光山油茶饼粕蛋白水解物的制备及功能活性分析.pdf

2582023年第9期中国食品添加剂China Food Additives分析测试光山油茶饼粕蛋白水解物的制备及功能活性分析朱静，吕静，邢淑婕，陈亚蓝，李亚钦，陈龙*（信阳农林学院食品学院，河南省大别山特色食物资源综合利用工程技术研究中心，信阳 464000）摘 要：从光山油茶饼粕中提取蛋白，以油茶粕多肽含量为指标，通过酶法生产油茶饼粕蛋白水解物，并对其功能活性进行验证。采用单因素试验优化酶解时间、加酶量和底物浓度，利用 Design Expert 8.0.6 统计分析软件得到油茶粕多肽含量随加酶量、底物浓度和酶切时间变化的标准回归模型，采用响应面分析得到最佳酶解条件，并做验证试验。最佳水解条件为：采用胃蛋白酶处理油茶粕，在加酶量 6950 U/g、底物浓度 2.9%、时间为 4.1 h 时为最佳酶解条件，油茶粕多肽含量为（6.200.15）g/mL，通过检测发现，油茶粕蛋白多肽对羟自由基的清除能力为 93.89%，对 DPPH 和 ABTS+自由基的清除能力分别为 61.29%和 37.17%，对油脂吸附能力为 0.414 g/g，0.20 g/mL 的多肽胆酸盐结合能力为 0.9 g/mL，说明油茶粕蛋白水解物具有较好的抗氧化和降脂能力。关键词：油茶籽粕多肽；响应面分析；抗氧化活性；降脂能力中图分类号：TS202.3 文献标识码：A 文章编号：1006-2513（2023）09-0258-08doi：10.19804/j.issn1006-2513.2023.09.034Preparation and functional activity analysis of protein hydrolysate from Guangshan Camellia oleifera oil extraction residues ZHU Jing，L Jing，XING Shujie，CHEN Yalan，LI Yaqin，CHEN Long*（College of Food Science，Xinyang Agriculture and Forestry University，Engineering Technology Research Center for Comprehensive Utilization of Characteristic Food Resources in Dabie Mountain，Xinyang 464000）Abstract：Protein was extracted from Guangshan Camellia oleifera oil extraction residues，and its hydrolysate was prepared by enzymatic method using polypeptide as the index.The functional activity of the protein hydrolysate was tested.The single factor design was used to optimize the enzyme hydrolysis time，the enzyme amount and the concentration of the substrate.The standard regression model was obtained using the Design Expert 8.0.6 statistical analysis software.The optimized enzyme hydrolysis conditions by response surface analysis were as follows：Camellia oleifera meal treated with pepsin，enzyme amount 6950 U/g，substrate concentration 2.9%，and reaction time 4.1 h.The content of polypeptide in camellia oleifera meal was（6.200.15）g/mL.the scavenging ability of protein polypeptide of Camellia oleifera meal to hydroxyl free radical was 93.89%，the scavenging ability to DPPH and ABTS free radical was 61.29%and 37.17%，respectively，and the adsorption ability to oil was 0.414 g/g.The binding 收稿日期：2023-02-21 *通信作者基金项目：河南省重点研发与推广专项（科技攻关）项目（212102110314），河南省青年科学基金项目（212300410228），信阳农林学院高水平科研孵化器建设项目（FCL202014），信阳农林学院 2019 年度学校青年基金项目（2019LG002），信阳农林学院科技创新团队（XNKJTD-001）。作者简介：朱静（1983-），女，博士，副教授，研究方向：食品生物技术、食品微生物与发酵技术。2592023年第9期中国食品添加剂China Food Additives分析测试capacity of 0.20 g/mL polypeptide cholate was 0.9 g/mL，indicating that the protein hydrolysate of Camellia oleifera meal had good antioxidant and lipid-lowering capacity.Key words：Camellia oleifera meal polypeptide；response surface analysis；antioxidant activity；lipid-lowering ability油茶籽经压榨后得到的茶籽油，是一种有“东方橄榄油”美称的高品质食用油，但其残渣油茶粕，因其中含有皂素而辛辣刺激，油茶粕无论做肥料还是饲料，效果均不理想，通常作为清塘剂直接撒到池塘中；若作为废弃物丢弃堆积，霉变之后会造成污染。但油茶粕中含有 10%20%的蛋白质，其氨基酸组成为 17 种，其中8 种为人体必需氨基酸，组氨酸和精氨酸两种半必需氨基酸含量也较高，为潜在的优质植物蛋白资源。研究表明，油茶粕降脂多肽具有降血脂和降低胆固醇的功效，对动脉粥样硬化导致的冠心病、心肌梗塞、中风等多种脂代谢异常疾病及心脑血管疾病都有一定的预防作用1。后期如能将其开发成功能食品，可增加其经济附加值，提高农民收入。目前制备生物功能性肽最为常见的方法是酶解法，其专一性高，酶切效果好，反应条件也不剧烈2-3。赵丽娜等4用复合蛋白酶水解茶渣，水解产物对 DPPH 的清除率为 90.30，对 OH 的清除率为 65.18，且分子量 8000 Da的蛋白质水解产物具有更有效的抗氧化活性。赵世光等5用胃蛋白酶酶解油茶籽粕，多肽产率达到 61.8%。林秀椿等6用产蛋白酶的红曲霉、米曲霉、构巢曲霉菌对油茶茶粕蛋白进行发酵，低分子蛋白含量达到了 49.38%。基于以上研究，本文采用胃蛋白酶处理获得油茶粕蛋白水解物，通过响应面分析法得到最佳酶解条件。并初步探究酶解物抗氧化及降脂功能，包括羟自由基、DPPH 及 ABTS+自由基清除能力、油脂吸附和胆酸盐结合能力，为油茶饼粕的综合应用和提高附加值等提供研究基础。1 材料与方法1.1 材料与试剂油茶籽粕：光山县槐店乡司马光油茶园。胃蛋白酶（120 U/g）：上海源叶生物科技有限公司；DPPH（1，1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical；2，2-Diphenyl-1-（2，4，6-trinitrophenyl）hydrazyl）：上海麦克林生化科技有限公司；ABTS（2，2-amino-di（2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6）ammonium salt）：上海麦克林生化科技有限公司；所有提取试剂均为国产分析纯。1.2 仪器与设备TDL-40B 低速离心机：上海安亭科学仪器厂；TGL-16 高速离心机：江苏省金坛市环宇科学仪器厂；FD-1A-80 冷冻干燥机：上海比朗仪器制造有限公司；A390 紫外分光光度计：翱艺仪器（上海）有限公司；DXF-20C 粉碎机：广州市大祥电子机械设备有限公司。1.3 方法1.3.1 油茶粕蛋白的提取参考范东斌方法7，采用超声波辅助溶剂法提取油茶粕中的蛋白质。将干燥粉碎过的油茶粕过筛，脱脂后取 100 g 加入 4000 mL 70%的乙醇溶液，并调节其 pH至 10，在 48 的水浴中超声波提取 68 min，过滤得滤液，其超声功率为 450 W。将过滤后的残渣按照 140 的固液比加 70%乙醇溶液进行三次浸提。将所得滤液合并后静置 12 h，然后再次过滤，将滤液 4000 r/min 离心 10 min，并用 20%的盐酸将离心后的上清液调至蛋白质的等电点（pH=4.2），待沉淀出现并稳定后将沉淀真空冷冻干燥，得到油茶粕蛋白，采用凯氏定氮法，根据下面公式，代入计算其提取率。蛋白质提取率/%=mM100%（1）式中：m 为干燥后油茶粕蛋白含量，g；M为原料中蛋白质含量，g。1.3.2 油茶粕蛋白酶解单因素试验设计1.3.2.1 酶解时间对酶解效果的影响 配制底物浓度为 3%的油茶粕蛋白溶液，调节 pH=2.0，根据溶液中蛋白质的质量，以 7000 U/g 的加酶量加2602023年第9期中国食品添加剂China Food Additives分析测试入已经活化的胃蛋白酶，在 45 的水浴中分别酶解 2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5 h，终止酶解反应，在 5000 r/min 条件下离心 15 min，测定油茶粕多肽含量，确定最优酶解时间。1.3.2.2 加酶量对酶解效果的影响 配制底物浓度为 3%的油茶粕蛋白溶液，调节 pH=2.0，分别以 5000、6000、7000、8000、9000、10000 U/g 的加酶量加入已经活化的胃蛋白酶溶液，在 45 条件下以最优酶解时间酶解，终止酶解反应，5000 r/min 条件下离心 15 min，测多肽含量，确定最优加酶量。1.3.2.3 底物浓度对酶解效果的影响 分别配制底物浓度为 1%、2%、3%、4%、5%、6%的油茶粕蛋白溶液，调节 pH 为 2，以最优加酶量加入已经活化的胃蛋白酶，在 45 条件下以最优酶切时间酶解，终止酶切反应，5000 r/min 条件下离心 15 min，测油茶粕多肽含量，确定最优底物浓度。1.3.3 油茶粕蛋白酶解响应面试验设计在单因素试验的基础上，通过 Design Expert 8.0.6 软件设计进行响应曲面试验设计以及数据分析。根据单因素试验结果，以酶切时间、加酶量、底物浓度三个因素为自变量，以油茶粕多肽含量为响应值，进行三因素三水平的响应面试验，共计 17 个试验点，5 个中心重复试验，以探究胃蛋白酶酶解油茶饼粕蛋白的最佳工艺条件。各因素水平见表 1。表 1 因素水平表Table1 Factors and levels 因素水平A 加酶量/（U/g）600070008000B 底物浓度/%2.003.004.00C 酶解时间/h3.504.004.50在响应面试验完成后，以响应面所优化后的工艺条件连续酶切油茶粕蛋白，将所得的数值与响应面模型所得预测值进行比较，观察差异性。1.3.4 油茶粕多肽含量的测定1.3.4.1 标准曲线的绘制 取 0.01 g 经干燥的甘氨酸，加入蒸馏水至 10 mL，稀释得到 20 g/mL溶液，再分别稀释成 220 g/mL 的稀释液。各取 2 mL 稀释液，加入 1 mL 茚三酮显色指示剂，充分混匀后沸水浴 15 min，冷却后加入 5 mL 浓度为 40%的乙醇溶液，静置 15 min，在 570 nm处测定吸光度8。1.3.4.2 油茶粕蛋白多肽含量的测定方法 取 3 mL 水解液，加入 3 mL 质量浓度为 20%的三氯乙酸溶液，静置 15 min 后，在 5000 r/min 条件下离心 15 min，取 0.5 mL 离心液定容稀释 100 倍，取 14 mL 稀释液，采用 pH=8.0 的磷酸盐缓冲液和茚三酮作为指示剂，水浴后冷却定容。以水做参比液，在 570 nm 处测定吸光值，对照标准曲线，根据标准曲线方程，得到油茶粕多肽含量。1.3.5 油茶粕多肽抗氧化性能的测定1.3.5.1 羟基（OH）自由基清除能力测定 参照李晓博9的方法稍作修改，进行油茶粕蛋白多肽对羟基（OH）自由基的清除能力测定，羟自由基清除计算公式如下：%100%/清除率0102AAAA%1001%/清除率021AAA%1001%/清除率01AA （2）式中：A0 为空白组吸光值；A1 为无双氧水对照组吸光值；A2 为样品清除自由基后吸光值。1.3.5.2 DPPH 自由基清除能力测定 参考朱培等10的试验方法，略有修改，进行油茶粕蛋白多肽对 DPPH 自由基的清除能力测定，DPPH 自由基清除计算公式如下：%1001%/清除率021AAA%1001%/清除率01AA （3）式中：A0 为空白组吸光值；A1 为样品清除自由基后吸光值；A2 为无水乙醇对照组吸光值。1.3.5.3 ABTS+自由基清除能力测定 参考刘薇等11的试验方法，略作修改，进行油茶粕蛋白多肽对 ABTS+自由基的清除能力测定，ABTS+自由基清除计算公式如下：%1001%/清除率01AA （4）式中：A1 为样品吸光度值；A0 为空白对照吸光度值。2612023年第9期中国食品添加剂China Food Additives分析测试1.3.6 油茶粕多肽降脂性能的测定1.3.6.1 油脂吸附能力的测定 参照龚受基等12的试验方法，稍作修改，吸油量计算公式如下：吸油量/（g/g）=（A2-A1）/A1 （5）式中：A1为油茶粕蛋白水解液的质量，g；A2为吸附油脂后油茶粕蛋白水解液的质量，g。1.3.6.2 胆酸钠结合能力测定 参考刘淑敏等13的试验方法，略有修改，分别吸取 10、20、30、40、50 L 质量浓度为 0.05 mg/mL 的油茶粕蛋白酶解液，分别加入 6 mL 的 pH 值为 6.3 的磷酸盐缓冲溶液和 4 mL 的 0.6 mmol/L 甘胺胆酸钠和牛磺胆酸钠溶液（最后对应的浓度分别为 0.05、0.10、0.15、0.20、0.25 g/mL），于 37条件下震荡 2 h，离心后取 2.5 mL 上清液加入 7.5 mL 浓度为 60%的硫酸溶液，70 条件下水浴 20 min、冰水浴 5 min，在 378 nm 处测得其吸光度，由标准曲线求得样液中的胆酸盐。标准曲线的绘制：分别吸取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 的胆酸标准液于 25 mL 的具塞试管中，再分别用 60%的醋酸溶液定容至 1 mL、60%硫酸溶液定容至 14 mL，在 70 条件下水浴 20 min，冰水浴 5 min 后，在 378 nm 处测得吸光值。2 结果与分析2.1 酶解条件对油茶粕多肽含量的影响设计 6 组不同酶解时间，探究其对油茶粕多肽含量的影响，从图 1-A 中可以清楚地看出，从2 到 3.5 h 之间，随酶解时间的延长，油茶粕多肽含量逐步上升，在时间达到 4 h 之后，油茶粕多肽含量趋于水平，且在 4 h 含量最高。综合成本效益等方面考虑，酶解时间选择 4 h 为宜。设计 6 组不同的胃蛋白酶（120 u/g）添加量，以油茶粕多肽含量为指标，探究不同加酶量对酶解效果的影响。从图 1-B 中可以看出，随加酶量的增加，油茶粕多肽含量也在增加，这是因为，当底物浓度一定时，酶含量越大，分子间的碰撞也就会加大。但是，当加酶量达到一定饱和值时，底物浓度固定不变，酶含量对酶切的效果就会越来越缓慢，在图中则会表现为逐步持平。所以，综合成本等因素考虑，7000 u/g 的加酶量最佳。65432105.55.04.04.53.52.53.02.00.56.56.05.05.54.53.54.03.02.52.0ACB2.53.0酶解时间/h加酶量/(u/g)底物浓度/%多肽含量/(g/ml)多肽含量/(g/mL)多肽含量/(g/mL)3.54.04.512345650006000700080009000 10000图 1 酶解条件对多肽含量的影响Figure 1 Effect of enzymatic conditions on COSP extraction rate2622023年第9期中国食品添加剂China Food Additives分析测试分别选取 6 个底物浓度测定其油茶粕多肽含量进行分析，从图 1-C 中可以看出，当底物浓度比较低时，分子间的碰撞不够，不利于酶解反应，所以多肽含量也较低。当底物浓度升高到一定值时，溶液形成一定粘度，反而影响了酶分子的运动，也不利于酶解反应。综合考虑，当底物浓度选择 3%时产率最高，所消耗的成本也最低。2.2 响应面优化蛋白酶最佳工艺结果分析根据单因素试验结果表明，在胃蛋白酶（120 u/g）的添加量为 7000 u/g、底物浓度为 3%、酶切时间为 4.0 h 得到最佳的酶切效果。通过响应面试验，以油茶粕多肽含量为评价指标，对加酶量、底物浓度、酶切时间三个因素进行优化。采用 Design Expert 8.0.6 软件，设置胃蛋白酶添加量、酶解时间、底物浓度三个因素为自变量，油茶粕多肽含量为响应值，设计 17 个试验点，5个中心重复试验点，各试验因素水平见表 2，响应面的结果和方差分析见表 3。表 2 响应面试验设计及结果Table 2 Response surface design and results试验点ABC油茶粕多肽含量/（g/mL）预测油茶粕多肽含量/（g/mL）实际值1-1-104.6415.0821-105.6595.383-1104.8215.1041103.4793.045-10-13.3313.00610-13.7894.177-1015.3514.9881014.5694.9290-1-14.154.041001-11.992.06110-114.394.33120114.554.66130006.165.99140006.167.07150006.165.78160006.166.06170006.165.91根据响应面的试验结果，利用软件，对表2 中的数据进行多元非线性回归拟合，得到油茶粕多肽含量对胃蛋白酶添加量（A）、底物浓度（B）、酶解时间（C）三个因素的二次回归方程为：Y=6.16-0.081A-0.50B+0.70C-0.59AB-0.31AC+0.58BC-0.51A2-1.00B2-1.39C2从表 3 中可以看出，模型的 P 值0.01，表明该达到了极显著的水平，而失拟项 P=0.37680.05，相对于纯误差，失拟项是不显著的，说明该某型的误差小，拟合度良好，用该模型来预测油茶粕蛋白多肽含量是真实可信的。从表中还可以看出，一次项 C 和二次项 B2、C2对结果都具有极显著（P0.01）的影响，一次项 B 对结果有显著（P0.05）的影响，其余各项对结果均不显著。由主要因素 A、B、C 的 F 值可知，各因素对油茶粕蛋白多肽的影响程度依次为：酶切时间（C）底物浓度（B）胃蛋白酶添加 量（A）。表 3 响应面方差分析结果Table 3 Analysis of variance of response surface experiment方差来源 平方和自由度均方F 值ProbF显著性模型23.7992.648.550.0049*A0.05310.0530.170.6917B1.9711.976.380.0395*C3.9513.9512.780.0090*AB1.3911.394.510.0714AC0.3810.381.220.3052BC1.3311.334.320.0763A1.0911.093.520.1027B4.2414.2413.720.0076*C8.0918.0926.170.0014*残差2.1670.31失拟项1.0930.361.350.3768纯误差1.0740.27总离差25.9616R2=0.9167R2adj=0.8095注：表中*表示差异显著（0.01P0.05），*表示差异极显著（P0.01）。2632023年第9期中国食品添加剂China Food Additives分析测试通过 Design Expert 8.0.6 软件对回归方程进行分析，得到油茶粕蛋白多肽制备工艺中三个交互项之间的响应面图和等高线图，预测胃蛋白酶添加量、底物浓度和酶解时间三个因素对油茶粕多肽含量的影响，见图 2。8765434.003.503.002.502.50455652.003.003.504.002.00 6000.00B：底物浓度A：胃蛋白酶添加量B：底物浓度A：胃蛋白酶添加量油茶粕多肽含量6500.007000.007500.008000.006000.00 6500.00 7000.00 7500.00 8000.008765434.504.304.103.904455563.903.703.504.104.304.503.703.50 6000.00C：酶解时间C：酶解时间A：胃蛋白酶添加量A：胃蛋白酶添加量油茶粕多肽含量油茶粕多肽含量6500.007000.007500.008000.006000.00 6500.00 7000.00 7500.00 8000.00876543214.504.304.103.904355563.903.703.504.104.304.503.703.50 2.00C：酶解时间C：酶解时间油茶粕多肽含量油茶粕多肽含量2.503.003.504.002.002.503.003.504.00B：底物浓度B：底物浓度图 2 各因素交互作用对油茶粕多肽含量变化影响的响应面图及等高线图Figure 2 Response surface diagrams and contour maps of the effects of interaction of various factors on polypeptide content in Camellia oleifera meal2642023年第9期中国食品添加剂China Food Additives分析测试根据回归方程做出相应的响应曲面分析图，从图 2 中可以看出，AC、AB、BC 之间呈圆形且疏松，证明底物浓度、胃蛋白酶添加量、酶解时间三个因素的交互作不显著。其中每个图中均有极值点，说明回归方程比较准确可靠。通过回归方程得到的酶解油茶粕蛋白的工艺条件为：加酶量为 6949.30 U/g；底物浓度为 2.83%；时间为4.11 h，此时多肽含量达到 6.28403 g/mL。为了节约试验的时间和成本，也考虑到实际情况，将最佳工艺修正为：加酶量 6950 U/g，底物浓度2.9%，时间为 4.1 h。根据响应面的优化结果，在加酶量为 6950 U/g，底物浓度为 2.9%，时间为 4.1 h 条件下酶解油茶粕蛋白，进行三次平行试验，得到油茶粕多肽含量为（6.200.15）g/mL，基本复合预测值。采用响应面法优化的酶解油茶粕蛋白的数学模型准确可靠。2.3 油茶粕多肽抗氧化性能测定结果由 图 3 可 知，油 茶 粕 多 肽 对 羟 自 由 基（OH）的 清 除 率 高 达 93.89%，DPPH 自 由 基的清除率为 61.29%，ABTS+自由基清除率可达37.17%。试验以 1 mg/mL VC 溶液做对照，其中，油茶粕蛋白多肽对羟自由基的清除率高于 VC 溶液（90.36%），而 对 DPPH 自 由 基 及 ABTS+自由基的清除率相对于 VC 溶液（分别为 67.43%、98.79%）较低，可能是由于 VC 可以很好地破坏DPPH 自由基以及 ABTS+自由基的稳定性，并且可以提供电子与 DPPH 及 ABTS+中的游离电子配对，使其得到有效的清除14。研究发现，多肽100806040200清除率/%羟自由基DPPH自由基ABTS+自由基油茶粕多肽VC溶液图 3 油茶粕多肽抗氧化性能测定结果Figure 3 Results of antioxidant activity of polypeptides from Camellia oleifera meal末端中的疏水性氨基酸和芳香族氨基酸具有较高的抗氧化活性，同时氨基酸的位置及分子质量都会影响多肽的抗氧化能力15，因此在后续的研究中，可以通过不同酶解位点，获得多种活性多肽，并筛选出抗氧化活性最强的肽链进行研究。2.4 油茶粕多肽降脂能力测定结果由图 4 可知，油茶粕蛋白多肽对花生油的吸附量为 0.414 g/g，比六堡茶茶褐素（0.730 g/g）12和石榴皮不溶性膳食纤维（1.320 g/g）14对花生油的吸附量低，但高于麦麸（0.390 g/g）、甘薯（0.365 g/g）、香芋纤维（0.312 g/g）等膳食纤维16对食用油的吸附量。试验结果说明，油茶粕蛋白多肽对食用油有一定的吸附能力。1.41.21.00.80.60.20.40.0花生油吸附量/(g/g)油茶粕多肽六堡茶茶褐石榴皮不溶性纤维麦麸甘薯香芋纤维图 4 油脂吸附能力测定结果Figure 4 Oil adsorption capacity根据试验结果，绘制出胆酸标准曲线17，如图 5 所示，其中 y 是吸光度，x 表示胆酸盐浓度，得到关于吸光度与胆酸盐浓度的线性回归方程：y=3.346x-0.0011 其中，R2=0.9995，有较好的线性关系，表明标准曲线真实可信。4.003.502.503.002.001.001.500.500.00y=3.346x-0.0011R2=0.9995（0.50）浓度/(g/mL)吸光度0.200.40.60.811.2图 5 胆酸盐标准曲线Figure 5 Standard curve of cholate2652023年第9期中国食品添加剂China Food Additives分析测试根据试验结果及图 6 所示，随油茶粕多肽的浓度升高，胆酸盐结合能力逐渐上升，结果证明，油茶粕多肽的胆酸盐结合能力与多肽浓度相关，且随浓度的升高而呈现上升趋势，由此可以得出油茶粕蛋白多肽具有一定的胆酸盐结合能力。0.04 0.06 0.08 0.10 0.12 0.14 0.16 0.18 0.20 0.220.720.740.760.780.800.820.840.860.880.90多肽浓度/(g/mL)胆酸盐浓度/(g/mL)图 6 胆酸盐结合能力Figure 6 Cholate binding capacity3 结论本研究主要通过单因素试验及响应面分析优化油茶粕蛋白的最佳酶解工艺，并对酶解所得产物的功能活性进行初步探究，为后续的活性成分筛选提供试验基础。研究发现，在胃蛋白酶添加量 6949.3 U/g，底物浓度为 2.83%，酶解时间为 4.11 h 条件下，油茶粕多肽得率最高，可达6.28403 g/mL，且具有一定的功能活性，对羟自由基（OH）、DPPH 自由基和 ABTS+自由基清除率分别达 93.89%、61.29%和 37.17%左右，后续若对该酶解产物进行分离纯化水解处理，能够进一步提高抗氧化效果。同时酶解产物在油脂及胆酸盐吸附能力上有较好的表现，油茶粕蛋白多肽对花生油的吸附量为 0.414 g/g，对胆酸盐的吸附效果呈剂量依赖性。因此油茶籽粕多肽具有一定的潜在利用价值，可以在此基础上进行进一步 研究。参考文献：1胡平平.油茶饼粕多糖的提取、分离纯化及抗氧化活性研究 D.长沙：中南林业科技大学，2012.2Chemat F，Rombaut N,Sicaire A G，et al.Ultrasound assisted extraction of food and natural products.Mechanisms，techniques，combinations,protocols and applications.A review J.Ultrasonics Sonochemistry，2017，34：540-560.3付珊珊，周显青，张玉荣，等.超声辅助酶法和碱法对米糠蛋白提取率的影响研究 J.食品科技，2021，46（9）：149-155.4赵立娜，汪少芸.茶渣蛋白有限酶解及在脂-肉体系中抗氧化机理探讨 C/北京：全球华人保健.2013.5赵世光，张焱，薛正莲，等.酶法水解油茶籽粕制备油茶籽多肽的研究 J.中国油脂，2011，36（4）：60-63.6林秀椿，高刚峰，陈美高，等.油茶饼粕蛋白提取及抗氧化酶解产物的制备 J.食品工业科技，2011，32（1）：219-221，270.7范东斌，莫弦丰，陈玉竹，等.响应曲面法优化油茶饼粕蛋白的超声辅助提取工艺研究 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