1、ICS 65. 020. 20 CCS B 05 0044 广东省由巳ET且,方标准D844/T 2323-2021 五指毛桃组织培养育苗技术规程Code of practice on tissue cu1ture of Ficus hirta 2021 - 07 -28发布2021 - 10 -28实施广东省市场监督管理局发布DB44/T 2323-2021 目IJ1=1 本文件按照GB/T1.1-2020 标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由广东省林业局提出、归口井组织实施。本文件起草单位:梅州1m农林科学院林业研究所。本文件主要起草人:黄锦荣、朱昔娇、唐
2、国涛、张凤、张冬生、蔡梅玲、范秀琼、简耀彩、谢金兰、范剑明、甘奕挺。DB44/T 2323-2021 五指毛桃组织培养育苗技术规程1 范围本文件规定了五指毛桃(FicushiTta Vahl)组织培养的外植体、瓶苗培育、瓶苗移植、档案管理等内容。本文件适用于五指毛桃组培苗培育。2 规范性亏|用文件下列文件中的内容通过文中的规范性寻|用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件:不注日期的寻|用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。LY/T 1770 按树无性系组培快繁技术规程LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程LY/T 2752 林木
3、轻基质无纺布容器育苗技术规程3 术语和定义LY/T 1770和LY/T1882界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3. 1 五指毛桃Ficus hirta Vahl 为桑科(Moraceae)榕属(Ficus)粗叶榕(Ficus hirta Vahl)中五裂叶型的植株,俗名五指毛桃、掌叶榕、五指牛奶等,其干燥根昧甘、辛,性平,有去红肿,桔风湿,益气固表等功效。4 外中直体4. 1 采集选取无病虫害、健壮的当年生嫩枝为外植体。需在连续3d晴天后来集。4. 2 预处理切取长约2cm3 cm带顶芽茎段,置入干净玻璃瓶中,注入适量洗涤剂和水清洗茎段表面,用自来水反复冲洗干净。4. 3 灭菌在超净工作
4、台上用75%乙醇浸泡10s15 s无菌水冲洗1次2次,然后用添加1滴2滴吐温80的0.1%HgC1,浸泡并不断摇动,灭菌14min,用无菌水冲洗4次6次。5 瓶苗培育D844/T 2323-2021 5. 1 培养基5. 1. 1 配制初代培养基为MS+6-BA1.0 mg/L + IBA (0. 1 mg/LO. 5 mg/L) +庶糖30g/L,增殖培养基为MS+6-BA(0.5mg/L 1. 5 mg/L)十IBA(0. 1 mg/LO. 5 mg/L)十庶糖30g/L,生根培养基为1!4MS(大量元素1!4)+IBA(1.0 mg/L2. 0 mg/L)+NAA(O. 1 mg/LO.
5、 5 mg/L)+ACO. 5 g/甘肃糖20g/L,添加卡拉胶均为6.5g/L,而值调至5.86. 20 5.1.2 页菌和存放参照LY/T1770和LY/T1882相关条款执行。5. 2 培养条件培养室温度26C:!:2 C,相对湿度65%70%,光照强度10001x2000 1x,每天光照时长10h 12 h。及时发现并清除污染材料,定期清洁培养室。5. 3 初代培养在超净工作台上将消毒好的带顶芽茎段接种在初代培养基中,每瓶接种l段,培养30d40 d,可诱导顶芽萌发,形成单芽或丛芽。5.4 增殖培养在超净工作台上将初代培养诱导出的幼芽接种在增殖培养基中培养,每瓶接种4(个或丛)5 (个
6、或丛),培养周期30d35 do从外植体开始,培养时间超过4年,或继代培养超过40代,宜重新采集外植体更新培养材料。5. 5 生根培养在超净工作台上从增殖培养获得的芽苗中,切取具3片以上舒展叶片、高2.5 cm3. 5 cm的芽苗,接种在生根培养基中培养,培养周期为25d30 do 6 瓶苗移植6. 1 基质与容器采用轻型基质(基质成分参照、LY/T2752相关条款执行)或黄心士作基质,以塑料薄膜袋或无纺布袋为容器,规格为8cmX 10 cm。移植前2d用50%的多菌灵可湿性粉剂1000倍液淋透基质杀菌。6. 2 瓶苗炼苗当瓶苗生根率达80%90%,根长O.5 cm1. 5 cm时,可在炼苗棚
7、内进行炼苗,炼苗10d15 d, 后将瓶盖拧开再炼苗3d5 d。6. 3 洗苗将经过炼茵的瓶苗和培养基一起倒入洁水中,洗净培养基,不要损伤幼苗。选择生长正常、叶片舒展、根系完整、根茎结合处无愈伤组织的芽苗备用。2 DB44/T 2323-2021 6.4 移植移植时先在基质中掘个小孔,将芽苗植入,用基质完全覆盖小面根音节,不要按压基质,以防压断幼根,避免夏季高温时移植。6.5 苗期管理6.5.1 遮荫移植后用透光度25%的遮阳网遮荫,阴天可不遮盖,30 d后可移除遮阳网。6.5.2 水分移植完成后即淋透水,以后做到见干见水,保持基质湿润。6.5.3 养分小面移植10d左右开始长新叶,可以薄施肥
8、,用1g. L-1的复合肥CN-P20,-K,O=15-15-15)水溶液淋施,7 d10 d一次:移植30d后,逐渐增加到用3g L-1的复合肥CN-P20,-K,O=15-15-15)水溶液淋施,10 d15 d一次。6.5.4 除草以除早、除小、除了为原则,及时连根拔除杂草。6.6 苗木出圃苗高二?:20 cm,地径二三O.3 cm,生长正常,无损伤,无病虫害的苗木可以出圃。7 有害生物防治7. 1 病害苗期偶有炭瘟病危害,发病后应及时清除病叶,集中焚烧,阻止病源传播,可用50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液喷洒防治。7.2 虫害苗期偶有卷叶自我或粘虫的幼虫危害嫩梢和嫩叶,少量危害时人工捕杀,并用黑光灯或糖醋液诱杀成虫。8 档案按LY/T1770相关条款执行。3