YY∕T 1847-2022 抗人球蛋白检测卡(柱凝集法)[医药].pdf

ICS 11. 100CCS C 44YY中华人民共和医药行业标准YY/T 18472022抗人球蛋白检测卡(柱凝集法)Anti-human globulin reagents (column agglutination technique, CAT)2022-05-18 发布2023-06-01 实施国家药品监督管理局 发布YY/T 18472022-XJL.刖 B本文件按照GB/T L1-2O2O标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定 起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由国家药品监督管理局提出.本文件由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会(SAC/TC 136)归口 .本文件起草单位：中国食品药品检定研究院、北京市医疗器械检验所、长春博迅生物技术有限责任 公司、伯乐生命医学产品(上海)有限公司、上海血液生物医药有限责任公司。本文件主要起草人:胡泽斌、黄杰、毕春雷、陈维佳、侯磊、詹申宏。IYY/T 18472022抗人球蛋白检测卡（柱凝集法）1范围本文件规定了抗人球蛋白检测卡（柱凝集法）的要求、试验方法,标签和使用说明书、包装、运输和贮 存等。本文件适用于以凝胶、玻璃微珠等材料进行填充微柱，采用免疫血液学、颗粒过筛和离心技术三者 结合的原理，进行定性检测的抗人球蛋白检测试剂,包括抗IgG、抗C3d、抗IgG+C3d.本文件不适用于血源筛查进行抗人球蛋白检测的诊断试剂。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。GB/T 1912008包装储运图示标志GB/T 29 79 1. 2-2013体外诊断医疗器械 制造商提供的信息（标示）第2部分:专业用体外诊 断试剂3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4要求 4. 1外观制造商应根据产品的包装特点规定适当的外观要求。一般应有试剂各组分组成、性状；内外包装、 标签清晰等的要求。4. 2特异性421抗IgG的特异性4. 2. 1 J 总则制造商应选择包含但不限于以下3个系统的IgG抗体,分别是Rh系统的抗D抗体、Kidd系统的 抗Jk*/Jkb抗体与Duffy系统的抗Fy7Fyb抗体，使用RhD阳性与阴性红细胞、Jk/JH阳性与阴性红 细胞、FyVFyb阳性与阴性红细胞，与待检抗人球蛋白检测卡进行间接抗人球蛋白试验和直接抗人球蛋 白试验。注：本文件所涉及检测所用红细胞的信息见附录A.4. 2. 1.2 间接抗人球蛋白试验IgG型抗D抗体、抗JK/Jkb抗体、抗Fy*/Fyb抗体与相应抗原阳性的红细胞在检测卡中反应，结 YY/T 18472022果应均为阳性反应;与相应抗原阴性的红细胞在检测卡中反应，结果应均为阴性反应;健康人的血浆/血 清与O型红细胞在检测卡中反应,结果应为阴性反应.注1： RhD阳性红细胞是指正常RhD阳性红细胞,不包含RhD抗原变异体在内的RhD阳性红细胞.注2：本文件所涉及检测所用血清或血浆的信息见附录B；“/”表示或者；健康人是指其血浆或血清中无不规则 抗体.4.2.1.3 直接抗人球蛋白试验抗人球蛋白检测卡（柱凝集法）IgG柱应符合以下要求：a）与IgG型抗D抗体、抗Jk/Jl?抗体、抗Fy-/Fyb抗体致敏的相应抗原阳性红细胞反应，结果 应均为阳性反应；与同样致敏操作的相应抗原阴性红细胞反应，结果应均为阴性反应;与未致 敏的红细胞反应,结果应为阴性反应。b）当此柱X为抗IgG柱时，与C3d致敏的红细胞反应,结果应为阴性反应。4. 2. 2 抗C3d的特异性抗人球蛋白检测卡（柱凝集法）C3d柱应符合以下要求：a）与C3d致敏的红细胞反应,结果应为阳性反应;与未致敏的红细胞反应,结果应为阴性反应。b）当此柱仅为抗C3d柱时，与IgG型抗D抗体致敏的红细胞反应,结果应为阴性反应。4. 3 灵敏度4. 3. 1 抗IgG的灵敏度4. 3. 1.1 间接抗人球蛋白试验在检测卡中IgG型抗D抗体与RED阳性红细胞发生阳性反应，凝集强度应大于或等于3+；在检 测卡中】gG型抗JY/JH抗体、抗FyVFyb抗体与含有相应抗原阳性红细胞发生阳性反应，凝集强度应 大于或等于1+.4. 3J. 2直 接抗人球蛋白试验检测卡与IgG型抗D抗体致敏的红细胞发生阳性反应，凝集强度应大于或等于3+；检测卡与IgG 型抗Jk,/JH抗体、抗Fy*/Fyb抗体致敏的红细胞发生阳性反应，凝集强度应大于或等于4.3.1.3 效价比对试骐检测卡间接抗人球蛋白试验检测IgG型抗D抗体的效价，应不低于用相应抗人球蛋白试剂国家标 准品同步试管法测得的效价。注：本文件所涉及抗人球蛋白试剂国家标准品的信息见附录C.4. 3. 2 抗C3d的灵敏度与C3d致敏的红细胞发生阳性反应，凝集强度应大于或等于1 +。4. 4 批内重复性4. 4. 1 抗IgG的重复性4. 4. 1.1 间接抗人球蛋白试验用同批检测卡分别对能产生1 +2+凝集强度稀释度的IgG型抗体与相应抗原阳性和阴性红细 YY/T 18472022胞样本进行检测，各重复检测10次，结果均应一致;且阳性结果凝集强度的差异不超过1个+,阴性结 果不应有凝集和溶血等不易分辨的现象。4. 4. 1. 2 直接抗人球蛋白试验用同批检测卡分别对能产生1 +2 +凝集强度稀释度的IgG型抗体致敏的红细胞进行检测，未致 敏红细胞做阴性对照，各重复检测10次，结果均应一致;且阳性结果反应强度的差异不超过1个+,阴 性结果不应有凝集和溶血等不易分辨的现象。442抗C3d的重复性用同批检测卡分别对同一 C3d致敏和未致敏红细胞样本进行检测，各重复检测10次，结果均应一 致;且阳性结果凝集强度差异不超过1个十 ,阴性结果不应有凝集、溶血等不易分辨现象。4. 5 批间重复性用3个批次的检测卡分别对批内重复性进行检测，比较3批检测卡的结果，应符合4. 4的相应 要求。4. 6 稳定性可选用效期稳定性或热稳定性进行验证：a）效期稳定性:制造商应规定产品的有效期。取到效期后一定时间内的产品，检验其外观、特异 性、灵敏度和批内重复性，结果应符合4. 14. 4的相应要求。注1： 一般地，效期为1年时选择不超过1个月的产品，效期为半年时选择不超过半个月的产品，以此类推.但如超 过规定时间，产品符合要求时也可以采纳.b）热稳定性:在规定条件下处理试剂，检验其外观、特异性、灵敏度和批内重复性，结果应符合4 4. 4的相应要求。注2：热稳定性不能用于推导产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式.注3：根据产品特性可选择a）、b）方法的任意组合，但所选用方法宜能验证产品的稳定性，以保证在效期内产品性能 符合标准要求。5试验方法5J外观在自然光下目视检查外观，判断结果是否符合4. 1的要求。5. 2特异性5. 2. 1 抗IgG的特异性5. 2,1.1 间接抗人球蛋白试验按照产品说明书中间接抗人球蛋白试验的方法进行操作和判断。将相应抗体和红细胞加入检测卡 的微柱管中，37 C孵育后离心，目测观察，各检测一次，判断结果是否符合4. 2. 1. 2的要求。52. 1. 2直接抗人球蛋白试验制造商应规定各致敏红细胞的制备方法，如IgG型抗D抗体、抗JY/Jkb抗体、抗Fy/Fyb抗体致 敏的相应抗原阳性红细胞，以及同样致敏操作的相应抗原阴性红细胞。按照产品说明书中直接抗人球 3YY/T 18472022蛋白试验的方法进行操作和判断，将致敏红细胞和对照红细胞分别加入微柱管中，离心后目测观察，各 检测一次，判断结果是否符合4. 2. 1. 3的要求.522抗C3d的特异性制造商应规定C3d致敏红细胞和IgG型抗D抗体致敏红细胞的制备方法，按照产品说明书中直接 抗人球蛋白试验的方法进行操作和判断,将致敏红细胞或对照红细胞加入微柱管中，离心后目测观察, 各检测一次，判断结果是否符合4. 2. 2的要求。5. 3 灵敏度5. 3. 1 抗IgG的灵敏度间接抗人球蛋白试验和直接抗人球蛋白试验的操作方法同521,各检测一次，判断结果是否符合 4. 3. 1.1 和 4. 3. 1. 2 的要求。效价比对试验:待检抗人球蛋白（抗IgG）检测卡应使用抗人球蛋白试剂（抗IgG）国家标准品进行 同步比对，待检抗人球蛋白（抗IgG+C3d）检测卡应使用抗人球蛋白试剂（抗IgG+C3d）国家标准品进 行同步比对。按国家标准品的说明书进行操作和判断，判断结果是否符合431. 3的要求。5. 3. 2 抗C3d的灵敏度制造商应规定C3d致敏红细胞的制备方法，按照产品说明书中直接抗人球蛋白试验的方法进行操 作和判断,将致敏红细胞加入微柱管中，离心后目测观察，各检测一次，判断结果是否符合4. 3. 2的 要求。5. 4 批内重复性5. 4. 1 抗IgG的重复性5. 4. 1.1 间接抗人球蛋白试验按照5. 2. L1方法，选用在检测卡内能产生1+2+凝集强度稀释度的IgG型抗D抗体、抗Jk,/JY抗 体、抗FyVFyb抗体中的1个抗体，分别与相应的抗原阳性和阴性红细胞在检测卡内进行检测，各重复 10次，判断结果是否符合441. 1的要求。5. 4. 1. 2 直接抗人球蛋白试验按照5. 2. L2方法，选用能产生1 +2 +凝集强度稀释度的IgG型抗D抗体、抗Jk*/Jkb抗体、抗 FyVFyb抗体中的1个抗体致敏的红细胞；同时使用未致敏的相应抗原阳性红细胞做阴性对照进行检 测，各重复1。次，判断结果是否符合4. 4. 1.2的要求。5. 4. 2 抗C3d的重复性按照5. 2. 2方法，检测C3d致敏的O型红细胞，同时使用未致敏的该O型红细胞做阴性对照进行 检测，各重复10次，判断结果是否符合4. 4. 2的要求。5. 5 批间重复性取三个批次的试剂，按照5. 4方法，对批内重复性项目进行检测，判断结果是否符合4. 5的相应 要求。4YY/T 184720225. 6 稳定性可选用效期稳定性或热稳定性进行验证：a）效期稳定性:取到效期后一定时间内的产品，按照产品说明书进行操作和判断，判断结果是否 符合4. 6 a）的相应要求；b）热稳定性;制造商应规定热稳定性的放置时间是否与剩余效期有关，将试剂在一定温度下放置 一定时间后，按照产品说明书进行操作和判断，判断结果是否符合4,6 b）的相应要求。6标签和使用说明书标签和使用说明书应符合GB/T 29 79 1. 2的规定。7包装、运输、贮存7. 1 包装包装储运图示标志应符合GB/T 191的规定。包装容器应保证密封性良好，完整，无泄露，无破损。7. 2 运输试剂应按制造商的要求运输。在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压,避免阳光直射和雨雪浸淋, 防止与酸碱物质接触，防止内外包装破损.7. 3 贮存试剂应在制造商规定条件下保存。5YY/T 18472022附录A (资料性) 检测所用红细胞A. 1抗IgG检测用红细胞建议使用商品化不规则抗体检测试剂(人血红细胞)中已知Rh型别及Fy7Fyb及Jk/JY型别的 红细胞;使用自备红细胞，应明确其ABO血型并满足以下要求：a)外观:红细胞无溶血、无凝集及异常.b)抗原特异性:使用已批准上市的ABO血型定型试剂和RhD血型定型试剂，商品化的抗Jk,、抗 JP、抗Fy、抗Fyb抗体试剂，对红细胞进行抗原鉴定.检测常用O型红细胞的抗原特异性, 应符合表A. 1要求。表A. 1 O型红细胞的抗原特异性抗体0型RhD( + ) 红细胞0型 RhD(-) 红细胞O型Fy (a+) 红细胞0型Fy (a) 红细胞。型 Fy(b+) 红细胞O星 Fy(b-) 红细胞O型 Jk(a+) 红细胞。型 JkCa) 红细胞0型 Jk(b+) 红细胞0型 Jk(b-) 红细胞抗A一抗B一抗D+/抗Fy,/+一一一抗F/+抗Jk，/+抗 Jk11111“1+一注：表示阳性，“一”表示阴性.c)直接抗人球蛋白试验:使用已注册上市的抗人球蛋白检测试剂进行红细胞直接抗人球蛋白试 验，结果应为阴性.A. 2抗C3d检测用红细胞C3d致敏红细胞，使用已注册上市的抗人球蛋白检测试剂(抗IgG)进行检测，结果应为阴性；使用 已注册上市的抗人球蛋白检测试剂(抗C3d)进行检测，结果应为阳性.YY/T 18472022附录B（资料性）检测所用血清或血浆建议使用商品化A、B、O、AB血清或血浆进行检测;使用自备血清或血浆，应进行检验确认,并满足 以下要求：a）生物安全性:检测所用血清或血浆经乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎（HCV）抗体、艾滋 病病毒（HIV-1/HIV-2）抗体、梅毒血清学检测应为阴性；b）特异性:使用已注册上市的不规则抗体检测试剂（人血红细胞）和抗人球蛋白检测试剂，将血清 或血浆与不规则抗体检测试剂（人血红细胞）按照抗人球蛋白检测试剂说明书操作进行间接抗 人球蛋白试验，结果应为阴性。7YY/T 18472022附录C （资料性） 抗人球蛋白试剂国家标准品C. 1概述本附录提供了第4章灵敏度指标中适用的国家标准品信息，该国家标准品为“抗人球蛋白试剂（抗 IgG+C3d）国家标准品”（参考品编号：370029）和“抗人球蛋白试剂（抗IgG）国家标准品”（参考品编号： 370028）,C. 2用途“抗人球蛋白试剂（抗IgG+C3d）国家标准品”适用于评价柱凝集法的抗人球蛋白卡（抗IgG+C3d） 间接抗人球蛋白试验检测IgG型抗体的最低效价抗人球蛋白试剂（抗IgG）国家标准品”适用于评价 柱凝集法的抗人球蛋白卡（抗IgG部分）间接抗人球蛋白试验检测IgG型抗体的最低效价。C3规格和组成抗人球蛋白试剂（抗IgG+C3d）l支,0. 5 mL/支:抗人球蛋白试剂（抗IgG）l支,0. 5 mL/支。C. 4其他现行国家标准品说明书可在该国家参考品的分发单位网站进行查询下载，说明书的内容可能会根 据参考品的批次变更有所调整。8YY/T 18472022参考文献El尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程（第4版）M,北京:人民卫生出版社,2015.2总局关于发布抗人球蛋白检测试剂注册技术审查指导原则等4项注册技术审查指导原则的 通告（国家食品药品监督管理总局，通告2018年第36号）9