A血液生理家兔.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,A血液生理家兔,A血液生理家兔A血液生理家兔血沉的测定,红细胞比容测定,血红蛋白含量的测定,血细胞计数基本内容,血沉的测定,红细胞比容测定,血红蛋白含量的测定,血细胞计数,基本内容,一,.,血沉的测定,目的：,学习测定红细胞沉降率的方法，了解测定其数值的意义。,原 理,红细胞沉降率（血沉）是指血沉管内的抗凝血被静置一段时间（,1h,）后，红细胞因重力而下沉的毫米数。它是以血浆层的高度来计算的，血浆层越高，则血沉越快。家畜有的疾病可以引起红细胞血沉的显著加速，故测定红细胞血沉具有临床诊断价值。,方法与步骤,1.,采血：,5%,的柠檬酸钠作为抗凝剂，抗凝剂与血液之间的容积比例为,1,：,4,。,2.,吸血：,吸血前要混匀抗凝血，加入血沉管（清洁）的血不能带有气泡，血沉管垂直放置于血沉管架上。,3.,检查：,分钟、小时和小时检查血沉管上部血浆的高度。,讨论：,影响血沉的因素是什么？什么情况下血沉将升高？,二,.,红细胞比容的测定,实验目的：,学习测定红细胞比容的方法,将抗凝血放在特制有刻度的玻璃管,(,温氏分血管,),中，经过离心沉淀，使血细胞与血浆分离。此时管中的血液分为三层：上层为淡黄色的透明液体即血浆；中层为很薄的一层呈灰白色的白细胞和血小板；下层为挤压很紧的暗红色的红细胞。,红细胞下沉，彼此压紧而又不改变每个血细胞的正常形态。根据玻璃管刻度的读数，测出红细胞占全血的容积百分比即红细胞比容。,实验原理：,方法与步骤,1.,抗凝剂处理温氏分血管：,草酸盐抗凝剂的配制：草酸钾,0.8,克，草酸铵,1.2,克，再加蒸馏水至,100,毫升。每,1,毫升血液可用,0.1,毫升上述溶液。,吸取混合草酸盐抗凝剂溶液，置于温氏分血管内，并使该抗凝剂均匀分布于小试管内壁上，,60,80,烘箱内烘干备用。,2.,采血：,将血液缓缓注射于有抗凝剂的试管中，用拇指堵住管口，倒转试管两、三次，使血液与抗凝剂混合。,3.,离心：,用长颈滴管吸取试管内的抗凝血，将滴管插入温氏分管的底部，沿管壁将抗凝血准确加到分血管刻度,10,厘米处。注意不要有气泡。将温氏分血管配平后放入离心机中，,3000,转,/,分钟离心,30,分钟。,4.,读数：,取出分血管，直接读数。,讨论：,影响比容测定的因素是什么？在那些情况下红细胞的比容明显增加？,三,.,血红蛋白含量的测定,目的：了解和掌握比色法测定家兔血,红蛋白的含量,原理：,在一定量的血液中加入少许盐酸，酸不仅破坏红细胞膜，且将红细胞内的亚铁血红素转变成高铁血红素，后者呈较稳定的棕色。,将其用蒸馏水稀释后与血红蛋白计的标准比色板进行目测比色，即得每,100ml,血液所含的血红蛋白的克数。,方法与步骤：,1.,加盐酸：,滴加,0.1mol/L,盐酸溶液至测定管刻度“,2”,或“,10%”,处。,2.,采血与滴加血液：,用吸血管吸血至刻度,20,立方毫米处；不能有气泡，反复吹洗几次。玻棒将血液和盐酸混匀，放置分钟。,3.,滴加蒸馏水：,逐滴滴加，然后摇匀，观察颜色，直至比色箱中液体颜色与标准比色板的颜色相同。,4.,读数：,读取测定管上液面的读数即为,100ml,血液中血红蛋白的克数。,注意事项：,血液与盐酸作用时间：,10min,蒸馏水逐滴滴加,做三次，取平均值,及时清洗吸血管：吸取蒸馏水冲洗几次，吸取酒精冲洗几次。,讨论：,影响血红蛋白含量的主要因素是什么？,四,.,血红蛋白含量的测定,目的：,了解红细胞、白细胞计数的原理，学习人工计数红白细胞的方法。,实验原理：,一定量的血液稀释后，置于血细胞计数室内，计算一定体积的血细胞数，然后在换算成每立方毫米或血液中的血细胞数。,血球记数板构造：,两个计数室，每室分为,9,个大格。格与盖玻片的距离为,0.1mm,，每大格边长为,1mm,，面积为,1mm,2,，体积为,0.1mm,3,。四角的,4,个大方格分为,16,个中方格，用作白细胞计数。中央大方格被分为,25,个中方格，每个中方格边长为,0.2mm,，面积为,0.04 mm,2,，体积为,0.004mm,3,。每个中方格又分为,16,个小方格，中央大方格四角的中方格和中央的中方格用作红细胞计数。,方法与步骤,血细胞计数板的准备：,计数室只能用自来水和蒸馏水冲洗，然后以丝巾轻轻擦干，切不可用酒精和乙醚洗涤。洗涤完毕后，放入低倍显微镜下观察其构造。,采血及稀释：,（,1,）配制稀释液：用移液管吸取,1.99ml,红细胞稀释液（生理盐水）放入,1,号试管，用移液管吸取,0.38ml,白细胞稀释液（,2%,醋酸加少量龙胆紫）放入,2,号试管。,（,2,）采血：用吸血管吸取血液,10,l,放入,1,试管，用吸血管吸取血液,20,l,放入,2,号试管，摇匀试管，使血液与稀释液充分混匀。,计数：盖玻片放好后，滴半滴于计数室与盖玻片交界处，稀释血液可自动均匀渗入计数室。放置,1-2,分钟，待细胞下沉后进行计数。,记数原则,计数红细胞：将计数室中央的大方格置于视野内，转用,10,倍物镜下计数,5,个中方格（四角和中央）内的红细胞总数。,计数时必须遵循一定方向逐格进行，如将上侧和左侧线上的红细胞数入，则勿将下侧和右侧线上的数入。,计数白细胞：,10,倍物镜下计数四角四个大方格中所有的白细胞总数。,红细胞数换算,红细胞数,/L,=N2001010,6,255,-1,=N10,10,其中：,N,：,5,个中方格数的红细胞总数,255,-1,：,5,个中方格换算为,1,个大方格内红细胞数,10,：,1,个大方格换算为,1,微升血液的红细胞数,10,6,：,1,微升换算为,1,升,200,：血液稀释倍数,白细胞数换算,白细胞数,/L,=N4,-1,201010,6,=N510,7,其中：,N,：,4,个大方格数的白细胞总数,N4,-1,：,1,个大方格数的白细胞总数,10,：,1,个大方格换算为,1,微升血液内的白细胞数,10,6,：,1,微升换算为,1,升,20,：血液稀释倍数,注意事项,1,计数室内细胞分布要均匀。计数红细胞时如果发现各中方格的红细胞数目相差,20,个以上，或计数白细胞时发现白细胞数目相差,10,个以上，表示血细胞分布不均匀，必须将稀释液摇匀后重新计数。,2,混悬液滴入计数室时，液量要适当。过多会溢出并流入两侧深槽内，使盖玻片浮起。滴入过少影响计数体积。,3,所用吸管，试管，计数板，盖玻片等都必须十分干净。,实验要求,每,2,小组合为,1,大组使用,1,只兔子；,每大组测定,1,个血沉值、,1,个红细胞比容、血红蛋白含量和,5,组血细胞计数；,汇报结束,谢谢大家,!,请各位批评指正,