DB37∕T 4013-2020 养殖水体中三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的测定 气相色谱-质谱法.doc

ICS13.060.25Z 16DB37山东省地方标准DB37/T 40132020养殖水体中三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的测定气相色谱-质谱法Determination of triazine,amide,dinitroaniline herbicides in aquaculture water by gas chromatography mass spectrometry2020 - 07 - 09发布2020 - 08 - 09实施山东省市场监督管理局发布前言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由山东省农业农村厅提出并组织实施。本标准由山东省农业标准化技术委员会渔业标准化分技术委员会（鲁TC03)归口。本标准起草单位：山东省海洋资源与环境研究院、山东省水产品质量检验中心。本标准主要起草人：张秀珍、徐英江、张华威、宫向红、刘小静、韩典峰、田秀慧、黄会、任传博。养殖水体中三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的测定气相色谱-质谱法1 范围本标准规定了养殖水体中16种三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的气相色谱-质谱测定方法。本标准适用于养殖海水及养殖淡水中三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的测定，其他水体可参照执行。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3 原理过滤后的试样，经固相萃取柱富集净化后，采用气相色谱-质谱法测定，外标法定量。4 试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。4.1 试剂4.1.1 氯化钠（NaCl）。4.1.2 乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯。4.1.3 甲醇（CH3OH）：色谱纯。4.1.4 正己烷（C6H14）：色谱纯。4.1.5 丙酮（CH3COCH3）：色谱纯。4.2 溶液配制正己烷-丙酮溶液：正己烷与丙酮等体积混合。4.3 标准品标准物质：16种除草剂标准品：纯度98%，标准品信息参照附录A。4.4 标准溶液配制4.4.1 标准贮备液：称取扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、乙草胺、甲草胺、环草津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺、西草净、二甲戊乐灵、丁草胺、草净津、丙草胺各10mg（精确至0.01mg），用乙酸乙酯溶解，分别定容至10mL，配制成1.0mg/mL标准贮备液，于4下避光保存，有效使用期为6个月。4.4.2 混合标准工作液：分别移取扑灭津等16种除草剂标准贮备液，用乙酸乙酯稀释成混合标准工作液，使其中扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺的浓度均为1.0g/mL，环草津、西草净、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺的浓度均为1.5g/mL，草净津、二甲戊乐灵的浓度均为2.0g/mL，于4下避光保存，有效使用期为1个月。4.5 材料4.5.1 0.45m混合纤维素滤膜。4.5.2 固相萃取柱：HLB，60mg/3mL，或相当者。5 仪器和设备5.1 气相色谱-质谱联用仪：配电子轰击离子源（EI源）。5.2 电子天平：感量0.00001g。5.3 离心机：转速不低于4000r/min。5.4 抽滤装置。5.5 固相萃取装置。5.6 氮吹仪。5.7 旋涡混合器。5.8 移液管：1mL。6 试样制备与保存6.1 养殖海水将待测养殖海水用抽滤装置经0.45m混合纤维素滤膜过滤后，备用。采集的样品应于28冷藏、避光保存，2d内分析或萃取完毕。萃取液应于28冷藏、避光保存，8d内分析完毕。6.2 养殖淡水在待测养殖淡水中加入氯化钠，使之浓度达到3%，用抽滤装置经0.45m混合纤维素滤膜过滤后，备用。采集的样品应于28冷藏、避光保存，2d内分析或萃取完毕。萃取液应于28冷藏、避光保存，8d内分析完毕。7 测定步骤7.1 提取与净化准确量取500mL处理后的养殖用水样品于1000mL三角瓶中，加入20mL甲醇，混匀。依次用甲醇（4.1.3）3mL、水3mL活化HLB固相萃取小柱（4.5.2），将水样品全部通过固相萃取小柱后，用水3mL淋洗，抽干5min，加正己烷-丙酮溶液（4.2.1）6mL洗脱。收集洗脱液，40氮吹至近干，用乙酸乙酯（4.1.2）定容至1mL，供气相色谱-质谱联用仪分析。7.2 标准曲线的绘制准确移取适量的混合标准使用液（4.4.2），用乙酸乙酯稀释成一系列的混合标准工作液，使其中扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺浓度分别为5.00g/L、10.0g/L、20.0g/L、50.0g/L、100g/L，环草津、西草净、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺浓度分别为7.50g/L、15.0g/L、30.0g/L、75.0g/L、150g/L，草净津、二甲戊乐灵浓度分别为10.0g/L、20.0g/L、40.0g/L、100g/L、200g/L，临用时配制。以定量离子峰面积为纵坐标，对应的浓度为横坐标，绘制标准工作曲线。7.3 测定7.3.1 气相色谱参考条件：a) 色谱柱：DB-17ms毛细管柱，30m0.25mm0.25m，或相当者；b) 载气：高纯氦气，纯度99.999%，流速1.0mL/min；c) 进样方式：无分流进样；d) 进样量：1L；e) 进样口温度：260；f) 柱温：起始温度50，保持1min；以20/min 升温至200，保持10min，以10/min升温至240，以30/min 升温至300，保持3min。7.3.2 质谱参考条件：a) 离子源：EI源；b) 接口温度：280；c) 离子源温度：230；d) 四级杆温度：150；e) 溶剂延迟：4.0 min；f) 测定方式：选择离子（SIM）监测模式，定量离子和定性离子见表1。表1 待测物定量离子和定性离子化合物名称定量离子m/z定性离子1m/z定性离子2m/z扑灭津214229172阿特拉津200215173特丁津214173229西玛津201186173乙草胺162223174甲草胺160188217环草津212227170敌草净213198171扑草净241184226莠灭净227170185异丙甲草胺162238146西草净213170185表1待测物定量离子和定性离子（续）化合物名称定量离子m/z定性离子1m/z定性离子2m/z二甲戊乐灵252281162丁草胺176160188草净津225198240丙草胺1622381767.3.3 测定方法7.3.3.1 定性方法在同样测试条件下，试样液中待测物的保留时间与标准工作液中待测物的保留时间偏差在0.10min以内，在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的特征离子均应出现，且检测到的离子的相对丰度，应与浓度相当的校正标准溶液相对丰度一致。其允许偏差应符合表2要求。表2 定性确证时相对离子丰度的允许偏差相对离子丰度%允许偏差%501020501510202010507.3.3.2 定量方法按7.3.1和7.3.2设定仪器条件，待仪器稳定后，根据表1中的定量离子分别对16种除草剂进行测定，记录保留时间和峰面积，以峰面积按外标法进行单点或多点校准定量，标准工作液和试样液中待测物的响应值均应在仪器检测线性范围内。标准溶液、空白加标样品的选择离子流图参见附录B。7.4 空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。8 结果计算和表述按式（1）分别计算试样中16种除草剂的含量（ng/L计算结果需扣除空白值，测定结果用两次平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。(1)式中：X 试样中被测组分的含量，单位为纳克每升（ng/L）；ci 试样溶液中对应的被测组分浓度，单位为微克每升（g/L）；V1 试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）；V 供试试样总体积，单位为毫升（mL）。9 检测方法的灵敏度、准确度和精密度9.1 灵敏度扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺检出限分别为5.0ng/L、定量限分别为10ng/L；环草津、西草净、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺检出限分别为7.5ng/L、定量限分别为15ng/L；草净津、二甲戊乐灵检出限分别为10ng/L、定量限分别为20ng/L。9.2 准确度扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺在添加浓度10ng/L100ng/L时，回收率均为70%120%；环草津、西草净、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺在添加浓度15ng/L150ng/L时，回收率均为70%120%；草净津、二甲戊乐灵在添加浓度20ng/L200ng/L时，回收率均为70%120%。9.3 精密度本方法的批内相对标准偏差小于15%，批间相对标准偏差小于15%。AA附录A （资料性附录）16种除草剂标准品信息表A.1 16种除草剂中、英文名称、分子式、分子量及CAS号中文名称英文名称分子式分子量CAS号扑灭津PropazineC9H16ClN5229139-40-2阿特拉津AtrazineC8H14ClN52151912-24-9特丁津TerbuthylazineC9H16ClN52295915-41-3西玛津SimazineC7H12ClN5201122-34-9乙草胺AcetochlorC14H20ClNO226934256-82-1甲草胺AlachlorC14H20ClNO226915972-60-8环草津CyprazineC9H14ClN522722936-86-3敌草净DesmetrynC8H15N5S2131014-69-3扑草净PrometrynC10H19N5S2417287-19-6莠灭净AmetrynC9H17N5S227834-12-8异丙甲草胺MetolachlorC15H22ClNO228351218-45-2西草净SimetrynC8H15N5S2131014-70-6二甲戊乐灵PendimethalinC13H19N3O428140487-42-1丁草胺ButachlorC17H26ClNO231123184-66-9草净津CyanazineC9H16ClN524021725-46-2丙草胺PretilachlorC17H26ClNO231151218-49-6BB附录B （资料性附录）16种除草剂标准溶液、空白海水加标样品、空白淡水加标样品色谱图1.扑灭津；2.阿特拉津；3.特丁津；4.西玛津；5.乙草胺；6.甲草胺；7.环草津；8.敌草净；9.扑草净；10.莠灭净；11.异丙甲草胺；12.西草净；13.二甲戊乐灵；14.丁草胺；15.草净津；16.丙草胺图B.1 16种除草剂标准溶液总离子流图（50.0g/L）1.扑灭津；2.阿特拉津；3.特丁津；4.西玛津；5.乙草胺；6.甲草胺；7.环草津；8.敌草净；9.扑草净；10.莠灭净；11.异丙甲草胺；12.西草净；13.二甲戊乐灵；14.丁草胺；15.草净津；16.丙草胺图B.2 空白海水加标样品总离子流图（20.0ng/L）1.扑灭津；2.阿特拉津；3.特丁津；4.西玛津；5.乙草胺；6.甲草胺；7.环草津；8.敌草净；9.扑草净；10.莠灭净；11.异丙甲草胺；12.西草净；13.二甲戊乐灵；14.丁草胺；15.草净津；16.丙草胺图B.3 空白淡水加标样品总离子流图（20.0ng/L）_