DB23∕T 2629-2020 尖叶石竹组培苗生产技术规程(黑龙江省).pdf

ICS 65.020.20B 62黑龙江省地方标准DB23DB23/T 26292020尖叶石竹组培苗生产技术规程2020-05-28 发布2020-06-27 实施黑龙江省市场监督管理局发 布DB23/T 26292020I前言本标准依据 GB/T 1.1-2009 的编写规则起草。本标准由黑龙江省农业农村厅提出。本标准由黑龙江省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：东北农业大学、哈尔滨圭璜科技有限公司。本标准主要起草人：王金刚、周爱民、张琦、杨涛、曲波、杨雅涵、刘恩慧、乔坤、龚束芳。DB23/T 262920201尖叶石竹组培苗生产技术规程1范围本标准规定尖叶石竹（Dianthus spiculifoliusSchur）组培苗生产的环境与设备消毒、培养基配制、外植体制备、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养、培养条件、移栽及生产档案。本标准适用于尖叶石竹的组培苗生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6001-1985 育苗技术规程LY/T 1882-2010林木组织培养育苗技术规程NY/T 2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程3环境与设备消毒3.1接种室消毒接种室消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.6 进行。3.2培养室消毒培养室消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.7 进行。3.3超净工作台消毒超净工作台消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.5、8.6 进行。3.4接种器具消毒接种器具按 NY/T 2306-2013 中 8.4 进行。4培养基配制4.1母液配制培养基母液配制按NY/T 2306-2013 中7.3执行。4.2培养基配制4.2.1培养基配方培养基配制成分如下：DB23/T 262920202a)初代培养基：MS蔗糖30g/L琼脂粉8g/L，pH值5.8；b)继代增殖培养基：MS0.2mg/L 6-BA4mg/L KT0.02mg/L IAA蔗糖30g/L琼脂粉8g/L，pH值5.8；c)生根培养基：1/2 MS1.0mg/L IBA0.01mg/L NAA蔗糖30g/L琼脂粉8g/L，pH值5.8。4.2.2培养基配制方法培养基配制方法按NY/T 2306-2013中7.4执行。4.3培养基灭菌及保存培养基灭菌及保存方法按 LY/T 1882-2010 中 4.2 进行。5外植体制备5.1外植体选择选取当年生的嫩茎作为外植体，宜晴天进行。5.2外植体消毒外植体的处理：选取生长良好的茎段，自来水冲洗 3h，75% 酒精中浸泡消毒 5s，2%次氯酸钠消毒3min，再用蒸馏水冲洗 45 次，用滤纸吸干水分。6初代培养将消毒后的外植体切成 1cm2cm 的茎段，每段至少带有 1 个2 个叶芽，将切好的外植体接种到诱导培养基中，注明接种物名称和日期，培养 21d28d，记录诱导情况。7继代培养分化的不定芽接入继代增殖培养基中，约 8 个/瓶，培养 28d35d，每个茎段萌发出 5 个8 个不定芽，分割新长出的不定芽，可按需求重复继代。8壮苗培养切取继代增殖培养中长 1.0cm 以上的不定芽，转接至壮苗培养基中，约 8 个/瓶，培养 14d21d。9生根培养壮苗培养基中组培苗长到 2.0cm 以上高度时，将小苗转入生根培养基中，约 10 株/瓶，培养 7d10d，当小苗基部长出健壮的不定根 3 条以上，大部分苗根长为 0.5cm2.0cm 时，即可进行移栽。10培养条件无菌培养室白天的温度控制在232，夜间不低于15，相对空气湿度控制在60%80%，光照强度为2000Lux3000Lux，光照时间为12h/d14h/d，黑暗时间为10h/d12h/d。DB23/T 26292020311移栽11.1移栽基质的制备基质选择草炭土和蛭石混合，体积比约为1:1，栽植前用0.5%的高锰酸钾溶液浇透消毒24h。11.2驯化移栽将生根培养瓶转移到过渡培养间，半开瓶口1d2d后，敞开瓶口炼苗2d3d后可移栽。11.3组培苗移栽将幼苗取出, 用清水洗净附着在根上的培养基,用清水喷湿,可进行移栽， 移栽后压实小苗周围的基质，浇透水，覆70%遮阳网。11.4移栽苗管理保证温室内幼苗水分供需平衡，育苗水分管理按GB/T 6001中执行。移栽5d7d后，去掉遮阳网，浇1/2 MS营养液1次，温度2228，相对空气湿度60%80%，温室环境应保持清洁。12生产档案建立尖叶石竹组织苗生产技术档案，包括繁殖培养条件、培养基配制、外植体接种、增殖数量、种苗驯化移栽及管理等。