1、狂犬病毒包涵体(狂犬病毒包涵体(Negri bodyNegri body)第1页/共26页4 4细胞凋亡细胞凋亡 由宿主细胞基因所指令发生的一种生物由宿主细胞基因所指令发生的一种生物学过程。细胞受到诱导因子作用激发并将信学过程。细胞受到诱导因子作用激发并将信号导入细胞内部,死亡基因被激活,细胞膜号导入细胞内部,死亡基因被激活,细胞膜出现鼓泡、细胞核浓缩,出现鼓泡、细胞核浓缩,DNADNA降解。降解。细细胞胞水水平平第2页/共26页5 5病毒基因组的整合与细胞转化病毒基因组的整合与细胞转化 全基因组整合全基因组整合 失常性整合失常性整合 细细胞胞水水平平第3页/共26页病毒感染对免疫系统的作用病
2、毒感染对免疫系统的作用(1 1)损伤免疫系统)损伤免疫系统(2 2)超敏反应)超敏反应(3 3)自身免疫病)自身免疫病第4页/共26页抗病毒感染的免疫抗病毒感染的免疫第5页/共26页Innate and adaptive immune responses against viruses第6页/共26页1 1干扰素干扰素 固固有有免免疫疫广谱性广谱性选择性选择性间接性间接性高活性高活性种属特异性种属特异性第7页/共26页2 2NKNK细胞细胞 固固有有免免疫疫第8页/共26页第9页/共26页1 1体液免疫体液免疫-抵抗再感染抵抗再感染 适适应应性性免免疫疫第10页/共26页2 2细胞免疫细胞免疫
3、-清除病毒清除病毒 适适应应性性免免疫疫第11页/共26页第三节第三节 病毒感染的检查与防治原则病毒感染的检查与防治原则第12页/共26页病毒感染的检测方法病毒感染的检测方法(一)标本的采集与处理原则:(一)标本的采集与处理原则:1 1、尽早取材,选取合适部位。、尽早取材,选取合适部位。2 2、无菌操作,加双抗(青霉素和链霉素)。、无菌操作,加双抗(青霉素和链霉素)。3 3、冷藏速送(置含抗生素的、冷藏速送(置含抗生素的5050甘油缓冲盐水)。甘油缓冲盐水)。(二)形态学检查(二)形态学检查1 1、光镜、光镜:包涵体、多核巨细胞包涵体、多核巨细胞 2 2、电镜:病毒颗粒形态与大小、电镜:病毒颗
4、粒形态与大小(三)病毒的分离培养和鉴定(三)病毒的分离培养和鉴定1 1、动物接种:可用于疫苗安全检验。、动物接种:可用于疫苗安全检验。2 2、鸡胚培养:常用于流感病毒检测。、鸡胚培养:常用于流感病毒检测。3 3、细胞培养:细胞病变效应(、细胞培养:细胞病变效应(CPECPE)和红细胞吸附和红细胞吸附第13页/共26页n动物接种动物接种病病毒毒的的培培养养第14页/共26页n鸡胚接种鸡胚接种病病毒毒的的培培养养第15页/共26页n组织细胞培养组织细胞培养病病毒毒的的培培养养第16页/共26页(四四)病毒生长繁殖的指标与鉴定病毒生长繁殖的指标与鉴定蚀斑试验斑试验 病毒感染单层细胞后,产生的局限性病
5、灶,称蚀斑,蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的,称蚀斑形成单位,病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU(plaque forming unit)来表示。第17页/共26页常用快速诊断技术常用快速诊断技术光镜光镜-包涵体电镜电镜免疫荧光免疫荧光ELISA分子生物学技术分子生物学技术杂交Southern blotPCRNorthern blot(五)病毒的检测:(五)病毒的检测:抗原、核酸抗原、核酸、抗体抗体第18页/共26页病毒数量和感染性测定病毒数量和感染性测定1、蚀斑试验斑试验2、ID50 或或 TCID50 病毒感染鸡胚、动物或细胞后,引起 50%发生死亡或病变的最小量。病毒
6、感染单层细胞后,产生的局限性病灶,称蚀斑,蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的,称蚀斑形成单位,病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU(plaque forming unit)来表示。第19页/共26页PLAQUE ASSAYPLAQUE ASSAY第20页/共26页PLAQUE ASSAYPLAQUE ASSAY第21页/共26页PLAQUE ASSAYPLAQUE ASSAY第22页/共26页病毒感染的预防病毒感染的预防免疫预防免疫预防人工主动免疫人工主动免疫灭活疫苗:灭活疫苗:乙脑疫苗 狂犬疫苗 流感灭活疫苗HAV,HBV疫苗等减毒活疫苗:减毒活疫苗:脊髓灰质炎疫苗麻疹疫苗腮腺炎疫苗风疹疫苗HAV疫苗亚单位疫苗:亚单位疫苗:乙肝疫苗 HBsAg第23页/共26页抗病毒治疗抗病毒治疗 n1、化学制剂:作用于病毒复制的环节n2、基因治疗:反义寡核苷酸、小干扰 RNA、核酶n3、中草药:板蓝根、大青叶、穿心莲等可抑制病毒复制,黄芪等可增强机体免疫功能 第24页/共26页重点回顾重点回顾n持续性感染形成的原因。持续性感染形成的原因。n病毒感染对宿主细胞的影响。病毒感染对宿主细胞的影响。第25页/共26页Thank you End!End!第26页/共26页