DB32∕T 3719-2020 中华绒螯蟹“诺亚1号”(江苏省).pdf

TCS 67. 120. 30 B 52 DB32 江苏省山巳ET且，万标准DB 32fT 3719-2020 中华绒萤蟹诺亚1号Chinese mitten-handed crab Noahs Ark NO.l 2020-01-06发布2020-01-30实施江苏省市场监督管理局发布DB 32/T 3719-2020 目IJ1=1 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由江苏诺亚方舟农业科技有限公司提出。本标准起草单位:江苏诺亚方舟农业科技有限公司、中国水产科学研究院淡水渔业研究中心。本标准主要起草人:庄红根、徐跑、戴飞、董在杰、郭风英。I DB 32/T 3719-2020 中华绒萤蟹诺亚1号1 范围本标准规定了中华绒整蟹诺亚1号产品的术语和定义、要求、规格、试验方法、检验规则、捕捞、暂养、标志、捆扎、包装、运输、贮存。本标准适用于中华绒整蟹诺亚1号的成品。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 191包装储运图示标志GB 5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB 5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定GB 5009.5食品安全国家标准食品中蛋白质的测定GB 5009.6食品安全国家标准食品中脂肪的测定GB 5009.11食品安全国家标准食品中总肺及无机畔的测定GB 5009.12食品安全国家标准食品中铅的测定GB 5009.15食品安全国家标准食品中锚的测定GB 5009.17食品安全国家标准食品中总京及有机示的测定GB/T 5009.19食品中有机氯农药多组分残留量的测定GB/T 5009.162动吻性食品中有机氯农药和拟除虫菊酷农药多组分残留量的测定GB 5009.190食品安全国家标准食品中指示性多氯联苯含量的测定GB 5009.205食品安全国家标准 食品中二日思英及其类似物毒性当量的测定GB 5009.268食品安全国家标准食品中多元素的测定GB 5749生活饮用水卫生标准GB 11607渔业水质标准GB/T 17924地理标志产品标准通用要求GB/T 19783中华绒董蟹GB/T 19857水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定GB/T 20014.14良好农业规范第14部分:水产池塘养殖基础控制点与符合性规范GB/T 20361水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定高效液相色谱荧光检刷法GB/T 20366动物源产品中唾诺自同类残留量的测定液相色谱-串联质谱法GB/T 21317动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法GB/T 21323动物组织中氨基糖昔类药物残留量的测定高效液相色谱-质谱/质谱法GB/T 22338动物源性食品中氯霉素类药物残留量测定GB 23200.92食品安全国家标准动物源性食品中五氯酣残留量的测定液相色谱-质谱法DB 32/T 3719-2020 法SC/T 3015水产品中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定SC/T 3016水产品抽样方法SC/T 9101淡水池塘养殖水排放要求SN/T 1928进出口食品中硝基咪瞠残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法SN/T 3032出口食品中三聚氨版和三聚氨酸检测方法液相色谱-质谱/质谱法SN/T 3235出口动物源食品中多类禁用药物残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法DB32/T 593中华绒整蟹产品农业部783号公告-1-2006水产品中硝基映喃类代谢物残留量的测定液相色谱.串联质谱法农业部1025号公告-23-2008动物源食品中磺肢类药物残留检测液相色谱-串联质谱法农业部1077号公告-1-2008水产品中17中磺肢类及15种诺喳自同类药物残留检测液相色谱.串联质谱3术语和定义3.1中华绒萤蟹诺亚l号中华绒萤蟹诺亚1号(以下统称诺亚1号蟹)是指选用诺亚1号蟹种养殖的成蟹，其质量符合GB/T19783的要求。4要求4.1环境条件水质应清新无污染，符合GB11607规定。pH值7.5-8.5，溶解氧当mg/L.水深1.2-2.0m，透明度O.4m以上，池底平坦，淤泥少。4.2蟹种亲本为诺亚方舟基地:e3Z长江水系培育而成的国家水产新品种诺亚l号大幼体由诺亚方舟在定点蟹苗繁育场繁育而成，规格为14万头/kg，一龄蟹种由诺亚方舟及子公司的蟹种培育基地培育成，规格为20只/kg-120只/kg，并荷合相应的国家标准。4.3养殖周期在养殖基地内连续饲养周期不少于2011天。4.4感官要求诺亚l号蟹的感官应符合表l要求。表1诺亚1号蟹的感官指标项目指标体表体表清洁，纹理清晰，没有寄生虫及其他附着物。背由淡百色或黄褐色，腹部灰白。甲壳坚硬，头脑甲呈方同形，后半部宽于前半部，中央隆起，表面凹凸不平。活)J反应灵敏，活力强。气味共有目亚l号蟹固有的鲜昧，无异味。鱼E鱼思丝清晰完整，无色或微褐色。附肢附肢完整，关节处肌肉饱满。组织肌肉纹理清晰，有弹性，不易剥离。水煮肌肉组织紧密有弹性，肉质鲜嫩，蟹黄厚实酥松，气味微甜。2 DB 32/T 3719-2020 4.5产品分级4.5.1规格等级诺亚1号蟹按个体体重的不同分成特级、一级、二级、三级、四级、五级，规格应符合表2的规定。表2诺亚1号蟹的规格等级规格g/只雄蟹雌蟹特级二主300注200一级250-299 175-199 二级200-249 150-174 一级175-199 125-149 四级150-174 100-124 五级150 100 4.5.2质量等级诺亚l号蟹分为一级、二级共两个质量等级，等级指标应符合表3的规定。表3诺亚1号蟹的质量等级项目一级二级外观蟹体清洁，无斑点，附肢齐伞。蟹体清洁，斑点少，附肢齐全。内在品质H:腺饱涡，无透明区4腺有1-2mm透明区。肥i芮度，g/cm3 二0.41二三0.361年腺占体重的百分比， 注7.5注6.54.6理化指标10月中旬至11月中旬，蟹体的理化指标应符合表4的规定。表4诺亚1号蟹的理化指标项目雄蟹惟蟹粗蛋白/(%)注14.5 15.5 粗脂肪/(%)注7.5 9.5 水分/(%) 、2 68 65 灰分/(%) 、2 1.8 1.5 4.7安全卫生指标安全指标应符合表5的规定。3 DB 32/T 3719-2020 表5诺亚1号蟹的安全指标序号检验项目指标检测方法铺(以Cd计), flg/kg 主三500GB 5009.15 GB/T 19857 2 孔雀石绿a不得检出GB/T 20361 3 氯霉素，flg/kg 不得检出GB/T 22338 4 氟苯尼考，问/kg100 GB/T 22338 5 日夫喃瞠自同代谢物不得检出农业部783号公告-1-20066 日夫H南它自同代谢物不得检出农业部783号公告-1-20067 口如南西林代谢物不得检出农业部783号公告-1-20068 日夫H南妥因代谢物不得检出农业部783号公告-1-2006恩诺沙星(以旦、诺j少星与环丙沙星之和GB/T 20366 9 主三5计)，g/kg 农业部1077号公告-1-2008GB/T 20366 10 t军tjg(壳U、j、生同不得检出农业部1077号公告-1-2008GB/T 20366 11 培氟沙星不得检出农业部1077号公告-1-2008GB/T 20366 12 洛美j少星不得检出农业部1077号公告-1-2008GB/T 20366 13 诺氟j少星不得检出农业部1077号公告-1-2008SC/T 3015 14 四环素，g/kg主三100GB/T 21317 SC/T 3015 15 金霉素，lg/kg 运100GB/T 21317 SC/T 3015 16 士霉素，g/kg运100GB/T 21317 磺肢类(总量)b 不得检出农业部1025号公告-23-200817 农业部1077号公告-1-200818 地西洋不得检出SN/T 3235 19 甲硝日坐不得检出SN/T 1928 20 地美硝瞠不得检出SN/T 1928 21 洛硝R边瞠不得检出SN/T 1928 22 挂基甲硝瞠C不得检出SN/T 1928 23 经甲基甲硝眯日坐d不得检出SN/T 1928 24 五氢酣酸呐(以五氯酣计)不得检出GB 23200.92 25 甲基末，mg/kg 主三0.5GB 5009.17 4 DB 32/T 3719-2020 表5(续)序号检验项目指标检测方法26 无机呻，mg/kg 主三0.5GB 5009.11 27 铅，mg/kg 运0.3GB 5009.12 28 指示性多氯联苯，m各国主三0.2GB 5009.190 29 己烯雌酣，flg/kg 不得检出SN/T 3235 30 滇氨菊醋，mg/kg 不得检出GB/T 5009.162 注a孔雀石绿系指孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿残留量之和，以孔雀石绿表示。b 横肢类(总量)项目至少包含磺胶|眩吭、横肢二甲11密吭、磺胶币基|眩吭、磺胶甲恶瞠、横肢间二甲氧11密吭、晴肢邻二甲氧H密院、磺肢间甲氧H密皖、h期安氯屹H秦、磺胶险恶H林，如检出其他睛胶药物残留，一并计入磺胶类(总量)并判定。C.搓基甲硝H些为甲硝瞠代谢物。d. Y;王币基甲硝咪哇为地美酣睡、洛硝盹瞠代谢物。4.8风险监控指标风险监控指标应符合表6要求。表6诺亚1号蟹的风险监控指标序号项目类别项目指标检测方法1 四环素类强力霉素，g/kg三三50GB/T 21317 2 染料类结晶紫不得检出隐性结晶紫不得检出GB/T 19857 3 4 化学元素类铜，g/kg三三20000GB 5009. 268 5 氨基糖苦类新毒素，g/kg500 GB/T 21323 6 环境污染物二H墨、英及其多氯联苯，pg/g 6. 5 GB 5009. 205 7 杀虫剂自J主飞，/主、/主-、，mg/kg O. 05 滴滴j弟，咱g/kgO. 05 GB/T 5009. 19 8 9 非法添加物=聚氨肢不得检出SN/T 3032 10 环丙沙星，g/kg三三511 丹i若j少星，g/kg5 12 沙拉沙星，g/kg5 13 。奎i若酣类药物麻保沙星，g/kg5 GB/T 20366 14 恶。奎酸，g/kg 5 15 氟甲。奎，g/kg5 16 双(二氟沙星，g/kg5 5 DB 32/T 3719-2020 5检验方法5.1感官特征5.1.1感官检验将试样放在白色搪瓷盘中，用目测、于掂、捏，鼻嗅检查。当感官难以判定产品质量时，进行水煮试验。5.1.2水煮试验将2-3只蟹用清水洗净放入蒸芳、容器中，加少量水，以刚没过整蟹为准，煮10-15分钟，打开盖，闻其昧，品尝肉质C5.2等级检验5工l规格等级用灵敏度为O.lg的天秤称重，进行规格分级。5工2肥满度的测定按DB32/T593的方法执行。5.3蛋白质的测定按GB5009.5的方法执行。5.4脂肪的测定按GB5009.6的方法执行。5.5水分的测定按GB5009.3的方法执行。5.6灰分的测定按GB5009.4的方法执行。6检验规则6.1组批规则同一养殖场、同等级、同批次、同时收获的诺亚l号蟹为一个检验批次。6.2抽样方法按SC/T3016的规定执行。6.3检验分类产品检验分为出场检验和型式检验。6.3.1出场检验每批产品出场前，出场检验由生产者执行，检验项目为等级规格、感官指标。6.3.2型式检验型式检验是对产品进行全面考核，即对本标准规定的全部要求进行检捡有下列情形之一者应进行型式检验:a)申请绿色食品农产品标识:b)有关行政部门提出型式检验要求:c)前后两次抽样检验结果差异较大:d)正常养殖时，每年至少一次型式检验;6.4判定规则6.4.1所有检验指标都符合本标准的规定，则判定该批次产品合格。6.4 .2卫生标准中有一顶不符合本标准的规定，则判定该批次产品不合格。6 DB 32/T 3719-2020 6.4.3除卫生指标外的其他指标有两项或两项以上不符合本标准的规定，则判定该产品不合格，有一项指标不合格，可降级或进行复检，以复检结果为准。7捕捞及暂养7.1 捕捞捕捞方式可以是地笼捕捞、塘埂捕捉和干塘捕捞等，但不得使用叮光捕捞。捕捞后池塘尾水排放符合SC/T9101的要求。7.2暂养成蟹捕捞后在暂养塘分规格分网箱暂养，上市前经专用清洗?也请水暂养(15-30)分钟，清洗用水符合GB5749的规定，彻底去除成蟹跟中泥沙。8标志、捆扎、包装、运输、贮存8.1标志诺亚1号蟹的标志使用，应符合GB/T17924规定。8.2捆扎诺亚l一号蟹用棉绳或香草将蟹的两只大整及附肢捆扎住，捆扎物不得超过蟹体重量的5%。8.3包装8.3.1将蟹头部朝下整齐排列于包装容器中，包装容器应有透气孔:包装材料应卫生、洁净，无毒、无害。8.3.2运输包装物的图示标志应符合GB/T191的规定。8.4运输、贮存8.4.1在低温清洁的环境中装运，保证鲜活，防止挤压。运输工具应清洁卫生、无毒、无异昧，不得与有毒有害物品混运和重压，严防运输污染。8.4 .2活体诺亚l号蟹应贮存于洁净环境中，防止有毒有害物质的污染及其他损害。9记录符合GB/T20014.14的要求，及时登记蟹种、饲料、饵料、药物等投入品的使用情况，记录保存时间不得少于2年。7 DB 32/T 3719-2020 附录A(规范性附录)A.l亲本来源和类型A.l.1亲本来源2005年采用长江水系野生中华绒整蟹为基础群体，经群体继代选育而成。2014年2015年经历生产小试、中试试验，2017年4月经全国水产原种和良种审定委员会审定，定名为诺亚1号(品种登记号:GS-O 1-005-20 16) A.1.2亲本特性形态指标青背、白肚、金爪、黄毛是指背甲淡青色，腹部银白色或灰白色，整足具有浓密的绒毛，步足上的刚毛呈金黄色;步足长，额齿明显，额齿问缺刻较深，呈u字型。生物学指标:性腺发育良好，体重规格达标(雄蟹大于200g，雌蟹大于150g)0 A.2主要特征A.2.1形态学特征头胸甲呈方圆形，后半部宽于前半部，中央隆起，表面凹凸不平。额缘具4尖齿，齿间缺刻较深，第4尖齿小而明显，内额齿间缺刻呈u型。额部两侧有一对带柄的复眼。头胸部两侧有5对足，第1对为整足，末端似钳，布满棕褐色绒毛，后4对为步是，长节末前角各有l尖齿。腹部覆以腹甲，腹部扁平，雄蟹腹脐呈三角形，雌蟹腹脐呈卵圆形。头胸甲背面淡青色豆豆黄褐色，腹部灰白。诺亚l号蟹的外部形态见图l和国20雌性雄性图1诺亚1号蟹外彤L背面)雌性雄性图2诺亚1号蟹外形(腹面8 DB 32/T 3719-2020 A工2可量性状诺亚1号蟹的主要形态性状比值见表L表l诺亚1号蟹主要形态性状比值项目平均值际j住差雄休I6J/头胸甲长0.560:1:0.022 头胸甲宽/头脑甲长1.106:1:0.026 中额齿问Ji!p/头胸甲长0.077:1:0.006 两侧额齿|可Ji!fi/头胸甲长0.228:1:0.011 第一侧齿间距/头胸甲长0.603:1:0.018 侧缺刻至前疵状突/头脑甲长0.081:1:0.010 侧缺刻至中疵状突/头脑甲长0.189:1:0.008 侧缺刻至后流状突/头胸甲长0.224:1:0.011 第四侧内豆中缺刻/头胸甲长0.695:1:0.011 第四侧JA豆侧缺刻/头胸甲长0.645:1:0.012 第四侧iIi豆前疵突/头胸甲长0.637:1:0.013 第二步足长节长/头脑甲长0.778:1:0.025 第二步足趾节长/头脑甲长0.430:1:0.060 A.3形体与繁殖A.3.1形体指标诺亚l号蟹体重与头胸甲长的关系式为:式中:W一一体重g;L 头脑甲长CffioA.3.2繁殖雄蟹W=0.0207L22173(R=0.8538), 雌蟹W=0.0041L25372(R=0.8247)。A.3.2.1诺亚l号蟹生殖泪游一般在10月中下旬-11月下旬oA.3.2.2性成熟雌蟹可进行一次交配，多次产卵。A.3.2.3不同体重诺亚l号蟹抱卵量见表20表2不同体重诺亚l号蟹的抱卵量体重/g抱卵量/粒100 200 750000 9 DB 32/T 3719-2020 A.4遗传学特性A.4.1细胞遗传学特性诺亚1号蟹的染色体数目为146(2n) ，为点状型。图3诺亚1号蟹染色体A.4.2生化遗传学特性诺亚l一号蟹肌肉组织脂酶(EST)同工酶的电泳图谱见图40+ 图4诺亚l号蟹肌肉组织脂酶(EST)同工酶电泳图A.4.3分子遗传学特性A.4.3.1 RAPD 筛选到2个RAPD引物Sl与S15在诺亚l号蟹群体中扩增条带清晰，扩增产物长度分别为950bp和750bp(图5，6)。10 DB 32/T 3719-2020 I 2 3 4 5 6 7 8 M 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 950 图5引物SIPCR扩增M: IOObp DNA ladder, 1-15:雌蟹，16-24:雄蟹1 2 3 4 5 6 7 8 M 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 750 图6寻|物S15PCR扩I国M: 100bp DNA ladder, 1-15:雌蟹，16-24:雄蟹A.4.3.2核糖体内转录区l用所设计的特异引物ITS1，在诺亚l号蟹群体中的核糖体转录区l中进行扩增，均可扩出一条大小为390bp的条带，见图701 2 3 4 5 6 7 8 M 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 390 bp A.5检测方法A.5.1形态特征日测检查。图7引物TTS1PCR扩增M: DL2000, 1-15:雌蟹，16-24:雄蟹11 DB 32/T 3719-2020 A.5.2可量指标10月-11月取性成熟蟹，雌雄个体样本数均大于30只。用感量不低于0.001g的天平称重，计算，取算术平均值。A.5.3繁殖力测定在繁殖季节，将附着在抱卵蟹腹部刚毛上的受精卵刮下称重。取3组样品，采用O.OO1g电子天平各称取19卵，在解剖镜下计数，计算平均每克卵粒数和抱卵数。A.5.4染色体测定按GB/T18654.12的规定执行。A.5.5同工酶测定按GB17716中的第6章的规定执行。A.5.6随机扩增多态(RAPD)测定A.5.6.1样本采集与保存取约200mg肌肉、肝脏、血液或性腺的新鲜样品，于液氮、干冰及-300C低温保存，或于95%乙醇保存。A.5.7基因组DNA提取采用酌-氯仿抽提法提取基因组DNAo取个体新鲜肌肉组织(步足或整足)约200mg，于冰上预冷的研钵内研磨，放入1.5mL的eppendorf离心管中，加入2倍体积的裂解缓冲液(10mmol/L Tris-HCL, pH值8.0;O.lmol/L EDTA, pH值8.0;0.5%SDS)泪匀，加入蛋白酶K至终浓度为100g/mL，560C消化3-4h。冷却至室温后，室温下13200r/min离心10min，取上清液加入等体积的平衡酣-氯仿-异戊醇(25:24:1)剧烈混匀，13200 r1min室温离心10mino取粘稠水相，加入2倍体积的无水乙醇，-20oC静置30min，13200 r/min室温离心10min，弃上;青液晾干。将上述沉淀溶于200LE(2ml TE, pH值7.6，溶解2mg粗制膜蛋白酶卧.faseI) , 3TC消化30mino1%琼脂糖i疑胶电泳观察提取的DNA浓度和纯度，40C保存。A.5.7.1基因组DNA的PCR扩增在0.5mL的薄壁管中加入总体积为25L的PCR反应混合液。其中2.5LlO年CR反应缓冲液( 100mmol/L Tris-HCL, 500mmol/L KCl, 1.3mg/mL BSA, 0.01 %Gelatin, pH值8.4) 2LMgCI2(2.5mmol几);1 L dNTP(2.5 mmol几);1LRAPD引入物(10mol几);0.2LTaq酶(5U10;0.7L基因组DNA;ddH20补足体积。PCR扩增程序940C预变性7min;940C变性min，370C退火1min，720C延伸2min，4045个循环720C延伸10min，40C保存。每次反应设置不含模板的空白对照。A.5.7.2PCR扩增产物的电泳分离与观察将扩增产物置于1%琼脂糖凝胶上进行电泳，取10LPCR扩增产物，用移液器将样品加入样品孔。以澳酣蓝做指示剂，在5V/cm疑胶的电压下进行电泳。当指示剂迁移至足够分离DNA片段的距离时，停止电泳。用0.5阳/mL的澳化乙链染色20min后，在Ef疑胶成像系统下观察井照相。12