. 3. 1. 4 菌袋元耕无f&损，由丝允11均由和l袋(汹不1)，手iW种袋，感觉坚实，无松巾，无软化。茵丝无，&、发照，地!组肉，无软化，无f实体UJ见，无杂呈l污染。8. 3. 2 栽均种检验8.3.2. 1 按照袄苓就站和l 质击标准，i:自然JC;卡采取门训沽，于菌种培养J1和中经常观察各菌种袋内肉丝生长情况;4 DB42/ T 570-2009 8. 3. 2. 2 发现菌丝体发黄、发黑、不均、地图斑、污染者，应及时剔出:8. 3. 2. 3 逐一检查各菌种袋，应符合上述质量标准，且菌丝长满菌种袋(满料).菌丝无倒伏现象。手握菌种袋，感觉坚实，无松散，无软化;9 菌种的储存与标签9. 1 母种、原种、栽培种的标签内容均应符合湖北省食用菌菌种管理办法中有关规定。9.2 母种储存9.2. 1 母种检验合格后，应置于4C冰箱保存条件下进行储存。9. 2. 2 母种储存保质期的菌龄30d。9. 3 原种储存9.3. 1 原种检验合格后，应及时使用，或置于10C25C的常温培养室内储存。9. 3. 2 储存期间应按时进行抽样检查，及时别出不合格品，并认真作好菌种储存及抽样检查记录。9. 3. 3 原种储存保质期的菌龄45d。9. 4 栽培种储存9.4. 1 栽培菌种检验合格后，应及时使用，或置于10C25C的常温培养室内储存。9.4.2 储存时，应将菌种按一定数量装入专用包装袋中，单层置于货架或垫板上，码放整齐，不得叠放，以免使菌种局部泪度过高，导致衰亡。9.4. 3 储存期间应按时进行抽样检ft.及时剔出不合格品，并认真作好菌种储存及抽样检查记录。9.4.4 栽培商种储存保质期的商龄60d。5 。CON-ohmHN寸团由