动物疫病实验室检测过程中的样品管理和生物安全.ppt

实验室检测过程中的样品和个人生物防控1内容实验室检测过程中样品质量控制实验室检测工作中的生物安全2样品对检测结果的影响错误结果：样品采集的不典型，不对；样品处理方式不正确；样品编号不正确；样品的保存方式不正确3样品种类血液样品：血清，全血抗凝血，血浆组织样品：心肝脾肺肾脑，淋巴结，扁桃体粪便样品：新鲜，湿润的生殖道和精液样品皮肤样品：皮屑分泌液和渗出液样品：舌面或蹄部的水泡液4样品的管理程序样品的接受和登记样品的编号样品的制备样品的流转样品的贮存样品的处置样品的保密和安全5样品的接受登记登记内容：样品的数量、性质、含量和状态登记后样品一分两份：正样：制备后供检测用；副样：以原始状态保存，供复检用。样品标签：样品编号、样品名称、数量、送样日期、保存日期、检测状态（未检、在检、检毕）6样品编号原则：唯一性，可识别性收样年份-收样顺序样品数量如：200900020（1-200）或在编号后加大写字母分出猪Z、牛N、羊Y、禽Q7样品的处理1血液样品：血清，全血抗凝血，血浆全血（抗凝血）:白细胞5000转/秒，5分钟，中间的那层白膜.血清：不加抗凝剂的血液，在室温静置2-4h（或371h），待血液完全凝固后，析出上清即为血清；或短暂离心8000转/秒，2分钟。8样品的处理2组织样品的处理：1、分割，剪取小块典型病变组织，分装，标识；2、如果是做PCR检测，组织病料需要剪碎，研磨，然后用缓冲液悬浮，8000转/秒离心，取上清。3、如果做细菌分离：无菌做组织抹片或取小块新鲜组织接种营养平板。9取样越大越好吗？如何准确取样？血清学中，取血清时应该尽力10样品的流转样品按顺序流转，交接签收时检查样品状态，在不同检测人员直接流通应有签收证明。11样品的保存样品在检测过程中：原则保持低温，避免反复冻融。样品检测前：冷冻样品检测后：冷冻或销毁12生物防护你的实验室从事禽流感病原学检测，在实验过程中存在哪些风险因素，如何做才能保证实验室各方面的生物安全？你认为我们的实验室可能存在哪些生物安全方面的问题呢？13了解兽医微生物实验室风险因素了解不同防护级别实验室硬件设施了解实验室规范操作要素了解个体防护的种类了解实验室管理基本要素14实验室相关人群感染情况最易受感染的人员依次为：实验室操作人员、动物饲养员、实验室技工、清洁员、文书人员、来访人员。大约有80%的病例，对实验室感染的来源、病原体作用和感染方式不清楚。1516气溶胶悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子（粒径一般为 0.001100m）形成的相对稳定的分散体系。17常规操作和意外事故空气中颗粒数 实验操作或事故 颗粒数吸入30ml培养液至50ml试管中 0-5.5移去离心管上的棉花塞 0.8-5振荡后移去烧瓶上的湿棉花 0.6-19划平板 0-20接种环插入到100ml培养液中 6-24倾注离心培养液至烧瓶 0-115使用轴承磨损的混合器混合培养液 12-126使用盖子松动的混合器混合培养液 77-124650ml离心管离心时损坏或飞溅 80-18001819最常见的暴露途径事故或操作过程中产生的气溶胶吸入经皮接种感染粘膜和污染物质的接触经口19ABSL 风险因素饲养动物相关活动：喂食、换笼、清洁等动物感染实验相关活动：去毛、麻醉、固定、灌胃、注射、解剖等特别考虑:动物自带病原体20二、硬件防护措施二级屏障：实验设施一级屏障：实验设备和个人防护装置21硬件防护措施二级屏障：实验设施一级屏障：实验设备和个人防护装置22二级防护屏障是生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离。保护目标：环境23BSL-1 实验室示意图24BSL-2 实验室示意图25一级防护屏障 是通过生物安全柜、负罩等实验设备和个人防护装备实现的，对操作者和被操作对象之间的隔离。26一级生物安全柜气流组织房间空气污染空气HAPE过滤空气27二级生物安全柜气流组织28IIB2型生物安全柜(美国)II级B2型生物安全柜房间空气污染空气HAPE过滤空气29离心机罩30生物安全型离心机31个体防护装备（PPE）32良好的内务和个人习惯33个人责任食品、饮料及类似物品 食品、饮料及类似物品只应在指定的区域中准备和食用。食品和饮料只应存放于非实验室区域内指定的专用处。冰箱应适当标记以明确其规定用途。实验室内禁止吸烟。化妆品、发、珠宝 禁止在工作区内使用化妆品和处理隐形眼镜。长发应束在脑后。在工作区内不应配带戒指、耳环、腕表、手镯、项链和其他珠宝。34个人责任免疫状态 所有实验室工作人员应接受免疫以预防其可能被所接触的生物因子感染。应按有关规定保存免疫记录 对一特定实验室的免疫计划应根据文件化的实验室传染危害评估和地方公共卫生部门的建议制定个人物品 个人物品、服装和化妆品不应放在有规定禁放的和可能发生污染的区域 35行为决定安全36微生物实验室消毒原则及时有效彻底安全37实验室内空气的消毒紫外线气溶胶喷雾甲醛熏蒸过氧化氢熏蒸 38地面消毒 喷洒消毒：0.2%0.5%过氧乙酸喷洒 或 有 效 氯 为 1000mg/L2000mg/L的含氯消毒剂喷洒，消毒剂的用量不得少于100ml/m2。39物体表面的消毒 实实验验台台面面、桌桌子子、椅椅子子、凳凳子子、床床头头柜柜、门门把把手手、实实验验记记录录 夹夹 等等 可可 用用 0.2%0.2%0.5%0.5%过过 氧氧 乙乙 酸酸 喷喷 洒洒 或或 有有 效效 氯氯 为为1000mg/L1000mg/L2000mg/L2000mg/L的的含含氯氯消消毒毒剂剂喷喷洒洒、擦擦拭拭，消消毒毒作用作用10-15min 10-15min。若实验台面等明显被传染性标本污染，例如，传染性标本若实验台面等明显被传染性标本污染，例如，传染性标本和培养物外溢、溅泼或容器打碎，洒落于表面，应立即用和培养物外溢、溅泼或容器打碎，洒落于表面，应立即用0.2%0.2%0.5%0.5%过氧乙酸喷洒或有效氯为过氧乙酸喷洒或有效氯为1000mg/L1000mg/L2000mg/L2000mg/L的含氯消毒剂喷洒覆盖于污染表面，保持的含氯消毒剂喷洒覆盖于污染表面，保持30-30-60min60min。40感染性物质溢出处理41实验器材、防护服等的消毒 压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌 消毒液喷洒消毒液喷洒 消毒液浸泡消毒液浸泡 42仪器设备消毒喷洒消毒熏蒸消毒43菌/毒株、标本转移消毒对对于于菌菌毒毒株株和和相相关关样样本本无无法法灭灭菌菌或或消消毒毒的的，应应对对样样本本的的载载体体和和包包装装容容器器的的表表面面进进行行严严格格的的灭灭菌菌或或消消毒毒处处理理后后才才可可带带出出，取取出出样样本本时时应应对对载载体体再再次次进进行行消消毒毒处处理理，并并对对包包装装容容器器进行灭菌或消毒处理。进行灭菌或消毒处理。44剩余标本和容器的处理剩余标本如组织器官、动物尸体、检验后的废弃标本及其容器如塑料袋、纸袋等高压灭菌后焚烧处理。液体废弃标本 可用 121，30分钟高压灭菌处理。45手的消毒尽量采用自动洗手设备尽量采用自动洗手设备离开实验室前，脱掉工作服后离开实验室前，脱掉工作服后接触污染物品后接触污染物品后离开生物安全柜前离开生物安全柜前46实验结束后消毒灭菌每日实验结束后立即对实验环境和自己进行消毒处理。实验告一段落后对实验室进行终末消毒。47目 标结果操作者环境48