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92江西中医药大学学报 2023 年 10 月第 35 卷第 5 期JOURNAL OF JIANGXI UNIVERSITY OF CM 2023 Vol.35 No.5中药研究覆盆子枸杞提取工艺优化及压片糖果制备 刘豫 温粤文 曹明 温晓 郑琴（江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室 南昌 330004）摘要目的：从滋阴补肾功效类中药中选取覆盆子、枸杞两味常用配伍中药，探究其联合最佳提取工艺以及制备最优处方工艺，研制一款针对久坐久视工作人群养护肝肾、固精明目的保健产品。方法：先后采用单因素、正交实验L9（33）和L9（34）进行提取工艺及处方筛选，总黄酮和出膏率为指标考察提取工艺，感官评价与片剂质量为指标考察处方工艺。结果：最优提取工艺为提取次数4次、料液比18 g/mL、每次2 h。最优配方为85%乙醇，山梨糖醇、麦芽糖、硬脂酸镁质量占比（80.0%、0.8%、10.0%），最优片剂平均崩解时间、硬度、脆碎度分别为7 min、35.4N、1.1%。结论：按照最优提取工艺与最优配比制备，不仅有效成分含量高，而且所制备的覆枸压片糖果硬度适中，风味独特。关键词古典方剂；覆杞压片糖果；提取工艺；工艺优化；质量检测中图分类号：R284 文献标志码：ACombined Extraction of Raspberry and Wolfberry and Optimization of Tablet Confectionery ProcessLIU Yu,WEN Yue-wen,CAO Ming,WEN Xiao,ZHENG QinKey Laboratory of Modern Chinese Medicine Preparation of the Ministry of Education,Jiangxi University of Chinese Medicine,Nanchang 330004,China.Abstract Objective:To investigate the optimal extraction process and preparation of the optimal prescription process for the combined extraction of Raspberry and Chinese wolfberry from Chinese herbs for nourishing Yin and tonifying the kidneys,and to develop a health product for sedentary and long-sighted working people to maintain the liver and kidney,and to strengthen the essence and brighten the eyes.Methods:Single-factor,orthogonal experiments L9(33)and L9(34)were used to screen the extraction process and prescriptions,with flavonoids and cream yield as indicators of the extraction process and sensory evaluation and tablet quality as indicators of the prescription process.Results:The optimal extraction process was 4 times,18 g/mL material-to-liquid ratio,2 h.The optimal formulation was 85%ethanol,sorbitol,maltose and magnesium stearate mass ratio(80%,0.8%,10%),and the average disintegration time,hardness and friability of the optimal tablets were 7 min,35.4 N and 1.1%,respectively.Conclusion:When prepared according to the optimum extraction process and the optimum ratio,the extracts not only have a high content of active ingredients,but also have a moderate hardness,a unique flavour.Key words Innovative Application of Classical Formulas;Chinese Wolfberry Tablet Candy;Extraction Process;Prescription Process Optimization;Quality Testing基金项目：江西省大学生创新创业项目（202210412232）。通信作者：郑琴，博士，教授。E-mail:。覆盆子为蔷薇科植物华东覆盆子 Rubus chingiiHu 的干燥果实。其含萜类、香豆素类、黄酮类等成分1，具抗氧化、降血糖、抗肿瘤等药理活性2-3。本草备要载：“甘酸微温。益肾脏而固精，补肝虚而明目”。4现代研究分析出覆盆子花青素对眼疾有治疗作用5。结合古今理论研究，覆盆子明目方面疗效确切，且目前有关覆盆子明目类产品国内上市较少，市场有待开发。枸杞子为茄科类植物宁夏枸杞 Lycium barbarumL.的干燥果实，神农本草经中记为上品6。其含枸杞总黄酮、枸杞多糖以及色素类物质7，为其在抗抑郁、抗肿瘤、降血糖、抗氧化、调节免疫等多种功效上提供可靠依据8-11。现代药理作用研究发现，枸杞中色素类物质具有明目作用，其在防治老年性白内障、糖尿病视网膜病变、视网膜色素变性、老年性失明等眼部疾病方面具有一定疗效12-13。互联网时代工作方式转变，致多数工作者久坐久视14-15。肝肾亏虚所致目暗不明患者激增，但93刘豫等：覆盆子枸杞提取工艺优化及压片糖果制备中药研究国内外针对此类明目固精保健产品稀少16。覆盆子、枸杞两者均为“药食两用”类中药。我国古典医书中同寿录 摄生众药方 证治准绳等悉数记载两者配伍用药，其中包含补阴丸、五子衍宗丸、补肾丸、滋补明目汤等。明目古方滋补明目汤，治疗青光眼睫状体炎、老年性黄斑病变等疾病疗效确切17-18。然而，现代相关治疗眼部疾病新药物产品中，涉及两者联合制备的剂型稀少，且集中在保健酒、果醋等少量液体制剂产品19-20。压片糖果作为受大众欢迎的产品，被市场与消费者接受。本文将覆盆子与枸杞两味常用明目配伍中药研制成压片糖果，掩盖了传统药物中苦涩味，方便日常食用携带，因此以枸杞、覆盆子为主要原料的糖果类产品研发，有利于促进古典药方“活化”产品数量增长，为枸杞、覆盆子研究与利用提供新途径。1 实验仪器与试剂1.1 仪器GZX-9140MBE 数显鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）；DZF-6050 型真空干燥箱（上海新苗医疗器械制造有限公司）；TRD-8 多功能压片机（德国 ERWEKA）；U-3000 紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；ZB-1E智能崩解仪（天津市天大天发科技有限公司）；FT-2000 脆碎度检测仪（天津大学精密仪器厂）；YD-3片剂硬度测试仪（天津市国铭医药设备有限公司）。1.2 材料与辅料覆盆子（江西江中中药饮片有限公司，批号：211229）、枸杞（江西江中中药饮片有限公司，批号：211104）经江西中医药大学药学院刘荣华教授鉴定分别为蔷薇科植物华东覆盆子 Rubus chingii Hu 的干燥果实、茄科类植物宁夏枸杞 LyciumbarbarumL.的干燥果实；硬脂酸镁、山梨糖醇、麦芽糊精、乙醇（佰晟食品配料有限公司，均为食品级）；芦丁（广州博晶科技有限公司，批号：R10078）；纯净水；NaNO2（西陇科学股份有限公司，批号：2103082）；Al（NO3）3（上海阿拉丁生化科技股份有限公司，批号：A110781）；NaOH（上海易恩化学技术有限公司,批号：R000689）。2 实验方法与结果2.1 制备工艺2.1.1 工艺流程将样品浓缩成膏，制软材，制粒与风干，得成品水分在3%5%以内即合格。利用0.850mm（20目）筛网对所得成品整粒，随后放入多功能压片机中压片。得直径 9mm、质量约 0.30g 圆形片剂。见图 1。2.2 最优提取工艺筛选2.2.1 提取工艺评价标准2.2.1.1浸膏得率测定取 1mL 药液（质量为Ag）置于已干燥恒重蒸发皿，于水浴蒸至近干，转入烘箱干燥得干膏（质量为 Bg），计算出膏率，公式为出膏率=（B-A）V/M100%21，V 为样品总体积（mL），M 为生药质量（g）。2.2.1.2总黄酮含量测定采取硝酸铝-亚硝酸钠显色法22测浸膏中总黄酮含量，以芦丁标准溶液，采用 UV 法在 510nm 处测定吸光度，得标准曲线为 Y=7.8786X-0.001，r=0.9992，相关性显著。2.2.2提取工艺单因素考察参考文献23提取工艺方法，以总黄酮含量以及出膏率为指标，对提取次数、料液比、提取时间进行单因素考察。其中固定料液比为 10 倍水，提取时长 1h,考察提取次数（1、2、3、4）次对提取优化工艺的影响；固定提取次数为 3 次，提取时长 1h，考察料液比 6、8、10、12、14 倍）加水量对提取优化工艺的影响；固定料液比为 10 倍水，提取次数为 3 次，考察提取时长 0.5、1.0、1.5、2h 对提取优化工艺的影响。见图 2。?图1 工艺流程图94江西中医药大学学报 2023 年 10 月第 35 卷第 5 期中药研究图2 提取次数（a）、加水量（b）、提取时间（c）对提取工艺影响单因素实验结果初步表明，覆盆子枸杞联合提取最适条件为料液比 8 倍水、提取次数 4 次，每次提取 2h。在此条件时，总出膏率为 50.56%，总黄酮量 1.78g，达到较理想提取效果。2.2.3提取工艺正交实验在单因素实验结果基础上，选择提取次数、料液比、提取时间 3 个因素，每个因素 3 水平进行正交实验，以出膏率和总黄酮为指标，选取最优工艺，水平因素见表 1。表1 覆盆子枸杞提取工艺正交水平表水平提取次数 A/次A料液比 B/（gmL-1）B提取时间 C/minC128123101.534122选择 3 因素 3 水平的正交试验考察提取工艺，见表 2。表3 正交实验结果的方差分析表方差来源偏差平方和自由度均方离差FSigA16.87128.43624.1600.040B1.82820.9142.6180.276C3.89121.9455.5710.152由方差分析结果得出，提取次数 A 差异显著（P0.05），为后续料液比 B 及提取时间 C 进一步优化提供参考依据。最优提取工艺结果中，正交实验结果 A3B3C3与单因素结果 A3B1C3不同，方差分析结果显示，料液比 B 与提取时间 C 对结果影响不显著。经过 t检验分析水平间显著差异得出：料液比 B 水平间不具备显著性差异（P0.05），可优化因素 B。最佳提取工艺组合为 A3B1C3，即提取次数 4 次，加水量8 倍，提取时间 2h/次。见表 3。表2 覆盆子枸杞提取工艺优化正交结果因素ABC出膏率/%总黄酮/%综合评价/分实验 111141.261.1521.20实验 212243.371.3522.36实验 313347.421.5724.50实验 421246.851.5924.29实验 522348.811.6225.21实验 623146.991.3924.20实验 731350.551.7826.16实验 832149.831.6125.72实验 933250.571.8426.2068.0571.5871.1173.6373.3072.7878.0974.9075.87K122.6823.8623.70K224.5424.4324.26K326.0324.9625.30R3.351.101.5995刘豫等：覆盆子枸杞提取工艺优化及压片糖果制备中药研究2.2.4验证实验根据正交试验结果，按以下条件提取次数 4 次，加水量 8 倍，提取时间 2h/次提取浸膏（平行 3 次），以出膏率以及总黄酮含量为标准对其进行综合评价。所得综合评价为（26.1626.21）分，优于正交实验各条件所得结果，说明所得提取条件为最优提取条件。2.3 覆杞压片糖果成型工艺研究 2.3.1 覆杞压片糖果制剂评价标准2.3.1.1 压片糖果综合感官评定 参考其他压片糖果感官评价标准方案24，以表 4 为理论依据对压片糖果进行感官评价，挑选 10 位经过专业感官训练志愿者进行评分。除去最高分与最低分后，取10 位志愿者评价分数平均值为结果。表4 覆杞压片糖果感官评价标准表指标评分标准得分/分色泽（20 分）色泽均匀光鲜亮丽，赏心悦目有光泽1520色泽有部分暗淡，微小花斑点或存在颜色不均一现象015气味（10 分）有相应的药味，药味纯正510气味较淡，无异味05口感（40 分）甜味适中，没有苦味，口感舒适2040有轻微苦涩感，咀嚼感一般，甜度不适合020片剂状态（30 分）片剂紧实，表面及边缘无缺口、整体质量保持同一水平1530片剂较为松散，表面及边缘存在裂缝，片剂整体质量较低0152.3.1.2 产品质量评价 根据 2020 年中国药典对片剂质量检测指标要求，对片剂硬度、崩解时限、脆碎度等进行指标评价。按照SB/T103472008 糖果压片糖果标准，参考表 5 对最终产品进行检验，生产出符合国家要求的压片糖果产品。2.3.2综合评价以综合感官评价与产品质量评价为标准（表 4、表 5），采用加权评分法对产品综合评价：综合评分=0.5 综合感官评价+0.5 覆杞压片糖果质量评价。2.3.3覆杞压片糖果不同辅料添加量单因素考察 以压片糖果综合评价为标准，对山梨糖醇、麦芽糖、硬脂酸镁、乙醇体积分数单因素考察，筛选出适合制剂的添加量。2.3.3.1 山梨糖醇添加量对压片糖果品质影响 固定麦芽糊精 10.0%，硬脂酸镁 1.0%，剩余原料粉用量，考察山梨糖醇添加量（40.0%、50.0%、60.0%、70.0%和 80.0%）对感官品质与片剂质量影响；分析得出山梨糖醇添加量达 80%时，片剂稳定性、硬度、外观均更优良。见图 3。图3 山梨糖醇配比对压片糖果的影响2.3.3.2麦芽糊精添加量对压片糖果品质影响 固定山梨酸糖醇 70.0%，硬脂酸镁 1.0%，剩余原料粉用量，考察麦芽糊精添加量（5.0%、10.0%、15.0%、20.0%和 25.0%）对感官品质与片剂质量影响；分析所得麦芽糊精 10.0%为最佳占比，片剂完整度达峰值，综合评价得分最高。见图 4。麦芽糊精添加量感官评价得分质量评价得分得分图4 麦芽糊精配比对压片糖果的影响2.3.3.3硬 脂 酸 镁 添 加 量 对 压 片 糖 果 品 质 影响固定山梨糖醇 80.0%，麦芽糊精投料量为10.0%，剩余原料粉用量，考察硬脂酸镁添加量（0.6%、0.8%、1.0%、1.2%和 1.4%）对感官品质表5 覆杞压片糖果质量评价标准表分数/每项制剂成型性颗粒外观/压片效果崩解时间/min硬度/N脆碎度1820容易，颗粒均匀、明显白色、淡黄色/压片优良052040减失重量 1%，并无断裂，无龟裂或粉碎片1517一般，颗粒较均匀，部分粉末棕色/压片良好5104060减失重量1%，并无断裂，无龟裂或粉碎片1214一般，颗粒部分不均匀褐色/压片一般10156080有微裂痕911困难，颗粒成型性差黑褐色/压片困难152080120有裂痕或粉碎片96江西中医药大学学报 2023 年 10 月第 35 卷第 5 期中药研究与片剂质量影响；分析得出选取 0.8%硬脂酸镁为添加量，此时压片糖果的表面光滑度以及稳定性达到最优。见图 5。图5 硬脂酸镁配比对压片糖果影响2.3.3.4 乙醇浓度对压片糖果品质影响 固定山梨糖醇的投料量为 80.0%，麦芽糊精投料量为 10.0%，硬脂酸镁添加量 1.0%，剩余为原料粉用量，考察润 湿 剂 乙 醇 体 积 分 数（75.0%，80.0%，85.0%，90.0%和 95.0%）对感官品质与片剂质量影响。分析得出乙醇浓度 80.0%时，片剂嚼感优良，结构紧密，甜味适度，综合评分值最高。见图 6。图6 乙醇浓度对压片糖果的影响2.3.4覆杞压片糖果辅料添加量正交实验以制粒压片效果和压片糖果感官评价为标准，以山梨糖醇、麦芽糊精、硬脂酸镁添加量与乙醇体积分数 4个因素对压片糖果品质的综合影响，设计正交表。见表 6。选择 4 因素 3 水平 L9（34）的正交试验设计见表 7。由方差结果得出，山梨糖醇添加量 A、B、C影响显著（PBCD，正交实验筛出最优配比为 A1B2C2D2与单因素考察结果 A1B2C2D1不一致。经过 t 检验分析水平间显著差异得出：料液比 D 水平间不具备显著性差异（P0.05），可优化因素 D，即山梨糖醇添加量 80.0%、麦芽糊精添加量 10.0%、硬脂酸镁添加量 0.8%、乙醇最佳体积分数 85.0%。见表 8。表6 覆杞压片糖果辅料筛选正交水平表%水平山梨糖醇添加量 A麦芽糊精添加量 B硬脂酸镁添加量 C乙醇体积分数 D180.05.00.680.0270.010.00.885.0360.015.01.090.0表7 覆杞压片糖果辅料筛选正交实验表因素ABCD综合评价/分实验 1111185实验 2122293实验 3133387实验 4212381实验 5223182实验 6231287实验 7313277实验 8321382实验 9332184265243254251250257258257243258246250K188.3381.0084.6783.67K283.3385.6786.0085.67K38186.0082.0083.33R7.335.004.002.34表8 正交实验结果的方差分析表方差来源偏差平方和自由度均方离差FSigA34.587317.29351.8780.023B30.273315.13645.4080.036C13.89136.94519.8350.047D3.56431.7325.1950.1462.4 优化工艺验证实验根据正交试验结果，按以下条件（山梨糖醇添加量 80.0%、麦芽糊精添加量 10.0%、硬脂酸镁添加量 0.8%、乙醇最佳体积分数 85.0%）制取压片糖果（平行 3 次），经工艺流程操作生产后，所得覆杞压片糖果光泽饱满、硬度适中，清新可口、风味独特，以 SB/T10347-2008糖果压片糖果标准进行检验。按优化工艺质量检测结果为最优结果。见表 9。97刘豫等：覆盆子枸杞提取工艺优化及压片糖果制备中药研究3 结论本文将枸杞和覆盆子制成压片糖果，克服了原料原有的苦涩味道，矫正过后清新可口，适用于久坐久视人群工作时的保健需求。从中医滋补肝肾角度切入，养护肝肾，固精明目。本文所用工艺筛选方法，可为后续开发类似明目类产品工艺筛选以及产品开发提供一定的参考。压片糖果的研制是糖果制造行业的热点，目前制备方法的改进与共处理辅料的研发成为解决压片糖果生产与质量问题的重要因素。目前制备方法主要以湿法制粒压片法，干法制粒与粉末直接压片在国内尚未普及，因此对产品制备技术深入研究是对糖果产业的必然需求。同时对共处理辅料以及质量评价标准研究尚未完善，可能成为未来研究领域的新趋势，为更多压片糖果投入工业化生产提供指导。参考文献1崔璐,郑振秋.关于覆盆子化学成分与药理作用的研究进展 J.全科口腔医学电子杂志,2020,7(1):192,196.2张露,王夜寒,梅强根,等.覆盆子不同多酚组成及抗氧化、抗糖尿病活性 J.食品科学,2022,43(18):192-199.3WangPW,ChengYC,HungYC,etal.RedraspberryextractprotectstheskinagainstUVB-induceddamagewithantioxidativeandanti-inflammatorypropertiesJ.OxidMedCellLongev,2019,2019:9529676.4汪昂.本草备要 M.郑金生,整理.北京:人民军医出版社,2007.5郑琴,吴玲,张科楠,等.覆盆子研究概况及产品开发趋势分析 J.中药材,2019,42(5):1204-1208.6付文昊,于梅.枸杞子的研究进展 J.世界最新医学信息文摘,2017,17(98):104.7苏保洲.枸杞子活性成分药理作用研究进展 J.江苏中医药,2022,54(3):78-81.8刘倩,余意,梁琰,等.枸杞子活性成分及分析方法研究进展 J.辽宁中医药大学学报,2018,20(11):56-59.9MaZF,ZhangHX,TehSS,etal.Gojiberriesasapotentialnaturalantioxidantmedicine:aninsightintotheirmolecularmechanismsofactionJ.OxidMedCellLongev,2019,2019:2437397.10ZhaoXQ,GuoS,LuYY,etal.LyciumbarbarumL.leavesamelioratetype2diabetesinratsbymodulatingmetabolicprofilesandgutmicrobiotacompositionJ.BiomedPharmacother,2020,121:109559.11ZhouYF,OlatunjiOJ,ChenHX.AmeliorativeeffectsofLyciumchinensisonmalesexualdysfunctionandtesticularoxidativedamageinstreptozotocin-induceddiabeticratsJ.FoodSciBiotechnol,2019,28(4):1217-1223.12倪同上,刘相和,迟焕芳.枸杞子提取液对 RCS 大鼠视网膜色素变性的保护作用 J.青岛大学医学院学报,2008,44(5):416-418.13廖林丽,杨成昊,杨毅敬,等.枸杞子在眼病临床运用进展 J.陕西中医药大学学报,2022,45(2):137-140.14牛严君,乔玉成.久坐行为对个体健康影响的研究综述 J.南京体育学院学报,2018,1(1):45-49.15SilvaDAS,GunnellKE,TremblayMS.FactorstructureofresponsestothePortugueseversionofquestionsaboutscreentime-basedsedentarybehavioramongadolescentsJ.JPhysActHealth,2018,15(4):263-268.16周祖安.基于久坐办公人群的健康辅助产品设计研究 D.广州:华南理工大学,2021.17朱娟芳,马晓维.滋补肝肾明目汤治疗白内障术后频发青光眼睫状体炎综合征临床疗效观察 J.新中医,2015,47(3):101-102.18李雪莹,邵颖,闫静.益气养阴明目汤配合光动力疗法对老年性黄斑变性患者预后的影响观察 J.四川中医,2019,37(4):160-163.19李雄,刘争艳,李新社,等.覆盆子枸杞生态保健酒的研发 J.中国酿造,2013,32(10):146-148.20黄蓓蓓.枸杞覆盆子果醋生产工艺研究 J.食品工业,2016,37(6):70-71.21严霞,岳国超,肖晏婴.四物汤不同制备工艺出膏率比较研究 J.中医药通报,2022,21(2):38-40.22王丽丽,林清霞,宋振硕,等.分光光度法测定茶叶中总黄酮含量J.茶叶学报,2021,62(1):1-6.23王振东,刘世娟,杨晓筱,等.枸杞桑椹黑豆压片糖果的加工工艺J.食品工业,2021,42(12):1-5.24李冰,张立攀,胡桂芳,等.牡丹花山茱萸复合压片糖果研制及工艺优化 J.河南化工,2021,38(3):22-26.（收稿日期：2022-09-19）编辑：翟兴英表9 最优成品质量检测结果项目检测结果SB/T103472008糖果压片糖果标准单项评定色泽淡黄白色，光泽饱满符合品种应有的色泽合格形态块形完整，大小基本一致，无裂缝，无明显变形块形完整，大小基本一致，无裂缝，无明显变形合格组织坚实、不松散、剖面紧密、不粘连坚实、不松散、剖面紧密、不粘连合格滋味、气味枸杞微甜味，覆盆子清凉风味，无异味符合品种应有的滋味和气味，无异味合格杂质无正常视力可见杂质无正常视力可见杂质合格干燥失重（0.3460.017）g 5g/100g合格食品添加剂未测出应符合 GB2760 的规定合格食品营养强化剂未测出应符合 GB14880 的规定合格