广药药理实验中枢神经兴奋药LD50实验报告.doc

药理学实验论文

中枢神经系统兴奋药对小鼠急性毒性研究

二级学院
药科学院
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指导教师

2015年12月

中枢神经系统兴奋药对小鼠急性毒性研究
摘要：从未知药物筛选出具有中枢神经兴奋作用的目标药物，通过给药注射，观察药物对小鼠的兴奋作用，测定其LD50，以评价该药物的有效性和安全性。方法：预实验：取三只小鼠，腹腔注射母液，筛选出目标药物，再将15只小鼠随机分为5组，测定LD0和LD100。正式实验：将50只小鼠随机分成5组，按计算的剂量注射稀释好的药物，观察小鼠死亡情况，以测定LD50。

关键词：LD50；中枢兴奋药

7

目录

1 前言 2
2 材料与方法 3
2.1 实验材料 .....3
2.2 实验方法........................................................................................................3
2.2.1预实验.............................................................................................................3
2.2.2正式实验.........................................................................................................4
2.3 数据处理方法.................................................................................. ................4
3 实验结果................................................................................................................5
4结论 6
参考文献 7

1 前言
作用于中枢神经系统的药物主要影响递质和受体而发挥作用，而其药理效应主要表现是中枢神经系统功能的增强或抑制；通过观察动物的药物反应，可初步区分动物的特性。通过药物LD50的测定，分析其安全性。
药物给药剂量与动物死亡率呈正态分布。以对数剂量为横坐标，累加死亡率为纵坐标作图，可得到一对称S型曲线，其两端较平坦，中间较陡，说明两端处剂量稍有变化时死亡率的改变不易表现出来，在50%死亡率处斜率最大，该处剂量稍有变动时，其死亡率变动最明显，即最灵敏，在技术上也最容易准确测得，故常选用LD50值作为反映药物毒性的指标。若将死亡率换算成几率单位，则对数剂量与几率单位呈直线关系，用数学方法可拟合其回归方程式，可精确地计算LD50及引起任何死亡率的剂量及相关数据。
2 材料与方法
2.1 实验材料
动物：
动物名称：小鼠
体重范围：18~26g
动物来源：广东药学院实验动物中心
药品与试剂：
名称：中枢神经系统药物、生理盐水
来源：广东药学院药科学院药理系

2.2 实验方法
2.2.1 预实验
确定实验药物，大致探索该药物的LD100和LD0,以便正式实验时确定剂量。

实验过程：
1、 确认主题，准备预实验方案，并在课前做方案汇报与探讨可能出现、需要注意的问题。
2、 称量所取的18只小鼠，记录其体重。
3、 从18只小鼠中随机抽取3只小鼠，按0.1ml/10g的给药量分别注射实验提供的三瓶母液，筛选出目标药物中枢兴奋药。
4、 将剩余小鼠分为5组，每组3只，进行药物兴奋致死量研究。根据小鼠体重以0.1ml/10g的剂量注射，以母液浓度为100%，初定了20%、40%、60%、80%、100%的五组不同浓度兴奋药。为避免所设置的最低浓度过高，从最低浓度开始试验，依次提高注射药物浓度，并根据实际情况调整浓度（如若在40%浓度小鼠全部死亡，则根据实际情况从新调整注射浓度）。在30分钟内观察小鼠的反应并记录死亡情况。
5、 通过实验现象的观察，得出了我们组中枢兴奋药的LD0和LD100的所在范围。

2.2.2 正式实验
按照实验方案进行完成所选药物的LD50测定
实验剂量计算：r=(Dmin/Dmax)^(1/(n-1))
根据预实验结果和正式实验剂量组数设计，计算出正式实验的剂量公比r为0.87,则各组剂量为：
1）262.5mg/kg
2) 262.5*0.87=228.38mg/kg
3) 262.5*0.87^2=198.6mg/kg
4) 262.5*0.87^3=172.86mg/kg
5)262.5*0.87^4=150.39mg/kg

实验过程：
1、 取小鼠50只，称重，标记，随机分为5组，每组10只，进行下一步实验；
2、 各组小鼠按0.1ml/10g给药量分别腹腔注射相应浓度药液，立即记录时间，观察小鼠情况，并在30分钟后记录各组死亡数量。
3、 根据实验所得数据，计算LD50

2.3数据处理方法
实验结果将小鼠死亡情况，药物浓度等输入LD50数据处理程序,即可求得回归方程与LD50

3 结果
表1 预实验筛选药物情况
组别
编号
现象
药物
1
2
3
1
2
3
小鼠无任何异常
小鼠跳动，呼吸加快，最后死亡
小鼠安静，嗜睡，最后死亡
生理盐水
兴奋药
抑制药

表2 预实验实验结果
组别
剂量(mg/kg)
现象
死亡率
1
600
小鼠兴奋，惊厥，最后死亡
100%
2
450
小鼠兴奋，惊厥，最后死亡
100%
3
375
小鼠兴奋，惊厥，最后死亡
100%
4
262.5
小鼠兴奋，惊厥，最后死亡
100%
5
150
小鼠跳动，呼吸加快
0%

表 3 正式实验实验结果
组别
剂量
现象
死亡率
1
262.5
小鼠跳动，呼吸加快，最后死亡
100%
2
228.38
小鼠跳动，呼吸加快，最后部分死亡
30%
3
198.69
小鼠跳动，呼吸加快，最后部分死亡
40%
4
172.86
小鼠跳动，呼吸加快
0%
5
150.39
小鼠跳动，呼吸加快
0%

表4 中枢实验药LD50测定
组别
剂量（mg/kg）
对数剂量（X）
动物数（只）
死亡动物数（只）
死亡率（%）
几率单位（Y）
及95%可信度
1
262.5
2.419
10
10
100
33.000
=185.6062mg/kg
95%可信度：

2
228.38
2.359
10
3
30
4.480
3
198.69
2.298
10
4
40
4.750
4
172.86
2.238
10
0
0
0.003
5
150.39
2.177
10
0
0
0.003
4结论
预实验中测得引起死亡的最大无效量为150mg/kg,最小有效量为262.5mg/kg。
正式实验后求得该中枢神经系统抑制药的LD50为185.6115mg/kg。

参考文献
[1] 黄胜炎 作用于中枢神经系统药物新制剂 上海医药 2008年09期 （第31-33页）
[2] 谭毓治 药理学实验 人民卫生出版社 广州 2008年12月 （第89-90 136-137页）
3、通过活动，使学生养成博览群书的好习惯。
B比率分析法和比较分析法不能测算出各因素的影响程度。√
C采用约当产量比例法，分配原材料费用与分配加工费用所用的完工率都是一致的。Ｘ
C采用直接分配法分配辅助生产费用时，应考虑各辅助生产车间之间相互提供产品或劳务的情况。错
C产品的实际生产成本包括废品损失和停工损失。√
C成本报表是对外报告的会计报表。×
C成本分析的首要程序是发现问题、分析原因。×
C成本会计的对象是指成本核算。×
C成本计算的辅助方法一般应与基本方法结合使用而不单独使用。√
C成本计算方法中的最基本的方法是分步法。X
D当车间生产多种产品时，“废品损失”、“停工损失”的借方余额，月末均直接记入该产品的产品成本
中。×
D定额法是为了简化成本计算而采用的一种成本计算方法。×
F“废品损失”账户月末没有余额。√
F废品损失是指在生产过程中发现和入库后发现的不可修复废品的生产成本和可修复废品的修复费用。Ｘ
F分步法的一个重要特点是各步骤之间要进行成本结转。(√)
G各月末在产品数量变化不大的产品，可不计算月末在产品成本。错
G工资费用就是成本项目。(×)
G归集在基本生产车间的制造费用最后均应分配计入产品成本中。对
J计算计时工资费用，应以考勤记录中的工作时间记录为依据。(√)
J简化的分批法就是不计算在产品成本的分批法。(×)
J简化分批法是不分批计算在产品成本的方法。对
J加班加点工资既可能是直接计人费用，又可能是间接计人费用。√
J接生产工艺过程的特点，工业企业的生产可分为大量生产、成批生产和单件生产三种，X
K可修复废品是指技术上可以修复使用的废品。错
K可修复废品是指经过修理可以使用，而不管修复费用在经济上是否合算的废品。Ｘ
P品种法只适用于大量大批的单步骤生产的企业。×
Q企业的制造费用一定要通过“制造费用”科目核算。Ｘ
Q企业职工的医药费、医务部门、职工浴室等部门职工的工资，均应通过“应付工资”科目核算。Ｘ
S生产车间耗用的材料，全部计入“直接材料”成本项目。Ｘ
S适应生产特点和管理要求，采用适当的成本计算方法，是成本核算的基础工作。(×)
W完工产品费用等于月初在产品费用加本月生产费用减月末在产品费用。对
Y“预提费用”可能出现借方余额，其性质属于资产，实际上是待摊费用。对
Y引起资产和负债同时减少的支出是费用性支出。X
Y以应付票据去偿付购买材料的费用，是成本性支出。X
Y原材料分工序一次投入与原材料在每道工序陆续投入，其完工率的计算方法是完全一致的。Ｘ
Y运用连环替代法进行分析，即使随意改变各构成因素的替换顺序，各因素的影响结果加总后仍等于指标的总差异，因此更换各因索替换顺序，不会影响分析的结果。(×)
Z在产品品种规格繁多的情况下，应该采用分类法计算产品成本。对
Z直接生产费用就是直接计人费用。X
Z逐步结转分步法也称为计列半成品分步法。√

A按年度计划分配率分配制造费用，“制造费用”账户月末(可能有月末余额/可能有借方余额/可能有贷方余额/可能无月末余额)。
A按年度计划分配率分配制造费用的方法适用于(季节性生产企业)