第九章肠杆菌科.ppt

第二章第二章 肠杆菌科肠杆菌科 肠杆菌科细菌是一大群生物学性状近似的肠杆菌科细菌是一大群生物学性状近似的革兰氏阴性杆菌。多数是肠道的正常菌群，革兰氏阴性杆菌。多数是肠道的正常菌群，少数为病原菌。肠杆菌科细菌种类繁多，如少数为病原菌。肠杆菌科细菌种类繁多，如埃希菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、变形杆埃希菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、变形杆菌属等。菌属等。（Enterobacteriaceae)第一节第一节 埃希菌属埃希菌属（Escherichia)埃希菌属有埃希菌属有5个种，个种，其中最重要的是大肠其中最重要的是大肠埃希菌俗称大肠杆菌埃希菌俗称大肠杆菌（E.coli)，是最常见是最常见的临床分离菌。的临床分离菌。引引起起疾疾病病：能能感感染染人人和和动动物物，引引起腹泻、化脓或败血症。起腹泻、化脓或败血症。1.形形态态与与染染色色：卵卵圆圆形形或或杆杆状状，单单个个或或成成双双，无无芽芽孢孢，大大多多数数具具有有周周身身鞭鞭毛毛，能能运运动动。一一般般无无荚荚膜膜，但但有有些些菌菌株有荚膜。株有荚膜。G-。革兰氏阴性小杆菌，散在或成对，周毛菌，有菌毛。革兰氏阴性小杆菌，散在或成对，周毛菌，有菌毛。大肠杆菌大肠杆菌扫描电镜下的大肠杆菌（示鞭毛）扫描电镜下的大肠杆菌（示鞭毛）2、培养及生化特性、培养及生化特性 属属于于需需氧氧和和兼兼性性厌厌氧氧菌菌，对对营营养养要要求求不不高高，在在普普通通营营养养琼琼脂脂上上生生长长良良好好，最最适适生生长长温温度度为为37，最最适适pH为为7.2-7.4。普通培养基上生长良好，光滑、普通培养基上生长良好，光滑、湿润、半透明、灰白色菌落；湿润、半透明、灰白色菌落；麦康凯琼脂上形成红色菌落；麦康凯琼脂上形成红色菌落；伊红美蓝琼脂上产生黑色带金伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽菌落；属光泽菌落；致病菌株在绵羊血平板上呈致病菌株在绵羊血平板上呈型型溶血；溶血；麦康凯培养基麦康凯培养基伊红美蓝琼脂伊红美蓝琼脂麦康凯琼脂：红色菌落；麦康凯琼脂：红色菌落；伊红美蓝琼脂：黑色带金属闪光的菌落；伊红美蓝琼脂：黑色带金属闪光的菌落；SS琼脂：一般不生长或生长较差，生长者呈红色；琼脂：一般不生长或生长较差，生长者呈红色；血平板：一些致病性菌株常血平板：一些致病性菌株常溶血；溶血；能发酵多种糖类，产酸产气。多数菌株能发酵多种糖类，产酸产气。多数菌株发酵乳糖；约半数菌株不分解蔗糖；发酵乳糖；约半数菌株不分解蔗糖；IMViC：几乎均不产生硫化氢，几乎均不产生硫化氢，H2S阴性。阴性。不分解尿素。不分解尿素。生化特性生化特性I(吲哚吲哚)M（MR）Vi（VP)C（枸橼酸盐利用试验）（枸橼酸盐利用试验）3.抵抗力抵抗力 抵抵抗抗力力中中等等，但但各各菌菌株株间间有有差差异异。一一般般都都能能被被巴巴氏氏消消毒毒所所杀杀死死。常常用用的的化化学学消消毒毒药药可可在在数数分分钟钟之之内内杀杀死死本本菌菌，在在潮潮湿湿、阴阴暗暗而而温温暖暖的的环环境境中中，本本菌菌可可生生存存1个个月月左左右右，在在寒寒冷冷而而干干燥燥的的环境中生存较久。环境中生存较久。4.抗原结构抗原结构：血清型较多。：血清型较多。O抗抗原原：是是光光滑滑型型细细菌菌的的菌菌体体抗抗原原，对对热热稳稳定，抗原性强。定，抗原性强。K抗抗原原：热热不不稳稳定定抗抗原原。多多存存在在于于荚荚膜膜或或类类似似结结构构中中，个个别别位位于于菌菌毛毛中中。除除K88、K99为蛋白质菌毛抗原，其余均属多糖抗原。为蛋白质菌毛抗原，其余均属多糖抗原。H抗抗原原为为鞭鞭毛毛抗抗原原，为为蛋蛋白白质质。加加热热80或或以乙醇处理则被破坏。以乙醇处理则被破坏。大大肠肠杆杆菌菌的的抗抗原原式式，表表示示方方法法：O：K：H，如如O111：K58（B）：）：H12。5、致病性、致病性根据毒力因子与发病机制不同，将腹泻大肠杆菌分为根据毒力因子与发病机制不同，将腹泻大肠杆菌分为5类：类：（1）产肠毒素大肠杆菌（）产肠毒素大肠杆菌（ETEC）（2）肠致病型大肠杆菌（）肠致病型大肠杆菌（EPEC）（3）肠出血型大肠杆菌（）肠出血型大肠杆菌（EHEC）（4）肠侵袭型大肠杆菌（肠侵袭型大肠杆菌（EIEC）（5）肠聚集型大肠杆菌（）肠聚集型大肠杆菌（EAEC）产肠毒素大肠杆菌（产肠毒素大肠杆菌（ETEC）引起人和动物腹泻，主要毒力因子有两类：引起人和动物腹泻，主要毒力因子有两类：粘附素（定居因子）：粘附素（定居因子）：菌毛和非菌毛类蛋白，能粘附宿主的菌毛和非菌毛类蛋白，能粘附宿主的小肠上皮细胞，虽不是直接的致病因子，却是首要的毒力因子小肠上皮细胞，虽不是直接的致病因子，却是首要的毒力因子。肠毒素：肠毒素：分泌到胞外的一种蛋白质性毒素。分泌到胞外的一种蛋白质性毒素。（1）不耐热肠毒素（）不耐热肠毒素（heat-labile enterotoxin,LT)对热敏感，可转变成类毒素，具有对热敏感，可转变成类毒素，具有A和和B亚单位。亚单位。（2）耐热肠毒素（）耐热肠毒素（heat-stable enterotoxin,ST)耐热，分子量小，无免疫原性。耐热，分子量小，无免疫原性。产志贺毒素大肠杆菌（产志贺毒素大肠杆菌（STEC）引起猪水肿病，有两类毒力因子：引起猪水肿病，有两类毒力因子：粘附素粘附素 粘附性菌毛粘附性菌毛F18，有助于细菌在肠粘膜上皮细胞定有助于细菌在肠粘膜上皮细胞定居和繁殖。居和繁殖。志贺毒素，又称类志贺毒素、志贺毒素，又称类志贺毒素、Vero毒素。毒素。直接导致该病发生的主要毒力因子。直接导致该病发生的主要毒力因子。n标本采集：标本采集：根据临床疾病类型的不同，采集适当的标本。根据临床疾病类型的不同，采集适当的标本。如败血症病例采集病变的内脏组织，腹泻病例采集小肠内如败血症病例采集病变的内脏组织，腹泻病例采集小肠内容物。容物。n检查方法：检查方法：（一）分离培养：选择培养基（一）分离培养：选择培养基（麦康凯或伊红美蓝培养基）麦康凯或伊红美蓝培养基）（二）生化试验：糖发酵、（二）生化试验：糖发酵、IMViC试验、试验、H2S阴性。阴性。（三）血清学试验：玻片凝集试验鉴定血清型（三）血清学试验：玻片凝集试验鉴定血清型6.微生物学诊断微生物学诊断目前国内外已有多种疫苗预防大肠杆菌目前国内外已有多种疫苗预防大肠杆菌病，如全菌灭活苗、亚单位疫苗、类毒病，如全菌灭活苗、亚单位疫苗、类毒素苗、基因工程疫苗等。素苗、基因工程疫苗等。7.免疫防治：免疫防治：n由由于于大大肠肠杆杆菌菌极极易易产产生生耐耐药药性性，尤尤其其是是抗抗生生素素的的不不合合理理应应用用，使使耐耐药药菌菌株株不不断断增增加加，且且通通过过耐药质粒在细菌间传递，广泛蔓延。耐药质粒在细菌间传递，广泛蔓延。n为为了了减减少少药药物物的的滥滥用用和和细细菌菌耐耐药药性性的的产产生生,在在使使用用药药物物治治疗疗大大肠肠杆杆菌菌病病时时,有有条条件件的的应应扩扩大大常常规规抗抗生生素素种种类类进进行行药药敏敏试试验验。根根据据药药敏敏试试验验结结果果,选选择择敏敏感感药药物物,且且应应注注意意交交替替用用药药,按按疗疗程投药程投药,这样才能收到较好的治疗效果。这样才能收到较好的治疗效果。第二节第二节 沙门氏菌属（沙门氏菌属（Salmonella)绝大多数沙门氏菌对人绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性，人类和动物有致病性，人类食物中毒的主要病原之食物中毒的主要病原之一，在公共卫生上占有一，在公共卫生上占有重要地位。重要地位。n所致疾病：所致疾病：1.对人类致病的沙门氏菌对人类致病的沙门氏菌 2.对对畜畜禽禽致致病病：如如鸡鸡白白痢痢、鸡鸡伤伤寒寒、鸡鸡副副伤伤寒寒等等感感染染雏雏鸡鸡后后发发生生白白痢痢或或败败血血症症等等。也引起牛、羊、马发生流产。也引起牛、羊、马发生流产。3.引起食物中毒：如鼠伤寒沙门氏菌。引起食物中毒：如鼠伤寒沙门氏菌。一、形态及染色一、形态及染色与与大肠杆菌相似，大肠杆菌相似，除鸡白痢和鸡伤寒除鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛不沙门氏菌无鞭毛不运动外，其余均以运动外，其余均以周鞭毛运动。周鞭毛运动。G-。n两端钝圆，细长，中等大杆菌，无芽孢,无荚膜。n培培养养特特性性：该该菌菌需需氧氧或或兼兼性性厌厌氧氧；对对营营养养的的要要求不高求不高。普普通通琼琼脂脂平平板板：无无色色半半透透明明、光光滑滑、湿湿润润、边边缘缘整整齐齐或或呈呈锯锯齿齿状状、直直径径2-3mm的的中中等等大大菌菌落落。鸡白痢、鸡沙门氏菌生长贫瘠，形成较小菌落。鸡白痢、鸡沙门氏菌生长贫瘠，形成较小菌落。SS琼脂琼脂：由于本菌不分解乳糖，故生长出与：由于本菌不分解乳糖，故生长出与培养基颜色一致的淡黄色或无色菌落。产生硫培养基颜色一致的淡黄色或无色菌落。产生硫化氢的菌株，菌落中心形成黑色小点。化氢的菌株，菌落中心形成黑色小点。二、培养及生化特性二、培养及生化特性（1）培养特性与埃希氏菌属相似。）培养特性与埃希氏菌属相似。（2）鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒等）鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒等沙门氏菌在普通琼脂上生长贫瘠。培养基中加沙门氏菌在普通琼脂上生长贫瘠。培养基中加入血清、葡萄糖、硫代硫酸钠、胱氨酸、脑心入血清、葡萄糖、硫代硫酸钠、胱氨酸、脑心浸液和甘油等均有助于本菌生长。浸液和甘油等均有助于本菌生长。（3）麦康凯上，大多形成无色菌落（不发酵乳）麦康凯上，大多形成无色菌落（不发酵乳糖）；糖）；SS平板上，形成黑色菌落。平板上，形成黑色菌落。麦康凯培养基：发酵乳糖（大肠杆菌）；麦康凯培养基：发酵乳糖（大肠杆菌）；不发酵乳糖（沙门氏菌）不发酵乳糖（沙门氏菌）在在选择培养基上因不发酵乳糖而呈无色菌落。选择培养基上因不发酵乳糖而呈无色菌落。IMViC试验：试验：-+-+；多数菌株；多数菌株H2S阳性。阳性。三糖铁培养基三糖铁培养基三糖铁琼脂斜面：斜面为红色，底部变黑并产气。三糖铁琼脂斜面：斜面为红色，底部变黑并产气。三糖铁培养基三糖铁培养基阳性：斜面变红，底面是黄色或是黑色，有时产生气泡。阳性：斜面变红，底面是黄色或是黑色，有时产生气泡。阴性：是斜面变黄，底面发黄，有时也有气泡。阴性：是斜面变黄，底面发黄，有时也有气泡。三、抗原及血清型三、抗原及血清型（一）抗原（一）抗原1.菌体抗原（菌体抗原（O抗原）：抗原）：其成分为其成分为LPS的多糖侧链。的多糖侧链。58种，耐种，耐 热，热，1个菌株可含多种，以阿拉伯数字表示。个菌株可含多种，以阿拉伯数字表示。2.荚膜抗原（荚膜抗原（K抗原）：抗原）：与毒力有关，又称与毒力有关，又称Vi抗原。有的菌株有，抗原。有的菌株有，有的菌株无。有的菌株无。3.鞭毛抗原（鞭毛抗原（H抗原）：抗原）：其成分为蛋白质，不耐热，其成分为蛋白质，不耐热，63种种,分为两相：分为两相：（1）第）第1相（特异相）：小写英文字母表示相（特异相）：小写英文字母表示 （2）第）第2相（非特异相）：阿拉伯数字表示相（非特异相）：阿拉伯数字表示n表示方法：表示方法：O抗原：第抗原：第1相相H抗原：第抗原：第2相相H抗原抗原 如：如：1，4，5，12：i:1,2 有有Vi抗原的，则表示为：抗原的，则表示为：（二）血清型（抗原式）（二）血清型（抗原式）O抗原：抗原：Vi抗原：第抗原：第1相相H抗原：第抗原：第2相相H抗原抗原n沙门氏菌属在外界的生活力较强，在沙门氏菌属在外界的生活力较强，在10 42 的范围内均能生长。但不耐热，的范围内均能生长。但不耐热，60 15 30min即被杀死。即被杀死。n在普通水中可生存在普通水中可生存2 3周，在粪便中可存活周，在粪便中可存活1 2个月。在牛乳和肉类食品中存活数月，个月。在牛乳和肉类食品中存活数月，在食盐含量为在食盐含量为10 15的腌肉中亦可存活的腌肉中亦可存活2 3个月。个月。n由于沙门氏菌属不分解蛋白质，不产生靛基质，由于沙门氏菌属不分解蛋白质，不产生靛基质，污染食物后无感官性状的变化，易被忽视而引污染食物后无感官性状的变化，易被忽视而引起食物中毒。起食物中毒。四、抵抗力四、抵抗力 沙门氏菌属包括沙门氏菌属包括2000多个血清型，多个血清型，在形态结构、培养特性、生化特性和抗原在形态结构、培养特性、生化特性和抗原构造方面都非常相似，主要寄居于人和其构造方面都非常相似，主要寄居于人和其它温血动物的肠道中，可引起多种性质的它温血动物的肠道中，可引起多种性质的疾病。疾病。五、致病性五、致病性n第一类群：专门对人致病。如伤寒沙门氏菌、第一类群：专门对人致病。如伤寒沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌，乙型副伤寒伤门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌，乙型副伤寒伤门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌。丙型副伤寒沙门氏菌。n第二类群：能引起人类食物中毒，称之为食物第二类群：能引起人类食物中毒，称之为食物中毒沙门氏菌群，如鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱中毒沙门氏菌群，如鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌等。沙门氏菌、肠炎沙门氏菌等。n第三类群：专门对动物致病，很少感染人，如第三类群：专门对动物致病，很少感染人，如马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌。根据沙门氏菌的致病范围，可将其分为三大类群：根据沙门氏菌的致病范围，可将其分为三大类群：根据对宿主适应性不同，可分为：根据对宿主适应性不同，可分为：1.专嗜性：专嗜性：如鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌如鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌2.2.偏嗜性：偏嗜性：如猪霍乱沙门氏菌如猪霍乱沙门氏菌3.3.泛嗜性：泛嗜性：如鼠伤寒、肠炎沙门氏菌如鼠伤寒、肠炎沙门氏菌 （一）分离培养：选择培养基（一）分离培养：选择培养基 （二）生化试验：糖发酵、（二）生化试验：糖发酵、IMViC试验、试验、H2S阳性。阳性。（三）血清学试验：玻片凝集试验鉴定血清型（三）血清学试验：玻片凝集试验鉴定血清型六、微生物学诊断六、微生物学诊断1、疫苗接种；、疫苗接种；2、严格实行卫生检验和检疫规程；、严格实行卫生检验和检疫规程；3、有效的抗生素：由于本属菌的耐药菌株、有效的抗生素：由于本属菌的耐药菌株不断在增加，最好使用经药敏试验选定不断在增加，最好使用经药敏试验选定的高敏药物用于治疗病畜禽。的高敏药物用于治疗病畜禽。七、免疫防治七、免疫防治n 仔仔猪猪副副伤伤寒寒：C500弱弱毒毒菌菌苗苗使使用用方方法法：于于1月月龄龄以以上上哺哺乳乳仔仔猪猪或或断断奶奶仔仔猪猪耳耳后后浅浅层肌肉注射层肌肉注射1ml。n 鸡鸡白白痢痢：用用已已知知鸡鸡白白痢痢平平板板抗抗原原，对对鸡鸡群群进进行行检检疫疫，逐逐年年淘淘汰汰阳阳性性鸡鸡，达达到到净净化化目的。目的。与与大肠杆菌的鉴别诊断：大肠杆菌的鉴别诊断：被检材料被检材料分离培养分离培养三糖铁琼脂斜面三糖铁琼脂斜面普通琼脂斜面普通琼脂斜面涂涂 片片 镜镜 检检生化反应生化反应血清型鉴定血清型鉴定