DB21∕T 2676-2016 大孢子头北虫草栽培技术规程.pdf

ICS 65.020.01 B 39 DB21/T 26762016 辽宁省地方标准 大孢子头北虫草栽培技术规程 2016 - 07 - 26 发布 2016 - 09 - 26 实施 辽宁省质量技术监督局 发 布 DB21 DB21/T 2676-2016 前 言 为保证辽宁省大孢子头北虫草制种及栽培过程 规范操作，确保产品质量安全，针对本地区大孢子头北虫草生产特点制定本标准。 本规程按照 GB/T 1.12009 的规则起草。 本标准由沈阳市农业科学院提出。 本标准由沈阳市质量技术监督局归口。 本标准起草单位：沈阳市农业科学院。 本标准主要起草人：刘慧铭、闫玲、高红治、潘菊、马东梅、张健、李金凤、胡颖、杨双、施骥、孙嘉兴、宋伟等。 本标准于 2016 年首次发布。 DB21/T 2676-2016 1 大孢子头北虫草栽培技术规程 1 范围 本标准规定了大孢子头北虫草生产环境、设施、菌种制作、出草盒制备、出草管理、采收及烘干贮存技术。 本标准适用于大孢子头北虫草的栽培生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件， 其最新版本 （包括所有的修订单） 适用于本文件。 GB 9688 食品包装用聚丙烯成型品卫生标准 GB/T 12728 食用菌术语 DB3205/187 无公害农产品 北冬虫夏草生产技术规程 DB21/T 1730 北虫草菌种生产技术规程 3 术语和定义 GB/T 12728 食用菌术语 适用于本标准。下列术语和定义适于本标准。 3.1 北虫草 又名蛹虫草、北冬虫夏草，与冬虫夏草同属于真菌门，子囊菌纲，麦角菌科，虫草属。北虫草子实体又名子座，通常所称北虫草即子座、子实体部分。 3.2 大孢子头北虫草 北虫草栽培新品种，属于棒状蛹虫草的一种，其孢子头膨大，呈长圆形，有绒毛刺。 3.4 出草 北虫草菌丝由营养生长过渡到生殖生长， 菌丝扭结形成原基， 由原基发育成子实体的过程。 4 场地环境及设施 远离禽畜舍、生活垃圾、工业污染重地 300m 以上，选择座北朝南、地势平坦、靠近清洁水源处建棚（房），跨度 810m、长度 50m 为标准。 内部设施按 DB3205/ 187 中 4.1和 4.2 规定执行。 5 菌种制作 5.1 母种制作 5.1.1 培养基配方 DB21/T 2676-2016 2 马铃薯 200g、冷凝脂 15g、葡萄糖 20g、酵母浸粉 5g、磷酸二氢钾 1.8g、无水硫酸镁0.9g、水 1000ml。葡萄糖、磷酸二氢钾、无水硫酸镁为 AR：分析纯；酵母浸粉、冷凝脂为BR：生物试剂。 5.1.2 制作流程 符合 DB21/T 1730 中 4.3.1 规定。 5.1.3 接种 5.1.3.1 亲株筛选 草龄 4045 天、生长健壮、无杂菌及病虫害子实体。 5.1.3.2 亲株处理 先以 75%酒精表面消毒 15s，再用无菌水冲洗 3 次，最后用无菌滤纸吸干水分。 5.1.3.3 接种 子实体尖端 12cm 处切取 12mm 厚组织块置于试管斜面培养基表面。 5.1.4 培养 温度保持 2224，光照要求避光黑暗，空气湿度控制在 65%左右，培养时间为 15d。 5.2 液体菌种制作 5.2.1 培养基配制 5.2.1.1 配方 玉米粉 20g、 葡萄糖 15g、 磷酸二氢钾 3g、 无水硫酸镁 1.5g、 蛋白胨 8g、 维生素 B150mg，水 1000ml。葡萄糖、磷酸二氢钾、无水硫酸镁为 AR：分析纯；酵母浸粉、冷凝脂为 BR：生物试剂。 5.2.1.2 制作 玉米粉均匀溶于水后，再加热、煮沸、定容至 1000ml，依次加入 5.2.1.1 药品，充分溶解，搅拌均匀后分装。装液量占容器容量 1/2，迅速封口，灭菌温度 126，时间 50min。 5.2.2 接种 5.2.2.1 母种标准 无杂菌污染，气生菌丝少，基内菌丝浓密平伏，呈辐射状整齐生长，见光转色快。 5.2.2.2 接种量 每 100ml 液体培养基接种 1 块 0.5cm固体母种。 5.2.3 培养 温度保持 2022，光照为自然散射光，空气相对湿度 50%，培养时间 67d。先静止培养 1d，再摇床振荡培养 56d，频率 80r/min 。当培养液中菌球均匀一致、菌量达到液体总量 2/3 时培养结束。 6 出草栽培盒制备 6.1 培养基配制 DB21/T 2676-2016 3 以新鲜无霉变、无虫蛀、子粒饱满小麦为主料，按比例加入营养水制成混合培养基，料水比为 1:1.7。 营养水成分及浓度为葡萄糖 2%，蛋白胨粉 0.2%，磷酸二氢钾 0.15%，无水硫酸镁 0.08%， 维生素 B10.05。 高压灭菌 0.15Mpa 维持 1.5h； 常压灭菌 100维持 1214h。 6.2 接种 选择菌龄 710d 的优质液体菌种作栽培种，接种前用无菌水稀释，菌液与水稀释比例为 1:67；接种时每 100g 培养基接种量为 1012ml，将菌液均匀喷洒到培养基表面,利于菌种萌发，减少杂菌侵染几率。 7 出草管理 7.1 出草房（棚）消毒 出草盒进房培养前，需对空间进行消毒。新建房屋以阳光暴晒、紫外线杀菌消毒为主；老旧菇房需要化学药物熏蒸， 每立方米空间用17m的l36%甲醛加入14g高锰酸钾消毒45min，开窗通风 24h 后进入。 7.2 发菌 前 2d 温度保持 20，当菌种萌发后升至 23，控制空气相对湿度 60%左右，避光黑暗培养 67d。 7.3 出草 菌丝长满料面、穿透底面近 2/3 后，见光培养，每天光照 1415h，白天散射自然光，夜晚采用日光灯补充光照； 温度 2025， 昼夜温差 5， 空气湿度 7080%， 每天通风 0.5h。810d 原基出现后，将栽培盒上的封口膜刺孔通风，加强盒内外气体交换，保持温度 2325，提高空气相对湿度至 85%，每天通风 2 次，每次 1h，连续培养 60d 左右。 8 采收 子实体生长期 6070d，色泽金黄，长度 1012cm，孢子头明显膨大伴有绒毛刺，子囊孢子尚未弹射，此时为适宜采收期。采收时人员须佩戴消毒帽子、口罩、手套，于干燥、洁净室内进行，保证卫生，防止杂菌。采摘要求将子实体整根拔起，去掉基部残留麦粒，分级排放。 9 烘干贮存 新鲜子实体置于自然通风处阴干 1d 后，6070快速烘干，降温稍作回潮后装入密封袋，于 1520黑暗干燥处贮存。包装时按照 GB9688 食品包装用聚丙烯成型品卫生标准执行。