肠癌B7H1表达的临床意义及作用机制.ppt

肠癌肠癌B7-H1B7-H1表达的临床意义及作用机制表达的临床意义及作用机制1研研 究究 背背 景景5/8/20242肿瘤微环境肿瘤微环境A.还原论者认为肿瘤是由一群单纯的肿瘤细胞聚集而成的B.肿瘤是由肿瘤细胞和肿瘤基质构成的，肿瘤基质主要包括成纤维细胞、各种免疫细胞和新生血管上皮细胞等细胞类型。5/8/20243Tc1Th1M1M2Th17/Tc17Th2/Tc2Treg/AnergicMyeloid-Derived Suppressor Cells(MDSC)Tc1Th1M1M2Th17/Tc17Th2/Tc2Treg/AnergicTreg/AnergicMyeloid-Derived Suppressor Cells(MDSC)肿瘤浸润免疫细胞几乎囊括了宿主免疫系统的所有成分：T 淋巴细胞，B淋巴细胞，巨噬细胞，树突状细胞，肥大细胞等，形成一个肿瘤局部微环境下的免疫系统。其中的淋巴细胞成分被定义为肿瘤浸润性淋巴细胞（Tumor infiltrating lymphocytes，TIL）,巨噬细胞被定义为肿瘤相关性巨噬细胞（Tumor associated macrophagel，TAM）。肿瘤微环境和免疫细胞肿瘤微环境和免疫细胞5/8/20244协同刺激分子和协同刺激信号协同刺激分子和协同刺激信号v双信号双信号vB7/CD28B7/CD28超家族超家族 TNF/TNFRTNF/TNFR超家族超家族v协同刺激分子及其受体介导协同刺激分子及其受体介导的信号途径在的信号途径在T T细胞的活化和细胞的活化和行使功能过程中发挥重要作行使功能过程中发挥重要作用，正成为对临床疾病进行用，正成为对临床疾病进行免疫干预最有希望的手段之免疫干预最有希望的手段之一。一。5/8/20245v人人B7-H1B7-H1基因定位于基因定位于9p249p24。属于免疫球蛋白超家族。其属于免疫球蛋白超家族。其开放阅读框编码开放阅读框编码290290个氨基酸个氨基酸由胞外由胞外IgVIgV、IgCIgC结构域、疏结构域、疏水性跨膜结构域、及胞内区水性跨膜结构域、及胞内区组成。胞外段与组成。胞外段与B7-1B7-1、B7-2B7-2具有较高的同源性，分别达具有较高的同源性，分别达到到2020、1515。vB7-H1B7-H1蛋白广泛表达于蛋白广泛表达于APCsAPCs，活化，活化T T、B B细胞，巨噬细胞细胞，巨噬细胞及一些非淋巴样组织。及一些非淋巴样组织。vB7-H1B7-H1通过与通过与T T细胞上的受体细胞上的受体PD-1PD-1结合，负性调控免疫应结合，负性调控免疫应答。答。B7-H1B7-H1分子分子 概况概况5/8/20246B7-H1B7-H1分子分子 概况概况5/8/20247研究内容研究内容1 1、分析人结直肠癌中、分析人结直肠癌中B7-H1B7-H1分子表达及分子表达及T T细胞的浸润情况细胞的浸润情况2 2、探讨、探讨B7-H1B7-H1信号对肿瘤浸润信号对肿瘤浸润T T细胞的作用机制细胞的作用机制结直肠癌的发展过程结直肠癌的发展过程5/8/20248第一部分第一部分人结直肠癌中人结直肠癌中B7-H1分子的表达及分子的表达及T细胞的浸润情况细胞的浸润情况5/8/20249实验方法实验方法肠癌标本的肠癌标本的收集及资料收集及资料统计（收集统计（收集结直肠癌标结直肠癌标本本112例）例）免疫组化检免疫组化检 测测B7-H1B7-H1的的 表达、表达、CD3+CD3+T T细胞及细胞及CD8+TCD8+T细胞的细胞的浸润情况浸润情况结合患者临结合患者临床病理参数床病理参数进行相关性进行相关性分析和生存分析和生存分析分析5/8/202410标本来源标本来源 标本取自2003年1月至2003年12月在苏州大学附属第四医院接受结肠直肠癌切除手术的112名患者的组织蜡块，收集患者的病理资料。所有病例经HE染色读片、病理诊断确认为结肠癌或直肠癌。患者年龄29-85岁，中位年龄62岁，所有患者术前均未接受放疗或化疗。同时选取10例癌旁正常组织作为正常对照。采用已确认B7-H1免疫组化染色阳性的乳腺浸润性导管癌组织作为阳性对照组织，采用扁桃体组织作为CD3抗体和CD8抗体免疫组化染色的阳性对照组织。5/8/202411CDBAA.肠癌组织高度表达B7-H1;B.肠癌组织低度表达B7-H1;C.正常组织不表达B7-H1;D.阴性对照一、一、B7-H1B7-H1分子在结直肠癌及正常组织中的表达分子在结直肠癌及正常组织中的表达实验结果实验结果肠癌组织中B7-H1分子的表达水平显著高于临近正常切端组织。（P0.001）5/8/202412二、二、B7-H1B7-H1在肠癌的表达情况和肠癌患者临床病理因素的相关性在肠癌的表达情况和肠癌患者临床病理因素的相关性5/8/202413三、三、B7-H1B7-H1的表达与患者预后的关系的表达与患者预后的关系肠癌组织中B7-H1分子的表达水平与患者的临床预后显著相关，且B7-H1高表达的患者生存率显著低于低表达的患者。（P0.05）5/8/202414四、四、CD3CD3+T T细胞、细胞、CD8CD8+T T细胞在肠癌组织的浸润与患者预后的关系细胞在肠癌组织的浸润与患者预后的关系BAA.肠癌组织中CD3+T细胞的浸润 B.肠癌组织中CD8+T细胞的浸润CD3+T细胞在肠癌组织浸润程度和肠癌患者的总体生存率密切相关，CD3+T细胞浸润高的患者其生存率较CD3+T细胞浸润低的患者升高（P0.01）。5/8/202415五、五、肠癌肠癌CD3CD3+T T、CD8CD8+T T细胞的浸润情况和患者临床参数的相关性细胞的浸润情况和患者临床参数的相关性5/8/202416六、肠癌六、肠癌CD3CD3+T T、CD8CD8+T T细胞的浸润程度与细胞的浸润程度与B7-H1B7-H1分子表达水平的分子表达水平的相关性相关性5/8/202417第一部分小结第一部分小结1、B7-H1分子在肠癌组织中的表达显著高于正常组织，并且与肿瘤部位和Dukes分期显著相关；2、生存分析显示，肠癌患者的预后与B7-H1分子的表达水平呈负相关，与CD3+T细胞的浸润程度呈正相关，而与CD8+T细胞的浸润程度无显著相关性；3、B7-H1分子的表达水平与CD3+T细胞的浸润程度呈负相关；5/8/202418第二部分第二部分B7-H1B7-H1信号对肿瘤浸润信号对肿瘤浸润T T细胞及其细胞及其亚群的影响亚群的影响5/8/202419实验方法实验方法分析肿瘤患者分析肿瘤患者外周血和组织外周血和组织中的中的T T 细胞亚细胞亚群群,及组织中及组织中TregsTregs与与B7-H1B7-H1的相关性的相关性构建构建SW480/B7-SW480/B7-H1H1+/-+/-细胞，并细胞，并与外周血与外周血CD4+TCD4+T细胞共培养细胞共培养检测刺激前后检测刺激前后调节性调节性T T 细胞细胞（TregsTregs）的）的功能改变功能改变5/8/202420一、肿瘤患者外周血和组织中的一、肿瘤患者外周血和组织中的T T细胞亚群细胞亚群肿瘤患者外周血中T 细胞总数比例较健康人变化不大，肿瘤组织中浸润的T细胞有所下降，但仍占浸润淋巴细胞总数的67.1，表明T细胞依然是抗肿瘤免疫应答的主要效应细胞。而无论在肿瘤患者外周还是组织中，CD4+T/CD8+T 细胞比例均发生了倒置，同时CD4+CD25+Tregs 比例也都较正常人显著上升。实验结果实验结果5/8/202421二、肿瘤浸润淋巴细胞中调节性二、肿瘤浸润淋巴细胞中调节性T T细胞（细胞（TregsTregs）与肿瘤细胞）与肿瘤细胞B7-H1B7-H1的关系的关系5/8/202422三、三、SW480/B7-H1SW480/B7-H1和和SW480/MockSW480/Mock细胞上细胞上B7-H1B7-H1分子和分子和GFPGFP报告基因的报告基因的表达表达ASW480/Mock细胞上GFP绿荧光蛋白的表达BSW480/Mock细胞上B7-H1蛋白的表达CSW480/B7-H1细胞上GFP绿荧光蛋白的表达DSW480/B7-H1细胞上B7-H1蛋白的表达SW480/MOCKSW480/MOCKSW480/B7-H1SW480/B7-H1GFPGFPB7-H1B7-H15/8/202423四、肿瘤四、肿瘤B7-H1B7-H1信号促进信号促进CD4+TregsCD4+Tregs的诱导产生的诱导产生5/8/202424五、肿瘤五、肿瘤B7-H1B7-H1信号促进信号促进CD4CD4+T T细胞分泌细胞分泌TGF-TGF-和和IL-10IL-105/8/202425第二部分小结第二部分小结1、肠癌患者的组织及外周血中的Tregs比例都较正常人显著上升；2、成功构建了肠癌转基因细胞株SW480/B7-H1+/-；3、在CD3单抗和TGF-的共同作用下，SW480/B7-H1可诱导Treg的产生。5/8/202426全文总结全文总结1、肠癌组织较正常组织显著高表达B7-H1分子，且与患者的肿瘤部位和Dukes分期显著相关，提示B7-H1在肠癌的发生发展过程中起着重要的作用。2、肠癌组织中B7-H1的表达水平与CD3+T细胞的浸润程度呈负相关，且两者都与患者的预后显著相关，提示B7-H1分子可能通过下调肿瘤微环境中的浸润性T淋巴细胞，从而介导了肿瘤免疫逃逸。3、体外实验结果表明，B7-H1分子对Tregs的产生具有诱导作用，提示B7-H1还有可能通过诱导产生抑制性的Tregs，从而抑制了宿主的抗肿瘤免疫应答。5/8/202427今后需要开展的工作今后需要开展的工作1、继续收集肠癌患者组织标本及术后随访资料，探讨B7-H1分子表达水平的检测在肠癌患者预后监测中的作用；2、通过建立动物模型，分析单抗治疗前后免疫功能的改变。5/8/2024285/8/202429后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用5/8/202430主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！5/8/202431致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求5/8/202432The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field5/8/202433