DB37∕T 4177—2020 蔬菜中4-羟基百菌清残留量的快速测定 液相色谱-串联质谱法(山东省).pdf

TCS 65.100 G 25 DB37 山东省山巳ET且，万标准DB 37/T 4177-2020 蔬菜中4-挂基百菌清残留量的快速测定液相色谱-串联质谱法Determination of 4-hydroxychlorothalonil residues in vegetables -Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 2020 -09 -30发布2020 -10-30实施山东省市场监督管理局发布目IJ1=1 本标准按照GB!T1. 1-2009给出的规则起草。本标准由山东省农业农村厅提出井组织实施。本标准由山东省农业标准化技术委员会种植业标准化分技术委员会归口。本标准起草单位:山东省农业环境保护和农村能源总站。本标准主要起草人:吴成、王吉、赵志强、于富昌。DB37/T 4177-2020 DB37/T 4177-2020 蔬菜中4-1，圣基百菌清残留量的快速测定液相色谱-串联质谱法1 范围本标准规定了蔬菜中4一起基百菌清(参见附录的残留量液相色谱一串联质谱测定方法。本标准适用于蔬菜中4起基百菌洁残留量的快速测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不住日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 2763 食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB!T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理试样用乙睛匀浆提取，盐析离心后，取上清液，过滤后用j夜相色谱一串联质谱仪检测，外标法定量。4 试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为色谱纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。4.1 试剂4. 1. 1 乙睛(C81CN，IS 05-8) 0 4.1.2 甲醇(C810H，67-56-1) 4.1.3 甲因受(CH202，64-18-6)。4.1.4 醋酸按(C7N02，631-61-8)。4.1.5 氧化制(NaCl，7647-14-5) ，分析纯，14)C烘烤4ho 4. 2 溶液自己制0.1%甲酸+5mmol/L醋酸锻水溶液:称取0.385g醋酸接于500ll:L烧杯中，用水充分溶解后，准确加入1mL甲酸，将上述溶液转移至1000mL容量瓶中，用水定容，现用现自己。4. 3 标准品4一起基百菌洁标准品:纯度二三98%，标准品信息参照附录A。4.4 标准溶液自己制4.4.1 标准储备溶液DB37/T 4177-2020 准确称取适量(精确至O.lmg)4在基百菌洁标准品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成1000mg/L的标准储备洛液(或购买有证标准储备溶液), 0 oC4 oC保存，保存期为6个月O4.4.2 中间标准溶液准确吸取适量的标准储备溶液(4.4.1)，用甲醇稀释配制成10mg/L的4控基百菌清中间标准溶液，o oC4 oC保存，保存期为2周。4.4.3 标准工作溶液准确吸取适量的中间标准溶液(4.4.2)，用空白样品基质溶液稀释配制成所需浓度的标准工作溶液，现用现配。4.5 材料微孔滤膜:有机系，O. 22 IJ mo 5 仪器和设备5. 1 液相色谱一串联质谱仪:配有电喷雾负高于源(ESr)。5. 2 分析天平:感量分别为O.OOOOlg和0.01go 5. 3 组织捣碎机。5.4 旋涡混合器。5.5 均质器:转速不低于15000r/mino 5. 6 高l;机:转速不低于5000r/mino 6 试样制备蔬菜样品取样部位按GB2763的规定执行。对于个体较小的样品，取样后全部处理;对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理:对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不|可部位切取小片或截成小段后处理:取后的样品将其切醉，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀桨，放入洁净的样品盒内，密封并做好标记。将样品于180C以下冷冻保存。7 分析步骤7. 1 提取称取15.0g试样(精确至0.1g)于100mL离，中管中，加入30mL乙脯，用均质器在12000r/min匀浆提取2min，加入6g氧化辛肉，再振荡提取1mi丑，4200 r/min离心5mi丑，取上;青拮;约2mL，用0.22f1m滤膜过滤，待测。7. 2 测定7.2. 1 液相色谱一串联质谱参考条件参考条件如下:a) 色谱柱Shim-packXR-ODSIII色谱柱，50mmX2.0mm(i.d.)，1.6IJm，或相当者:2 DB37/T 4177-2020 b) 流动相A为0.1%甲酸+5mmol/L醋酸按水溶液(4.2), B为甲醇，梯度洗肮程序见表1;流速O.35 mL/min; c) 柱温400C;d) 进样体积10.0 IJ L; e) 扫描方式:负离子模式:f) 检测方式:多反应监测(MRM)，多反应监测条件参照附录B;g) 加热块温度4000C;h) 脱溶剂管(DL)温度250C; i) 干燥气(N2)流速15.0L/min，纯度二三99.999%; j) 雾化气(N2)流速3.0L/min，纯度二:99.999%; k) 电喷雾负离子源(ESr-) 接口电压-3.5kV; 1) 检测器电压1.74kV; m) 碰撞气(Ar)压力0.23MPao 表1梯度洗脱程序时间A/% tnln O. 5 90 2. 0 50 5.0 50 9. 0 5 11. 5 5 13.0 90 B/% 10 50 50 95 95 10 注:以上质i著条件是在SHIMADZULCMS-8040质谱仪上完成的，列出试验用仪器型号仅是为了提供参宅，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。7. 2. 2 定性测定被测试样中4一挂基目菌;青色普峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在:!:2. 5 %之内O在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与基质标准工作溶液相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，4捏基百茵洁的质谱定量和定性高于均出现，而且同一检测批次，样品中4一起基百菌洁的定性高于和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的基质标准工作溶液相比，其允许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在4荒基百菌洁。相对离子丰度允许相对偏差7.2.3 定量测定表2定性时相对离子丰度的最大允许偏差50% :1:20 % 20%至50% :1:25 % 10 :至20% :1:30 % 运10% :1:50 % 本方法采用外标法单定量高于对定量测定，定量用标准溶液采用基质标准工作溶液。在仪器最佳工作条件下，对基质标准工作溶液进样，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液3 DB37/T 4177-2020 中4究基百菌清响应值均应在仪器测定的线性范围。本方法的4起基百菌洁标准物质多反应监测色谱图参照附录A，质谱图参照附录ca7. 3 空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。7.4 平行试验按以上步骤对同一试样进行平行测定。8 结果计算和表述液相色谱一串联质谱测定结果可由计算机按外标法白动计算，也可按式(1)计算:xV =一一一. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . (1) m 式中:一一质量分数，指试样中4一起基百菌清残留量，单位为毫克每千克Cmg/kg); 从标准工作曲线上得到的试样中4挂基百菌洁的质量浓度，单位为毫克每升(mg/L)V一一提取溶剂总体积，单位为毫升CmL)m 试样的质量，单位为克Cg)计算结果应扣除空白值，计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留两位有效数字，含量超过1mg/kg时保留三位有效数字。9 精密度9. 1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值(百分率)，应符合附录E的要求。9. 2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差恒与其算术平均值的比值(百分率)，应符合附录F的要求。10 定量限和回收率10. 1 定量限本方法的定量限CLOQ)参照附录A。10.2 回收率当添加水平为LOQ、5XLOQ、10XLOQS寸添加回收率参照附录004 DB37/T 4177-2020 附录A(资料性附录)4-挂基百菌清中英文名称、分子式、CAS号、保留时间、定量限和标准物质多反应监测色谱图4一起基百菌请中英文名称、分子式、CAS号、保留时间和定量限，参照表A.1。标准物质色谱图，参照、图A.L表A.14-挂基百菌清中英文名称、分子式、CAS号、保留时间和定量限中文名称| 英文名称| 分子式CAS . 保留时间mln 4在基百菌清I4-hydroxych1orotha1oni 1 I CHHCLN,O 28343-61-5 6. 91 12回10田7回500 2丑。气、一-产-2.0 2.5 3.0 二54.0 4.5 50 55 6.0 毡岳7.0 7.5 8.0 8.5 图A.1 4-挂基百菌清标准物质多反应监测色谱图9.0 定量限mg/kg o. 01 9.5 mln 5 DB37/T 4177-2020 附录B(资料性附录)4-挂基百菌清监测离子对、碰撞能量和碎裂电压4起基百菌j青监测离于对、碰撞气能量和醉裂电压，参照表B.1o表B.1 4-挂基百菌清监测离子对、碰撞能量和碎裂电压序号化合物名称电离模式母离子子离子Ql!V CE/V Q3/V 相对离于强度/%1 175* 27 25 29 4注基百商j青245 71.8 210 11 25 12 注代表负离子模式*指定量离子Q1和Q3分别指质谱仪碰撞池前端和后端四极杆预杆偏置电压CE指碰撞;也电压相对离子强度指定性参宅离子与定量离于强度比。6 DB37/T 4177-2020 附录c(资料性附录)4-挂基百菌清标准物质多反应监测(MRM)质谱图4一起基百菌清标准物质多反应监测CMRM)质谱图，参照国C.1o叫道Ill!雄?础:Irn到节123 4四寸mm 00 700 000 w。 3田2田100 .0 图c.1 同;E U 2 七d E E d 2 d J k U 田T I;:J r.i由t囚rj由E囚艺由I.i1.1 li ru 4-挂基百菌清标准物质多反应监测(MRM)质谙图7 DB37/T 4177-2020 附录D(资料性附录)4-挂基百菌清在6种蔬菜中的添加回收率4起基百菌请在6种蔬菜中的添加回收率，参照表D.1o表D.1 4-挂基百菌清在6种蔬菜中的添加回收率化合物名称添加水平菠菜豆豆番而甘JR黄瓜韭菜mg/kg % % % % % % O. 01 7086 7391 8693 7386 8091 7191 4在基百菌清O. 05 8096 8092 7696 7688 8092 8092 O. 1 8898 8298 7896 78100 7891 7987 8 DB37/T 4177-2020 附录E(规范性附录)实验室内重复性要求实验室内重复性要求如表E.1所示。表E.1 实验室内重复性要求被测组分含量精密度mg/kg % 三三O.001 36 0.001运0.0132 0.01:0三O.1 22 0.1:0三l18 1 14 9 DB37/T 4177-2020 附录F(规范性附录)实验室间再现性要求实验室间再现性要求如表F.1o表F.1 实验室间再现性要求被测组分含量精密度mg/kg % O. 001 54 0.0010.01 46 0.01运O.1 34 0.1运125 1 19 10