果蝇的性别鉴定性状观察及饲养方法.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验二,果蝇的性别鉴定、性状观察及饲养方法,一、实验原理,普通果蝇（Drosophila melenogaster）为双翅目昆,虫，具完全变态，与家蝇是不同的种。,作为实验材料的优点是：,生,活史短，生长迅速，每12天左右即可完成一个世代；,繁,殖能力较强，每只受精的雌蝇约可产卵400-500个，,因此在短时间内即可获得多数子代，有利于遗传分析；,容,易饲养，饲料如玉米粉简便易得；,突,变性状多达400以上，且多数是形态变异，便于观察。,因此在遗传学研究中得到广泛应用，尤其在基因分离、,连锁、交换等,二、实验目的,1.了解果蝇生活史中各个阶段的形态特征,2.几种常用突变型的主要性状,3.掌握果蝇的性别鉴定方法,4.掌握果蝇的饲养管理以及培养基的配制,方法,三、实验材料和用具,材料：饲养的野生型和几种习见的突变型,果蝇。,用具 体视解剖镜、放大镜、麻醉瓶、培,用品 养皿、乙醚、滤纸条、白纸、毛笔、,棉花、纱布、玉米面等。,：,四、实验内容和步骤,生活史的观察,用放大镜从培养瓶外观察果蝇生活史,中的四个时期。,卵,幼虫,蛹,成虫,成虫,卵,蛹,幼虫,卵：孵化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天以后才能产卵。卵长约0.5毫米，椭圆形，腹面稍扁平，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在食物（或瓶壁）上，不致深陷到食物中去。,幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期，此时体长可达4-5毫米，肉眼观察下可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺管向后延伸，然后汇合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。通过体壁，还可以看到一对生殖腺位于身体后半部的上方两侧，精巢较大，外观为一明显的黑色斑点，卵巢则较小，熟悉观察后可借以鉴别雌雄。,当营养条件适宜时，在20下饲养，卵幼虫期平均为8天，蛹成虫期约为6.3天；若在25下饲养，卵幼虫期平均为5天，蛹成虫期约为4.2天。因此当营养条件适合而在25下饲养时，只需10天即可完成一代生活史。普通果蝇生活的最适温度为20-25，当温度低至10时，生活周期将延长至57天以上，而且生活力明显降低，如果高于30时则将引起不育和死亡。,2.几种常见突变类型的观察,突变名称 基因符号 形 状 特 征 染色体上座位,白 眼 W 复眼白色 X 1.5,棒 眼 B 复眼横条纹,小眼数少 X 57.0,黑檀体 e 身体呈乌黑色,黑亮 R 70.7,黑 体 b 体黑色,比黑檀体深 L 48.5,黄 体 y 全身呈浅橙黄色 X 0.0,残 翅 vg 翅明显退化,部分残留 R 67.0,不能飞,焦刚毛 Sn,3,刚毛卷曲如烧焦状 X 21.0,性状 突变名称 基因符号 性状特征 染色体号数,翅形 残翅 vg 翅退化 ,小翅 m 翅小 (X),勺状翅 nub,2,翅小似勺 ,翘翅 cy 翅后翻 ,眼 白眼 w 复眼白色 (X),棒眼 B 复眼棒状 ,体色 黑檀体 e 体色黑亮 ,黑体 b 体色黑 ,黄体 y 体色浅橙黄色 ,刚毛 焦刚毛 sn,3,刚毛卷曲 ,叉刚毛 f 刚毛近中部分叉 ,野生型(+),突变型,body color（y-黄体）,Eye color：,（w）,Eye color（v-朱红眼）,Eye color（se-墨色眼）,Eye shape（B）,Wing size（m-小翅）,Wing size（dp-短翅）,Wing shape（Cy-卷曲翅）,Wing shape（vg）,Cv-无横隔脉,Sb-短刚毛,f-叉刚毛,腹部尖端细长,腹部尖端呈钝圆形,第一对足的跗节基部：性梳,3.果蝇雌雄鉴别,果蝇雌雄外形判别,（体形大小）,雌,雄,腹部体节数目,雌果蝇,6,节，腹部底部为产卵管，呈现圆锥状凸出,。,腹部体节数目,雄果蝇,4,节，腹部底部为交尾器，呈现黑色圆形外观。,雄果蝇在前肢先端具有性梳,性梳,性梳,雌雄在幼虫期区分较难，雌雄成蝇的区别很明显，可以用放大镜或直接观察鉴别，其特点如下：,雌果蝇,体型较大,腹部椭圆形、末端稍尖,腹部背面外观有5条黑色条纹,腹部腹面有6个腹片,无性梳,外生殖器的外观比较简单,雄果蝇,体型较小,腹部末端钝圆,腹部背面有三条黑色条纹，前两条细，后一条宽而延伸至腹面，呈一明显的黑斑,腹部腹面有4个腹片,第一对足的付节基部有黑色鬃毛状流苏称性梳,外生殖器的外观较复杂，用低倍镜观察刚羽化的幼蝇，可见到明显的生殖弧，肛上板及阳茎等。,性梳的有无是鉴别雌雄果蝇的明显标志之一。,性状观察方法,为了便于细致的观察，需将果蝇进进行麻醉处理，可使用专用的麻醉瓶，或者以适当大小的广口瓶代用,麻醉时，先取下麻醉瓶塞倒立放在瓶侧，再取培养瓶轻拍瓶壁，使果蝇落在培养瓶底部，用右手两指取下培养瓶的棉塞（夹在指间不要放在台上），迅速和麻醉瓶口对接紧密，左手握紧两瓶口稍微倾斜，右手轻拍培养瓶将果蝇震落麻醉瓶中，然后迅速盖好两个瓶塞。或者培养瓶在下，麻醉瓶在上，去塞对接口，达到一定数量后，迅速分别盖好两个瓶口。,如果用自制的麻醉瓶，可在瓶塞的棉花团上先加几滴乙醚，随即迅速塞紧瓶口，果蝇对乙醚很敏感，易麻醉，约经半分钟，果蝇便被麻醉，麻醉的深度看实验要求而定（作种蝇以轻度麻醉为宜，作观察可深度麻醉，致死也无妨），这时可倾倒在用酒精擦过的白磁板上进行观察，当发现果蝇苏醒时，可用一条吸水纸加几滴乙醚贴在培养皿内盖住果蝇，再次麻醉。注意勿使麻醉过度，如蝇翘外展和身体呈45,0,角，表明已麻醉致死不能复苏。,4、培养基的配制,成熟的柔质水果，如葡萄、香蕉等，特别是成熟过度开始发酵时，常可招致很多野生果蝇。因为果蝇是以果汁上的酵母菌为食的，所以根据果蝇的生活习性，可以在一些发酵的基质上进行饲养，常用的有香蕉饲料、玉米粉琼脂饲料等。,玉米粉糖琼脂培养基：,配方 水 琼脂 红糖 玉米粉 丙 酸 酵母粉,1 75ml 1.5g 13.5g 10.0g 0.15-0.2g 适量,2 380ml 3.0g 31.0g 42.0g 2.5ml 适量,按配方（2）：可将琼脂放入190ml水中加热溶解后，再加糖煮沸，另将玉米粉和所余190ml水调匀，然后将二液混合，继续加热煮沸几分钟，最后加入丙酸搅匀倾入培养瓶中，冷置待用。,五、作业,1.,列表反映你所见到的黑腹果蝇野生型以及突变体主要表型特征。2.如何区分幼蝇的雌雄，请画出其可用来区分的特征。,野生型及各种突变型果蝇的性状观察,性,品 状,系,体色,眼色,翅长,刚毛,其他,野生型（）,三隐性（,msn3w,）,残翅型（vg）,