分类与命名埃希菌属.ppt

孙景勇孙景勇肠杆菌科肠杆菌科 http:/ 概述概述1 大肠埃希菌大肠埃希菌2上海交通大学医学院上海交通大学医学院概述概述 分类与命名分类与命名1 临床意义临床意义 2 生物学特性生物学特性 3 鉴定原则鉴定原则 4上海交通大学医学院上海交通大学医学院概述概述v肠杆菌科（肠杆菌科（EnterobactericaeaeEnterobactericaeae）是栖居在人和动物的是栖居在人和动物的肠道内的一大群形态、生物学性状相似的革兰阴性杆菌。肠道内的一大群形态、生物学性状相似的革兰阴性杆菌。v广泛分布在自然界中，包括植物、土壤、水以及人和动广泛分布在自然界中，包括植物、土壤、水以及人和动物的肠道中，多数是正常人肠道菌群的重要成员，在机物的肠道中，多数是正常人肠道菌群的重要成员，在机体的其他部位相对较少。体的其他部位相对较少。上海交通大学医学院上海交通大学医学院肠杆菌科（肠杆菌科（EnterobactericaeaeEnterobactericaeae）v包括包括致病性较强、能引起人类传染病致病性较强、能引起人类传染病的菌属：鼠疫耶尔的菌属：鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌森菌、伤寒沙门菌v引起人类腹泻和肠道感染引起人类腹泻和肠道感染的菌属（四个）的菌属（四个）v埃希菌属埃希菌属v志贺菌属志贺菌属v沙门菌属沙门菌属v耶尔森菌属耶尔森菌属上海交通大学医学院上海交通大学医学院与医院感染有关的条件致病菌与医院感染有关的条件致病菌v枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属v克雷伯菌属克雷伯菌属v肠杆菌属肠杆菌属v泛菌属泛菌属沙雷菌属沙雷菌属变形杆菌属变形杆菌属普罗威登菌属普罗威登菌属摩根菌属摩根菌属上海交通大学医学院上海交通大学医学院正常菌群正常菌群与与条件致病菌条件致病菌v有许多细菌既是肠道的有许多细菌既是肠道的正常菌群正常菌群，也是，也是条件致病菌条件致病菌。v在一定的条件下，能引起机会感染或二重感染。在一定的条件下，能引起机会感染或二重感染。v1 1）机体抵抗力下降）机体抵抗力下降v2 2）寄居部位的改变）寄居部位的改变v3 3）肠道菌群失调）肠道菌群失调v约有约有4040种以上肠杆菌科的菌种可以在临床标本中出现。种以上肠杆菌科的菌种可以在临床标本中出现。上海交通大学医学院上海交通大学医学院一、分类与命名一、分类与命名v肠杆菌科种类繁多，历史上分类和命名较为混乱。肠杆菌科种类繁多，历史上分类和命名较为混乱。v近近年年来来采采用用生生化化反反应应、抗抗原原分分析析、核核酸酸杂杂交交和和序序列列分分析析技技术术来来进进行行分分类类。现现已已经经发发现现肠肠杆杆菌菌科科3131个个菌菌属属、120120多多个个菌菌种种（见见表表）。肠肠杆杆菌菌科科细细菌菌的的DNA DNA G GC C molmol在在39395959之间。之间。上海交通大学医学院上海交通大学医学院表表8-1 8-1 肠杆菌科细菌的肠杆菌科细菌的3131个菌属（按英文字母排列）个菌属（按英文字母排列）编号编号属名属名1 1巴特维菌属巴特维菌属 （BudviciaBudvicia）；）；2 2布丘菌属布丘菌属 （ButtiauxellaButtiauxella）；）；3 3西地西菌属（西地西菌属（CedeceaCedecea）；）；4 4枸橼酸杆菌属（枸橼酸杆菌属（CitrobacterCitrobacter，柠檬酸杆菌属）；，柠檬酸杆菌属）；5 5爱德华菌属（爱德华菌属（EdwardsiellaEdwardsiella）；）；6 6肠杆菌属（肠杆菌属（EnterobacterEnterobacter）；）；7 7欧文菌属（欧文菌属（ErwiniaErwinia）；）；8 8埃希菌属（埃希菌属（EscherichiaEscherichia）；）；9 9爱文菌属（爱文菌属（EwingellaEwingella）；）；上海交通大学医学院上海交通大学医学院1010哈夫尼亚菌属（哈夫尼亚菌属（HafniaHafnia）；）；1111克雷伯菌属（克雷伯菌属（KlebsierllaKlebsierlla）；）；1212克卢瓦菌属（克卢瓦菌属（KluyveraKluyvera）；）；1313勒克菌属勒克菌属 （LeclerciaLeclercia）；）；1414勒米诺菌属（勒米诺菌属（LeminorellaLeminorella，19851985年）；年）；1515穆勒菌属（穆勒菌属（MoellerellaMoellerella，Hickman-BrennerHickman-Brenner，19841984年）；年）；1616摩根菌属（摩根菌属（MorganellaMorganella）；）；1717肥杆菌属肥杆菌属 （ObesumbacteriumObesumbacterium）；）；1818普拉奇菌属普拉奇菌属 （PragiaPragia）；）；1919泛菌属（泛菌属（PantoeaPantoea，GaviniGavini et al et al，19891989）；）；2020光杆状菌属光杆状菌属 （PhotorhabdusPhotorhabdus）；）；上海交通大学医学院上海交通大学医学院2121变形杆菌属（变形杆菌属（ProteusProteus）；）；2222普城菌属（普城菌属（ProvidenciaProvidencia，普罗威登斯菌属）；，普罗威登斯菌属）；2323兰恩菌属（兰恩菌属（RahnellaRahnella）；）；2424沙门菌属（沙门菌属（SalmonellaSalmonella）；）；2525沙雷菌属（沙雷菌属（SerratiaSerratia）；）；2626志贺菌属（志贺菌属（ShigellaShigella）；）；2727塔特姆菌属（塔特姆菌属（TatumellaTatumella）；）；2828特拉布斯氏菌属（特拉布斯氏菌属（TrabulsiellaTrabulsiella）；）；2929致病杆菌属（致病杆菌属（XenorhabdusXenorhabdus）；）；3030耶尔森菌属（耶尔森菌属（YersiniaYersinia）；）；3131约根菌属（约根菌属（YokenellaYokenella，19851985年，同义名：年，同义名：KosrellaKosrella）上海交通大学医学院上海交通大学医学院概述概述 分类与命名分类与命名1 临床意义临床意义 2 生物学特性生物学特性 3 鉴定原则鉴定原则 4上海交通大学医学院上海交通大学医学院二、临床意义二、临床意义v肠肠杆杆菌菌科科的的细细菌菌可可致致化化脓脓性性疾疾病病、肺肺炎炎、脑脑膜膜炎炎、菌菌血血症症以以及及伤伤口口、泌泌尿尿道道和和肠肠道道的的感感染染。其其中中有有些些细细菌菌是是引引起医院感染的重要病原。起医院感染的重要病原。v本本科科细细菌菌占占临临床床分分离离菌菌总总数数的的5050和和临临床床分分离离的的革革兰兰阴阴性杆菌总数的性杆菌总数的8080，v将将近近5050的的败败血血症症、7070以以上上的的泌泌尿尿道道感感染染和和大大量量的的肠肠道感染由肠杆菌科细菌引起。道感染由肠杆菌科细菌引起。上海交通大学医学院上海交通大学医学院v菌毛或菌毛样结构菌毛或菌毛样结构v荚膜或微荚膜荚膜或微荚膜v外膜蛋白外膜蛋白v内毒素内毒素v外毒素外毒素致病物质致病物质上海交通大学医学院上海交通大学医学院所致疾病所致疾病 v肠道感染肠道感染 腹泻、食物中毒、肠热症腹泻、食物中毒、肠热症v肠道外感染肠道外感染 鼠疫（烈性传染病）、泌尿道感染、鼠疫（烈性传染病）、泌尿道感染、肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症上海交通大学医学院上海交通大学医学院（一）人类肠道外感染（一）人类肠道外感染v除除志志贺贺菌菌外外，许许多多肠肠杆杆菌菌科科细细菌菌均均可可引引起起肠肠外外感感染染，如如大大肠肠埃埃希希菌菌、肺肺炎炎克克雷雷伯伯菌菌、产产酸酸克克雷雷伯伯菌菌、奇奇异异变变形形杆杆菌菌、产产气气肠肠杆杆菌菌、阴阴沟沟肠肠杆杆菌菌、粘粘质质沙沙雷雷菌菌等等均均可可引引起起泌泌尿尿道道、呼吸道、伤口和中枢神经系统的感染，且往往为医院感染。呼吸道、伤口和中枢神经系统的感染，且往往为医院感染。v鼠疫耶尔森菌能引起甲类传染病：鼠疫。鼠疫耶尔森菌能引起甲类传染病：鼠疫。上海交通大学医学院上海交通大学医学院（二）人类肠道感染（二）人类肠道感染v肠杆菌科细菌也是人和动物肠道感染的重要病原。肠杆菌科细菌也是人和动物肠道感染的重要病原。v虽虽然然本本科科中中许许多多细细菌菌均均与与腹腹泻泻有有关关，但但比比较较明明确确的的肠肠道道病病原原菌菌是是肠肠杆杆菌菌科科中中的的埃埃希希菌菌属属、志志贺贺菌菌属属、沙沙门门菌菌属属和耶尔森菌属和耶尔森菌属。v主主要要引引起起各各种种急急、慢慢性性肠肠道道感感染染、食食物物中中毒毒、旅旅行行者者腹腹泻及肠热症等。泻及肠热症等。上海交通大学医学院上海交通大学医学院概述概述 分类与命名分类与命名1 临床意义临床意义 2 生物学特性生物学特性 3 鉴定原则鉴定原则 4上海交通大学医学院上海交通大学医学院三、生物学特性三、生物学特性v肠杆菌科细菌具有以下共同的生物学特性：肠杆菌科细菌具有以下共同的生物学特性：1 1、形形态态特特征征：革革兰兰阴阴性性杆杆状状或或球球杆杆状状、无无芽芽孢孢、多多数数有有鞭鞭毛，能运动，有致病性的菌株多数有菌毛；毛，能运动，有致病性的菌株多数有菌毛；2 2、培培养养特特性性：需需氧氧或或兼兼性性厌厌氧氧，营营养养要要求求不不高高，在在普普通通培培养基和麦康凯培养基上生长良好；养基和麦康凯培养基上生长良好；3 3、生生化化特特性性：发发酵酵葡葡萄萄糖糖（产产酸酸或或产产酸酸产产气气）、触触酶酶阳阳性性、氧化酶阴性、可将硝酸盐还原至亚硝酸盐。氧化酶阴性、可将硝酸盐还原至亚硝酸盐。上海交通大学医学院上海交通大学医学院肠杆菌科的共同特性肠杆菌科的共同特性1.1.形态染色相似形态染色相似 革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌 2.2.培养特性相同培养特性相同 普通培养基上生长良好普通培养基上生长良好 3.3.生化反应活泼生化反应活泼 发酵葡萄糖，发酵葡萄糖，氧化酶阴性，触酶阳性，还原氧化酶阴性，触酶阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐硝酸盐为亚硝酸盐，O/FO/F试验为发酵型。试验为发酵型。4.4.抗原构造复杂抗原构造复杂5.5.抵抗力弱抵抗力弱 6.6.易变异易变异返回返回上海交通大学医学院上海交通大学医学院肠杆菌科细菌与其它革兰阴性杆菌的区别肠杆菌科细菌与其它革兰阴性杆菌的区别试试 验验肠杆菌科肠杆菌科弧菌科弧菌科非发酵菌非发酵菌巴斯德菌巴斯德菌科科葡萄糖葡萄糖发酵发酵发酵发酵氧化或不分解氧化或不分解发酵发酵氧化酶氧化酶形态形态杆状杆状弧状、杆状弧状、杆状杆状杆状球杆状球杆状鞭毛鞭毛周鞭毛或周鞭毛或无无单鞭毛单鞭毛单、丛、周鞭单、丛、周鞭毛或无毛或无无鞭毛无鞭毛上海交通大学医学院上海交通大学医学院氧化酶试验氧化酶试验阳性：紫红色阳性：紫红色 阴性：无色阴性：无色上海交通大学医学院上海交通大学医学院硝酸盐还原试验硝酸盐还原试验阳性：红色阳性：红色 阴性：淡黄色阴性：淡黄色 上海交通大学医学院上海交通大学医学院氧化型氧化型发酵型发酵型产碱型产碱型O-FO-F试验试验上海交通大学医学院上海交通大学医学院抗原构造抗原构造v复杂复杂v包括菌体（包括菌体（O O）抗原、鞭毛（）抗原、鞭毛（H H）抗原和表面抗原）抗原和表面抗原3 3种。种。vO O抗抗原原：是是细细菌菌细细胞胞壁壁的的成成分分，其其化化学学成成分分是是脂脂多多糖糖。脂脂多多糖糖分分子子是是一一个个以以核核心心多多糖糖为为中中心心的的三三层层结结构构：内内侧侧是是脂脂类类A A，为为内内毒毒素素的的毒毒性性成成分分；外外侧侧是是由由重重复复的的低低聚聚糖糖组组成的特异多糖，决定成的特异多糖，决定O O抗原的特异性。抗原的特异性。上海交通大学医学院上海交通大学医学院vH H抗抗原原：是是不不耐耐热热的的蛋蛋白白质质抗抗原原，由由鞭鞭毛毛蛋蛋白白多多肽肽链链上上的的氨氨基基酸酸序序列列和和空空间间构构型型决决定定H H抗抗原原的的特特异异性性。表表面面抗抗原原是是包包绕绕在在O O抗抗原原外外侧侧的的不不耐耐热热的的多多糖糖抗抗原原，由由粘粘液液或或荚荚膜膜多多糖的结构决定表面抗原的特异性。糖的结构决定表面抗原的特异性。v表表面面抗抗原原：在在不不同同菌菌属属中中有有不不同同的的名名称称。O O抗抗原原和和H H抗抗原原是是肠肠杆杆菌菌科科血血清清学学分分群群和和分分型型的的依依据据。表表面面抗抗原原存存在在时时可可阻阻断断O O抗抗原原与与相相应应抗抗体体之之间间的的反反应应，加加热热处处理理能能消消除除阻阻断作用。断作用。上海交通大学医学院上海交通大学医学院肠杆菌科细菌抗原模式肠杆菌科细菌抗原模式图图上海交通大学医学院上海交通大学医学院抵抗力抵抗力v不强不强v加热加热6060、30min30min即被杀死，即被杀死，v不不耐耐干干燥燥，对对般般化化学学消消毒毒剂剂如如漂漂白白粉粉、酚酚、甲甲醛醛和和戊戊二醛等均敏感。二醛等均敏感。v对低温有耐受力。对低温有耐受力。v耐耐胆胆盐盐，并并在在一一定定程程度度上上能能抵抵抗抗染染料料的的抑抑菌菌作作用用，此此特特性已被用于制作肠道选择培养基。性已被用于制作肠道选择培养基。上海交通大学医学院上海交通大学医学院概述概述 分类与命名分类与命名1 临床意义临床意义 2 生物学特性生物学特性 3 鉴定原则鉴定原则 4上海交通大学医学院上海交通大学医学院四、鉴定原则四、鉴定原则 v（一）检验程序：见图（一）检验程序：见图8-18-1。v（二）标本采集（二）标本采集1 1肠外标本肠外标本 采采自自不不同同的的感感染染部部位位如如血血液液、体体液液、呼呼吸吸道道、伤伤口口、尿液及其他各种标本。尿液及其他各种标本。2 2肠道标本肠道标本 宜宜在在疾疾病病的的早早期期留留取取新新鲜鲜的的粪粪便便标标本本，挑挑取取其其中中的的脓血和粘液部分进行粪便培养。脓血和粘液部分进行粪便培养。上海交通大学医学院上海交通大学医学院注意：注意：培养应在培养应在2h2h内进行，以利于志贺菌等的检出。内进行，以利于志贺菌等的检出。如如不不能能及及时时培培养养应应将将沾沾有有标标本本的的棉棉拭拭插插入入运运送送培培养养基基或或甘甘油油缓缓冲冲盐盐水水，冷冷藏藏待待检检。对对儿儿童童或或团团体体健健康康体体检时可用肛拭采集标本。检时可用肛拭采集标本。上海交通大学医学院上海交通大学医学院 标本标本 直接检查直接检查 分离培养：选择鉴别培养基分离培养：选择鉴别培养基（涂片、染色、镜检）（涂片、染色、镜检）（BAPBAP、SSSS、EMB/MACEMB/MAC）可疑菌落可疑菌落 TSIATSIA或或 KIA/MIUKIA/MIU 药物敏感试验药物敏感试验 鉴定鉴定 （生化、血清学鉴定，补充试验）（生化、血清学鉴定，补充试验）肠杆菌科细菌检验程序肠杆菌科细菌检验程序 上海交通大学医学院上海交通大学医学院鉴定步骤鉴定步骤 应该遵循科、属、种的次序，与其它革兰阴性杆菌进行鉴别。应该遵循科、属、种的次序，与其它革兰阴性杆菌进行鉴别。（1 1）科科鉴鉴别别：首首先先根根据据葡葡萄萄糖糖氧氧化化发发酵酵试试验验、氧氧化化酶酶试试验验、菌菌体体形形态态和有无鞭毛等试验区分是否肠杆菌科细菌。和有无鞭毛等试验区分是否肠杆菌科细菌。（2 2）科科内内鉴鉴别别：证证实实为为肠肠杆杆菌菌科科之之后后，可可直直接接用用自自动动仪仪器器或或商商品品鉴鉴定定试剂盒得到属、种的鉴定结果，也可继续手工鉴定。试剂盒得到属、种的鉴定结果，也可继续手工鉴定。上海交通大学医学院上海交通大学医学院肠杆菌科细菌与其它革兰阴性杆菌的区别肠杆菌科细菌与其它革兰阴性杆菌的区别试试 验验肠杆菌科肠杆菌科弧菌科弧菌科非发酵菌非发酵菌巴斯德菌巴斯德菌科科葡萄糖葡萄糖发酵发酵发酵发酵氧化或不分解氧化或不分解发酵发酵氧化酶氧化酶形态形态杆状杆状弧状、杆状弧状、杆状杆状杆状球杆状球杆状鞭毛鞭毛周鞭毛或周鞭毛或无无单鞭毛单鞭毛单、丛、周鞭单、丛、周鞭毛或无毛或无无鞭毛无鞭毛上海交通大学医学院上海交通大学医学院v首首先先根根据据苯苯丙丙氨氨酸酸脱脱氨氨酶酶和和VPVP试试验验，将将肠肠杆杆菌菌科科1414个个菌菌属分为三个组：属分为三个组：1 1）苯苯丙丙氨氨酸酸脱脱氨氨酶酶阴阴性性和和VPVP试试验验阴阴性性：埃埃希希菌菌属属、志志贺贺菌菌属、沙门菌属、枸橼酸菌属和爱德华菌属。属、沙门菌属、枸橼酸菌属和爱德华菌属。2 2）苯苯丙丙氨氨酸酸脱脱氨氨酶酶阴阴性性和和VPVP试试验验阳阳性性：克克雷雷伯伯菌菌属属、肠肠杆杆菌属、哈夫尼亚菌属、泛菌属、沙雷菌属、耶尔森菌属。菌属、哈夫尼亚菌属、泛菌属、沙雷菌属、耶尔森菌属。3 3）苯苯丙丙氨氨酸酸脱脱氨氨酶酶阳阳性性和和VPVP试试验验阴阴性性：变变形形杆杆菌菌属属、摩摩根根菌属、普罗威登斯菌属。菌属、普罗威登斯菌属。上海交通大学医学院上海交通大学医学院苯丙氨酸脱氨酶试验苯丙氨酸脱氨酶试验阳性：绿色阳性：绿色 阴性：黄色阴性：黄色 上海交通大学医学院上海交通大学医学院鉴定原则鉴定原则 1.1.科间鉴别科间鉴别科间鉴别科间鉴别 2.2.2.2.将肠杆菌科分为三大类将肠杆菌科分为三大类将肠杆菌科分为三大类将肠杆菌科分为三大类3.3.3.3.属、种、群、型的区分属、种、群、型的区分属、种、群、型的区分属、种、群、型的区分 4.4.4.4.肠杆菌科细菌综合鉴定流程肠杆菌科细菌综合鉴定流程肠杆菌科细菌综合鉴定流程肠杆菌科细菌综合鉴定流程上海交通大学医学院上海交通大学医学院肠杆菌科肠杆菌科 概述概述1 大肠埃希菌大肠埃希菌2上海交通大学医学院上海交通大学医学院大肠埃希菌大肠埃希菌 分类与命名分类与命名1 临床意义临床意义 2 生物学特性生物学特性 3 鉴定原则鉴定原则 4上海交通大学医学院上海交通大学医学院分类与命名分类与命名v 埃希菌属（埃希菌属（EscherichiaEscherichia）包括包括 5 5个种。个种。v大肠埃希菌（大肠埃希菌（E Ecolicoli）是最常见的临床分离菌，也是）是最常见的临床分离菌，也是肠道中革兰阴性杆菌的主要成员，常引起各种肠内外的肠道中革兰阴性杆菌的主要成员，常引起各种肠内外的感染，是腹泻和泌尿道感染的主要病原菌，又分为正常感染，是腹泻和泌尿道感染的主要病原菌，又分为正常（NormalNormal）和不活泼（）和不活泼（InactiveInactive）2 2个亚种。个亚种。上海交通大学医学院上海交通大学医学院v蟑螂埃希菌（蟑螂埃希菌（E Eblattaeblattae）不常见，偶可从人类标本）不常见，偶可从人类标本中检出并有潜在的致病性。中检出并有潜在的致病性。v弗格森埃希菌（弗格森埃希菌（E Efergusoniifergusonii），），v赫尔曼埃希菌（赫尔曼埃希菌（E Ehermanniihermannii），），v伤口埃希菌（伤口埃希菌（E.E.vulnerisvulneris）。）。v本菌属细菌的本菌属细菌的DNA GDNA GC molC mol为为48485252。本节以大肠埃。本节以大肠埃希菌为代表叙述。希菌为代表叙述。上海交通大学医学院上海交通大学医学院大肠埃希菌大肠埃希菌 分类与命名分类与命名1 临床意义临床意义 2 生物学特性生物学特性 3 鉴定原则鉴定原则 4上海交通大学医学院上海交通大学医学院临床意义临床意义l l侵袭力侵袭力 本菌的本菌的K K抗原和菌毛与侵袭力有关。抗原和菌毛与侵袭力有关。K K抗原：抗原：能抗吞噬，并能够抵抗抗体和补体的作用。能抗吞噬，并能够抵抗抗体和补体的作用。菌菌毛毛：能能帮帮助助细细菌菌粘粘附附于于粘粘膜膜表表面面，使使细细菌菌在在肠肠道道内内定定殖殖，产产生生毒毒素素而而引引起起相相应应症症状状。有有侵侵袭袭力力的的菌菌株株能能直直接接侵侵犯犯肠道粘膜上皮引起炎症。肠道粘膜上皮引起炎症。上海交通大学医学院上海交通大学医学院2 2内内毒毒素素 大大肠肠埃埃希希菌菌的的细细胞胞壁壁有有内内毒毒素素活活性性，其其毒毒性性部部位位在在类类脂脂A A（lipid lipid A A），与与所所有有革革兰兰阴阴性性杆杆菌菌产产生生的的内内毒毒素素一一样样，具具有有相相似似的的病病理理生生理理作作用用，如如发发热热、休休克克、DICDIC等。等。上海交通大学医学院上海交通大学医学院3 3肠毒素肠毒素 不不耐耐热热肠肠毒毒素素（heat heat labile labile toxintoxin，LTLT），加加热热 6565、3030分钟即被破坏；分钟即被破坏；耐热肠毒素（耐热肠毒素（heat stable toxinheat stable toxin，STST）LTLT和和STST均均可可使使肠肠道道细细胞胞中中cAMPcAMP的的水水平平升升高高，引引起起肠肠液液大大量量分泌而导致腹泻。分泌而导致腹泻。上海交通大学医学院上海交通大学医学院所致疾病所致疾病vv肠道外感染肠道外感染肠道外感染肠道外感染 泌尿道感染（最常见）泌尿道感染（最常见）泌尿道感染（最常见）泌尿道感染（最常见）胆道感染、腹膜炎、肺炎胆道感染、腹膜炎、肺炎胆道感染、腹膜炎、肺炎胆道感染、腹膜炎、肺炎 菌血症、新生儿脑膜炎菌血症、新生儿脑膜炎菌血症、新生儿脑膜炎菌血症、新生儿脑膜炎vv肠道感染肠道感染肠道感染肠道感染 ETECETECETECETEC、EPECEPECEPECEPEC、EIECEIECEIECEIEC、EHECEHECEHECEHEC、EaggECEaggECEaggECEaggEC 返回返回上海交通大学医学院上海交通大学医学院（1 1）肠毒素型大肠埃希菌（肠毒素型大肠埃希菌（enterotoxigenicenterotoxigenic E.coliE.coli，ETECETEC）：引起儿童腹泻和旅行者腹泻，导致恶心、腹：引起儿童腹泻和旅行者腹泻，导致恶心、腹痛、低热以及急性发作的类似于轻型霍乱的大量水样痛、低热以及急性发作的类似于轻型霍乱的大量水样腹泻。该菌产生两种由质粒介导的肠毒素，即耐热肠腹泻。该菌产生两种由质粒介导的肠毒素，即耐热肠毒素（毒素（STST）和不耐热肠毒素（）和不耐热肠毒素（LTLT）。）。（2 2）肠致病性大肠埃希菌（肠致病性大肠埃希菌（enteropathogenicenteropathogenic E.coliE.coli，EPECEPEC）：主要引起婴幼儿肠道感染，导致发热、呕：主要引起婴幼儿肠道感染，导致发热、呕吐、大量水泻，便中含黏液但无血液，是世界各地婴吐、大量水泻，便中含黏液但无血液，是世界各地婴儿腹泻的重要病原菌。儿腹泻的重要病原菌。上海交通大学医学院上海交通大学医学院（3 3）肠侵袭型大肠埃希菌（肠侵袭型大肠埃希菌（enteroinvasiveenteroinvasive E.coliE.coli，EIECEIEC）：类似于志贺菌，能直接侵犯肠黏膜，在黏膜：类似于志贺菌，能直接侵犯肠黏膜，在黏膜上皮细胞内增殖，并破坏上皮细胞。上皮细胞内增殖，并破坏上皮细胞。EIECEIEC还可像志贺还可像志贺菌一样引起肠炎症状如发热、腹痛、水泻或细菌性痢菌一样引起肠炎症状如发热、腹痛、水泻或细菌性痢疾的典型症状，出现黏液脓血便。疾的典型症状，出现黏液脓血便。上海交通大学医学院上海交通大学医学院（4 4）肠出血型大肠埃希菌（肠出血型大肠埃希菌（enterohemorrhagicenterohemorrhagic E.coliE.coli，EHECEHEC），又称，又称VeroVero毒素大肠埃希菌（毒素大肠埃希菌（verotoxigenicverotoxigenic E.coliE.coli，VTECVTEC）或志贺样毒素大肠埃希菌（）或志贺样毒素大肠埃希菌（Shiga Shiga like like toxigenictoxigenic E.coliE.coli，SLTECSLTEC）v多为水源性或食源性感染，由加热不充分的牛肉引起，多为水源性或食源性感染，由加热不充分的牛肉引起，牛肉在屠宰场因接触牛粪而受到污染，人与人之间通牛肉在屠宰场因接触牛粪而受到污染，人与人之间通过粪口途径传播。过粪口途径传播。上海交通大学医学院上海交通大学医学院vEHECEHEC的致病因子主要有菌毛和毒素，的致病因子主要有菌毛和毒素，EHECEHEC产生二种产生二种VeroVero毒素（毒素（VT-1VT-1和和VT-2VT-2），可抑制蛋白质的合成并致），可抑制蛋白质的合成并致VeroVero细胞产生病变，引起临床症状。细胞产生病变，引起临床症状。vEHECEHEC最具代表性的血清型是最具代表性的血清型是O157O157：H7H7，是从血便中分，是从血便中分离到的最常见的病原菌，分离率占血便的离到的最常见的病原菌，分离率占血便的4040，6 6、7 7、8 8三个月三个月O157O157：H7H7感染的发生率最高。感染的发生率最高。上海交通大学医学院上海交通大学医学院vEHECEHEC感染后潜伏期感染后潜伏期3 35 5天（天（1 18 8天范围），引起无症天范围），引起无症状感染、轻度腹泻或腹泻，从无血便发展至血便，并状感染、轻度腹泻或腹泻，从无血便发展至血便，并有腹疼（合并出血性结肠炎时），便中白细胞少见，有腹疼（合并出血性结肠炎时），便中白细胞少见，无明显发热。成人患者往往自愈。无明显发热。成人患者往往自愈。v由由O157O157：H7H7引起的腹泻有引起的腹泻有2 27 7发展成发展成HUSHUS，出现溶，出现溶血性贫血，血小板减少性紫癜和急性肾衰竭。血性贫血，血小板减少性紫癜和急性肾衰竭。vO157O157：H7H7是是4 4岁以下儿童急性肾衰竭的主要病原菌。岁以下儿童急性肾衰竭的主要病原菌。HUSHUS患者死亡率为患者死亡率为3 31010，出现严重或慢性肾、心、，出现严重或慢性肾、心、神经系统并发症的发生率是神经系统并发症的发生率是4%4%3030。上海交通大学医学院上海交通大学医学院表表8-4 8-4 引起肠道感染的大肠埃希菌的主要致病特征引起肠道感染的大肠埃希菌的主要致病特征菌株菌株致病机制致病机制感染类型感染类型主要临床表现主要临床表现发病年龄发病年龄危险因素危险因素ETECETECLTLT和和STST腹泻，旅行者腹泻，旅行者腹泻腹泻大量水样便，腹大量水样便，腹痛、恶心、脱水痛、恶心、脱水成人、儿童成人、儿童海外旅行海外旅行EPECEPEC黏附因子黏附因子急性腹泻急性腹泻水样便、发热、水样便、发热、呕吐、黏液便呕吐、黏液便2 2岁婴儿、成岁婴儿、成人人EIECEIEC侵入结肠黏膜侵入结肠黏膜上皮上皮志贺样脓血便志贺样脓血便脓血便，便中含脓血便，便中含红、白细胞和黏红、白细胞和黏液，发热、腹痛液，发热、腹痛成人成人海外旅行海外旅行EHECEHEC类志贺毒素类志贺毒素腹泻、出血性腹泻、出血性肠炎肠炎腹泻（无腹泻（无WBCWBC），），腹痛、血便、发腹痛、血便、发热、热、HUSHUS儿童、老人儿童、老人未熟牛肉未熟牛肉牛奶牛奶EaggECEaggEC未明未明急、慢性腹泻急、慢性腹泻水泻、呕吐水泻、呕吐所有年龄所有年龄上海交通大学医学院上海交通大学医学院大肠埃希菌大肠埃希菌 分类与命名分类与命名1 临床意义临床意义 2 生物学特性生物学特性 3 鉴定原则鉴定原则 4上海交通大学医学院上海交通大学医学院形态特征形态特征大肠埃希菌革兰染色大肠埃希菌革兰染色上海交通大学医学院上海交通大学医学院大肠埃希菌电镜图大肠埃希菌电镜图上海交通大学医学院上海交通大学医学院培养特性培养特性v兼性厌氧，营养要求不高，兼性厌氧，营养要求不高，v在普通营养琼脂上生长良好，形成较大的圆形、光滑、在普通营养琼脂上生长良好，形成较大的圆形、光滑、湿润、灰白色的菌落湿润、灰白色的菌落上海交通大学医学院上海交通大学医学院在血琼脂在血琼脂上某些菌上某些菌株可产生株可产生-溶血。溶血。大肠埃希菌菌落特征（血平板）大肠埃希菌菌落特征（血平板）上海交通大学医学院上海交通大学医学院在肠道选在肠道选择培养基择培养基上可发酵上可发酵乳糖，形乳糖，形成有色菌成有色菌落。落。大肠埃希菌菌落特征（大肠埃希菌菌落特征（MACMAC）上海交通大学医学院上海交通大学医学院生化反应生化反应v发酵多种糖产酸产气，发酵多种糖产酸产气，v吲哚、甲基红、吲哚、甲基红、V VP P、枸橼酸盐（、枸橼酸盐（IMVCIMVC）等）等4 4个试验的结个试验的结果为果为，v在克氏铁琼脂（在克氏铁琼脂（KIAKIA）上斜面和底层均产酸、产气，）上斜面和底层均产酸、产气，H H2 2S S阴性（阴性（AAAA），），v在动力、吲哚、脲酶（在动力、吲哚、脲酶（MIUMIU）培养基上的反应结果为）培养基上的反应结果为，上海交通大学医学院上海交通大学医学院大肠埃希大肠埃希菌菌KIAKIA（AAAA）MIUMIU（）（）上海交通大学医学院上海交通大学医学院大肠埃希菌大肠埃希菌IMViCIMViC试验（）试验（）右侧为对照（）右侧为对照（）上海交通大学医学院上海交通大学医学院大肠埃希菌抗原结构大肠埃希菌抗原结构上海交通大学医学院上海交通大学医学院v1 1O O抗原抗原 是多糖磷脂复合物（是多糖磷脂复合物（LPSLPS），耐热，加热），耐热，加热100100不能灭活，目前已知有不能灭活，目前已知有171171种，是血清学分型的基种，是血清学分型的基础。础。v2 2H H抗原抗原 是不耐热的蛋白质，已知有是不耐热的蛋白质，已知有5656种，均为单相种，均为单相菌株。菌株。上海交通大学医学院上海交通大学医学院v3 3K K抗原抗原 是多糖荚膜抗原，对热稳定，在是多糖荚膜抗原，对热稳定，在K K抗原存在时抗原存在时能阻止能阻止O O凝集。已知有凝集。已知有100100种，不是每个菌株均有种，不是每个菌株均有K K抗原。抗原。v大肠埃希菌的血清型别按大肠埃希菌的血清型别按O O：K K：H H的顺序，以数字表示，的顺序，以数字表示，如如O111O111：K58K58：H2H2、O157O157：H7H7等。等。上海交通大学医学院上海交通大学医学院大肠埃希菌大肠埃希菌 分类与命名分类与命名1 临床意义临床意义 2 生物学特性生物学特性 3 鉴定原则鉴定原则 4上海交通大学医学院上海交通大学医学院（一（一（一（一）检验程序检验程序检验程序检验程序（二）（二）（二）（二）标本采集标本采集标本采集标本采集（三）（三）（三）（三）检验方法检验方法检验方法检验方法（四）（四）（四）（四）耐药性耐药性耐药性耐药性 （五）（五）（五）（五）结果分析与报告结果分析与报告结果分析与报告结果分析与报告 鉴定原则鉴定原则上海交通大学医学院上海交通大学医学院大肠埃希菌检验程序大肠埃希菌检验程序上海交通大学医学院上海交通大学医学院检验方法检验方法1.1.1.1.显微镜检查显微镜检查显微镜检查显微镜检查 2.2.2.2.分离培养分离培养分离培养分离培养 3.3.3.3.鉴定：科、属、种、型鉴定：科、属、种、型鉴定：科、属、种、型鉴定：科、属、种、型 ETECETECETECETEC EPECEPECEPECEPEC EIECEIECEIECEIEC EHECEHECEHECEHEC EaggECEaggECEaggECEaggEC上海交通大学医学院上海交通大学医学院表表8-5 埃希菌属内各菌种的鉴别埃希菌属内各菌种的鉴别生化反应生化反应大肠大肠赫尔曼赫尔曼弗格森弗格森蟑螂蟑螂伤口伤口INDIND+MRMR+VPVPCITCIT（）（）d dLYSLYS+ARGARG（）（）d dORNORNd d+ONPGONPG+乳糖乳糖+d d（）（）山梨醇山梨醇+甘露醇甘露醇+侧金盏花醇侧金盏花醇+纤维二糖纤维二糖+黄色色素黄色色素+d d注：注：INDIND，吲哚；，吲哚；MRMR，甲基红；，甲基红；VPVP，伏普试验；，伏普试验；CITCIT，枸橼酸盐；，枸橼酸盐；LYSLYS，赖氨酸脱羧酶；，赖氨酸脱羧酶；ARGARG，精氨酸双水解酶；，精氨酸双水解酶；ORNORN，鸟氨酸脱，鸟氨酸脱羧酶；羧酶；ONPGONPG，-半乳糖苷酶；半乳糖苷酶；+，90%90%以上菌株阳性；，以上菌株阳性；，90%90%以上菌株阴性；以上菌株阴性；d d，26%75%26%75%阳性；（），阳性；（），76%89%76%89%阴性。阴性。上海交通大学医学院上海交通大学医学院1 1）ETECETEC：生化反应加血清分型加肠毒素测定，：生化反应加血清分型加肠毒素测定，v生化反应符合大肠埃希菌，属于一些特定的血清型别，生化反应符合大肠埃希菌，属于一些特定的血清型别，v主要依赖主要依赖STST和和LTLT肠毒素的检测，常用生物学方法或细胞肠毒素的检测，常用生物学方法或细胞培养、免疫学和分子生物学方法培养、免疫学和分子生物学方法上海交通大学医学院上海交通大学医学院STST检测（乳鼠灌胃试验）检测（乳鼠灌胃试验）上海交通大学医学院上海交通大学医学院LT LT 检测检测（CHOCHO细胞培养细胞培养）上海交通大学医学院上海交通大学医学院2 2）EPECEPEC：生化反应加血清分型，：生化反应加血清分型，v用多价抗血清检测其用多价抗血清检测其O O抗原。取抗原。取5 51010个乳糖阳性的大个乳糖阳性的大肠埃希菌菌落，进行特异性抗血清的凝集试验。肠埃希菌菌落，进行特异性抗血清的凝集试验。上海交通大学医学院上海交通大学医学院3 3）EIECEIEC：生化反应加血清分型加毒素测定，：生化反应加血清分型加毒素测定，v本菌与志贺菌相似，多数本菌与志贺菌相似，多数EIECEIEC为动力阴性，乳糖不发为动力阴性，乳糖不发酵或迟缓发酵。酵或迟缓发酵。v所有所有EIECEIEC菌落均为赖氨酸脱羧酶阴性，无动力，其中菌落均为赖氨酸脱羧酶阴性，无动力，其中最常见的血清型最常见的血清型O152O152和和O124O124为乳糖阴性，与志贺菌的为乳糖阴性，与志贺菌的抗血清有交叉反应，两菌属十分相似。抗血清有交叉反应，两菌属十分相似。上海交通大学医学院上海交通大学医学院v主要的鉴别试验：醋酸钠、葡萄糖铵利用试验和粘质主要的鉴别试验：醋酸钠、葡萄糖铵利用试验和粘质酸盐产酸试验，大肠埃希菌三者均阳性，而志贺菌三酸盐产酸试验，大肠埃希菌三者均阳性，而志贺菌三者均阴性。者均阴性。v毒力测定（豚鼠眼结膜试验）：以被检菌液接种于豚毒力测定（豚鼠眼结膜试验）：以被检菌液接种于豚鼠眼结膜囊内，产生典型的角膜结膜炎症状，并在角鼠眼结膜囊内，产生典型的角膜结膜炎症状，并在角膜上皮细胞内出现大量细菌者，为毒力试验阳性。膜上皮细胞内出现大量细菌者，为毒力试验阳性。上海交通大学医学院上海交通大学医学院4 4）EHECEHEC：血清分型加生化反应，：血清分型加生化反应，v可用山梨醇麦康凯琼脂（可用山梨醇麦康凯琼脂（SMACSMAC）直接筛选不发酵山梨醇）直接筛选不发酵山梨醇的菌落（的菌落（35353737培养培养242448h48h后选无色菌落），经次代后选无色菌落），经次代培养后可用胶乳凝集试验检测培养后可用胶乳凝集试验检测O157O157抗原。抗原。上海交通大学医学院上海交通大学医学院O157:H7O157:H7菌落特征（菌落特征（MACMAC）上海交通大学医学院上海交通大学医学院O157:H7O157:H7菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）上海交通大学医学院上海交通大学医学院