高效液相色谱-高分辨质谱法快速筛查动物源性药食同源产品中32种抗生素兽药残留.pdf

1469 2023 年 12 月第 43 卷第 12 期 Jilin Journal of Chinese Medicine Dec.2023 Vol.43 No.12 DOI:10.13463/ki.jlzyy.2023.12.024高效液相色谱-高分辨质谱法快速筛查动物源性药食同源产品中 32 种抗生素兽药残留周雪莼1，胡婷婷2，王佳慧2，白 静3，杨 颖3，侯 宇1，张 哲1*，张 勋2*（1.长春中医药大学吉林省人参科学研究院，长春 130117；2.长春海关技术中心，长春 130062；3.吉林省吉测检测技术有限公司，长春 130117）摘要：目的 建立高效液相色谱-高分辨质谱法（high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry，HPLC-HRMS）对鹿茸、鹿胎膏和蜂蜜中-内酰胺类、林可酰胺类、大环内脂类、硝基咪唑类、喹诺酮类、磺胺类、氯霉素类共 32 种抗生素残留的快速前处理和筛查方法。方法 动物源性产品采用乙腈超声提取，上清液经 PRiME HLB 固相萃取柱（无需活化和平衡）净化，氮吹至 0.5 mL 以内，用 10%甲醇溶解定容后，经 C18色谱柱立分离，在电喷雾正离子模式下，根据 32 种抗生素药物的分子离子峰、特征离子信息建立 HPLC-HRMS 数据库，采用 Trace Finder 2.5 软件系统进行定性筛查和分析。结果 本方法能够在缺乏标准品的前提下，迅速且准确地识别动物源性药食同源特色产品（鹿茸、鹿胎膏和蜂蜜）中的 32 种抗生素残留，检出限为 0.01 mg/kg，准确率为100%。结论 本方法简单、快速、准确，适用于大批量动物源性药食同源产品中抗生素类兽药残留的快速筛查，可为动物源性药食同源特色产品抗生素类兽药的监管提供可靠的技术支持。关键词：高效液相色谱-高分辨质谱法；动物源性食品；药食同源；抗生素类兽药残留；快速筛查；数据库 中图分类号：R914.1 文献标志码：A 文章编号：1003-5699(2023)12-1469-06Rapid screening of 32 kinds of veterinary drug residues in animal-derived medicine and food Rapid screening of 32 kinds of veterinary drug residues in animal-derived medicine and food homologous products by high performance liquid chromatography-high resolution mass homologous products by high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometryspectrometryZHOU Xuechun1,HU Tingting2,WANG Jiahui2,BAI Jing3,YANG Ying3,HOU Yu1,ZHANG Zhe1*,ZHANG Xun2*(1.Jilin Ginseng Academy,Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China;2.Changchun Customs Technology Center,Changchun 130062,China;3.Jilin Jice Testing Technology Co.,Ltd.,Changchun 130117,China)Abstract:ObjectiveAbstract:Objective To establish a rapid pre-treatment and instrument screening method for 32 kinds of antibiotic residues in animal-derived medicine and food homologous products(pilose antler,semifluid extract of deer foetus and honey)based on the high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry(HPLC-HRMS).MethodsMethods The samples were extracted by acetonitrile,purified by PRiME HLB solid phase extraction column,and qualitatively screened by HPLC-HRMS database(compound name,molecular formula,molecular weight,retention 基金项目：科技部国家重点研发计划项目（2019YFC1710704）；吉林省自然科学基金项目（YDZJ202301ZYTS204）；海 关总署科技项目（2020HK182）作者简介：周雪莼（1999），女，硕士研究生，主要从事药物化学研究*通信作者：张 哲，电子信箱-；张 勋，电子信箱-方药纵横1470 2023 年 12 月第 43 卷第 12 期 Jilin Journal of Chinese Medicine Dec.2023 Vol.43 No.12 “药食同源”产品是以国家颁布的药食同源目录生产的保健食品1-2，介于保健品与药品之间，既有药品的治疗又有食品的安全稳定性3-5。吉林省动物源性药食同源特色产品包括：鹿胎膏、蜂蜜、鹿茸等产品。近年，“药食同源”产品的需求日益增多，但这些产品很多在生产、储存、运输过程中抗生素类兽药残留严重6-7，这对食用这些产品的人们健康造成巨大危害8-11，并且缺乏可靠的快速检测技术手段。建立一种兽药抗生素药物残留的分析方法是非常必要的。目前，动物源性药食同源产品中残留抗生素类兽药常用的检测技术主要有微生物抑制检测法12、免疫分析法13-14、高效液相色谱法15、传感器检测法16、薄层色谱法17、近红外光谱法18、液相色谱-质谱法等19-22。但是上述方法依然存在操作复杂、耗时长、假阳性率高等问题，限制了其在快速检测中的发展和应用23-26，高分辨质谱具备灵敏度高、准确度高、检测速度快及假阳性率低等特点27-29，弥补了上述方法的劣势，填补了动物源性药食同源产品中抗生素类兽药快速筛查数据库的空白，尤其在无标准品的情况下能同时对大量样品中的多种或多类别待测物质进行高通量非靶向筛查确证，为动物源性药食同源产品中抗生素类兽药的快速筛查提供了新方法。本研究选取了吉林省生产经营过程中使用频率较高的-内酰胺类、林可酰胺类、大环内脂类、硝基咪唑类、喹诺酮类、磺胺类、氯霉素类 7 类共 32 种抗生素兽药进行研究，并建立了对具有吉林省特色的鹿胎膏、蜂蜜和鹿茸样品基质为代表的动物源性药食同源特色产品 32 种抗生素类兽药残留的快速前处理技术、基于高效液相色谱-高分辨质谱法高效筛查库，在缺乏标准品的条件下，快速准确筛查抗生素类兽药残留，为动物源性药食同源产品的质量控制和监管提供技术支撑。1 实验部分1.1 仪器和试剂 Dionex Ultimate 3 000 RSLC-Q-Exactive型静电场轨道阱高分辨质谱仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）、Hypersile Gold C18色谱柱（100 mm2.1 mm，1.9 m）（美国Thermo Fisher Scientific公司）、Trace Finder 2.5 软件系统；Syncore 型天平（0.01 g，瑞士 Precisa 公司）；TurboVap II 型氮气浓缩仪（美国Organomation公司）；AS10200-10L型超声波清洗器（天津，奥特赛恩斯仪器有限公司）；Allegra X-22R 型高速冷冻离心机（美国 Beckman Coulter 公司）。鹿茸、鹿胎膏和蜂蜜均来自于长春海关技术中心的待检测样品。乙腈、甲醇、甲酸、乙酸铵（质谱纯，美国Thermo Fisher Scientific 公司）；PRiME HLB 固相萃取柱（美国 Waters 公司）；氨苄青霉素、头孢噻肟、头孢噻呋、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢匹林、林可霉素、克林霉素、红霉素、交沙霉素、螺旋霉素、甲硝唑、氟甲喹、萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、洛美沙星、麻保沙星、丹诺沙星、双氟沙星、依诺沙星、恩诺沙星、环丙沙星、苯甲酰磺胺、磺胺醋酰、磺胺氯哒嗪、磺胺嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、氟苯尼考 32 种兽药标准品（纯度均 95%，德国 Dr.Ehrenstorfer 公司）。实验用水为Millipore 系统制造的高纯水（18 Mcm）。1.2 标准溶液的配置 用甲醇对32种抗生素兽药的混合标准溶液进行稀释，配置浓度为10 ug/mL、20 ug/mL、100 ug/mL 的混合标准溶液，避光保存。作为建立标准谱库及方法学考察的标准工作液。1.3 样品的制备与保存 鹿茸：将样品（不少于200 g）置于高速粉碎机中研磨粉碎后过 80 目筛，混合均匀后标记，置于常温下密封保存。蜂蜜和鹿胎膏：置于常温下密封保存。1.4 样品的前处理1.4.1 样品的提取 选用不同比例的乙腈-水和甲醇-水混合溶液对样品进行提取，每组设定3个平行试验，time,fragment ions,etc.).ResultsResults This method could quickly and accurately screen 32 kinds of antibiotic residues in animal-derived medicine and food homologous characteristic products(deer antler,deer fetal paste and honey)without standard products,with the limit of detection of 0.01 mg/kg.ConclusionConclusion This method is simple,rapid,accurate and suitable for the screening of veterinary drug residues of antibiotics in large quantities of samples,which can provide reliable technical support for the supervision of antibiotics veterinary drug residues in animal-derived medicine and food homologous products.Keywords:Keywords:high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry;animal-derived food;medicine and food homology;veterinary drug residues of antibiotics;rapid screening;database1471 2023 年 12 月第 43 卷第 12 期 Jilin Journal of Chinese Medicine Dec.2023 Vol.43 No.12 其提取步骤如下：用天平分别准确称取待测样品2.00 g，加入 1 mL 纯水浸润样品（蜂蜜、鹿胎膏用温水搅拌至完全化开），分别加入 10 mL 乙腈、75%乙腈-水、60%乙腈-水、45%乙腈-水、30%乙腈-水溶液、甲醇、75%甲醇-水、45%甲醇-水溶液后，旋涡震荡 1 min，超声波清洗器萃取 20 min，10 000 r/min 离心5 min 后，待净化。1.4.2 样品的萃取 设定不同超声萃取时间对样品进行萃取，每组设定 3 个平行试验，步骤如下：准确称取 2.00 g 鹿茸、鹿胎膏、蜂蜜样品，分别向其中添加0.01 mg/kg 的 32 种兽药的混合标准溶液，按照 1.4 方法处理，并分别超声提取 5、10、20、30、40 min。1.4.3 样品的净化 取超声后上清液直接加载到 PRiME HLB 固相萃取柱（60 mg，3 mL 或相当者）上，无需活化和平衡，保持每秒 1 滴的流速，收集全部流出液。取 5.00 mL 流出液氮吹至体积小于 0.5 mL，氮吹期间温度为 40，将得到的液体用 10%甲醇水溶液定容至 1.00 mL，过 0.22 m 微孔滤膜（尼龙）后用于分析测定。1.5 HPLC-MS 条件1.5.1 色谱条件 采用 Hypersile Gold C18色谱柱（100 mm2.1 mm，1.9 m）；流动相：水相（A）为含5 mmol/L乙酸铵的0.1%甲酸水溶液；有机相（B）为甲醇，其中进样体积为 10 L，流速为 0.3 mL/min，柱温为 30。色谱流动相的洗脱梯度表，见表 1。表 1 色谱流动相的洗脱梯度表时间/minA-水相/%B-有机相/%0901027030650508 59511 59511.190101590101.5.2 质谱条件 质谱的离子源参数：喷雾电压（+）为 3 200 V，离子传输管温度为 325，鞘气为 40 arb，辅助气为 10 arb，探针加热器温度为 350，S-透镜射频水平为 60 V。质谱扫描参数：扫描模式为 Full MS-ddMS2，全扫描范围为 80 1 000 m/z，分辨率为70 000，Full MS，17 500，MS/MS，自动增益控制为1e6，Full MS，2e5，MS/MS，循环次数：6，MSX计数：1，隔离宽度为2.0 m/z，碰撞能量分别为20、40、60 V，压缩比率为 1%，顶点触发为 2 6 s，动态排除为 8 s。1.6 标准分析数据库筛查设置 采用高效液相色谱-静电场轨道肼高分辨质谱对配制的 32 种化合物的标准物质溶液（1 mg/L）在 Full MS-ddMS2 Scan 模式下对目标化合物进行一级质谱全扫描，通过高分辨质谱获得32 种化合物的分子量、保留时间、碎片离子等信息建立一级标准谱库。采用Trace Finder 2.5数据库筛查方法，设置方法：1）加载数据库（含 32 个化合物，包含化合物名称、分子式、分子量、保留时间、碎片离子等信息）。Method Development Compound Database 打 开“pesticides database”；2）加 载 筛 查 方 法：Method Development Method View 打开“pesticides screening”；3）在筛查方法 pesticides screening 中勾选数据库 pesticides database，保存，建立 batch，分析数据发现其母离子强度达到设定阈值（1106）时，自动触发二级质谱扫描，同时得到母离子的精确质量数以及二级质谱的全扫描信息。采用 20 eV、40 eV、60 eV 三个碰撞能量对化合物进行碎裂，得到一张碎片离子信息丰富的加和图。由于化合物峰形较窄，为避免出现二级离子打不到的情况，根据峰宽肩动态排除时间设置为 3 s。获得二级谱图后利用软件计算碎片离子的分子量，与相应抗生素类兽药的相关信息关联，最终完成 32 种抗生素类兽药的色谱库和质谱图的谱库构建。1.7 实际样品的筛查测定 参考欧盟评分制方法指南筛查样品中目标物质是否存在，同时进行数据库验证。准确称量鹿茸、鹿胎膏、蜂蜜3种样品，分别作为空白阴性样品（不含有待测目标化合物）10 份、阳性添加样品各20份（对鹿茸、鹿胎膏、蜂蜜样品添加上述32种兽药标准品的混合溶液，添加浓度为0.01 mg/kg），按照实验方法筛查待测的 32 种抗生素兽药。假阳性率（%）、假阴性率（%）按照下面公式。1）假阳性率=（获得筛查阳性结果的阴性样品数/阴性样品总数）100%；2）假阴性率=（获得筛查阴性结果的阳性样品数/阳性样品总数）100%。依据欧盟 SANTE 11813/2017 法规要求，对目标物样品进行一级全扫描，根据所建立的谱库数据定性分析依据保留时间、母离子精确质量数和一个碎片离子精确质量数（或两个母离子精确质量数）。在相同条件下，样液中待测化合物保留时间与谱库中保留时间的相对偏差 2.5%（且不超过 0.5 min）或 0.2 min，所监测定性离子的信噪比 S/N 3，母离子精确质量数与理论质量数的相对偏差 5 ppm（110-6），一1472 2023 年 12 月第 43 卷第 12 期 Jilin Journal of Chinese Medicine Dec.2023 Vol.43 No.12 个二级碎片离子精确质量数的相对偏差 10 ppm，则可以初步判断实验中含有该种化合物。在空白样品中添加筛查浓度标准溶液，作为质控样品。样品中目标化合物检测浓度大于等于方法筛查限时判定为阳性结果。2 结果2.1 样品前处理方法的优化2.1.1 提取溶剂的选择 本研究分别对不同比例的乙腈-水和甲醇-水混合溶液进行了考察，使用甲醇为提取溶剂时，提取率不高仅为 46%58%，且提取液中含有较多杂质，用乙腈及乙腈-水混合溶液作为提取溶剂时，一方面能保证较高的待测物提取率，另一方面，乙腈极性大、穿透力强，可有效沉淀样品中的大量蛋白质及其他非极性磷脂类干扰物，尽可能地减少在测定过程中的基质干扰，故最终选用乙腈作为提取溶剂。随即对比 100%乙腈、75%乙腈-水、60%乙腈-水、45%乙腈-水、30%乙腈-水溶液的提取效果，结果表明，使用75%乙腈-水、60%乙腈-水、45%乙腈-水、30%乙腈-水为提取溶剂时，提取率范围约为 54%66%、46%52%、35%43%、26%32.5%。并且随着体系中水的占比不断升高时，溶液在浓缩步骤处于比较难于悬至近干的状态。当用 100%乙腈进行提取时，待测物的提取率范围为77%84%，提取液较澄清且得到的色谱图中未知物的杂峰数量有所减小，基本不影响32种待测物的检测，故最终选用 100%乙腈作为提取溶剂。2.1.2 超声时间的选择 超声波具有极端的物理特性，其机械效应、空化效应及热效应等能够对物质能产生很强的破坏作用，能促使细胞组织破壁变形30，可有效提高提取效率。因此，本研究比较了超声处理 5、10、20、30、40 min 的提取效率。准确称取一定量的鹿茸、鹿胎膏、蜂蜜，分别向其中添加 0.01 mg/kg水平的 32 种兽药的混合标准溶液，按照 1.4 方法处理，并分别超声提取 5、10、20、30 和 40 min。结果显示，当超声提取 5 min、10 min 时，提取率范围约为28%39%和 48%62.5%，当超声提取 20 min 时，32 种兽药的提取率均能够达到最高，提取率范围约为76%85%，20 min 后，提取时间的延长对 32 种兽药的提取率的影响已不显著，当超声提取 30 min、40 min时，提取率范围约为 77%85%和 78%86.5%，故最终确定超声提取时间为 20 min。2.2 HPLC-HRMS 条件的优化 本研究比较了 2 组不同流动相的分离效果：流动相 A 为纯水和含 5 mmol/L乙酸铵的 0.1%甲酸水溶液，流动相 B 为甲醇、乙睛及含5 mmol/L乙酸铵的0.1%甲酸的水溶液。结果表明，在流动相中加入 5 mmol/L 乙酸铵溶液可以流动相能够保持一定的离子强度，以改善峰形，减少峰拖尾。使用甲醇为流动相 B 时，待测物的响应强度更高，峰型更好，而且鹿茸、鹿胎膏、蜂蜜中基质复杂，甲醇能更好地洗脱，减少污染，延长了仪器和色谱柱的使用寿命。虽然采用甲醇时柱压较乙腈高，但对目标物响应值更高。2.3 筛查数据库的建立 配制混合标准溶液，依据建立好的色谱条件（1.5.1）和质谱条件（1.5.2）进样，准确输入 32 种抗生素兽药的英文、CAS 号、中文名称及化学式，由高分辨质谱数据库构建软件 Trace Finder 2.5 计算得到每种化合物的理论质量数。而后在采用数据依赖性二级质谱扫描（ddms2）的同时使用动态排除模式，当列表中的母离子响应强度达到设定阈值，自动采集二级数据；在三个碰撞能量下（20/40/60eV）对目标物进行碰撞，加和获得二级谱图，利用软件计算主要二级碎片精确分子量，与相应化合物的保留时间、精确质量数测定值、中英文名称、CAS 号、分子式等信息相关联，最终完成32种抗生素类兽药的谱库构建，见表 2。2.4 定性方法 按照欧盟 SANTE 11813/2017 法规，定性分析依据化合物的保留时间、母离子精确质量数和一个碎片离子精确质量数（或2个母离子精确质量数）。在相同条件下，样液中待测化合物保留时间与谱库中保留时间的相对偏差 2.5%（且不超过 0.5 min）或 0.2 min，所监测定性离子的信噪比 S/N 3，母离子精确质量数与理论质量数的相对偏差 5 ppm（110-6），一个二级碎片离子精确质量数的相对偏差10 ppm，则可以初步判断实验中含有该种化合物。在空白样品中添加筛查浓度（0.01 mg/kg）混合物标准溶液作为质控样品。样品中目标化合物检测浓度大于等于方法筛查限时判定为阳性结果。利用 Tract Finder 2.5 软件对化合物定性筛查，符合设定范围的样品即为阳性样品。实验条件相同时，如果色谱峰的保留时间与数据库相对应，扣除背景后的质谱图所选择的离子及其相对丰度与数据库相对应，则可证明样品中存在这种抗生素类兽药或与之相关的其他化学物质。2.5 实际样品的测定验证 鹿茸、鹿胎膏、蜂蜜所有阴性样品的假阳性率均为 0，在检测鹿胎膏中残留的1473 2023 年 12 月第 43 卷第 12 期 Jilin Journal of Chinese Medicine Dec.2023 Vol.43 No.12 表 2 32 种抗生素类兽药的分子式、保留时间、母离子和特征碎片离子质量序号化合物分子式保留时间/min扫描模式母离子精确质量数特征碎片离子精确质量数1-内酰胺类氨苄青霉素C16H25N3O7S3.84Positive350.116 90106.065 54174.055 04 160.042 77192.048 052头孢噻肟C16H17N5O7S24.15Positive456.064 22125.004 43 167.027 40 156.022 67 324.058 843头孢噻呋C19H17N5O7S36.09Positive524.036 29125.004 41 241.038 99 95.013 23285.011 084头孢氨苄C16H17N3O4S3.86Positive348.101 25158.027 16106.065 55174.055 0268.050 215头孢洛宁C20H18N4O5S23.90Positive459.079 14152.016 56 123.055 56 97.011 13185.038 076头孢匹林 C17H16N3NaO6S23.17Positive424.063 15292.057 10 152.016 60124.021 87111.014 067林可酰胺类林可霉素C18H34N2O6S3.47Positive407.221 03126.127 99407.220 92359.217 388克林霉素C18H33ClN2O5S5.44Positive425.187 15425.187 13 126.128 01377.183 939大环内脂类红霉素C37H67NO136.36Positive734.468 52158.117 69 83.049 77576.374 02116.107 2510交沙霉素C42H69NO157.77Positive828.474 00109.065 16 174.112 49229.143 33600.337 5211螺旋霉素C43H74N2O145.00Positive843.521 28174.112 69 83.049 77101.060 19540.317 4412硝基咪唑类甲硝唑C6H9N3O32.61Positive172.071 67128.045 65148.977 07172.071 73 71.929 9913喹诺酮类氟甲喹C14H12FNO37.36Positive262.087 40262.088 20 238.051 04220.040 51174.035 1014萘啶酸C12H12N2O37.10Positive233.092 07233.092 18 205.060 82159.055 34187.050 2315诺氟沙星C16H18FN3O33.97Positive320.140 50320.140 35 276.150 57233.108 51205.076 8916氧氟沙星C18H20FN3O43.99Positive362.151 06362.150 79 318.161 01261.103 30277.154 0517培氟沙星C17H20FN3O34.03Positive334.156 15334.155 88290.166 23233.108 47205.077 0618沙拉沙星C20H17N3O3F24.76Positive386.131 07386.130 89 342.141 30299.099 03357.089 9419司帕沙星C19H22F2N4O34.80Positive393.173 27393.173 00 349.182 59292.125 43251.086 6520洛美沙星C17H19F2N3O34.21Positive352.146 72352.146 51265.114 56308.156 74251.098 8621麻保沙星C17H19FN4O43.82Positive363.146 31 72.081 48 363.146 36320.103 94174.112 7622丹诺沙星C19H20FN3O34.21Positive358.156 15358.165 13314.166 11 96.061 25283.124 0223双氟沙星C21H19F2N3O34.81Positive400.146 72400.146 70 356.158 80299.099 8758.065 9824依诺沙星C15H17FN4O33.83Positive321.135 75321.135 74 234.103 61257.039 04277.144 2025恩诺沙星C19H22FN3O34.34Positive360.171 80360.171 51316.181 78245.108 34203.061 1426环丙沙星C17H18FN3O34.08Positive332.140 50332.140 50 288.150 63245.108 47203.061 4027磺胺类苯甲酰磺胺C13H12N2O3S6.36Positive277.064 14156.011 47 108.044 79 92.050 0065.039 3728磺胺醋酰C8H10N2O3S2.73Positive215.048 49156.011 49 108.044 80 92.049 9965.039 3729磺胺氯哒嗪 C10H9ClN4O2S5.27Positive285.020 75156.011 43 108.044 79 92.049 98285.020 6630磺胺嘧啶C10H10N4O2S3.17Positive251.059 72156.011 41251.059 71108.044 7792.049 9731磺胺间二甲氧嘧啶C12H14N4O4S6.48Positive311.080 85108.044 79 156.076 92 65.039 38 92.050 05245.103 3932氯霉素类氟苯尼考 C12H14Cl2FNO4S5.75Positive375.034 29241.005 52206.036 94130.065 28170.060 18喹诺酮类药物环丙沙星时，假阴性率为 5%。经 5 家单位技术人员进行验证实验，即对鹿茸、鹿胎膏、蜂蜜样品添加上述 32 种兽药标准品的混合溶液，添加浓度为 0.01 mg/kg，经验证结果表明，上述 32 种抗生素兽药在样品中均被定性检出，准确率为 100%。说明本方法准确率高、灵敏度较好，适用于 7 类共计 32 种抗生素兽药的同时快速筛查。3 小结 本研究通过优化样品的前处理方法及色谱和质谱条件，建立了同时检测动物源性药食同源产品（鹿茸、鹿胎膏、蜂蜜）中 32 种抗生素类兽药残留的快速筛查方法。通过简便的样品前处理方法，无需标准品即可实现 7 类共 32 种兽药残留的同时筛查，而且能够满足法规限量要求的灵敏度。假阳性率和假阴性率满足食用农产品化学物质残留高通量筛查方法确认与检测质量控制指南中对于筛查方法的性能要求，实际样品经 5 家单位的实验验证后，准确率为 100%，检出限为 0.01 mg/kg。这使得动物源性药食同源产品的多残留分析检测效率迈向了新的台阶，对动物源性药食同源产品的安全质量监管提供了重要的成熟筛查技术手段。若想更进一步研究动物源性药食同源产品中的兽药残留，还需不断补充兽药种类，进而为动物源性药食同源产品的安全保证提供有力支撑。1474 2023 年 12 月第 43 卷第 12 期 Jilin Journal of Chinese Medicine Dec.2023 Vol.43 No.12 参考文献：1 胡思,王超,孙贵香,等.大健康产业背景下药食同源资源开发的现状与对策研究 J.湖南中医药大学学报,2021,41(5):815-820.2 杨光,苏芳芳,陈敏.药食同源起源与展望 J.中国现代中药,2021,23(11):1851-1856.3 邓斯琪,潘晓彦,肖梓潍,等.基于 CiteSpace 的药食同源研究热点与趋势可视化分析 J.中国医药导报,2021,18(31):12-16.4 王茵,沈岚,汪晓凌,等.药食同源补益气血中药的保健功能及机制概述 J.食品与药品,2021,23(5):469-475.5 苑翼楠,周威.“药食同源”类食品国内外研究现状及展望 J.现代食品,2021,(14):118-121.6 余庆.抗生素在兽药中的应用分析 J.化工设计通讯,2017,43(12):175,179.7 林嫚婷,苏亚霞,胡汉昆.食品中抗生素残留的预处理及检测方法研究进展 J.食品与药品,2020,22(4):304-309.8 周迎春,韩文凤,刘少博.我国动物源性食品中兽药残留的原因分析 J.粮食与油脂,2021,34(5):160-162.9XU C M,KONG L Q,GAO H F,et al.A Review of current bacterial resistance to antibiotics in food animals J.Frontiers in Microbiology,2022,13:822689.10 刘楠,张静,龚月生.养殖场滥用抗生素的危害与防范对策 J.现代畜牧科技,2020,48(7):72-73.11 何文.动物源食品中残留抗生素的危害和检测技术 J.食品安全导刊,2022,16(17):157-159.12 李学芬,史磊,刘册家.动物类药材抗生素残留检测方法研究进展 J.山东化工,2022,51(4):115-117.13 苏霞,王绪根,李云,等.畜禽产品中四环素类抗生素残留检测方法研究进展 J.今日畜牧兽医,2022,38(7):8-9.14 马永强,张丝瑶,遇世友,等.蜂蜜中抗生素残留的检测方法研究进展 J.食品工业科技,2022,43(20):454-463.15 缪宇腾,郁宏燕,陆利霞,等.动物源性食品中氯霉素残留检测方法进展 J.生物加工过程,2020,18(5):658-664.16 段培宇,陈寒玉,张宝忠,等.动物源性食品中抗生素类污染物生物检测技术研究进展 J.环境化学,2022,41(2):581-590.17 黄璐,杨成雄,刘生鹏.动物源性食品中抗生素残留的危害及检测方法 J.广州化工,2021,49(5):44-47.18 田红静,刘通,王秀娟,等.动物源性食品中抗生素残留的快速检测方法 J.食品安全质量检测学报,2020,11(11):3391-3397.19 贾琳斐,管理,贾润芳,等.UPLC-MS 法测定动物源性食品中 12 种大环内酯类抗生素残留量 J.现代食品,2022,28(6):174-177.20 汪建妹,徐彦,周敏,等.UiO-67 分散固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中 6 种大环内酯类兽药残留 J.分析试验室,2023,42(3):350-354.21 朱琳娇,谢浙裕,孙晨.三重四级杆液质联用测定胶原蛋白海绵中 L-羟脯氨酸含量 J.海峡药学,2022,34(10):63-66.22 黄飞燕,李晓君,张国昌,等.超高效液相色谱-三重四级杆质谱法检测乌鸡白凤丸中鹿角胶特征肽及牛皮源成分 J.药品评价,2022,19(9):524-528.23 陈锂,朱正伟,汪薇,等.改进 QuEChERS-气相色谱-三重四级杆质谱法测定水果中吗啉脂肪酸盐的残留 J.现代食品科技,2022,38(4):241-247.24 袁凯旋,欧阳峰,刘泓伶,等.三种前处理方法对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定曲霉结果的对比研究J.中国临床新医学,2022,15(10):938-944.25 毛祈萍,何明珍,黄小方,等.基于超高效液相色谱和飞行时间质谱联用的紫苏化学成分鉴定 J.现代食品科技,2021,37(1):282-291,259.26 赵海波.液相色谱飞行时间质谱检验七种卡西酮类新精神活性物质的研究 D.北京:中国人民公安大学,2020.27 邵影,张鸿伟,高瑞刚,等.超高压液相色谱-高分辨质谱法同时筛查蓝莓中 90 种农药残留 J.食品工业科技,2023,44(5):230-240.28 唐雪妹,陈志廷,黄健祥,等.超高效液相色谱-高分辨质谱非靶向快速筛查果蔬中农药残留 J.分析测试学报,2021,40(12):1720-1727.29 周洁,孙骥,余晓玲,等.液相色谱-高分辨质谱快速测定奶粉中氯丙醇酯 J.环境化学,2022,41(7):2458-2460.30 高雪峰,高健,门中华,等.超声提取碱韭总黄酮及其抗氧化活性研究 J/OL.食品与发酵工业,2023,1-15.2023-11-28.https:/ 收稿日期：2023-10-18）